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乳杆菌源性外囊泡对LPS诱导小胶质细胞活化的影响及蛋白质组学分析

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中华麻醉学杂志 2024年第2期44卷 187-193页

作者：杨彦芳徐反宁倪新莉宁夏医科大学总医院麻醉与围术期医学科银川750004

目的评价乳杆菌源性细胞外囊泡(Lac-EVs)对脂多糖(LPS)诱导小胶质细胞活化的影响及蛋白质组学分析。方法取生长状态较好的小鼠BV2小胶质细胞,采用随机数字表法分为3组(n=12):对照组(C组)、LPS组(L组)和LPS+Lac-EVs组(L+E组)。C组正常培... 详细信息

目的评价乳杆菌源性细胞外囊泡(Lac-EVs)对脂多糖(LPS)诱导小胶质细胞活化的影响及蛋白质组学分析。方法取生长状态较好的小鼠BV2小胶质细胞,采用随机数字表法分为3组(n=12):对照组(C组)、LPS组(L组)和LPS+Lac-EVs组(L+E组)。C组正常培养;L组LPS(终浓度1 μg/ml)孵育24 h;L+E组于LPS处理后24 h加入Lac-EVs(终浓度2.5 μg/ml)孵育24 h。随后采用免疫荧光染色法检测CD86和CD206的表达。取L组和L+E组细胞沉淀,采用蛋白质组学方法筛选两组差异表达蛋白。对鉴定得到的差异表达蛋白进行生物信息学分析并采用RT-qPCR和Western blot法对载脂蛋白1(Apoa1)和G蛋白偶联受体激酶相互作用蛋白2(Git2)两个差异表达蛋白进行验证。结果与C组相比,L组CD86表达上调,CD206表达下调(P<0.05);与L组相比,L+E组CD86表达下调,CD206表达上调(P<0.05)。采用蛋白质组学法筛选出125个差异表达蛋白(FC=2.0,P<0.05),其中66个蛋白表达上调,59个蛋白表达下调,其中Apoa1和Git2表达上调并且排名较前。GO分析结果表明,这些差异表达蛋白主要参与内皮细胞增殖、SDNA损伤检查以及脂蛋白运输等生物过程。KEGG分析结果表明,PPAR信号通路、内吞作用、代谢途径、MAPK信号通路等存在差异。Western blot法和RT-qPCR法测定上述差异蛋白的表达趋势与蛋白质组学结果一致。结论 Lac-EVs可抑制LPS诱导小胶质细胞向M1型极化,其机制可能与上调的差异表达蛋白Apoa1和Git2有关。

关键词：乳杆菌属细胞外囊泡脂多糖类小神经胶质细胞蛋白质组学

肥胖因素对小鼠心肌缺血再灌注损伤的影响及TRPA1表达在其中的作用

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中华麻醉学杂志 2024年第4期44卷 471-475页

作者：王敏秦帅李傲雪吴云安徽医科大学第二附属医院麻醉与围术期医学科麻醉与围术期医学科安徽普通高校重点实验室合肥230601

目的评价肥胖因素对小鼠心肌缺血再灌注损伤的影响及瞬时受体电位锚蛋白1(TRPA1)表达在其中的作用。方法SPF级健康雄性C57BL/6J小鼠24只,6~7周龄,体质量18~21 g。采用随机数字表法分为2组(n=12):普通饲料组(CD组)和高脂饲料组(HFD组)。C... 详细信息

目的评价肥胖因素对小鼠心肌缺血再灌注损伤的影响及瞬时受体电位锚蛋白1(TRPA1)表达在其中的作用。方法SPF级健康雄性C57BL/6J小鼠24只,6~7周龄,体质量18~21 g。采用随机数字表法分为2组(n=12):普通饲料组(CD组)和高脂饲料组(HFD组)。CD组喂养普通饲料,HFD组喂养60%脂肪供能的高脂饲料,持续12周并每周记录小鼠体质量。随后将CD组小鼠随机分为2组(n=6):CD+溶剂组(CD+C组)和CD+AITC组(CD+A组);HFD组小鼠随机分为2组(n=6):HFD+溶剂组(HFD+C组)和HFD+TRPA1激动剂组(HFD+A组)。第13周,CD+A组和HFD+A组在原先饲料喂养基础上使用TRPA1激动剂异硫氰酸烯丙酯25 mg·kg^(-1)·d^(-1)进行灌胃,CD+C组和HFD+C组给予等量溶剂。第14周小鼠心肌缺血30 min再灌注120 min,记录小鼠体质量、附睾脂肪、肠系膜脂肪和肾周脂肪的质量,检测血清LDH、甘油三酯和胆固醇水平,计算心肌梗死体积百分比,采用Western blot法检测心肌组织TRPA1、Bax和Bcl-2的表达,计算Bax/Bcl-2比值。结果与CD+C组比较,CD+A组小鼠心肌组织TRPA1表达上调(P0.05),HFD+C组小鼠血清甘油三酯、胆固醇浓度、体质量、附睾脂肪、肠系膜脂肪、肾周脂肪质量和心肌梗死体积百分比增加,心肌组织TRPA1表达下调,LDH浓度和Bax/Bcl-2比值升高(P<0.05);与HFD+C组相比,HFD+A组小鼠血清甘油三酯和胆固醇浓度降低,体质量、附睾脂肪、肠系膜脂肪、肾周脂肪质量和心肌梗死体积百分比减少,心肌组织TRPA1表达上调,LDH浓度和Bax/Bcl-2比值降低(P<0.05)。结论肥胖因素可加重小鼠心肌缺血再灌注损伤,TRPA1表达下调参与了这一过程。

关键词：肥胖症心肌再灌注损伤瞬时受体电位通道

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不同给药方式用于分娩镇痛的效果研究

中国基层医药 2024年第2期31卷 239-242页

作者：李会会赵利芳范解放新乡市中心医院麻醉与围术期医学科新乡453000

目的探讨不同给药方式用于分娩镇痛的临床效果。方法选取新乡市中心医院2023年2—6月经阴道分娩的产妇152例进行随机对照研究,按照随机数字表法分为对照组、观察组各76例。对照组常规硬膜外置管后给予0.1%盐酸罗哌卡因3 mL,并于3 min后... 详细信息

目的探讨不同给药方式用于分娩镇痛的临床效果。方法选取新乡市中心医院2023年2—6月经阴道分娩的产妇152例进行随机对照研究,按照随机数字表法分为对照组、观察组各76例。对照组常规硬膜外置管后给予0.1%盐酸罗哌卡因3 mL,并于3 min后予镇痛药物3 mL,无特殊反应者3 min后给予镇痛泵内药物9 mL并连接镇痛泵,开启至分娩后拔出导管。观察组导管置入硬膜外腔前给予试验量0.1%盐酸罗哌卡因3 mL,常规置入硬膜外导管,3 min后产妇躺平再次给予镇痛泵内药物3 mL,3 min后给予镇痛泵内药物9 mL,连接镇痛泵并开启至分娩后拔出导管。观察两组硬膜外置管不畅发生率,产妇硬膜外穿刺前(T1)、镇痛开始30 min(T2)、宫口开全(T3)3个时间点的视觉模拟评分法(VAS)评分,产妇自主追加镇痛泵次数,产妇满意度,转剖宫产例数,恶心呕吐、发热等不良反应发生率以及新生儿Apgar评分。结果观察组置管不畅发生率为1.3%(1/76),显著低于对照组的10.5%(8/76)(χ^(2)=5.79,P<0.05)。观察组T2、T3时间点的VAS评分分别为(0.89±0.08)分、(2.1±0.07)分,均低于对照组的(2.55±0.07)分、(3.35±0.07)分(t=238.54、133.17,均P<0.001)。观察组自主追加镇痛泵次数[(1.00±0.84)次]少于对照组[(4.00±0.65)次](t=29.47,P<0.001)。观察组产妇满意度[100.0%(76/76)]高于对照组[92.1%(70/76)](χ^(2)=6.25,P<0.05),转剖宫产率为0(0/76),低于对照组的52.6%(4/76)(χ^(2)=4.10,P<0.05)。结论行硬膜外置管分娩镇痛时于置入硬膜外导管前给予试验量0.1%盐酸罗哌卡因3 mL有利于置管且可显著提高分娩镇痛效果,有一定的应用价值。

关键词：麻醉和镇痛镇痛,硬膜外镇痛,产科镇痛,病人控制疼痛测定阿普加评分随机对照试验

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上呼吸道感染患儿全麻术后多次拔管困难一例

临床麻醉学杂志 2024年第3期40卷 330-332页

作者：秦霈刘芯马锐丁卫王娟宁杨丽芳西安市儿童医院麻醉与围术期医学科 710003

患儿,男,4岁,96 cm,14.5 kg,因“发现双侧阴囊空虚18 d”入院。患儿系第2胎第2产,孕足月顺产,出生体重3 kg,出生时无窒息缺氧抢救史,按计划免疫接种。家长自述患儿3岁前,季节更换时因“上呼吸道感染、肺炎”每年住院治疗2次。入院查体:... 详细信息

患儿,男,4岁,96 cm,14.5 kg,因“发现双侧阴囊空虚18 d”入院。患儿系第2胎第2产,孕足月顺产,出生体重3 kg,出生时无窒息缺氧抢救史,按计划免疫接种。家长自述患儿3岁前,季节更换时因“上呼吸道感染、肺炎”每年住院治疗2次。入院查体:体温36.5℃、HR 107次/分、BP 98/63 mmHg,RR 24次/分。神志清楚,皮肤黏膜、腹部、肺部、四肢未见明显异常。术前访视:血常规、凝血功能、胸部X线片、心电图、肝肾功能正常,体格检查正常,3 d前出现偶咳,流少量清涕,体温正常,咽喉无红肿,双肺呼吸音清,术前评估ASAⅡ级,术前诊断为双侧隐睾,拟行“腹腔镜下双侧睾丸下降固定术”。

关键词：计划免疫接种双肺呼吸音清拔管困难足月顺产术前访视术前诊断清涕上呼吸道感染

SIRT1/Nrf2/HO-1通路在七氟烷后处理改善失血性休克复苏小鼠空间学习与记忆障碍中的作用

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中国药理学通报 2024年第3期40卷 551-556页

作者：牛志伦张丽胡溯吴雨洁万晓静胡宪文安徽医科大学第二附属医院麻醉与围术期医学科安徽合肥230601

目的探究沉默信息调节因子1(silent information regulation 1,SIRT1)/核因子E2相关因子2(nuclear transcription factor E2 related factor 2,Nrf2)/血红素加氧酶-1(heme oxygenase 1,HO-1)通路在七氟烷后处理减轻脑缺血/再灌注小鼠认知功能损伤中的作用。方法将♂C57BL/6J小鼠随机分为:假手术组、失血性休克复苏组、七氟烷后处理组、七氟烷后处理+SIRT1抑制剂组、七氟烷后处理+Nrf2抑制剂组,建立脑缺血/再灌注模型。水迷宫检验小鼠学习记忆能力;检测海马组织ATP、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、活性氧、丙二醛含量;Western blot检测海马SIRT1、Nrf2和HO-1蛋白表达。结果再灌注后小鼠学习记忆能力降低,海马SOD、ATP含量降低,丙二醛、活性氧含量升高,SIRT1、Nrf2和HO-1蛋白表达降低;七氟烷处理后减轻了再灌注后小鼠记忆障碍和氧化应激;加用SIRT1和Nrf2抑制剂后,减弱了七氟烷对小鼠认知障碍和氧化损伤的保护作用。结论七氟烷后处理可能通过SIRT1/Nrf2/HO-1通路对失血性休克复苏引起的小鼠学习记忆障碍起到保护作用,机制与其抑制氧化应激反应相关。

关键词：七氟烷后处理失血性休克复苏 SIRT1 Nrf2 HO-1 水迷宫氧化应激

右美托咪定通过提高GDNF释放发挥抗缺血性卒中损伤作用

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安徽医科大学学报 2024年第10期 1729-1736页

作者：杨海燕马晓梅吴芳王慧宁夏医科大学总医院麻醉与围术期医学科

目的探究右美托咪定(Dex)发挥抗缺血性卒中作用时对胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)释放的影响。方法将SD大鼠随机分为假手术组(Sham组),假手术+右美托咪定组(Sham+Dex组),缺血性卒中组(IS组),缺血性卒中+右美托咪定组(IS+Dex组),缺... 详细信息

目的探究右美托咪定(Dex)发挥抗缺血性卒中作用时对胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)释放的影响。方法将SD大鼠随机分为假手术组(Sham组),假手术+右美托咪定组(Sham+Dex组),缺血性卒中组(IS组),缺血性卒中+右美托咪定组(IS+Dex组),缺血性卒中+右美托咪定组+anti-GDNF(IS+Dex+anti-GDNF组),每组15只。采用Longa线栓法构建IS模型，24 h后各组取大鼠开展神经功能评分，将大鼠处死，取脑脊液和外周血检测GDNF含量，取全脑进行氯化三苯基四氮唑(TTC)染色评估脑缺血梗死区域面积，取全脑组织包埋、切片，通过免疫荧光检测星形胶质细胞活化，取缺血核心区组织通过qRT-PCR检测星形胶质细胞活化表型。结果与Sham组相比，Sham+Dex组各项指标没有明显变化，IS组大鼠神经功能评分增加(P<0.05),出现了明显的局部梗死区域，外周与中枢系统中GDNF释放增加(P<0.05),且IS造成小胶质细胞活化，神经毒性和神经保护性表型基因表达都明显升高(P<0.05);与IS组相比，IS+Dex组大鼠神经功能评分明显减少(P<0.05),局部梗死区域面积明显降低(P<0.05),且GDNF释放进一步增加(P<0.05),神经毒性星形胶质细胞表型基因表达明显减少(P<0.05),而神经保护性星形胶质细胞表型基因表达进一步升高(P<0.05)。然而，与IS+Dex组相比，anti-GDNF抗体的干预明显逆转了Dex的治疗作用。结论 Dex通过抑制神经毒性星形胶质细胞表型，提高神经保护性星形胶质细胞表型占比，进一步促进GDNF释放，发挥抗IS作用。

关键词：右美托咪定星形胶质细胞极化 GDNF 缺血性卒中

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床旁膈肌超声在预测胸腔镜肺叶切除术后肺部并发症中的应用价值

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实用医学杂志 2024年第2期40卷 207-212页

作者：郭高锋阮孝国王洋洋张加强河南省人民医院麻醉与围术期医学科郑州450003

目的评估床旁膈肌超声在预测胸腔镜肺叶切除术后肺部并发症(PPCs)中的应用价值。方法收集河南省人民医院择期行胸腔镜肺叶切除术患者,记录一般资料、围术期相关指标;术前,术后1、3、5 d床旁超声检测膈肌活动度(DE1d、DE3d、DE5d)。根据... 详细信息

目的评估床旁膈肌超声在预测胸腔镜肺叶切除术后肺部并发症(PPCs)中的应用价值。方法收集河南省人民医院择期行胸腔镜肺叶切除术患者,记录一般资料、围术期相关指标;术前,术后1、3、5 d床旁超声检测膈肌活动度(DE1d、DE3d、DE5d)。根据是否发生PPCs将患者分为两组(PPCs组和非PPCs组)。将单变量分析中有统计学差异的参数纳入多变量logistic回归分析中,筛选PPCs的独立影响因素。绘制受试者工作曲线(ROC),并通过曲线下面积(AUC)评估膈肌超声预测PPCs的效能。结果共纳入患者934例,其中537例发生PPCs(57.5%)。单因素分析显示:与非PPCs组比较,PPCs组糖尿病患者占比、术后24 h活动VAS评分增加;胸管拔除时间、单肺通气时间、术后住院时间长;PPCs组患者术后DE1d、3d手术侧、健侧;DE5d手术侧DE值低(P<0.05)。多因素logistic回归分析显示:单肺通气时间延长、糖尿病、术后(DE1d、3d)手术侧、健侧和DE5d手术侧DE值降低是发生PPCs的独立危险因素。ROC曲线显示:术后DE1d、3d的手术侧、健侧预测PPCs的效能较高(AUC分别为0.797、0.821、0.933、0.929);术后DE5d手术侧、健测预测PPCs效能较弱(AUC分别为0.703、0.512)。结论术后相应时间DE降低、单肺通气时间延长、糖尿病是胸腔镜肺叶切除术后发生PPCs的独立危险因素,术后3 d应用床旁超声评价DE对PPCs具有较高的预测价值。

关键词：膈肌超声肺叶切除术术后肺部并发症

亚麻醉剂量艾司氯胺酮复合右美托咪定对妇科手术患者焦虑抑郁情绪及炎症反应的影响

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新乡医学院学报 2024年第4期41卷 326-332页

作者：和谦蒋天赐周武童张永强陈胜阳新乡医学院第一附属医院麻醉与围术期医学科河南卫辉453100

目的探讨亚麻醉剂量艾司氯胺酮复合右美托咪定对妇科全身麻醉手术患者术后焦虑抑郁情绪和炎症反应的影响。方法选择2022年2月至2022年10月于新乡医学院第一附属医院择期行妇科全麻手术患者200例为研究对象。按随机数字表法将患者分为亚... 详细信息

目的探讨亚麻醉剂量艾司氯胺酮复合右美托咪定对妇科全身麻醉手术患者术后焦虑抑郁情绪和炎症反应的影响。方法选择2022年2月至2022年10月于新乡医学院第一附属医院择期行妇科全麻手术患者200例为研究对象。按随机数字表法将患者分为亚麻醉剂量艾司氯胺酮复合右美托咪定组(联合组)、艾司氯胺酮组、右美托咪定组、常规组,每组50例。4组患者术前常规禁食禁水,常规面罩吸氧3 L·min-1。联合组患者麻醉诱导前5 min静脉泵入右美托咪定,以0.3μg·kg^(-1)·h^(-1)的速率维持至术毕前30 min,并于术前5 min单次静脉注射艾司氯胺酮(0.2 mg·kg^(-1));艾司氯胺酮组患者术前5 min单次静脉注射艾司氯胺酮(0.5 mg·kg^(-1)),以0.2 mg·kg^(-1)·h^(-1)的速率维持至术毕前30 min;右美托咪定组患者麻醉诱导前5 min静脉泵入右美托咪定,以0.3μg·kg^(-1)·h^(-1)的速率维持至术毕前30 min;常规组患者麻醉诱导前5 min静脉滴注丙泊酚2.5 mg·kg^(-1),以0.6 mg·kg^(-1)·h^(-1)的速率维持至术毕前30 min。4组患者给予相同的麻醉诱导方法。分别于术前、术后48 h,应用焦虑视觉类比试验(AVAT)评分、医院焦虑抑郁量表(HADS)评分、焦虑自评量表(SAS)评分和抑郁自评量表(SDS)评分评估患者的焦虑、抑郁情况;分别于术前1 d及术后1、3、7 d,采集4组患者外周血2 mL,采用酶联免疫吸附法检测血清中白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-10(IL-10)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平。结果常规组患者术前与术后48 h AVAT、HADS、SAS和SDS评分比较差异无统计学意义(P>0.05);联合组、艾司氯胺酮组和右美托咪定组患者术后48 h AVAT、HADS、SAS和SDS评分均显著低于术前(P0.05)。术后1、3、7 d,4组患者血清IL-6、IL-10、TNF-α水平均显著高于术前1 d(P0.05)。术后1、3、7 d,联合组、艾司氯胺酮组和右美托咪定组患者血清IL-6、IL-10、TNF-α水平显著低于常规组(P麻醉剂量艾司氯胺酮与右美托咪定联合应用可显著改善妇科全身麻醉手术患者的焦虑抑郁情绪和炎症反应。

关键词：艾司氯胺酮右美托咪定焦虑抑郁

左侧星状神经节吗啡后处理在心肌梗死后重塑中的调节作用

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中国药理学通报 2024年第3期40卷 440-446页

作者：毛遂陶辉张野安徽医科大学第二附属医院麻醉与围术期医学科安徽医科大学麻醉与围术期医学安徽普通高校重点实验室安徽合肥230601

目的探讨左侧星状神经节(left stellate ganglion,LSG)吗啡后处理在心肌梗死(myocardial infarction,MI)后重塑中的调控作用。方法SD大鼠随机分为4组:假手术组(Sham组)、心肌梗死组(MI组)、MI+生理盐水组(Control组)和MI+吗啡后处理组(M... 详细信息

目的探讨左侧星状神经节(left stellate ganglion,LSG)吗啡后处理在心肌梗死(myocardial infarction,MI)后重塑中的调控作用。方法SD大鼠随机分为4组:假手术组(Sham组)、心肌梗死组(MI组)、MI+生理盐水组(Control组)和MI+吗啡后处理组(MI+Morphine组)。结扎冠状动脉左前降支构建大鼠心肌梗死(myocardial infarction,MI)模型,随后采用经皮后入路法给予吗啡到LSG周围。4周后超声检测大鼠心功能变化;Masson染色检测纤维化改变;Western blot检测CollagenⅠ、CollagenⅢ蛋白表达;RT-qPCR检测ANP和BNP的mRNA表达;免疫荧光检测μ阿片受体(μopioid receptor,μOR)在LSG的表达;ELISA法检测血浆和心肌组织中儿茶酚胺浓度。结果与Sham组相比,MI组大鼠心功能明显受损,心肌组织呈现纤维化改变,血浆和心肌组织中儿茶酚胺浓度明显增高。与Control组相比,MI+Morphine组减少MI后大鼠心肌纤维化胶原沉积,抑制心肌组织中ANP和BNP的表达,降低儿茶酚胺的浓度,改善MI大鼠的心功能。免疫荧光结果显示μOR在MI后LSG中有表达,并且在吗啡后处理后表达增高。结论本研究表明,LSG吗啡后处理在MI后重塑中有心肌保护作用,其机制可能与吗啡激动LSG中μOR,减少交感神经末梢儿茶酚胺释放有关。

关键词：心肌梗死星状神经节 μ阿片受体吗啡纤维化儿茶酚胺