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双色荧光 PCR 检测醉马草内生真菌(Neotyphodium gansuense)(英文)

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农业生物技术学报 2011年第5期19卷 973-980页

作者：汪琳廖芳黄国明刘跃庭罗加凤周琦北京出入境检验检疫局天津出入境检验检疫局南开大学生命科学学院

醉马草内生真菌(Neotyphodium gansuense)曾对我国的畜牧业造成过巨大损失,目前其鉴定仍是基于表型和分离培养的检测技术。本研究以与 N. gansuense 形态非常相似的同属种 N. coenophialum、N. lolii、N. huerfanum、N. chisosum 和 N. ... 详细信息

醉马草内生真菌(Neotyphodium gansuense)曾对我国的畜牧业造成过巨大损失,目前其鉴定仍是基于表型和分离培养的检测技术。本研究以与 N. gansuense 形态非常相似的同属种 N. coenophialum、N. lolii、N. huerfanum、N. chisosum 和 N. aotearoae 等共 6 种 7 个标准菌株,以及采自新疆的醉马草种子为环境材料,扩增和测定了它们的β-Tub 基因约 430 bp 的序列。根据序列分析结果,设计了 Neotyphodium 属的通用Taqman 探针和引物以及 N. gansuense 的特异探针和引物,基于双色荧光 PCR 技术成功建立了快速、敏感的分子检测方法。所建立的检测技术可实现对 N. gansuense 菌丝培养物、单粒醉马草种子中 N. gansuense 的检测,并且检测时间只需 7 h。该检测技术能很好弥补传统检测鉴定方法的不足,可直接应用于国内外畜牧业种子和草坪草种子中 N. gansuense 带菌率的检测。

关键词：分子检测醉马草内生真菌 β-Tub 基因双色荧光 PCR

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昆仑山北坡西段和中段暴雨的特征及差异

干旱区研究 2025年

作者：杨霞杨柳新疆维吾尔自治区气象台巴州气象局

利用1961—2023年昆仑山北坡国家气象站的降水资料和再分析资料，揭示了昆仑山北坡西段和中段暴雨的特征和差异。结果表明：（1）1961—2023年，昆仑山北坡西段和中段的暴雨日数及暴雨量均呈增加趋势，且西段增加的更显著；西段的累积... 详细信息

利用1961—2023年昆仑山北坡国家气象站的降水资料和再分析资料，揭示了昆仑山北坡西段和中段暴雨的特征和差异。结果表明：（1）1961—2023年，昆仑山北坡西段和中段的暴雨日数及暴雨量均呈增加趋势，且西段增加的更显著；西段的累积暴雨日数和累积暴雨量均多于中段；但二者的极值雨量差异不大；西段在暖湿阶段的暴雨量多于暖干阶段，而中段则相反，二者对气候转型的响应程度不同。（2）暴雨日数和暴雨量的空间分布在昆仑山北坡西段均呈“东多西少”的特征，在中段则均呈“中间多两边少”的特征；平均暴雨量与累积暴雨量的空间分布在西段一致，在中段相反。（3）2010—2023年，昆仑山北坡超过90%的国家站都出现过短时强降水暴雨，该比例高于南疆平均值；西段整体（中段）以非短时（短时）强降水暴雨为主。昆仑山北坡暴雨的持续性较差，且夜雨居多，西段和中段暴雨的平均降水时数接近。（4）造成昆仑山北坡西段和中段暴雨的主要天气系统的典型配置相同，导致昆仑山北坡暴雨的精细落区预报难度加大。研究结果可加深对干旱区暴雨独特性的认识，并为提高昆仑山北坡暴雨防御能力提供参考。

关键词：暴雨气候特征日变化天气系统昆仑山北坡

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葡萄A病毒RT-LAMP检测方法的建立

中国农业科学 2016年第1期49卷 103-109页

作者：张永江辛言言李桂芬乾义柯中国检验检疫科学研究院植物检疫研究所伊犁出入境检验检疫局

【目的】葡萄A病毒(Grapevine virus A,GVA)是葡萄皱木复合病的重要病原之一,以带毒种苗的嫁接为田间主要传播途径。使用无毒葡萄苗木进行生产是控制该病毒病害的根本措施,而简便灵敏的检测技术是筛选无毒种苗的有效保证。为此,开展针对... 详细信息

【目的】葡萄A病毒(Grapevine virus A,GVA)是葡萄皱木复合病的重要病原之一,以带毒种苗的嫁接为田间主要传播途径。使用无毒葡萄苗木进行生产是控制该病毒病害的根本措施,而简便灵敏的检测技术是筛选无毒种苗的有效保证。为此,开展针对GVA的反转录环介导等温扩增技术(reverse transcription loop-mediated isothermal amplification,RT-LAMP)研究,旨在建立其RT-LAMP特异性检测方法。【方法】通过比对分析GVA的CP(coat protein)基因序列并经引物设计软件Primer Explore 4.0设计,获得6条检测引物GVA-FIP(5′-CTTACAGCCACGCTCAGAGTCC-CGTGGGAAGTTGGTTGTGT-3′)、GVA-BIP(5′-GCCCGTCAAAGGGGCTACAC-TCATA GGCGTTCTGTGCGA-3′)、GVA-F3(5′-AGAAGATGGGGATAGACCCG-3′)、GVA-B3(5′-CCGCCATTAACACGAGGAA-3′)、GVA-LF(5′-AT CCTTCCCACCAGCTCGG-3′)和GVA-LB(5′-TCAGGCAGATGTGTGAACCT-3′)。将RT-LAMP的反应温度分别设为59、61、63和65℃,根据1 h扩增曲线出现的先后次序确定最佳反应温度。以同样侵染葡萄的沙地葡萄茎痘相关病毒(Grapevine rupestris stem pitting-associated virus,GRSPa V)、葡萄卷叶病毒(Grapevine leafrollassociated virus,GLRa V)、葡萄斑点病毒(Grapevine fleck virus,GFKV)的阳性材料及阴性对照(健康葡萄叶片,用NC表示)的总RNA为模板,对RT-LAMP方法的特异性进行测定。将GVA的总RNA进行10倍梯度稀释,得到10~1、10~2、10~3、10~4、10~5、10~6倍的不同稀释液后用作模板分别进行RT-LAMP和普通RT-PCR检测,比较两者的灵敏度。RT-LAMP产物可进行实时扩增曲线检测,阳性样品在浊度仪上出现扩增曲线,阴性样品无扩增曲线;还可进行染料颜色反应检测,在反应产物中加入SYBR Green I染料,阳性样品产生肉眼可见的绿色,阴性反应为橙色。【结果】建立了GVA的RT-LAMP快速特异性检测方法,最佳反应温度为65℃。该方法约27 min即可检测到扩增曲线,而普通RT-PCR获得检测结果约需1.5 h。特异性试验表明只有GVA的总RNA能够出现扩增曲线,反应液颜色变为绿色,显示为阳性,而其他3种参试病毒和健康对照没有出现扩增曲线,反应液的颜色为橙色,显示为阴性;RT-LAMP检测结果可通过肉眼观察直接判断,比普通RT-PCR结果判断容易。灵敏度试验显示RT-LAMP可检测到10~1、10~2、10~3、10~4和10~5倍的GVA总RNA稀释液模板,而普通RT-PCR只能检测到10~1、10~2、10~3和10~4倍的GVA总RNA稀释液模板,表明前者比后者的灵敏度高10倍。【结论】研究建立的RT-LAMP方法能够快速特异地检测GVA,可为筛选无GVA葡萄苗木提供技术支持;适用于检疫、科研及生产机构在进境检疫、苗木繁育和大田监测工作中对GVA的检测鉴定。

关键词：葡萄A病毒反转录环介导等温扩增技术检测

牛病毒性腹泻病毒内标双重TaqMan荧光RT-PCR方法的建立及初步应用

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中国预防兽医学报 2014年第8期36卷 646-650页

作者：季新成史茜郭春娟王科珂冉多良新疆出入境检验检疫局新疆乌鲁木齐830063 新疆农业大学新疆乌鲁木齐830052

为建立牛病毒性腹泻病毒（BVDV）内标双重TaqMan荧光RT-PCR方法,本研究根据BVDV 5＇-UTR区序列设计引物和荧光标记探针,通过重叠延伸PCR（SOE-PCR）扩增获得内标模板,经体外转录得到可以作为内标物的cRNA。经反应条件的优化,建立了BVDV... 详细信息

为建立牛病毒性腹泻病毒（BVDV）内标双重TaqMan荧光RT-PCR方法,本研究根据BVDV 5＇-UTR区序列设计引物和荧光标记探针,通过重叠延伸PCR（SOE-PCR）扩增获得内标模板,经体外转录得到可以作为内标物的cRNA。经反应条件的优化,建立了BVDV内标双重TaqMan荧光RT-PCR检测体系。结果表明：当cRNA浓度为103拷贝/μL时,二者均有较好的扩增曲线;该方法对I型BVDV的检测灵敏度为0.25 TCID50,对II型BVDV的检测灵敏度为2.5 TCID50;利用该方法对猪瘟病毒等其他相关核酸的检测结果均为阴性;重复性检测Ct值变异系数为0.54~4.73。对506份临床样品检测,结果有23份样品为阳性,阳性样品检出数量和编号与不含内标的单一荧光RT-PCR方法完全一致,表明该方法可以用来对BVDV进行准确、快速检测,并且可以对检测结果进行质量监控。

关键词：牛病毒性腹泻病毒内标共扩增 TaqMan荧光RT-PCR

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测定纺织品甲醛含量用乙酰丙酮比色法的改进

印染 2009年第6期35卷 46-47页

作者：曹青李锋格马增梅王小平朱新新疆出入境检验检疫局技术中心新疆乌鲁木齐830063

对测定纺织品甲醛含量的乙酰丙酮比色法进行了改进。直接采用甲醛标准溶液,简化了甲醛标准曲线的制作方法。该法在测定纺织品较高浓度甲醛含量时,符合有关标准,样品加标平均回收率大于89.0%,相对标准偏差(RSD)小于6.0%(20 mg/kg添加水... 详细信息

对测定纺织品甲醛含量的乙酰丙酮比色法进行了改进。直接采用甲醛标准溶液,简化了甲醛标准曲线的制作方法。该法在测定纺织品较高浓度甲醛含量时,符合有关标准,样品加标平均回收率大于89.0%,相对标准偏差(RSD)小于6.0%(20 mg/kg添加水平除外)。该方法简便、快速、准确,适合纺织品较高浓度甲醛含量的测定。

关键词：测试甲醛含量乙酰丙酮比色法纺织品

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进口杂铝和再生铝快速检测方法的研究

检验检疫科学 2001年第5期11卷 50-52页

作者：王成郑树桐热孜婉迪里拜尔方健新疆检验检疫局

1 前言杂铝和再生铝是近年来在独联体限制各牌号的铝锭出口后,在新疆陆路口岸中出现的新的进口商品,该商品自1992年开始进口,1995年以来进口量不断增加.

关键词：进口杂铝再生铝快速检测方法检验检疫 EDTA综合—氟化物置换容量法

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灰绿藜愈伤组织的诱导·继代及植株再生研究

安徽农业科学 2009年第29期37卷 14184-14187页

作者：蒋刚强黄玲窦辉新疆出入境检验检疫局技术中心新疆乌鲁木齐830063

[目的]通过诱导愈伤组织分化,建立灰绿藜植株再生方法。[方法]以灰绿藜茎和叶为材料,研究不同种类、不同浓度的植物生长调节剂对灰绿藜愈伤组织诱导和继代、不定芽分化及再生植株生根与移栽的影响。[结果]NAA、2,4-D、IAA在单独使用时,... 详细信息

[目的]通过诱导愈伤组织分化,建立灰绿藜植株再生方法。[方法]以灰绿藜茎和叶为材料,研究不同种类、不同浓度的植物生长调节剂对灰绿藜愈伤组织诱导和继代、不定芽分化及再生植株生根与移栽的影响。[结果]NAA、2,4-D、IAA在单独使用时,一定浓度范围内均有愈伤组织产生,利用不同的外植体,最佳的诱导组合培养基分别是茎为MS+NAA 4.0mg/L+6-BA 0.5mg/L,叶为MS+2,4-D 4.0mg/L+6-BA 0.2mg/L,光照有利于愈伤组织的诱导。在优化灰绿藜愈伤组织继代培养条件时,发现5.0mg/L的抗坏血酸(VC)对于灰绿藜愈伤组织的褐变有良好的抑制作用,继代培养基中较好的组合为MS+2,4-D 0.5mg/L+6-BA 0.5mg/L。愈伤组织不定芽分化培养基为MS+6-BA 2.0mg/L+NAA 0.05mg/L,根分化的培养基为1/2 MS+NAA 0.2mg/L。[结论]该研究为灰绿藜组织培养中适宜的培养基选择提供了科学依据。

关键词：灰绿藜愈伤组织诱导继代培养植株再生

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开好“头炮” 续写辉煌

中国检验检疫 2015年第2期 8-9页

作者：库来西新疆检验检疫局

建设“丝绸之路经济带”战略的实施,使身处“一带”建设核心区位的新疆更加突出地站在了我国向西开放的大前沿.新的一年，新疆检验检疫局要着眼国际国内两个大局，把“服务丝绸之路经济带核心区”建设作为促发展工作的“当头炮”，把握... 详细信息

建设“丝绸之路经济带”战略的实施,使身处“一带”建设核心区位的新疆更加突出地站在了我国向西开放的大前沿.新的一年，新疆检验检疫局要着眼国际国内两个大局，把“服务丝绸之路经济带核心区”建设作为促发展工作的“当头炮”，把握对外开放发展面临的新机遇，主动研究新对策，挖掘新潜力，采取更多更实的措施，助力丝绸古道再现辉煌。

关键词：丝绸之路检验检疫局对外开放经济带新疆

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阿拉山口口岸发现检疫性有害生物单柱菟丝子

植物检疫 2014年第3期28卷 74-76页

作者：莫善明郭开发曾怡然苏伟新疆阿拉山口出入境检验检疫局新疆阿拉山口833418

2013年阿拉山口出入境检验检疫局在口岸外来杂草监测中,首次发现检疫性杂草单柱菟丝子(Cuscuta monogyna Vahl),本文描述了单柱菟丝子的形态特征、寄主范围,以及采取的防治措施,以期为相关口岸检验检疫提供参考。

关键词：阿拉山口单柱菟丝子监测防治