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固相萃取-液相色谱串联质谱法测定奶及奶粉中12种同化激素药物残留量

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分析试验室 2024年

作者：赵善贞杨惠琴伊雄海郭德华盛永刚封卓然上海海关动植物与食品检验检疫技术中心

建立了奶及奶粉中12种同化激素多残留的固相萃取净化-液相色谱串联质谱（SPE-LC-MS/MS）的检测方法。样品经乙腈提取、HLB固相萃取柱净化、氮气吹干后，残留物用乙腈∶水（50∶50，V/V）溶解定容，液相色谱串联质谱仪以多反应监测（MRM... 详细信息

建立了奶及奶粉中12种同化激素多残留的固相萃取净化-液相色谱串联质谱（SPE-LC-MS/MS）的检测方法。样品经乙腈提取、HLB固相萃取柱净化、氮气吹干后，残留物用乙腈∶水（50∶50，V/V）溶解定容，液相色谱串联质谱仪以多反应监测（MRM）模式测定，内标法定性定量分析。12种同化激素的检出限（LOD）均为0.5 μg/kg，定量限（LOQ）均为1.0 μg/kg。在1.0～10.0 μg/L添加水平上，12种同化激素在牛奶基质中的回收率在71.4%～109.0%之间；在羊奶基质中的回收率在72.9%～121.5%之间；在牛奶粉基质中的回收率在67.4%～113.0%之间，相对标准偏差（RSD）均<15%。该方法可应用于奶及奶粉中甲睾酮、表睾酮、诺龙、勃地龙、群勃龙、脱氢表雄酮、甲地孕酮、甲羟孕酮、醋酸甲地孕酮、醋酸甲羟孕酮、醋酸美仑孕酮、醋酸氯地孕酮等同化激素的定性定量分析。

关键词：液相色谱串联质谱法(LC-MS/MS) 奶及奶制品同化激素

马病毒性动脉炎病毒荧光定量RT-PCR检测方法的建立

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中国预防兽医学报 2024年第2期46卷 159-163页

作者：梁歆歆王科珂蒋刚强徐军陈凯云王艳肖媛媛白梅花刘东石河子大学动物科技学院新疆石河子832003 乌鲁木齐海关技术中心新疆乌鲁木齐830063 上海海关动植物与食品检验检疫技术中心上海200120 喀什海关技术中心新疆喀什844099

为建立检测马病毒性动脉炎病毒(EAV)的荧光定量RT-PCR检测方法,本研究针对EAV ORF7基因序列设计引物及探针,并对其反应体系进行优化,建立标准曲线,结果显示,EAV荧光定量RT-PCR方法在退火温度为61℃、引物和探针终浓度均为0.6μmol/L的... 详细信息

为建立检测马病毒性动脉炎病毒(EAV)的荧光定量RT-PCR检测方法,本研究针对EAV ORF7基因序列设计引物及探针,并对其反应体系进行优化,建立标准曲线,结果显示,EAV荧光定量RT-PCR方法在退火温度为61℃、引物和探针终浓度均为0.6μmol/L的反应条件下效果最优;质粒标准品体外转录的cRNA在1.6×10^(7)拷贝/μL~1.6×10^(2)拷贝/μL时与Ct值之间呈现良好的线性关系,标准曲线方程为y=-2.68x+32.88,R^(2)=0.9927,初步建立了EAV荧光定量RT-PCR方法。采用该方法检测EAV、马焦虫、马疱疹病毒1型、马疱疹病毒4型、马流感病毒,结果显示,该方法仅能特异性检测到EAV,其他病原检测均为阴性,该方法特异性强;将体外转录合成的质粒标准品cRNA 10倍倍比稀释后利用该方法检测,结果显示该方法最低检测限为1.6×10^(2)拷贝/μL,灵敏性高;重复性试验结果显示,该方法组内及组间变异系数均小于2.0%,重复性好。采用本实验建立的荧光定量RT-PCR方法和文献发表的EAV荧光定量RT-PCR方法分别对234份临床样品进行检测,两者的阳性检出率均为14.1%(33/234),两种方法的符合率为100%。本研究建立的荧光定量RT-PCR检测方法为马病毒性动脉炎的防控提供了新的技术手段和思路。

关键词：马病毒性动脉炎 ORF7基因荧光定量RT-PCR

基于2019—2022年海关总署公布未准入境食品抽检数据分析及建议

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现代预防医学 2024年第6期51卷 1112-1117+1128页

作者：林燕奎熊贝贝貌达韩瑞阳卞学海侯乐锡巨玉佳深圳海关食品检验检疫技术中心中国计量科学研究院

目的通过对海关总署公布的未准入境的食品信息进行多维度对比分析，探讨进口食品的风险因素，为监管人员提升进口食品监管提供数据参考。方法本文主要对海关总署进出口食品安全局在2019—2022年期间公布的48期未准入境食品数据进行收... 详细信息

目的通过对海关总署公布的未准入境的食品信息进行多维度对比分析，探讨进口食品的风险因素，为监管人员提升进口食品监管提供数据参考。方法本文主要对海关总署进出口食品安全局在2019—2022年期间公布的48期未准入境食品数据进行收集、汇总，从未准入境食品的来源地区、食品生产企业、产品种类、未准入境事实等多维度进行对比分析。结果 2019—2022年总共有未准入境食品9 506批次，未准入境食品来源于112个国家和地区，来自日本的未准入境食品批次占比最高。共来自3 941家生产企业，未准入境食品生产企业数超过100家的国家或地区有11个，占总企业数的50%以上。按照HS编码，未准入境产品共有六类21章，主要是HS03、21、19和22产品，超过总不合格的60%。按照不合格原因分析，共有15种，排在前6的不合格原因占总不合格批次比重达到86%。涉及品质安全相关的不合格项目共268种，3 469项次。结论 2019—2022年期间未准入境食品批次数整体是先上升再下降的趋势，未准入境食品的来源国家、生产企业、未准食品类别、不合格原因和品质相关的不合格项目较集中。多维度对比分析，为监管人员和消费者提供数据参考，为政府提升进口食品监管提供帮助。

关键词：未准入境食品信息食品安全风险建议

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黄星蓟在我国的适生性分析及风险评估

生物安全学报（中英文） 2024年第3期33卷 285-290页

作者：袁淑珍龙阳李凯兵徐晗虞赟袁俊杰二连海关技术中心内蒙古二连浩特012600 湛江海关技术中心广东湛江524000 佛山海关广东佛山528000 中国检验检疫科学研究院北京100000 福州海关技术中心福建福州350003

【目的】黄星蓟是一种极具危险性的杂草,在美国和澳大利亚等地区被列为有毒有害杂草并加以控制。目前在我国新疆等局部区域,已发现有黄星蓟的定殖,且呈蔓延危害加剧的趋势。对黄星蓟进行适生性分析及风险评估,可为该有害生物的预警防控... 详细信息

【目的】黄星蓟是一种极具危险性的杂草,在美国和澳大利亚等地区被列为有毒有害杂草并加以控制。目前在我国新疆等局部区域,已发现有黄星蓟的定殖,且呈蔓延危害加剧的趋势。对黄星蓟进行适生性分析及风险评估,可为该有害生物的预警防控提供理论依据。【方法】利用MaxEnt模型对黄星蓟在我国的潜在适生区进行预测,并采用多指标赋值运算,对其入侵的风险进行定量分析。【结果】黄星蓟在我国的潜在适生区达32.96%,其中高度适生区、中度适生区和低度适生区的面积分别为11.21万、34.16万、272.28万km^(2)。其危险性综合评估风险值R为2.01,为高度危险。【结论】我国很多区域均属于黄星蓟的适生区,需要高度重视,其预测结果为建立黄星蓟长效预警与防控机制提供必要的理论基础。

关键词：黄星蓟潜在适生区 MaxEnt 风险评估

基于N和G蛋白的HeV抗体间接ELISA检测方法的建立

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动物医学进展 2024年第3期45卷 9-15页

作者：朱盈名王迎平冯旭东朱桓奕杨晓伟陈翔王艳赵光伟西南大学动物医学院重庆402460 上海海关上海200135 上海海关动植物与食品检验检疫技术中心上海200135

为了建立亨德拉病毒(HeV)抗体的间接ELISA检测方法,人工合成HeV的N和G基因,并将其分别连接到原核表达载体PET-30a,经IPTG诱导、变复性处理及纯化后获得表达蛋白,免疫健康马获得阳性血清,用矩阵法对蛋白包被浓度和一抗稀释倍数进行确定,... 详细信息

为了建立亨德拉病毒(HeV)抗体的间接ELISA检测方法,人工合成HeV的N和G基因,并将其分别连接到原核表达载体PET-30a,经IPTG诱导、变复性处理及纯化后获得表达蛋白,免疫健康马获得阳性血清,用矩阵法对蛋白包被浓度和一抗稀释倍数进行确定,优化包被时间、封闭剂以及孵育时间等技术参数,并对建立方法的灵敏性、特异性、重复性和准确性进行评估。经SDS-PAGE和Western blot验证,N和G两个蛋白均实现高效表达,间接ELISA方法中二者的最佳包被浓度分别为10μg/mL和8μg/mL,一抗血清的稀释倍数为1∶800,优化后的最佳反应条件为:N蛋白4℃包被过夜,5%脱脂奶粉37℃封闭2 h,一抗孵育时间30 min,二抗按1∶8000稀释后37℃作用60 min;G蛋白4℃包被过夜,2%BSA 37℃封闭2 h,一抗孵育时间80 min,二抗按1∶8000稀释后37℃作用80 min。结果表明,所建方法N蛋白的灵敏性大于1∶12800,G蛋白大于1∶6400,二者的临界值分别为0.235和0.267,特异性良好,批内、批间变异系数均小于10%,重复性良好,二者ROC曲线下面积分别为0.91和0.93,准确性高。试验结果可为海关、口岸以及出入境检验检疫等部门HeV临床血清学诊断提供技术支撑。

关键词：亨德拉病毒 N蛋白 G蛋白间接ELISA

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赫氏真厚螺的检疫鉴定

植物保护 2024年第1期50卷 264-267,279页

作者：王沛胡美玲姜娇张卫红陈宇林金成林阳武周卫川福州海关技术中心福州350001 福建省检验检疫技术研究重点实验室福州350001 浙江自然博物院杭州310014 新疆大学生命科学与技术学院乌鲁木齐830000 福州海关福州350015

赫氏真厚螺Euhadra herklotsi是一种重要的园艺有害生物。本文采用贝壳形态、生殖系统解剖和分子生物学相结合的方法对福建口岸截获的一种蜗牛进行检疫鉴定,结果表明,该蜗牛为赫氏真厚螺,并与近似种的形态鉴别特征进行了比较,讨论了蜗... 详细信息

赫氏真厚螺Euhadra herklotsi是一种重要的园艺有害生物。本文采用贝壳形态、生殖系统解剖和分子生物学相结合的方法对福建口岸截获的一种蜗牛进行检疫鉴定,结果表明,该蜗牛为赫氏真厚螺,并与近似种的形态鉴别特征进行了比较,讨论了蜗牛序列比对鉴定方法的适用性,为国境口岸防御该蜗牛的入侵提供了科学依据。

关键词：赫氏真厚螺贝壳形态生殖系统解剖分子特征植物检疫

基于酶介导双重指数扩增检测技术的白壳快速检测方法

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菌物学报 2024年第9期43卷 105-113页

作者：俞紫琳张慧丽顾建锋吴尧胡振新李秋实段维军宁波检验检疫科学技术研究院浙江宁波315012 宁波中盛产品检测有限公司浙江宁波315012 宁波海关技术中心浙江宁波315012 苏州晶睿生物科技有限公司江苏苏州215000

可可花瘿病致病菌白壳Albonectria rigidiuscula是我国进境植物检疫性有害生物,已在多个口岸植物入境产品中被截获,存在较大生物入侵风险。为探索口岸适用的现场快速检测技术,根据白壳翻译延长因子TEF1-α的基因序列,基于酶介导双重指... 详细信息

可可花瘿病致病菌白壳Albonectria rigidiuscula是我国进境植物检疫性有害生物,已在多个口岸植物入境产品中被截获,存在较大生物入侵风险。为探索口岸适用的现场快速检测技术,根据白壳翻译延长因子TEF1-α的基因序列,基于酶介导双重指数扩增核酸检测技术设计了针对白壳的5条DNA上游引物、6条DNA下游引物和4条RNA探针。通过筛选,获得了扩增效果最佳的上、下游DNA引物和RNA探针组合。灵敏度实验结果表明,其最低检测限量可达0.5 pg/uL。实际样品检测结果表明,该方法适用于口岸疑似携带有白壳样品的检测与初筛。该方法具有操作简便、耗时较短、特异性强等优点,整个反应过程仅需30 min,检测过程完全闭管且不需要PCR后续处理,为口岸现场白壳检测筛查提供了重要参考。

关键词：外来物种生物安全植物病害检疫检测

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气相色谱-质谱法同时测定番茄制品中拟除虫菊酯类农药残留

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分析化学 2005年第6期33卷 838-842页

作者：李锋格全晓盾新疆出入境检验检疫局技术中心乌鲁木齐830063 新疆出入境检验检疫局技术中心

番茄制品经乙腈提取,盐析,氟罗里硅土固相萃取小柱净化,微池电子捕获检测器(μECD)负化学源质谱(NCIMS)并联对净化液进行检测,一次进样可对番茄制品中的9种拟除虫菊酯类农药残留准确定量和确证。μECD回收率为87.6%～107.0%;相对标准偏... 详细信息

番茄制品经乙腈提取,盐析,氟罗里硅土固相萃取小柱净化,微池电子捕获检测器(μECD)负化学源质谱(NCIMS)并联对净化液进行检测,一次进样可对番茄制品中的9种拟除虫菊酯类农药残留准确定量和确证。μECD回收率为87.6%～107.0%;相对标准偏差为5.5%～11.3%;检出限为0.0005～0.005mg/kg;负化学源选择离子(NCISIM)模式回收率为91.9%～109.7%;相对标准偏差为5.2%～12.7%;检出限为0.0005～0.005mg/kg(氯菊酯除外),两者之间没有显著的差别。该法快速、灵敏、准确,各项技术指标均满足农药残留检测的要求。

关键词：拟除虫菊酯类农药番茄电子捕获检测器负化学源质谱

进口猪肉及其制品中猪繁殖与呼吸综合征病毒传入风险分析

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中国动物检疫 2024年第6期41卷 38-42页

作者：樊彦莉郑曦薛俊欣周豪迟王奕婷李健蒋静上海海关动植物与食品检验检疫技术中心上海200135 海关总署国际检验检疫标准与技术法规研究中心北京100013 上海海关上海20015

我国是世界养猪大国和猪肉消费大国,进口猪肉的卫生安全关系到我国畜牧业和经济社会可持续发展。为评估进口猪肉及其制品中猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的传入风险,按照世界动物卫生组织(WOAH)《陆生动物卫生法典》风险评估框架,采用... 详细信息

我国是世界养猪大国和猪肉消费大国,进口猪肉的卫生安全关系到我国畜牧业和经济社会可持续发展。为评估进口猪肉及其制品中猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的传入风险,按照世界动物卫生组织(WOAH)《陆生动物卫生法典》风险评估框架,采用情景树分析法,识别进口猪肉及其制品传入PRRSV的关键因素及其影响,综合入境评估、暴露评估和后果评估,分析PRRSV通过进口猪肉及其制品携带传入我国的风险。评估认为,进口猪肉及其制品的PRRSV入境评估风险为“极低”,暴露评估风险为“极低”,后果评估风险为“中”,综合评定传入风险为“极低”。针对风险评估结论,提出了事前、事中、事后风险管理建议,以期为产品准入和口岸监督执法提供参考。

关键词：猪肉产品猪繁殖与呼吸综合征传入风险口岸监管