基于UPLC-QE-Orbitrap-MS/MS和网络药理学探讨肉苁蓉水提物治疗糖尿病肾病的作用机制

作     者：刘天华 耿若愚 赵耀 王百才 马冲 杨建华 胡君萍 LIU Tian-hua;GENG Ruo-yu;ZHAO Yao;WANG Bai-cai;MA Chong;YANG Jian-hua;HU Jun-ping

作者机构：新疆医科大学药学院乌鲁木齐830017 新疆医科大学第一附属医院乌鲁木齐830054 

出 版 物：《天然产物研究与开发》 (Natural Product Research and Development)

年 卷 期：2024年第36卷第7期

页      面：1242-1256,1141页

核心收录：

学科分类：1008[医学-中药学(可授医学、理学学位)] 1007[医学-药学(可授医学、理学学位)] 100704[医学-药物分析学] 1006[医学-中西医结合] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

基　　金：新疆维吾尔自治区自然科学基金重点项目(2021D01D11) 国家自然科学基金(82160772) 新疆天然药物有效成分与药物释放技术重点实验室(XJDX1713) 

主　　题：肉苁蓉 UPLC-QE-Orbtrap-MS/MS 化学成分分析 网络药理学 实验验证 

摘      要：探究肉苁蓉水提物(the aqueous extract of Cistanche tubulosa,AECT)化学成分和AECT治疗糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)的作用机制。利用UPLC-MS/MS对化合物进行分析鉴定;借助PubChem、GeneCards、OMIM、DAVID等数据库预测有效成分防治DN的作用靶点及通路,对核心基因进行GO、KEGG富集分析,并使用Cytoscape软件构建“成分-靶点-通路可视化网络图。MTT法测定AECT的抗DN活性;生化试剂盒检测过氧化指标超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性和谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxide,GSH-Px)含量水平;ELISA法检测炎症因子白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和转化生长因子(transforming growth factor-β,TGF-β)水平;Annexin V-FITC/PI法检测细胞凋亡率;Western blot检测相关蛋白的表达。从AECT中共鉴定出84个化学成分,并推测出15个化合物可能的裂解途径;筛选出AECT治疗DN的70个潜在靶点和多个信号通路。体外实验发现AECT能够增加高糖高脂环境中的HK-2细胞存活率抑制细胞凋亡;并上调SOD活性和GSH-Px含量,抑制炎症因子IL-1β、TNF-α和TGF-β表达水平;Western blot结果证明AECT影响PI3K-AKT信号通路。本研究初步探明了AECT中的主要有效成分及其治疗DN的潜在靶点与作用机制,为AECT治疗DN后续的深入研究提供思路。