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利用高信噪比纳米探针实现原位精确的表面增强拉曼光谱生物成像

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分析测试学报 2024年第1期43卷 128-137页

作者：王莉湘施扬陈峰曹玥南京医科大学法医学系江苏南京211166 南京医科大学药学系江苏南京211166

生物行为的可视化对于基础和临床医学研究至关重要。表面增强拉曼光谱(Surface-enhancedRaman spectroscopy,SERS)作为一种新兴的光学技术,因其无创、高灵敏、快速和多重检测的特性引起了人们的广泛关注。尽管目前的SERS技术在体外分子... 详细信息

生物行为的可视化对于基础和临床医学研究至关重要。表面增强拉曼光谱(Surface-enhancedRaman spectroscopy,SERS)作为一种新兴的光学技术,因其无创、高灵敏、快速和多重检测的特性引起了人们的广泛关注。尽管目前的SERS技术在体外分子传感领域发展迅速,但由于现有的SERS成像速度和精度不足以满足活体成像的需求,仍无法实现实时可视化体内小分子的时空动力学。该文重点阐述了通过间隙增强核壳纳米颗粒、半导体复合纳米颗粒、拉曼沉默区SERS探针等这些更灵敏、可控、精确的纳米探针,在SERS体内成像方面的最新技术突破。SERS成像在细菌、肿瘤监测和光热治疗方面的研究越来越多,在制备SERS探针时,需要考虑背景信号的清除率、活体检测的穿透深度、靶标的靶向性、正常组织的无损性以及探针的活体清除率。此外,阐述了SERS在细胞成像、体内组织成像、术中成像和细菌成像中的最新研究应用。最后,对于SERS生物成像的未来发展进行了展望,并指出SERS成像在临床疾病预防、诊断和治疗方面具有巨大的潜力。

关键词：生物成像表面增强拉曼光谱(SERS) 治疗诊断学

S100A16启动子区DNA甲基化在小细胞肺癌细胞增殖及化疗耐药中的调控作用

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中国病原生物学杂志 2024年第5期19卷 528-533页

作者：叶瑞芳黄彩玲林潍轩方曼霖甘思远李汝佳冯娜郭琳琅熊英环孙艳芹广东医科大学第一临床医学院广东湛江524023 广东医科大学病理学系东莞东华医院病理科南方医科大学珠江医院病理科广东医科大学附属医院生物样本库广东医科大学实验动物中心

目的探讨S100钙结合蛋白A16(S100 calcium binding protein A16,S100A16)对小细胞肺癌细胞增殖、凋亡和化疗耐药性的影响,并揭示S100A16启动子区低甲基化在小细胞肺癌恶性表型中的潜在作用。方法结合生物信息学分析,采用RNA干扰技术降低... 详细信息

目的探讨S100钙结合蛋白A16(S100 calcium binding protein A16,S100A16)对小细胞肺癌细胞增殖、凋亡和化疗耐药性的影响,并揭示S100A16启动子区低甲基化在小细胞肺癌恶性表型中的潜在作用。方法结合生物信息学分析,采用RNA干扰技术降低H69AR细胞中S100A16的表达,使用RT-qPCR、Western blot、CCK-8实验、流式细胞术及免疫组化法分析S100A16在小细胞肺癌各种恶性表型中的调控作用。结果生物信息学在线数据分析发现,小细胞肺癌细胞易对化疗药物顺铂产生抵抗性,其持久耐药(Drug tolerant persister,DTP)细胞株中S100A16启动子区甲基化水平相对较低,与其mRNA表达水平呈负相关(P<0.05)。基于上述生信分析结果,我们进一步经实验验证发现,与小细胞肺癌化疗敏感细胞相比,S100A16在小细胞肺癌化疗耐药株中的表达较高(P<0.05);采用siRNA技术沉默化疗耐药细胞H69AR中S100A16的表达后,CCK-8实验分析发现细胞贴壁生长60 h后增殖能力明显下降(P<0.05),流式细胞术分析发现细胞早期凋亡率及晚期凋亡率均呈升高趋势(P<0.05)。为了探究S100A16表达改变与小细胞肺癌恶性表型间的分子机制,采用MassARRAY平台系统进行基因甲基化位点检测发现,癌组织中S100A16基因启动子区CpG-8甲基化水平显著较低(P<0.01),进一步采用去甲基化药物5-阿扎胞苷(5-aza-2′-deoxycytidine,5-aza-CdR)处理H69细胞后发现,DNA甲基转移酶DNMT3A明显下降(P<0.05)而S100A16的表达相对显著升高(P<0.01)。结论启动子区DNA低甲基化会导致S100A16在小细胞肺癌中高表达,能够进一步促进肿瘤发生发展,并且在化疗耐药中发挥一定作用。

关键词：小细胞肺癌 S100A16 化疗耐药 DNA甲基化

微型染色体维持蛋白10在肝癌中的表达和预后价值及作用机制研究

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中华肝胆外科杂志 2024年第3期30卷 207-213页

作者：贾锋宇王亮锦州医科大学锦州121000 锦州医科大学附属第一医院普外科锦州121000

目的分析微小染色体维持蛋白10(MCM10)在肝癌中的表达和预后预测价值及作用机制。方法从癌症基因组图谱数据库获取肝细胞肝癌转录组数据和临床数据,应用秩和检验对肿瘤组织和癌旁组织的MCM10表达水平进行分析。Cox回归分析MCM10表达水... 详细信息

目的分析微小染色体维持蛋白10(MCM10)在肝癌中的表达和预后预测价值及作用机制。方法从癌症基因组图谱数据库获取肝细胞肝癌转录组数据和临床数据,应用秩和检验对肿瘤组织和癌旁组织的MCM10表达水平进行分析。Cox回归分析MCM10表达水平与肝细胞肝癌患者生存预后的关系。应用基因集富集分析(GSEA)对MCM10高、低表达组之间差异基因表达谱进行通路富集分析。应用细胞计数实验(CCK-8)测定MCM10基因敲低对肝癌细胞HepG2增殖能力的影响;采用蛋白免疫印迹法检测MCM10基因敲低后对细胞G1/S-特异性周期蛋白-D1(cyclin D1)表达的影响。结果肝细胞肝癌中MCM10表达值为0.709±0.595,癌旁组织中MCM10表达值为0.077±0.094,差异有统计学意义(P<0.0001)。Cox回归分析显示MCM10高表达是肝细胞肝癌总生存期(HR=1.32,95%CI:1.19~1.48)和疾病特异性生存期(HR=1.40,95%CI:1.22~1.61)的危险因素和预后预测指标。GSEA分析表明差异基因主要富集在细胞周期、P53信号通路和细胞周期G1-S期正向调控等通路。CCK-8结果显示MCM10敲低能够抑制HepG2细胞增殖;蛋白免疫印迹分析进一步证实敲低MCM10表达可抑制HepG2细胞cyclin D1的表达。结论MCM10高表达是肝细胞肝癌患者预后的风险因素,MCM10能够通过cyclin D1促进肝癌细胞增殖从而发挥促肝癌的作用。

关键词：癌,肝细胞微小染色体维持蛋白10 预后基因集富集分析细胞周期蛋白D1

白细胞介素-4对肠道期旋毛形线虫感染的保护作用

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2024年第3期42卷 354-359,366页

作者：骆泽妮吴安琪汪志锴潘晋孙希萌首都医科大学基础医学院病原生物学系北京100069 首都医科大学基础医学院北京100069

目的探讨小鼠白细胞介素-4 (IL-4)对肠道期旋毛形线虫感染的保护作用。方法消化旋毛虫保种小鼠肌肉,收集肌幼虫,超声破碎后离心,取上清制备旋毛虫抗原。将10只野生型BALB/c小鼠随机分成未感染组和野生感染组,每组5只;另取4只IL-4敲除(... 详细信息

目的探讨小鼠白细胞介素-4 (IL-4)对肠道期旋毛形线虫感染的保护作用。方法消化旋毛虫保种小鼠肌肉,收集肌幼虫,超声破碎后离心,取上清制备旋毛虫抗原。将10只野生型BALB/c小鼠随机分成未感染组和野生感染组,每组5只;另取4只IL-4敲除(IL-4KO) BALB/c小鼠作为IL-4KO感染组。野生感染组和IL-4KO感染组每鼠灌胃旋毛虫肌幼虫400条,未感染组灌胃等体积PBS。感染旋毛虫后8 d,采集各组小鼠眼眶静脉血,离心收集血清,ELISA检测单核细胞趋化因子1 (MCP-1)含量。剖取十二指肠和近端空肠,制备石蜡切片后进行苏木精-伊红(HE)染色,使用Aperio ImageScope 12.4.3测量测量十二指肠、空肠的肠绒毛和隐窝的长度与杯状细胞的数量和大小,计算肠绒毛长度/隐窝长度的比值(V/C)和杯状细胞数/绒毛长度的比值(GC/V)。分离肠系膜淋巴结中的淋巴细胞,与旋毛虫抗原(10μg/ml)共培养72 h,收集细胞上清,高通量液相蛋白芯片(Luminex)技术检测IL-1β、IL-12p70、IL-2、IL-5、IL-6、干扰素γ (IFN-γ)、肿瘤坏死因子α (TNF-α)的含量。使用SPSS 26.0统计软件对数据进行分析,两两比较采用独立样本t检验,多样本比较采用单因素方差分析。结果 ELISA结果显示,未感染组、野生感染组、 IL-4KO感染组小鼠血清中MCP-1含量分别为(344.90±21.80)、(350.50±38.30)、(467.94±190.01) pg/ml,IL-4KO感染组高于野生感染组(t=0.681,P 0.05)外,IL-4KO感染组均高于野生感染组(F=5.52、24.73、48.72、5.00、123.10、50.55,P <0.05或0.01)。结论 IL-4在旋毛虫感染肠道期起免疫保护作用,能够降低小鼠血清中MCP-1含量,减缓十二指肠及空肠的炎症反应,抑制炎性细胞因子的分泌。

关键词：旋毛形线虫白细胞介素-4 肠道期感染抵抗作用

基于血清和关节液炎性标志物诊断假体周围感染的列线图诊断模型

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中华骨科杂志 2024年第4期44卷 250-259页

作者：秦磊磊杨建业张涛赵辰胡宁黄伟重庆医科大学附属第一医院骨科(重庆医科大学骨科实验室) 重庆400016

目的构建基于血清和关节液炎性标志物诊断关节置换术后假体周围感染(prosthetic joint infections,PJI)的列线图诊断模型,并验证其预测能力。方法回顾性收集2015年1月至2020年6月于重庆医科大学附属第一医院骨科诊断为PJI或无菌性松动的... 详细信息

目的构建基于血清和关节液炎性标志物诊断关节置换术后假体周围感染(prosthetic joint infections,PJI)的列线图诊断模型,并验证其预测能力。方法回顾性收集2015年1月至2020年6月于重庆医科大学附属第一医院骨科诊断为PJI或无菌性松动的181例患者临床资料作为建模组。通过lasso回归、单因素及多因素分析筛选出诊断PJI的最佳指标。通过综合考量各项指标的权重及内在联系,构建列线图诊断模型,并以此开发临床决策支持系统(clinical decision support system,CDSS)。前瞻性收集2020年7月至2022年12月于重庆医科大学附属第一医院骨科诊断为PJI或无菌性松动的49例患者作为验证组,通过受试者工作特征曲线(receiver operating characteristic curve,ROC)等方法对列线图模型的诊断性能进行外部验证。结果181例建模组中PJI患者85例,49例验证组中PJI患者23例。在27个潜在因素中通过lasso回归分析发现体质指数(body mass index,BMI)、血液指标[包括血小板、淋巴细胞绝对值、干扰素γ(interferonγ,IFN-γ)、红细胞沉降率、IL-6、C反应蛋白、D-二聚体]及关节液指标(包括C反应蛋白、IL-1、IL-4、IL-6、多核中性粒细胞百分比、CD64)可能是诊断PJI的潜在指标。单因素回归分析发现血液学指标(包括红细胞沉降率、C反应蛋白、IL-6、D-二聚体)和关节液指标(包括C反应蛋白、关节液CD64指数、C反应蛋白、IL-1、IL-4、IL-6、关节液多形核白细胞百分比)的差异有统计学意义(P<0.05)。多因素回归分析筛选出血清IL-6、D-二聚体、关节液CD64指数、C反应蛋白、IL-1、IL-4、IL-6及关节液多形核白细胞百分比等指标,以此为基础构建列线图模型和CDSS系统。验证组外部验证ROC曲线下面积(area under the curve,AUC)为0.978,内部验证AUC为0.995;校准曲线C指数为99.50%,内部验证C指数为99.53%,提示列线图模型在临床应用中具有良好的预测能力。结论基于多个诊断指标诊断PJI的列线图显示出良好的诊断性能。通过列线图构建的CDSS系统将有助于临床医生更好地诊断PJI,及时做出合理决策。

关键词：假体周围感染关节液列线图感染性标志物诊断

加速消除乙型肝炎病毒感染:扩大预防和治疗专家建议

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中华肝脏病杂志 2024年第6期32卷 497-503页

作者：中华医学会肝病学分会肝炎学组中华肝脏病杂志编辑委员会胡鹏尤红窦晓光不详重庆医科大学附属第二医院重庆400010 首都医科大学附属北京友谊医院北京100050 中国医科大学附属盛京医院沈阳110000

为了早日实现世界卫生组织提出的"2030年消除病毒性肝炎作为公共卫生危害"目标,针对乙型肝炎预防和治疗方面尚未形成共识的相关问题,包括全人群筛查、成人乙型肝炎疫苗接种、乙型肝炎病毒DNA定量值的评价、启动抗病毒治疗的丙氨酸转氨... 详细信息

为了早日实现世界卫生组织提出的"2030年消除病毒性肝炎作为公共卫生危害"目标,针对乙型肝炎预防和治疗方面尚未形成共识的相关问题,包括全人群筛查、成人乙型肝炎疫苗接种、乙型肝炎病毒DNA定量值的评价、启动抗病毒治疗的丙氨酸转氨酶阈值、"不确定期"患者的治疗、合并感染及合并症患者的治疗等方面问题,形成专家建议,旨在进一步扩大乙型肝炎的预防与治疗,加速消除乙型肝炎病毒感染。

关键词：慢性乙型肝炎乙型肝炎病毒预防治疗专家建议

高通量测序揭示系统性红斑狼疮B细胞异常的研究进展

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中华微生物学和免疫学杂志 2024年第7期44卷 641-645页

作者：夏彦祺赵晗段荦袁慧慧首都医科大学基础医学院免疫学系北京100069

系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)是一种以致病性自身抗体和免疫复合物形成并介导多器官损伤的急性或慢性自身免疫病,好发于育龄期女性,具有显著异质性。自身反应性B细胞过度活化产生自身抗体是SLE全身免疫病理损伤的... 详细信息

系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)是一种以致病性自身抗体和免疫复合物形成并介导多器官损伤的急性或慢性自身免疫病,好发于育龄期女性,具有显著异质性。自身反应性B细胞过度活化产生自身抗体是SLE全身免疫病理损伤的重要原因,靶向B细胞治疗SLE的显著疗效提示其在疾病发生和进展中的重要作用。由于自身反应性B细胞参与疾病进展的具体机制和标志分子尚不明确,目前,B细胞耗竭疗法均是针对总的B细胞群体,无法靶向清除自身反应性B细胞。随着科学技术手段的进步,高通量测序技术为研究SLE B细胞异常提供了新思路。本综述重点就高通量测序揭示B细胞受体新的异常、新的B细胞亚群和B细胞相关治疗靶点等在SLE中的作用进展进行总结和讨论,为深入了解SLE的发病机制和探讨治疗方法提供借鉴。

关键词：系统性红斑狼疮高通量测序 B细胞亚群 B细胞受体自身免疫

plin1基因敲除对小鼠产生胰岛素抵抗的影响程度比较研究

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营养学报 2024年第2期46卷 171-176页

作者：张富强杨佳敏高学坤陈朝阳乔舒燕炯山西医科大学公共卫生学院太原030001 山西医科大学动物实验中心太原030001

目的比较高脂饮食、高脂饮食联合腹腔注射链脲佐菌素(STZ)、plin1敲除(plin1^(-/-))和plin1敲除(plin1^(-/-))加高脂饮食对小鼠胰岛素抵抗(IR)的影响程度。方法C57BL/6J小鼠分为5组:普通饮食组(W-N)、高脂饮食组(W-H)、高脂饮食+STZ组(W... 详细信息

目的比较高脂饮食、高脂饮食联合腹腔注射链脲佐菌素(STZ)、plin1敲除(plin1^(-/-))和plin1敲除(plin1^(-/-))加高脂饮食对小鼠胰岛素抵抗(IR)的影响程度。方法C57BL/6J小鼠分为5组:普通饮食组(W-N)、高脂饮食组(W-H)、高脂饮食+STZ组(W-S)、plin1^(-/-)普通饮食组(K-N)和plin1^(-/-)高脂饮食组(K-H),每组8只,喂养12 w,测量小鼠体重,空腹血糖(FBG),葡萄糖耐量(GTT)和胰岛素耐量(ITT),并计算GTT和ITT曲线下面积,12 w后收集血清,处死小鼠,取出脂肪组织,检测空腹血清胰岛素水平(FINS)、血清甘油三酯(TG)、游离脂肪酸(FFA),计算稳态模型评估胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、Western blotting检测脂肪组织磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)、蛋白激酶B(AKT)、葡萄糖转运体4(GLUT4)蛋白表达水平。结果与W-N组比较,其余四组小鼠FBG、GTT和ITT曲线下面积、HOMA-IR、血清TG均明显升高、PI3K、p-AKT和GLUT4蛋白表达均显著下调(P<0.05),W-H组体重显著升高(P<0.05),K-N组体重显著下降(P<0.05),K-N组、K-H组、W-S组FINS显著升高(P<0.05),W-H组FFA显著升高(P<0.05),K-N组FFA显著降低(P<0.05)。与K-N组相比,W-H组、K-H组和W-S组小鼠体重显著升高(P<0.05);W-H组小鼠血清FFA显著升高(P<0.05);W-S组小鼠FBG显著升高,PI3K蛋白表达显著下调(P<0.05);K-H组和W-S组GTT和ITT曲线下面积、HOMA-IR、血清TG、FFA显著升高、p-AKT和GLUT4蛋白表达显著下调(P<0.05)。W-H组小鼠FBG、GTT和ITT曲线下面积、FINS、HOMA-IR、TG、PI3K、p-AKT、GLUT4蛋白表达无明显变化。结论plin1^(-/-)诱导小鼠IR程度与高脂饮食喂养的小鼠相当,但低于高脂饮食+STZ诱导的小鼠,高脂饮食喂养的plin1^(-/-)小鼠IR程度大于plin1^(-/-)小鼠。

关键词：围脂滴蛋白基因敲除胰岛素抵抗

股骨颈动力交叉钉系统动力棒偏移对早期临床结果的影响研究

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中华创伤骨科杂志 2024年第6期26卷 473-480页

作者：金宇杰周晓强李志强刘宇博徐人杰沈军张向鑫虞宵南京医科大学姑苏学院南京医科大学附属苏州医院苏州市立医院骨科苏州215000

目的:探讨股骨颈动力交叉钉系统(FNS)治疗中青年移位型股骨颈骨折过程中其动力棒偏移对术后早期临床结果的影响。方法:回顾性分析2019年12月至2023年1月期间苏州市立医院骨科采用FNS固定治疗的114例中青年移位型股骨颈骨折患者资料。根... 详细信息

目的:探讨股骨颈动力交叉钉系统(FNS)治疗中青年移位型股骨颈骨折过程中其动力棒偏移对术后早期临床结果的影响。方法:回顾性分析2019年12月至2023年1月期间苏州市立医院骨科采用FNS固定治疗的114例中青年移位型股骨颈骨折患者资料。根据术后FNS动力棒末端相对于股骨头颈中心轴线的偏移程度(W)不同分为两组:中心组(W≤20%)63例,男27例,女36例;年龄(46.4±8.0)岁。偏移组(W>20%)51例,男20例,女31例;年龄(45.1±9.8)岁。比较两组患者的术后患肢负重时间、骨折愈合时间、尖顶距、末次随访时股骨颈短缩程度、髋关节Harris评分、欧洲五维健康量表(EQ-5D-5L)效用值、并发症发生率及翻修手术率等。结果:两组患者术前一般资料及骨折复位质量比较差异均无统计学意义( P>0.05),具有可比性。两组患者术后患肢部分负重时间比较差异无统计学意义( P>0.05)。中心组患者术后患肢完全负重时间[15.0(14.0,16.0)周]、骨折愈合时间[14.0(12.0,15.0)周]显著短于偏移组患者[16.0(15.0,19.0)、15.0(13.0,17.0)周],尖顶距[(21.4±3.4)mm]显著小于偏移组患者[(23.5±2.7)mm],末次随访时髋关节Harris评分[(90.6±6.1)分]、EQ-5D-5L效用值[0.9(0.8,0.9)]显著高于偏移组患者[(87.7±6.2)分、0.9(0.8,0.9)],中重度股骨颈短缩发生率[25.4%(16/63)]、股骨头缺血性坏死发生率[0(0/63)]、翻修手术率[0(0/63)]显著低于偏移组患者[66.7%(34/51)、7.8%(4/51)、9.8%(5/51)],差异均有统计学意义( P< 0.05)。结论:FNS固定治疗中青年移位型股骨颈骨折时,将FNS动力棒尽可能靠近股骨头颈中心轴线置入可获得满意的临床疗效,并能降低翻修手术率。

关键词：股骨颈骨折骨折固定术,内骨钉股骨颈动力交叉钉系统