火鸡源性成分实时聚合酶链式反应检测方法ISO标准研制

作     者：潘良文 宁雪 王强 蔡一村 许镇坚 张晨 PAN Liangwen;NING Xue;WANG Qiang;CAI Yicun;XU Zhenjian;ZHANG Chen

作者机构：上海海关动植物与食品检验检疫技术中心上海200135 

出 版 物：《食品科学》 (Food Science)

年 卷 期：2024年第45卷第1期

页      面：217-224页

核心收录：

学科分类：09[农学] 0903[农学-农业资源与环境] 

基　　金：上海市科技创新行动计划技术标准项目(21DZ2207900) 上海市出入境食品和饲料检测专业技术服务平台项目(20DZ2291900)。 

主　　题：火鸡 实时聚合酶链式反应 检测 国际标准化组织 

摘      要：选择火鸡染色体Z DNA序列的特异片段作为检测靶序列,建立了实时聚合酶链式反应(real-time polymerase chain reaction,real-time PCR)检测方法,该方法种间特异性和种内一致性良好。将靶序列克隆到pUC57质粒中,通过对不同稀释浓度的质粒样品进行real-time PCR测试,该方法绝对检测限为5拷贝/PCR反应。组织国际协同实验对方法进行验证,方法的假阳性率、假阴性率均为0%,绝对检测限为5拷贝/PCR反应。根据对各实验室不同稀释浓度的质粒样品的定性测试结果对方法进行分析,结果表明,实验室间标准偏差为0.30,低于最大允许值1;在检出概率为95%的情况下,方法的绝对检测限为3.2拷贝/PCR反应,低于最大允许值20拷贝/PCR反应。将该方法提交国际标准化组织(International Organization for Standardization,ISO),经过标准不同的制订阶段投票、征求意见,正式上升为ISO标准(ISO/TS20224-8:2022)。