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糖尿病大鼠心肌缺血再灌注时SIRT1与NLRP3炎症小体的关系

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中华麻醉学杂志 2020年第4期40卷 421-424页

作者：张艺邱珍明浩季烨龙夏中元武汉大学人民医院麻醉科 430060

目的评价糖尿病大鼠心肌缺血再灌注时沉默信息调节因子1(SIRT1)与NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)的关系。方法SPF级健康雄性SD大鼠,6~8周龄,体重200~220 g,腹腔注射腹腔注射1%链脲佐菌素-柠檬酸盐缓冲液60 mg/kg制备1型糖尿病模... 详细信息

目的评价糖尿病大鼠心肌缺血再灌注时沉默信息调节因子1(SIRT1)与NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)的关系。方法SPF级健康雄性SD大鼠,6~8周龄,体重200~220 g,腹腔注射腹腔注射1%链脲佐菌素-柠檬酸盐缓冲液60 mg/kg制备1型糖尿病模型,造模成功后继续饲养8周。取1型糖尿病大鼠42只,采用随机数字表法分为4组:糖尿病假手术组(DS组,n=6)、糖尿病心肌缺血再灌注组(DIR组,n=12)、糖尿病心肌缺血再灌注+SIRT1激动剂SRT1720组(DIR+SR组,n=12)和糖尿病心肌缺血再灌注+SIRT1抑制剂EX-527组(DIR+EX组,n=12)。取非糖尿病大鼠18只,采用随机数字表法分为2组:非糖尿病假手术组(NS组,n=6)和非糖尿病心肌缺血再灌注组(NIR组,n=12)。采用结扎左冠状动脉前降支30 min后再灌注120 min的方法建立大鼠心肌缺血再灌注损伤模型。再灌注结束即刻采集颈动脉血样,采用ELISA法检测血清cTnI、CK-MB和LDH水平,然后处死大鼠,取心肌组织,采用TTC法检测心肌梗死体积,计算心肌梗死体积百分比;HE染色法观察心肌组织病理学结果;Western blot法检测心肌组织SIRT1、NLRP3和IL-1β的表达水平。结果与NS组比较,NIR组血清cTnI、CK-MB和LDH水平升高,心肌组织SIRT1表达下调,NLRP3和IL-1β表达上调(P<0.05);与DS组比较,DIR组血清cTnI、CK-MB和LDH水平升高,心肌组织SIRT1表达下调,NLRP3和IL-1β表达上调(P<0.05);与NIR组比较,DIR组心肌梗死体积百分比、血清cTnI、CK-MB和LDH水平升高,心肌组织SIRT1表达下调,NLRP3和IL-1β表达上调(P<0.05),病理学损伤加重;与DIR组比较,DIR+SR组心肌梗死体积百分比、血清cTnI、CK-MB和LDH水平降低,心肌组织SIRT1表达上调,NLRP3和IL-1β表达下调(P<0.05),病理学损伤减轻,DIR+EX组心肌梗死体积百分比、血清cTnI、CK-MB和LDH水平升高,心肌组织SIRT1表达下调,NLRP3和IL-1β表达上调(P<0.05),病理学损伤加重。结论SIRT1表达上调,可抑制NLRP3炎症小体活化,对糖尿病大鼠心肌缺血再灌注时产生内源性保护作用。

关键词：糖尿病心肌再灌注损伤抗衰老酶1 NLR家族,热蛋白结构域包含蛋白3

HIF-1α在糖尿病大鼠心肌缺血再灌注诱发肾损伤中的作用:与SLC7A11的关系

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中华麻醉学杂志 2021年第5期41卷 593-597页

作者：田立群黄琴陶洁田浩夏中元武汉大学人民医院麻醉科 430060

目的:评价缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)在糖尿病大鼠心肌缺血再灌注诱发肾损伤中的作用及其与溶质运载蛋白7家族成员11(SLC7A11)的关系。方法:SPF级健康雄性SD大鼠,4周龄,体重100~130 g,高脂高糖饲料自由饮食,每周测1次体重,体重达到240 ... 详细信息

目的:评价缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)在糖尿病大鼠心肌缺血再灌注诱发肾损伤中的作用及其与溶质运载蛋白7家族成员11(SLC7A11)的关系。方法:SPF级健康雄性SD大鼠,4周龄,体重100~130 g,高脂高糖饲料自由饮食,每周测1次体重,体重达到240 g后腹腔注射1%链脲佐菌素(STZ)-柠檬酸盐缓冲液35 mg/kg诱导2型糖尿病模型,STZ注射后继续予以高脂高糖饲料饲养,1周后尾静脉取血检测血糖,3次随机血糖≥16.7 mmol/L表明2型糖尿病模型制备成功。造模成功后继续高脂高糖饲养6周,取2型糖尿病大鼠18只,采用随机数字表法分为3组(n=6):糖尿病假手术组(DS组)、糖尿病心肌缺血再灌注组(DIR组)和糖尿病心肌缺血再灌注+HIF-1α激动剂DMOG组(DIR+DMOG组)。取非糖尿病大鼠12只,采用随机数字表法分为2组(n=6):非糖尿病假手术组(NS组)和非糖尿病心肌缺血再灌注组(NIR组)。采用结扎左冠状动脉前降支30 min再灌注120 min的方法建立大鼠心肌缺血再灌注损伤模型。于再灌注120 min时分离右侧颈内动脉取血,采用ELISA法检测血清肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)、中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)浓度;取部分肾组织,采用HE染色法观察肾脏组织病理学结果,进行肾小管损伤评分;Western blot法检测肾组织HIF-1α和SLC7A11的表达。结果:与NS组比较,DS组和NIR组血清Cr、BUN、NGAL浓度和肾小管损伤评分升高,DS组肾组织HIF-1α和SLC7A11表达下调,NIR组肾组织HIF-1α和SLC7A11表达上调(P<0.05);与DS组比较,DIR组血清Cr、BUN、NGAL浓度和肾小管损伤评分升高,肾组织HIF-1α和SLC7A11表达上调(P<0.05);与NIR组比较,DIR组血清Cr、BUN、NGAL浓度和肾小管损伤评分升高,肾组织HIF-1α和SLC7A11表达下调(P<0.05);与DIR组比较,DIR+DMOG组血清Cr、BUN、NGAL浓度和肾小管损伤评分降低,肾组织HIF-1α和SLC7A11表达上调(P<0.05)。结论:HIF-1α参与了心肌缺血再灌注诱发糖尿病大鼠肾损伤的过程,与调控SLC7A11表达有关。

关键词：缺氧诱导因子1 α亚基糖尿病心肌再灌注损伤急性肾损伤线粒体解偶联蛋白质类

MCU介导的线粒体动力学与小鼠肠缺血再灌注损伤的关系

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中华麻醉学杂志 2023年第6期43卷 732-735页

作者：图拉妮萨·喀迪尔罗杰廖师师丁可陈榕孟庆涛武汉大学人民医院麻醉科武汉430060

目的评价线粒体钙离子单向转运蛋白(MCU)介导的线粒体动力学与小鼠肠缺血再灌注损伤的关系。方法野生型成年雄性C57BL/6J小鼠24只,6~8周龄,体质量18~20 g,采用随机数字表法分为4组(n=6):假手术组(S组)、肠缺血再灌注组(IIR组)、假手术+... 详细信息

目的评价线粒体钙离子单向转运蛋白(MCU)介导的线粒体动力学与小鼠肠缺血再灌注损伤的关系。方法野生型成年雄性C57BL/6J小鼠24只,6~8周龄,体质量18~20 g,采用随机数字表法分为4组(n=6):假手术组(S组)、肠缺血再灌注组(IIR组)、假手术+MCU抑制剂Ru360组(S+Ru360组)和肠缺血再灌注+Ru360组(IIR+Ru360组)。采用夹闭肠系膜上动脉根部45 min、恢复灌注2 h的方法制备肠缺血再灌注损伤模型。再灌注2 h后取小肠组织,观察肠黏膜损伤情况并行Chiu评分;TBA法检测MDA含量,WST-8法检测SOD活性,比色法检测乳酸脱氢酶(LDH)含量;采用Western blot法检测MCU、线粒体动力相关蛋白1(Drp1)、重组人线粒体分裂蛋白1(Fis1)、线粒体融合蛋白1(Mfn1)、线粒体融合蛋白2(Mfn2)的表达。结果与S组和S+Ru360组比较,IIR组和IIR+Ru360组肠组织Chiu评分、MDA和LDH含量升高,SOD活性降低,肠组织MCU、Drp1和Fis1表达上调,Mfn1和Mfn2表达下调(P<0.05);与IIR组比较,IIR+Ru360组肠组织Chiu评分、MDA和LDH含量降低,SOD活性升高,肠组织MCU、Drp1和Fis1表达下调,Mfn1和Mfn2表达上调(P<0.05)。结论小鼠肠缺血再灌注损伤的发生机制可能与MCU促进线粒体分裂,减少线粒体融合,介导线粒体动力学失衡有关。

关键词：钙通道肠再灌注损伤线粒体动力学

右美托咪定对大鼠胸部撞击性肺损伤血清肿瘤坏死因子-α和白介素-1β的影响

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中华急诊医学杂志 2011年第5期20卷 485-488页

作者：李宁涛吴晓静夏中元武汉大学人民医院麻醉科武汉430060

目的探讨右美托咪定对大鼠胸部撞击性肺损伤的影响。方法雄性sD大鼠40只，体质量250～300g，随机（随机数字法）分为五组，每组8只：正常对照组（C）；右美托咪定组（D）；胸部创伤模型组（T）；胸部撞击伤后右美托咪定处理组（TD）；... 详细信息

目的探讨右美托咪定对大鼠胸部撞击性肺损伤的影响。方法雄性sD大鼠40只，体质量250～300g，随机（随机数字法）分为五组，每组8只：正常对照组（C）；右美托咪定组（D）；胸部创伤模型组（T）；胸部撞击伤后右美托咪定处理组（TD）；胸部撞击模型＋右美托咪定＋育亨宾组（TDY）。各组大鼠6h后股动脉放血处死，采用酶联免疫吸附实验（ELISA）检测血清中TNF-α和IL-1β浓度；检测支气管肺泡灌洗液（BALF）中性粒细胞占白细胞百分比（PMN％）；肺湿／干质量比（W／D）；HE染色光镜下观察肺组织病理改变。结果胸部撞击能够导致明显的肺损伤，促使血清TNF—α和IL-1β浓度、支气管肺泡灌洗液W（PMN）％、肺W／D升高（P〈0．05，P〈0．01），右美托咪定5μg·kg^-1·h^-1持续静脉输注明显降低胸部撞击所致肺损伤，育亨宾能够部分阻断右美托咪定的这种保护效应。结论右美托咪定对胸部撞击致急性肺损伤有一定的保护作用。

关键词：右美托咪定胸部撞击急性肺损伤肿瘤坏死因子-α 白介素-1β

艾司氯胺酮对内毒素性急性肺损伤大鼠肺组织细胞焦亡的影响

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中华麻醉学杂志 2021年第3期41卷 331-334页

作者：何旋吴晓静陈鹤翔孔倩袁敏明婷倩夏中元武汉大学人民医院麻醉科 430060

目的评价艾司氯胺酮对内毒素性急性肺损伤大鼠肺组织细胞焦亡的影响。方法SPF级健康成年雄性SD大鼠30只,体重200~220 g,8周龄。采用随机数字表法分为3组(n=10):对照组(C组)、内毒素性急性肺损伤组(ALI组)和艾司氯胺酮组(E组)。采用腹腔... 详细信息

目的评价艾司氯胺酮对内毒素性急性肺损伤大鼠肺组织细胞焦亡的影响。方法SPF级健康成年雄性SD大鼠30只,体重200~220 g,8周龄。采用随机数字表法分为3组(n=10):对照组(C组)、内毒素性急性肺损伤组(ALI组)和艾司氯胺酮组(E组)。采用腹腔注射LPS 10 mg/kg的方法制备大鼠内毒素性急性肺损伤模型。C组腹腔注射等容量0.9%氯化钠注射液;E组注射LPS 30 min时腹腔注射艾司氯胺酮10 mg/kg。于注射LPS后24 h时心脏采血后处死取肺组织,采用ELISA法检测血清IL-1β和IL-18的浓度,确定肺组织湿重/干重(W/D)比值,采用比色法测定髓过氧化物酶(MPO)活性,采用Western blot法检测肺组织NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)、caspase-1和消皮素D(GSDMD)的表达,HE染色观察肺组织病理学结果并行肺损伤评分,电镜下观察肺组织细胞超微结构。结果与C组比较,ALI组和E组大鼠肺损伤评分、肺组织W/D比值、MPO活性、NLRP3、caspase-1、GSDMD表达水平、血清IL-1β和IL-18浓度升高(P<0.05);与ALI组比较,E组大鼠肺损伤评分、肺组织W/D比值、MPO活性、NLRP3、caspase-1、GSDMD表达水平、血清IL-1β和IL-18浓度降低(P<0.05)。结论艾司氯胺酮减轻大鼠内毒素性急性肺损伤的机制与抑制肺组织细胞焦亡有关。

关键词：氯胺酮内毒素类急性肺损伤细胞焦亡

缺血后处理对大鼠缺血-再灌注肺损伤血红素加氧酶-1表达的影响

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中华急诊医学杂志 2012年第10期21卷 1122-1126页

作者：江莹夏中元高瑾徐金金孟庆涛侯家保武汉大学人民医院麻醉科武汉430060

目的观察缺血后处理（IPO）对大鼠肺缺血-再灌注损伤（IRI）期间血红素加氧酶-1（HO-1）表达的影响，探讨其保护机制。方法48只成年SD大鼠，随机（随机数字法）分成6组（n=8）,假手术组（S组）；缺血-再灌注组（I/R组）：夹闭左肺门缺血... 详细信息

目的观察缺血后处理（IPO）对大鼠肺缺血-再灌注损伤（IRI）期间血红素加氧酶-1（HO-1）表达的影响，探讨其保护机制。方法48只成年SD大鼠，随机（随机数字法）分成6组（n=8）,假手术组（S组）；缺血-再灌注组（I/R组）：夹闭左肺门缺血45min,再灌注105min；缺血后处理组（IPQ组）：缺血后再灌注30s,停灌30s，反复3次，再恢复灌注102min;氯化高铁血红素（Hemin）＋缺血-再灌注组（ZnPPIX＋IPO组）：术前连续2d腹腔注射Hemin40junol/（kg·d）,余同I/R组；锌原卟啉K＋缺血后处理组（ZnPPK＋IPO组）：术前24h腹腔注射ZnPPIX20mg/（kg·d）,余同IPO组；氯化高铁血红素＋假手术组（HM＋S组）。测定各组肺组织HO-1蛋白表达水平、动脉血氧分压（Pa02）、肺组织湿/干质量比（W/D）和血清丙二醛（MDA）含量，观察肺组织病理变化。组间比较采用单因素方差分析，组内比较采用配对＊检验。结果1/R组肺组织HO-1蛋白表达（0.177±0.015）与S组和HM＋S组相比差异具有统计学意义（P〈0.01,P〈0.05）,但与IPO组（0.194士0.017）及HM＋I/R组（0.209±0.013）相比差异具有统计学意义（P〈0.05,P〈0.01）o各实验组Pa02均显著低于S组（90±11）mmHg,IPO组和HM＋I/R组PaO2与1/11组相比较，差异具有统计学意义（P〈0.01）;I/R组较S组肺组织W/D、血清MDA含量升高，肺组织病理损伤严重，而IPO组和HM＋I/R组上述改变差异具有统计学意义（P〈0.05）。结论早期短时程缺血后处理能明显减轻在体大鼠肺IRI,其作用机制与其上调HO-1蛋白表达及抑制脂质过氧化的损伤作用有关。

关键词：缺血后处理缺血-再灌注损伤肺血红素加氧酶 1-氯化高铁血红素锌原卟啉Ⅸ 湿干质量比

PICCO监测在非体外循环冠状动脉搭桥术中血流动力学管理的指导作用

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武汉大学学报（医学版） 2019年第5期40卷 780-785页

作者：陈榕张云砚曾滋孙涛丁可夏中元孟庆涛武汉大学人民医院麻醉科

目的:探讨非体外循环冠状动脉旁路移植术中脉搏指示连续心排血量(PICCO)与中心静脉压(CVP)监测指导下的围术期液体管理疗效及对预后的影响。方法:采用前瞻性随机对照研究,严格按照纳入标准和排除标准选取我院2016年1月~2018年6月拟行非... 详细信息

目的:探讨非体外循环冠状动脉旁路移植术中脉搏指示连续心排血量(PICCO)与中心静脉压(CVP)监测指导下的围术期液体管理疗效及对预后的影响。方法:采用前瞻性随机对照研究,严格按照纳入标准和排除标准选取我院2016年1月~2018年6月拟行非体外循环冠状动脉旁路移植术患者83例,动态随机分为CVP组与PICCO组,两组分别根据术中CVP与PICCO相关参数指导液体管理,所有患者从颈内静脉置入三腔中心静脉导管,CVP组患者从股动脉置入动脉导管,PICCO组患者的股动脉置入PICCO导管。CVP组在CVP监测目标8~12 cmH2O压力导向下进行液体管理;PICCO组在容量指标EVLWI 3~7 mL/kg、ITBVI 850~1 000 mL/m2导向下进行液体管理。分别检测2组术前(T0)、搭桥后1 h(T1)、术后0 h(T2)、6 h(T3)、12 h(T4)、24 h(T5)的乳酸及B型脑钠肽(BNP)水平、心率(HR)、平均动脉压和CVP,记录不同时间点PICCO组患者血流动力学参数,分别记录2组患者术后血管活性药物使用时间、机械通气时间、多器官功能障碍综合征(MODS)发生率、ICU住院天数。结果:两组患者一般情况包括性别、年龄、术前心率、血压、平均动脉压、乳酸、BNP值、CVP均无统计学差异;与CVP组比较,PICCO组患者T1、T2、T3、T4时间点乳酸和BNP水平及HR均显著降低(P<0. 05);PICCO组术后各时间点血流动力学参数均优于术前,差异有统计学意义(P<0. 05);术后两组MODS发生率无统计学差异,但PICCO组患者血管活性药物使用时间、ICU住院时间及机械通气时间明显短于CVP组(P<0. 05)。结论:非体外循环冠状动脉旁路移植术中PICCO监测指导液体管理及用药优于CVP监测,具有积极的临床指导价值。

关键词：非体外循环冠状动脉旁路移植术脉搏指示连续心排血量中心静脉压血流动力学

盐酸戊乙奎醚对双重打击致大鼠急性肺损伤时细胞凋亡的影响

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中华麻醉学杂志 2015年第8期35卷 1007-1010页

作者：吴晓静杨旭明梁辉宋学敏武汉大学人民医院麻醉科 430060 武汉大学中南医院麻醉科

目的评价盐酸戊乙奎醚对双重打击致大鼠急性肺损伤时细胞凋亡的影响.方法 SPF级健康雄性SD大鼠30只,体重240 ～ 270 g,8周龄,采用随机数字表法分为3组（n=10）：假手术组（Sham组）、胸部创伤-失血性休克致急性肺损伤组（ALI组）和盐... 详细信息

目的评价盐酸戊乙奎醚对双重打击致大鼠急性肺损伤时细胞凋亡的影响.方法 SPF级健康雄性SD大鼠30只,体重240 ～ 270 g,8周龄,采用随机数字表法分为3组（n=10）：假手术组（Sham组）、胸部创伤-失血性休克致急性肺损伤组（ALI组）和盐酸戊乙奎醚组（PHC组）.ALI组和PHC组制备胸部创伤-失血性休克急性肺损伤模型,Sham组只分离股动、静脉,不制备胸部创伤-失血性休克急性肺损伤模型;PHC组于胸部创伤前1h腹腔注射盐酸戊乙奎醚2 mg/kg.于模型制备成功后8h时处死大鼠取肺组织.光镜和电镜下观察肺组织病理学结果,采用Western blot法检测Bax、Bcl-2和caspase-3的表达,采用ELISA法测定TNF-α含量,采用TUNEL法计数凋亡细胞,计算细胞凋亡指数.结果与Sham组比较,ALI组和PHC组肺组织Bax、caspase-3、TNF-α水平和细胞凋亡指数升高,Bcl-2表达下调（P＜0.05）;与ALI组比较,PHC组肺组织Bax、caspase-3、TNF-α水平和细胞凋亡指数降低,Bcl-2表达上调（P＜0.05）.PHC组肺组织病理学损伤较ALI组明显减轻.结论盐酸戊乙奎醚通过抑制细胞凋亡减轻双重打击致大鼠急性肺损伤.

关键词：胆碱能拮抗剂胸部损伤休克,出血性急性呼吸窘迫综合征,成人细胞凋亡

TLR4在机械通气致糖尿病小鼠肺毛细血管通透性增加中的作用

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中华麻醉学杂志 2014年第2期34卷 207-210页

作者：陈畅张帆张宗泽彭勉陈莹莹陈凯王焱林武汉大学中南医院麻醉科 430071 武汉大学人民医院麻醉科

目的评价Toll样受体4（TLR4）在机械通气致糖尿病小鼠肺毛细血管通透性增加中的作用.方法选择雄性野生型小鼠C3H/HeN和TLR4基因突变型小鼠C3H/HeJ各28只,8～ 10周龄,体重20 ～ 25 g,腹腔注射链脲佐菌素150 mg/kg的方法制备糖尿病模型... 详细信息

目的评价Toll样受体4（TLR4）在机械通气致糖尿病小鼠肺毛细血管通透性增加中的作用.方法选择雄性野生型小鼠C3H/HeN和TLR4基因突变型小鼠C3H/HeJ各28只,8～ 10周龄,体重20 ～ 25 g,腹腔注射链脲佐菌素150 mg/kg的方法制备糖尿病模型.采用随机数字表法,将2种小鼠各随机分为2组（n=14）,假手术组（DS组）糖尿病小鼠行气管插管术自主呼吸4h;机械通气组（DM组）糖尿病小鼠进行机械通气4h,吸入氧浓度50％,通气频率70次/min,潮气量15 ml/kg,PEEP 2cmH2O.自主呼吸或机械通气4h时采集颈动脉血样行血气分析,记录PaO2和PaCO2,收集血清,测定血清一氧化氮（NO）浓度.随后处死,取肺组织测定肺组织湿/干重比（W/D比值）、伊文思蓝（EB）含量,Western blot法测定小凹蛋白-1、内皮型一氧化氮合成酶（eNOS）和磷酸化内皮型一氧化氮合成酶（p-eNOS）的蛋白表达水平,计算p-eNOS/eNOS比值.结果与DS组比较,DM组小鼠PaO2、PaCO2、p-eNOS/eNOS比值降低,肺组织W/D比值、EB含量、小凹蛋白-1表达水平明显升高（P＜0.05）;与C3H/HeN小鼠比较,DM组C3H/HeJ小鼠肺组织W/D比值、EB含量和小凹蛋白-1表达水平明显降低,p-eNOS/eNOS比值和血清NO浓度升高（P＜0.05）,PaO2和PaCO2差异无统计学意义（P＞0.05）.结论 TLR4通过与小凹蛋白-1有效结合,减少NO生物利用度,增加糖尿病小鼠机械通气后肺毛细血管通透性.

关键词： Toll样受体4 呼吸窘迫综合征,成人糖尿病毛细血管通透性 Toll-like receptor 4