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敲低LOXL1基因对HLECs中弹性蛋白表达及细胞生物学行为的抑制作用

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中华实验眼科杂志 2024年第9期42卷 807-813页

作者：董月玛依努易湘龙新疆医科大学第一附属医院眼科乌鲁木齐830054

目的探讨敲低赖氨酰氧化酶样蛋白1(LOXL1)基因对人晶状体上皮细胞(HLECs)中弹性蛋白的表达、聚集程度以及对HLECs增生活力及迁移能力的影响。方法体外培养人晶状体上皮细胞系HLE-B3,将细胞分为shLOXL1-1组、shLOXL1-2组、shLOXL1-3组和... 详细信息

目的探讨敲低赖氨酰氧化酶样蛋白1(LOXL1)基因对人晶状体上皮细胞(HLECs)中弹性蛋白的表达、聚集程度以及对HLECs增生活力及迁移能力的影响。方法体外培养人晶状体上皮细胞系HLE-B3,将细胞分为shLOXL1-1组、shLOXL1-2组、shLOXL1-3组和正常对照组,通过不同序列的慢病毒转染方法对shLOXL1-1组、shLOXL1-2组和shLOXL1-3组细胞进行LOXL1基因敲低干预,对正常对照组进行无意义序列慢病毒转染干预。采用实时荧光定量PCR法检测各转染组细胞的LOXL1 mRNA相对表达量;采用免疫荧光法检测HLE-B3中弹性蛋白的荧光强度;采用Western blot法检测HLE-B3中弹性蛋白的表达;采用电子显微镜扫描法检测HLE-B3中弹性蛋白的含量及聚集程度;采用细胞划痕实验检测HLE-B3的迁移率;采用细胞计数试剂盒8法检测HLE-B3的增生活力。结果敲低LOXL1基因后,shLOXL1-1、shLOXL1-2、shLOXL1-3组LOXL1 mRNA相对表达量均低于正常对照组,差异均有统计学意义(均P<0.001),其中shLOXL1-3组敲低效果最佳,故选取shLOXL1-3组与正常对照组进行后续实验并对比。免疫荧光染色后可见弹性蛋白稳定表达于HLE-B3细胞中,shLOXL1-3组弹性蛋白的平均荧光强度为56.96±5.56,明显低于正常对照组的80.52±4.78,差异有统计学意义(t=5.572,P<0.001)。shLOXL1-3组弹性蛋白相对表达量为0.807±0.002,明显低于正常对照组的1.185±0.064,差异有统计学意义(t=5.802,P<0.01)。电子显微镜下可见shLOXL1-3组弹性蛋白密度低于正常对照组,但其形态、大小、聚集程度未见明显改变。培养24 h和48 h时shLOXL1-3组细胞相对迁移率为0.292±0.041和0.439±0.032,均低于正常对照组的0.463±0.017和0.719±0.007,差异均有统计学意义(t=8.178、2.611,均P<0.05)。培养24、48、72、96 h,shLOXL1-3组细胞活力值均低于正常对照组,差异均有统计学意义(t=2.555、2.704、6.695、7.266,均P<0.05)。结论在HLECs中,敲低LOXL1基因可引起弹性蛋白表达水平明显下降,同时细胞迁移能力和细胞增生活力均下降。

关键词：赖氨酰氧化酶样蛋白1 剥脱综合征弹性蛋白迁移增生

基于UPLC-QE-Orbitrap-MS/MS和网络药理学探讨肉苁蓉水提物治疗糖尿病肾病的作用机制

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天然产物研究与开发 2024年第7期36卷 1242-1256,1141页

作者：刘天华耿若愚赵耀王百才马冲杨建华胡君萍新疆医科大学药学院乌鲁木齐830017 新疆医科大学第一附属医院乌鲁木齐830054

探究肉苁蓉水提物(the aqueous extract of Cistanche tubulosa,AECT)化学成分和AECT治疗糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)的作用机制。利用UPLC-MS/MS对化合物进行分析鉴定;借助PubChem、GeneCards、OMIM、DAVID等数据库预测有效成分防治DN的作用靶点及通路,对核心基因进行GO、KEGG富集分析,并使用Cytoscape软件构建“成分-靶点-通路”可视化网络图。MTT法测定AECT的抗DN活性;生化试剂盒检测过氧化指标超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性和谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxide,GSH-Px)含量水平;ELISA法检测炎症因子白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和转化生长因子(transforming growth factor-β,TGF-β)水平;Annexin V-FITC/PI法检测细胞凋亡率;Western blot检测相关蛋白的表达。从AECT中共鉴定出84个化学成分,并推测出15个化合物可能的裂解途径;筛选出AECT治疗DN的70个潜在靶点和多个信号通路。体外实验发现AECT能够增加高糖高脂环境中的HK-2细胞存活率抑制细胞凋亡;并上调SOD活性和GSH-Px含量,抑制炎症因子IL-1β、TNF-α和TGF-β表达水平;Western blot结果证明AECT影响PI3K-AKT信号通路。本研究初步探明了AECT中的主要有效成分及其治疗DN的潜在靶点与作用机制,为AECT治疗DN后续的深入研究提供思路。

关键词：肉苁蓉 UPLC-QE-Orbtrap-MS/MS 化学成分分析网络药理学实验验证

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腹腔多发合并胸壁细粒棘球蚴病1例

中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2024年第3期42卷 424-426页

作者：祖力皮喀尔·图孙尼亚孜蒋铁民温浩新疆医科大学第一附属医院乌鲁木齐830000

患者,男,67岁,汉族,甘肃农民。2023年5月12日因“发现右侧胸壁包块2月余”就诊于新疆医科大学第一附属医院。患者30余年前有肝细粒棘球蚴感染史,2021年12月曾因肺细粒棘球蚴感染行右肺下叶切除术+右肺上叶楔形切除术,有家畜、犬类密切... 详细信息

患者,男,67岁,汉族,甘肃农民。2023年5月12日因“发现右侧胸壁包块2月余”就诊于新疆医科大学第一附属医院。患者30余年前有肝细粒棘球蚴感染史,2021年12月曾因肺细粒棘球蚴感染行右肺下叶切除术+右肺上叶楔形切除术,有家畜、犬类密切接触史。入院查体,右上胸部近腋窝处触及一大小约30 cm×20 cm、柔软的实性包块,质韧、边界清、压痛阳性。血常规示嗜酸粒细胞升高。血清学检查示棘球蚴和弓形虫抗体IgG阳性。腹部增强CT、腹部B超示肝脏、左上腹腔、脾周、右侧腹腔及胸壁多发囊性病灶,右侧胸壁下病灶局部通过肋间隙突入胸壁皮下,部分病灶钙化。诊断为“腹腔多发合并胸壁细粒棘球蚴病”,行手术摘除包囊。术后病灶组织切片HE染色显示,病灶部分区域见均质红染,散在分布棘球蚴样结构伴部分钙化。术后患者恢复良好,6月13日出院。患者即出院日起口服阿苯达唑片剂,10~15 mg/(kg·d),早、晚餐后分服,继续治疗6个月。术后3月复诊,患者未诉特殊不适,腹部、盆腔增强CT平扫未见明显异常。

关键词：肝棘球蚴病腹腔棘球蚴病胸壁棘球蚴病

基于谱效关系的茴香根皮抗肝纤维化有效成分筛选及其机制探讨

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天然产物研究与开发 2024年第3期36卷 400-414页

作者：王百才赵耀耿若愚马冲刘天华胡君萍杨建华新疆医科大学药学院乌鲁木齐830017 新疆医科大学第一附属医院乌鲁木齐830011

为探讨茴香根皮治疗肝纤维化的化学成分,揭示其药效物质基础和作用机制。本研究应用UPLC-Orbitrap-MS/MS技术定性鉴别茴香根皮95%乙醇提取物、石油醚部位、乙酸乙酯部位、正丁醇部位和水部位的化学成分,根据质谱裂解规律和对照品验证及... 详细信息

为探讨茴香根皮治疗肝纤维化的化学成分,揭示其药效物质基础和作用机制。本研究应用UPLC-Orbitrap-MS/MS技术定性鉴别茴香根皮95%乙醇提取物、石油醚部位、乙酸乙酯部位、正丁醇部位和水部位的化学成分,根据质谱裂解规律和对照品验证及文献检索推测鉴定了各组分的58个共有化合物;采用MTT法检测各组分对HSC-T6细胞增殖的影响,谱效关系筛选抗肝纤维化潜在活性化合物,结果显示茴香根皮抗肝纤维化贡献较大的成分是二氢辣椒碱、去氢骆驼蓬碱、异莨菪亭;体外实验验证单体化合物抗肝纤维化活性及机制,结果表明二氢辣椒碱、去氢骆驼蓬碱和异莨菪亭对活化的HSC-T6具有较好的抑制作用(P<0.01、P<0.001),均可以抑制α-SMA的表达(P<0.01、P<0.001);二氢辣椒碱和去氢骆驼蓬碱具有较强的促凋亡作用,可以下调Bax/Bcl-2和Caspase3的相对表达量(P<0.05、P<0.01)。表明茴香根皮抗肝纤维化的药效物质可能为二氢辣椒碱、去氢骆驼蓬碱和异莨菪亭、东莨菪内酯、7-羟基香豆素等,其机制可能是通过抑制肝星状细胞活化、调节Bax/Bcl-2的表达发挥作用,体现了茴香根皮多成分多靶点抗肝纤维化的作用特点。

关键词：茴香根皮肝纤维化肝星状细胞灰色关联度谱效关系

基于谱效关系探讨肉苁蓉水提物抗糖尿病肾病的有效成分及其作用机制

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中国现代应用药学 2024年第10期41卷 1313-1323页

作者：刘天华马冲王百才耿若愚赵耀胡君萍杨建华新疆医科大学药学院乌鲁木齐830017 新疆医科大学第一附属医院乌鲁木齐830054

目的基于肉苁蓉水提物不同洗脱部位质谱峰面积与其抗糖尿病肾病作用的谱效关系,筛选出肉苁蓉水提物抗糖尿病肾病的药效物质,探寻其治疗糖尿病肾病的药效物质基础及其作用机制。方法应用UPLC-Orbitrap-MS/MS技术定性色谱峰;MTT法检测肉... 详细信息

目的基于肉苁蓉水提物不同洗脱部位质谱峰面积与其抗糖尿病肾病作用的谱效关系,筛选出肉苁蓉水提物抗糖尿病肾病的药效物质,探寻其治疗糖尿病肾病的药效物质基础及其作用机制。方法应用UPLC-Orbitrap-MS/MS技术定性色谱峰;MTT法检测肉苁蓉水提物不同洗脱部位对高糖高脂HK-2细胞增殖的影响;灰色关联分析和偏最小二乘法分析质谱峰面积与抗糖尿病肾病活性的谱效关系。MTT法测定肉苁蓉水提物单体成分的抗糖尿病肾病活性;生化试剂盒检测过氧化指标SOD和GSH-Px水平;ELISA法检测炎症因子IL-1β、TNF-α和TGF-β水平;Western blotting检测凋亡相关蛋白的表达。结果UPLC-Orbitrap-MS/MS技术推测鉴定了72个共有化合物;在肉苁蓉水提物中,水、20%乙醇、40%乙醇洗脱部位会不同程度增加高糖高脂环境中的HK-2细胞增殖率;偏最小二乘法和灰色关联分析显示肉苁蓉水提物抗糖尿病肾病贡献较大的成分是8-表去氧马钱子酸、京尼平苷酸、松脂素、甜菜碱、丁香苷等;MTT实验发现8-表去氧马钱子酸、京尼平苷酸对高糖高脂环境中的HK-2细胞具有显著增殖作用;生化试剂盒和ELISA检测结果表明8-表去氧马钱子酸和京尼平苷酸能够上调SOD和GSH-Px活力,同时对炎症因子IL-1β、TNF-α和TGF-β表达水平具有抑制作用;Western blotting结果显示8-表去氧马钱子酸和京尼平苷酸能够下调皮间质转化标志物α-SMA、CollagenⅠ,上调E-cadherin,并且可以通过抑制PI3K-Akt通路发挥抗糖尿病肾病作用。结论在肉苁蓉所含众多化学成分中通过抗糖尿病肾病的谱效关系筛选的8-表去氧马钱子酸和京尼平苷酸这2种化合物可以通过抑制PI3K-Akt信号通路来影响氧化应激、炎症反应和肾小管细胞上皮间质转化进程,起到改善肾脏病理、纤维化程度及肾脏功能的作用,为肉苁蓉水提物治疗糖尿病肾病后续的深入研究提供参考。

关键词：肉苁蓉水提物 UPLC-Orbitrap-MS/MS 谱效关系糖尿病肾病

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胰十二指肠切除术后高淀粉酶血症的研究进展

中国普通外科杂志 2024年第3期33卷 424-430页

作者：开塞尔·阿不都哈迪尔林海新疆医科大学第一附属医院胰腺外科新疆乌鲁木齐830000

胰十二指肠切除术(PD)术后并发症发生率高达40%,故对其并发症的早期预测及处理是有必要的。PD术后高淀粉酶血症(POH)被认为是术后早期并发症发生率及严重程度的预测因子,但因对血清淀粉酶活性升高的机制不明确,其意义和含义近些年以不... 详细信息

胰十二指肠切除术(PD)术后并发症发生率高达40%,故对其并发症的早期预测及处理是有必要的。PD术后高淀粉酶血症(POH)被认为是术后早期并发症发生率及严重程度的预测因子,但因对血清淀粉酶活性升高的机制不明确,其意义和含义近些年以不同的方式被解释。在此,笔者就POH概念的提出与发展历程、原因及影响、与术后急性胰腺炎及术后胰瘘之间的关系,以及防治措施等加以综述。

关键词：胰十二指肠切除术手术后并发症高淀粉酶血症胰腺炎胰腺瘘综述

细粒棘球蚴抗原B和钙结合蛋白1调节小鼠免疫性血小板减少症机制研究

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2024年

作者：杨雪花宋海辰焦红杰程永凤岳迎宾宋传龙何白奇枫严媚新疆医科大学第一附属医院

目的探讨细粒棘球蚴抗原B (AgB)和钙结合蛋白1 (CBP1)在小鼠免疫性血小板减少症（ITP模型中基于TLR4/NF-κB/NLRP3信号通路的保护作用及机制。方法 42只健康雌性BALB/c小鼠随机分为对照组、ITP组、AgB组、AgB+ITP组、CBP1组、CBP1+ITP... 详细信息

目的探讨细粒棘球蚴抗原B (AgB)和钙结合蛋白1 (CBP1)在小鼠免疫性血小板减少症（ITP模型中基于TLR4/NF-κB/NLRP3信号通路的保护作用及机制。方法 42只健康雌性BALB/c小鼠随机分为对照组、ITP组、AgB组、AgB+ITP组、CBP1组、CBP1+ITP组，每组7只。AgB组和AgB+ITP组小鼠每天腹腔注射AgB100μg (200μl),CBP1组和CBP1+ITP组小鼠每天腹腔注射CBP1 100μg (200μl)，对照组和ITP组小鼠每天腹腔注射PBS 200μl；均连续5 d。随后ITP组、AgB+ITP组、CBP1+ITP组小鼠每天腹腔注射抗CD41单克隆抗体（anti-CD41 Ab） 3μg (200μl)进行ITP造模，对照组、AgB组、CBP1组小鼠每天腹腔注射PBS 200μl；均连续注射5 d。检测造模前1天（D0）、造模期间（D1～D5）、造模结束次日（D6）小鼠外周血血小板计数（PLT）的变化；造模结束次日安乐死处死小鼠，取脾脏和肝脏，称重并计算脏器指数；qRT-PCR检测小鼠脾组织Toll样受体4(TLR4)、NOD样受体热蛋白结构域蛋白3 (NLRP3)、凋亡点状蛋白（ASC）、IL-1β相对转录水平；蛋白质免疫印迹法（Western blotting）检测小鼠脾脏TLR4、诱导型一氧化氮合成酶（iNOS）、核因子κB (NF-κB)、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶1 (caspase-1)的相对表达水平。组间比较采用单因素方差分析，多组间两两比较采用LSD-t检验。结果ITP组小鼠D1～D6的血小板计数分别为（102.1±6.8）×10～9/L、（234.7±18.1）×10～9/L、（229.7±45.8）×10～9/L、（316.7±26.8）×10～9/L、（320.6±60.5）×10～9/L、（179.1±22.2）×10～9/L，均低于对照组的（526.6±90.4）×10～9/L、（679.3±58.5）×10～9/L、（828.0±61.0）×10～9/L、（855.3±101.9）×10～9/L、（784.1±177.7）×10～9/L、（877.4±107.5）×10～9/L (LSD-t=-4.2、-5.5、-6.9、-6.3、-3.9、-4.8，均P <0.05);AgB+ITP组和CBP1+ITP组D6的血小板计数为（512.6±100.5）×10～9/L、（511.1±114.8）×10～9/L，均高于ITP组（LSD-t=2.3、2.3，均P <0.05）。ITP组小鼠脾脏指数为12.1±1.2，高于对照组的6.3±0.4 (LSD-t=6.8,P <0.01);AgB+ITP组脾脏指数为9.0±0.3，较ITP组下降（LSD-t=-3.6,P <0.01）。qRT-PCR结果显示，ITP组脾脏组织TLR4、NLRP3、ASC、IL-1β相对转录水平分别为7.5±2.1、5.3±1.5、3.6±0.7、4.0±0.9，均高于对照组的1.3±0.3、1.2±0.2、1.2±0.3、1.0±0.1 (LSD-t=4.8、4.5、4.2、5.2，均P <0.01);AgB+ITP组转录水平为1.7±0.3、0.6±0.1、1.0±0.3、0.7±0.1,CBP1+ITP组为1.7±0.1、1.0±0.3、1.1±0.4、0.4±0.1，均较ITP组下降（LSD-t=-4.6、-5.1、-4.5、-5.9、-4.5、-4.7、-4.4、-6.3，均P <0.01）。Western blotting结果显示，ITP组脾脏组织TLR4、iNOS、NF-κB p65、caspase-1的相对表达水平为0.7±0.1、0.5±0.0、1.4±0.2、1.5±0.2，均高于对照组的0.2±0.0、0.3±0.0、0.9±0.2、0.8±0.2(LSD-t=8.6、6.5、3.1、3.5，均P <0.01);AgB+ITP组表达水平为0.4±0.0、0.4±0.0、0.9±0.1、1.0±0.1,CBP1+ITP组为0.2±0.1、0.2±0.0、0.6±0.1、0.7±0.1，均较ITP组下降（LSD-t=-6.1、-2.8、-3.1、-2.3、-8.9、-7.1、-4.9、-4.2，均P <0.05）。结论 AgB和CBP1对小鼠ITP具有保护作用，其机制与TLR4/NF-κB/NLRP3通路的调节有关。

关键词：细粒棘球绦虫免疫性血小板减少症 TLR4/NF-κB/NLRP3通路抗原B 钙结合蛋白1

核因子E2相关因子2信号通路在病理性瘢痕中作用的研究进展

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中华整形外科杂志 2024年第3期40卷 343-348页

作者：龚玲李宇马娟迟宏羽董祥林新疆医科大学第一附属医院整形科乌鲁木齐830011

核因子E2相关因子2(Nrf2)是细胞维持氧化还原稳态的主要调节因子,Nrf2信号通路具有抗炎、抗氧化应激、抗纤维化等作用,在伤口愈合及病理性瘢痕形成及进展中起着重要作用。该文对氧化应激、Nrf2信号通路对病理性瘢痕作用的相关研究进行... 详细信息

核因子E2相关因子2(Nrf2)是细胞维持氧化还原稳态的主要调节因子,Nrf2信号通路具有抗炎、抗氧化应激、抗纤维化等作用,在伤口愈合及病理性瘢痕形成及进展中起着重要作用。该文对氧化应激、Nrf2信号通路对病理性瘢痕作用的相关研究进行了综述,并对Nrf2信号通路、氧化应激和病理性瘢痕之间的相互关系进行了阐述,以为病理性瘢痕的机制研究及临床防治提供新的视角。

关键词：瘢痕,肥大性瘢痕疙瘩核因子E2相关因子2信号通路活性氧病理性瘢痕伤口愈合

骨小梁金属Cone重建膝关节翻修术中干骺端骨缺损的临床疗效

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中华骨科杂志 2024年第4期44卷 233-242页

作者：陈永杰李国庆汪洋纪保超曹力新疆医科大学第一附属医院关节外科乌鲁木齐830054

目的探讨膝关节翻修术中应用骨小梁金属Cone重建干骺端骨缺损的临床疗效。方法回顾性分析2015年7月至2023年8月于新疆医科大学第一附属医院接受膝关节翻修术中应用骨小梁金属Cone重建干骺端骨缺损患者46例(47膝)的病历资料,男12例、女34... 详细信息

目的探讨膝关节翻修术中应用骨小梁金属Cone重建干骺端骨缺损的临床疗效。方法回顾性分析2015年7月至2023年8月于新疆医科大学第一附属医院接受膝关节翻修术中应用骨小梁金属Cone重建干骺端骨缺损患者46例(47膝)的病历资料,男12例、女34例,年龄为(68.65±9.09)岁(范围41~83岁),体质指数(body mass index,BMI)为(27.20±4.50)kg/m2(范围19.5~36.0 kg/m2)。股骨侧及胫骨侧骨缺损安德森骨科研究所(Anderson orthopedic research institute,AORI)分型为T2B型20侧、T3型16侧、F2B型11侧、F3型17侧,64侧共置入骨小梁金属Cone 67个。临床评价指标包括膝关节活动度(range of motion,ROM)、疼痛视觉模拟评分(visual analogue scale,VAS)及美国膝关节学会评分(Knee Society score,KSS)。拍摄双下肢全长X线片和膝关节正侧位X线片,测量患肢膝关节胫股角(femorotibial angle,FTA),观察膝关节力线的改善情况及骨小梁金属Cone骨长入程度,记录并发症发生情况。结果46例患者均获得随访,随访时间为(46.22±26.55)个月(范围6~103个月)。KSS膝评分由术前(29.22±19.79)分提高至术后3个月的(72.46±6.55)分,末次随访为(88.22±6.01)分,差异有统计学意义(F=258.118,P<0.001);KSS功能评分由术前(7.65±8.21)分提高至术后3个月的(40.00±9.49)分,末次随访为(56.30±6.10)分,差异有统计学意义(F=354.711,P<0.001)。VAS评分由术前(5.35±1.50)分降低至术后3个月的(1.91±0.59)分,末次随访为(0.28±0.50)分,差异有统计学意义(F=300.934,P<0.001);ROM由术前67.72°±34.62°改善至术后3个月的80.33°±10.51°,末次随访为85.33°±9.15°,差异有统计学意义(F=7.798,P<0.001)。FTA由术前179.24°±10.30°改善至出院时的174.61°±2.11°,末次随访为174.39°±1.69°,差异有统计学意义(F=9.123,P<0.001)。末次随访时64个骨小梁金属Cone(95.5%,64/67)X线片提示有良好的骨长入,未见假体周围骨溶解,假体均牢固固定。1例患者术后第20天发生股骨干中段骨折,次日行股骨记忆合金环抱钢板内固定术,术后6个月复查骨折线已完全闭合,可扶助行器行走;其余患者均无假体周围感染、松动、脱位及周围骨折等并发症。结论膝关节翻修术中应用骨小梁金属Cone可有效重建严重的干骺端骨缺损,加强膝关节假体的稳定性,重建相对正常的膝关节下肢力线,Cone内骨长入趋势良好,膝关节功能明显改善。

关键词：关节成形术,置换,膝再手术骨缺损骨小梁金属