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m6A甲基化修饰是神经病理性疼痛的潜在生物靶点

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生理学报 2024年第5期 809-817页

作者：张玉婷张励才徐州医科大学江苏省麻醉学重点实验室

N6-甲基腺嘌呤（N6-methyladenosine,m6A）是真核生物中最常见的RNA修饰类型，通过甲基转移酶、去甲基化酶和m6A结合蛋白的动态可逆性调控影响细胞内的RNA代谢，控制相关病理生理过程的基因表达。近年来，m6A甲基化修饰参与神经病理性... 详细信息

N6-甲基腺嘌呤（N6-methyladenosine,m6A）是真核生物中最常见的RNA修饰类型，通过甲基转移酶、去甲基化酶和m6A结合蛋白的动态可逆性调控影响细胞内的RNA代谢，控制相关病理生理过程的基因表达。近年来，m6A甲基化修饰参与神经病理性疼痛的研究成为热点，一些新的认识不断涌现，m6A甲基化修饰成为治疗神经病理性疼痛的潜在生物靶点。本文就m6A甲基化修饰在神经病理性疼痛中的作用和调控机制进行综述，以期为神经病理性疼痛的药物开发和治疗提供新的启示。

关键词： N6-甲基腺嘌呤甲基转移酶去甲基化酶 m6A结合蛋白神经病理性疼痛

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乳酸调控巨噬细胞功能促进登革病毒2型感染

中华微生物学和免疫学杂志 2024年第5期44卷 396-405页

作者：胡欢覃燕春黄贞植周璐吴家红商正玲贵州医科大学基础医学院免疫学教研室安顺550025 贵州医科大学基础医学院寄生虫教研室安顺550025

目的探究外源性乳酸对Raw264.7细胞、小鼠骨髓来源巨噬细胞(mouse bone marrow-derived macrophages,BMDMs)及THP-1细胞中登革病毒2型(dengue virus type 2,DENV-2)复制的影响及乳酸与细胞活化之间的关系。方法培养和诱导BALB/c小鼠骨... 详细信息

目的探究外源性乳酸对Raw264.7细胞、小鼠骨髓来源巨噬细胞(mouse bone marrow-derived macrophages,BMDMs)及THP-1细胞中登革病毒2型(dengue virus type 2,DENV-2)复制的影响及乳酸与细胞活化之间的关系。方法培养和诱导BALB/c小鼠骨髓中的BMDMs,流式细胞术检测F4/80+CD11b+细胞纯度。qRT-PCR检测不同时间点DENV-2感染BMDMs中葡萄糖转运体1(glucose transporter type 1,GLUT1)、己糖激酶2(hexokinase 2,HK2)、乳酸转运体4(monocarboxylate transporters 4,MCT4)的mRNA表达水平,比色法检测细胞上清液中乳酸含量。使用CCK-8法评估不同浓度乳酸对Raw264.7细胞、BMDMs及THP-1细胞活力的影响,qRT-PCR检测不同浓度乳酸对不同MOI DENV-2感染细胞中病毒E基因、CD163、TGF-β、CD86、视黄酸诱导基因Ⅰ(retinoic acid-inducible geneⅠ,RIG-Ⅰ)、IFN-β、干扰素刺激基因15(interferon-stimulated gene 15,ISG15)及ISG56的mRNA表达水平,流式细胞术检测CD86和CD206蛋白的表达。结果BMDMs纯度为(87.53±1.66)%。DENV-2(MOI=3)感染BMDMs后,GLUT1 mRNA转录水平在12 h一过性增高,在24 h降低(P0.05)。结论本研究发现外源性乳酸能促进DENV-2在人源及鼠源巨噬细胞中的感染,该现象与细胞M2型极化有关。

关键词：乳酸巨噬细胞登革病毒病毒复制 M2型极化干扰素信号通路

布比卡因脂质体行改良臂丛上干阻滞与传统肌间沟臂丛神经阻滞在关节镜下肩袖修补术后镇痛效果的比较

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中华医学杂志 2024年第31期104卷 2928-2935页

作者：吴红罗靖予杨佩意袁开明李军温州医科大学附属第二医院育英儿童医院麻醉与围术期医学科小儿麻醉学教育部重点实验室浙江省麻醉学重点实验室温州325024

目的比较改良臂丛上干阻滞与传统肌间沟臂丛神经阻滞在关节镜下肩袖修补术后的镇痛效果。方法前瞻性纳入2023年10至11月温州医科大学附属第二医院行关节镜下肩袖修补术患者40例,美国麻醉医师协会(ASA)分级Ⅰ~Ⅱ级。根据不同神经阻滞方法... 详细信息

目的比较改良臂丛上干阻滞与传统肌间沟臂丛神经阻滞在关节镜下肩袖修补术后的镇痛效果。方法前瞻性纳入2023年10至11月温州医科大学附属第二医院行关节镜下肩袖修补术患者40例,美国麻醉医师协会(ASA)分级Ⅰ~Ⅱ级。根据不同神经阻滞方法,采用随机数字表法分为改良臂丛上干阻滞组(S组)及肌间沟臂丛神经阻滞组(I组),每组20例。局部麻醉用药均为1.33%布比卡因脂质体注射液与0.5%盐酸左布比卡因等容积混合液;S组采用混合液5 ml行改良臂丛上干阻滞,I组采用混合液15 ml行肌间沟臂丛神经阻滞;两组均行颈浅丛阻滞(混合液5 ml),随后实施标准化全身麻醉及标准化术后镇痛。主要观察指标为术后48 h静息数字评定量表(NRS)评分及神经阻滞后30 min单侧膈肌麻痹(HDP)发生率。次要观察指标包括麻醉后恢复室(PACU)期间及术后12、24、36 h静息NRS评分,术后阿片类药物消耗量及镇痛满意度,阻滞后30 min的脉搏血氧饱和度(SpO 2)、感觉及运动阻滞时长、围手术期不良反应发生率。S组患者术后各观察时间点静息NRS评分的非劣效界值设定为“1分”。结果S组1例患者因目标神经被锁骨下静脉阻挡,无法实施阻滞而排除,最终纳入19例,男11例,女8例,年龄(52.2±9.0)岁;I组男7例,女13例,年龄(55.0±5.1)岁。S组和I组术后48 h静息NRS评分分别为0(0,0)和0(0,0.8)分,差异无统计学意义(P>0.05);中位数差值为0(95%CI:0~0)分,95%CI上限为0分,低于预先设定的非劣效界值“1分”(非劣效性P学意义(P学意义(均P>0.05)。两组患者拔管后均未出现低氧血症、气道痉挛等呼吸系统不良事件。I组有1例患者入PACU时出现呼吸急促症状,有3例患者因患肢长时间(>2 d)麻木无力而感不适。两组患者均未出现神经阻滞操作、阿片类药物相关不良反应及神经系统并发症。结论布比卡因脂质体行改良臂丛上干阻滞能够为关节镜下肩袖修补术患者提供不劣于传统肌间沟臂丛神经阻滞的长时间术后镇痛,同时HDP发生率更低。

关键词：镇痛布比卡因脂质体关节镜下肩袖修补术改良臂丛上干阻滞肌间沟臂丛神经阻滞单侧膈肌麻痹

氧化石墨烯纳米颗粒在小鼠骨骼肌和人血液中诱导的免疫反应与毒性效应

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南方医科大学学报 2024年第4期44卷 617-626页

作者：孙益明黄爱兰赵志宋晨赖桂华蚌埠医科大学人体解剖学教研室安徽蚌埠233030 蚌埠医科大学食品质量与安全教研室安徽蚌埠233030 蚌埠医科大学第一附属医院骨科安徽蚌埠233030 南方医科大学人体解剖学教研室广东省组织工程构建与检测重点实验室广东广州510515

目的探讨氧化石墨烯(GO)在小鼠骨骼肌和血液中的免疫反应性,评估其毒性效应。方法超声破碎法制备GO纳米颗粒,动态光散射仪测定悬浮于去离子水和PBS的GO纳米颗粒粒径与表面电荷。将不同浓度(0.5、1和2mg/mL)的GO悬浮液或PBS分别注入C57B... 详细信息

目的探讨氧化石墨烯(GO)在小鼠骨骼肌和血液中的免疫反应性,评估其毒性效应。方法超声破碎法制备GO纳米颗粒,动态光散射仪测定悬浮于去离子水和PBS的GO纳米颗粒粒径与表面电荷。将不同浓度(0.5、1和2mg/mL)的GO悬浮液或PBS分别注入C57BL/6小鼠腓肠肌,HE和免疫荧光染色评价小鼠体内炎症和免疫反应性。采用扫描电镜、分光光度计和血栓弹性描记图(TEG)观察GO对体外人血红细胞形态、溶血和凝血的影响。结果动态光散射研究显示,与水悬浮液相比,GO颗粒的PBS悬浮液具有更优的胶体分散性、稳定性、表面电荷效应及体内微环境模拟性。HE和免疫荧光染色显示,小鼠腓肠肌中GO植入区周围的炎症浸润、肌纤维变性以及巨噬细胞、单核细胞、树突状细胞和CD4^(+)T细胞的浸润程度(包括F4/80^(+)、CD11b^(+)、CD11c+的平均阳性荧光面积百分比和CD3^(+)CD4^(+)细胞数等)均明显高于对照组(P<0.05),且呈明显的剂量和时间依赖性。扫描电镜观察显示,相比低浓度(0.002和0.02mg/mL)的GO和PBS,较高浓度(0.2、2和20mg/mL)的GO可使体外红细胞形态发生明显改变并引起红细胞溶血(P<0.05)。TEG显示,相较低浓度组和PBS组,高浓度GO组的多项血液凝固参数(K,α,R和MA)出现明显异常。结论GO可持久诱导炎症和免疫反应性,因而具有一定的骨骼肌肌肉毒性和体外血液毒性。

关键词：氧化石墨烯免疫反应肌肉毒性血液毒性

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过表达海马LINGO-1对小鼠学习和记忆能力及海马各亚区Spinophilin+树突棘的影响

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陆军军医大学学报 2024年第2期46卷 118-127页

作者：王舜蒋林何琦杨浩王依滢周宇宁梁芯张毅晁凤蕾张蕾唐勇重庆医科大学基础医学院组织学与胚胎学教研室重庆400016

目的脑立体定位注射腺相关病毒特异性过表达海马LINGO-1,探讨其对小鼠空间学习和记忆能力以及海马各亚区体积和Spinophilin+树突棘的影响。方法将7月龄雄性C57小鼠按照简单随机法分为对照组和LINGO-1过表达组,对照组小鼠海马立体定位... 详细信息

目的脑立体定位注射腺相关病毒特异性过表达海马LINGO-1,探讨其对小鼠空间学习和记忆能力以及海马各亚区体积和Spinophilin+树突棘的影响。方法将7月龄雄性C57小鼠按照简单随机法分为对照组和LINGO-1过表达组,对照组小鼠海马立体定位注射携带绿色荧光的空载腺相关病毒(adeno-associated virus, AAV),LINGO-1过表达组小鼠海马立体定位注射同时携带绿色荧光和LINGO-1过表达载体的AAV。运用Morris水迷宫评估小鼠的空间学习和记忆能力,荧光定量PCR及免疫荧光染色方法分别检测小鼠海马内LINGO-1基因表达水平和各亚区荧光强度,体视学三维定量小鼠海马各亚区体积及Spinophilin+树突棘总数。结果对照组和LINGO-1过表达组病毒注射前后体质量差异无统计学意义;LINGO-1过表达诱导小鼠海马LINGO-1的mRNA水平升高、荧光强度增强(P学习与记忆能力。

关键词： LINGO-1 树突棘突触海马学习记忆

自转录活性调节区测序技术在增强子发现研究中的应用

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遗传 2024年第8期46卷 589-602页

作者：王纪龙李青战廷正广西医科大学寄生虫学教研室南宁530021 广西医科大学细胞生物学教研室南宁530021 广西高校区域性疾病基础研究重点实验室(广西医科大学) 南宁530021

自转录活性调节区测序(self-transcribing active regulatory region sequencing,STARR-seq)是一种可发现并同时验证全基因组增强子活性的高通量测序方法。其原理为:将待验证序列插入质粒载体并电转入细胞中,该序列在作为增强子提高靶... 详细信息

自转录活性调节区测序(self-transcribing active regulatory region sequencing,STARR-seq)是一种可发现并同时验证全基因组增强子活性的高通量测序方法。其原理为:将待验证序列插入质粒载体并电转入细胞中,该序列在作为增强子提高靶基因转录的同时,其本身也作为靶基因被增强转录。通过对转录组进行测序,并对比未插入片段的测序结果,可获得增强子在基因组位置及活性的信息。在传统增强子研究方法中,通过对染色质开放区域和转录活性区域进行测序以预测增强子,但只能逐一验证预测结果,无法高通量验证增强子活性。STARR-seq技术解决了上述缺陷,可在对全基因组增强子高通量挖掘的同时,对其活性进行可靠的验证。自STARR-seq技术发明以来,已被广泛运用于不同物种与细胞中的增强子发现及活性验证研究。本文对传统增强子预测方法以及STARR-seq技术的基本原理、发展历史和具体运用进行了介绍,并对其发展前景进行展望,以期为后续增强子相关领域研究人员提供参考。

关键词：自转录活性区域测序增强子转录调控单核苷酸多态性

反复低血糖增加1型糖尿病小鼠肠GLP-1的表达及分泌

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中国病理生理杂志 2024年第5期40卷 890-898页

作者：靳方馨赵晶晶王岩李敏讷李如江郭军堂山东第二医科大学组织学与胚胎学教研室山东省高校重点实验室山东潍坊261053 山东第二医科大学病理生理学教研室山东潍坊261053

目的:构建1型糖尿病(type 1 diabetes mellitus,T1DM)小鼠反复低血糖(recurrent hypoglycaemia,RH)模型,并探讨低血糖时其胰高血糖素样肽1(glucagon-like peptide-1,GLP-1)在肠道的表达及意义。方法:以链脲佐菌素诱导C57BL/6J小鼠,形成T1DM,在糖尿病第15天腹腔注射短效胰岛素,每3 d注射1次,连续5次降至低血糖,以构建T1DM-RH模型。建模期间记录小鼠体重、血糖水平及活动状态;ELISA检测模型鼠第5次降糖持续60min后的血浆肾上腺素、胰高血糖素(glucagon,GCG)、生长抑素(somatostatin,SST)和GLP-1水平;免疫荧光检测模型鼠肠GLP-1和胰岛α、δ细胞激素的分泌变化;Western blot检测回肠和结肠的GLP-1及其受体GLP-1R、激素原转化酶1/3(prohormone convertases 1/3,PC1/3)蛋白的表达。结果:血糖、体重符合T1DM鼠标准。RH组连续降糖5次,每次血糖均降至(3.3±0.5) mmol/L,且持续时间>60 min,加之其血浆肾上腺素、血浆GCG水平及RH小鼠降糖期间行为改变,符合糖尿病小鼠RH和低血糖反调节障碍的建模标准。ELISA显示,与T1DM组相比,RH组血浆肾上腺素和GCG水平均下降(P<0.01),血浆SST和活性GLP-1水平显著升高(P<0.01);免疫荧光显示,与T1DM组相比,RH组肠GLP-1表达升高,胰岛SST分泌增多(P<0.01),GCG分泌减少(P<0.01);Western blot显示,与T1DM组相比,RH组肠活性GLP-1和GLP-1R明显升高(P<0.01)。结论:TIDM-RH小鼠肠GLP-1表达升高,与低血糖反调节障碍的形成或加重密切相关。

关键词： 1型糖尿病低血糖反调节障碍胰高血糖素样肽1 肠道胰腺

布比卡因脂质体用于髋关节囊周围神经阻滞对老年髋关节置换术后镇痛的有效性及安全性分析

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中华医学杂志 2024年第3期104卷 180-185页

作者：南洋王阳阳蒋学斌白玥励建琳罗婧予张旭彤李军温州医科大学附属第二医院育英儿童医院麻醉与围术期医学科小儿麻醉学教育部重点实验室浙江省麻醉学重点实验室，温州325024

目的探讨布比卡因脂质体行髋关节囊周围神经阻滞用于老年髋关节置换术后镇痛的有效性和安全性。方法选取2023年5至7月在温州医科大学附属第二医院行全髋关节置换术老年患者42例,美国麻醉医师协会(ASA)分级Ⅰ~Ⅲ级,男19例,女23例,年龄(6... 详细信息

目的探讨布比卡因脂质体行髋关节囊周围神经阻滞用于老年髋关节置换术后镇痛的有效性和安全性。方法选取2023年5至7月在温州医科大学附属第二医院行全髋关节置换术老年患者42例,美国麻醉医师协会(ASA)分级Ⅰ~Ⅲ级,男19例,女23例,年龄(68.8±6.3)岁。按随机数字表法分为布比卡因脂质体组(观察组)和盐酸左布比卡因组(对照组),每组21例,均采用腰麻联合髋关节囊周围神经阻滞的麻醉方法。行髋关节囊周围神经阻滞时,观察组注入布比卡因脂质体10 ml(133 mg)+生理盐水5 ml,对照组注入盐酸左布比卡因10 ml(75 mg)+生理盐水5 ml。主要观察指标为患者术前及术后6、12、24、36、48、60、72 h静止与运动时视觉模拟量表(VAS)评分,镇痛泵中舒芬太尼消耗量、镇痛泵按压次数及病房额外帕瑞昔布钠使用率。次要观察指标为下肢肌力变化、患者住院时间及不良反应发生情况。结果两组患者术前及术后6 h时静息与运动VAS评分差异均无统计学意义(均P>0.05);而在术后12、24、36、48、60、72 h时,观察组患者静息与运动VAS评分均低于对照组(均P学意义(P=0.500)。结论与盐酸左布比卡因相比,布比卡因脂质体用于髋关节囊周围神经阻滞可为老年髋关节置换术患者提供72 h的镇痛效应,减少术后阿片类药物及其他镇痛药物用量,降低术后恶心发生率,对下肢运动影响轻微,且不延长患者住院时间。

关键词：髋关节麻醉镇痛布比卡因脂质体左布比卡因

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tRNA修饰在胶质瘤中的研究进展

中国肿瘤临床 2024年第11期51卷 567-571页

作者：翟贝魏灯王萍中国医科大学神经生物学教研室沈阳市110122

转运RNA(transfer RNA,tRNA)是哺乳动物细胞中修饰程度最高的RNA,其修饰不仅高度动态,并且易受环境条件的影响。肿瘤发生常伴有tRNA修饰异常。研究发现tRNA修饰酶在多种肿瘤组织中异常表达,与发病机制密切相关。胶质瘤是最常见的原发性... 详细信息

转运RNA(transfer RNA,tRNA)是哺乳动物细胞中修饰程度最高的RNA,其修饰不仅高度动态,并且易受环境条件的影响。肿瘤发生常伴有tRNA修饰异常。研究发现tRNA修饰酶在多种肿瘤组织中异常表达,与发病机制密切相关。胶质瘤是最常见的原发性中枢神经系统肿瘤,恶性程度最高,预后极差。本文主要针对胶质瘤相关的几种t RNA修饰予以综述,描述其在胶质瘤发生发展中的功能和机制,为探索tRNA异常修饰生成的衍生片段作为胶质瘤诊断的生物标志物,以及设计靶向表观遗传调控因子的小分子抑制剂作为胶质瘤的治疗靶点提供新思路。

关键词：胶质瘤 tRNA修饰甲基化 tRNA衍生片段