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miR-328-3p靶向下调FOXP3抑制IL-17诱导的Caco-2人结直肠癌细胞侵袭和迁移

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细胞与分子免疫学杂志 2022年第6期38卷 487-493页

作者：张伟丽信阳职业技术学院医学院病理教研室河南信阳464000

目的研究miR⁃328⁃3p对白细胞介素17(IL⁃17)诱导的结直肠癌Caco⁃2细胞转移的影响和机制。方法实时定量PCR检测Caco⁃2结直肠上皮细胞和结直肠癌细胞中miR⁃328⁃3p、叉头盒P3(FOXP3)和IL⁃17 mRNA表达。将miR⁃328⁃3p模拟物(mimics)转染至结... 详细信息

目的研究miR⁃328⁃3p对白细胞介素17(IL⁃17)诱导的结直肠癌Caco⁃2细胞转移的影响和机制。方法实时定量PCR检测Caco⁃2结直肠上皮细胞和结直肠癌细胞中miR⁃328⁃3p、叉头盒P3(FOXP3)和IL⁃17 mRNA表达。将miR⁃328⁃3p模拟物(mimics)转染至结直肠癌Caco⁃2细胞中,然后给予IL⁃17诱导处理后,Transwell^(TM)小室测定细胞侵袭和迁移,明胶酶谱法测定细胞中基质金属蛋白酶2(MMP2)和MMP9活性。双荧光素酶报告基因实验验证miR⁃328⁃3p与FOXP3的靶向调控关系,蛋白质印迹法检测miR⁃328⁃3p mimics对Caco⁃2细胞中FOXP3蛋白表达的影响。将FOXP3过表达载体(pcDNA3.1⁃FOXP3)和miR⁃328⁃3p mimics共转染到Caco⁃2细胞,利用上述相同方法测定细胞侵袭、迁移和细胞MMP2、MMP9活性。结果与结直肠上皮细胞比较,miR⁃328⁃3p在结直肠癌细胞中的表达水平降低,FOXP3和IL⁃17 mRNA水平升高。转染miR⁃328⁃3p mimics可降低IL⁃17诱导处理后的Caco⁃2细胞侵袭和迁移能力及细胞MMP2、MMP9活性。miR⁃328⁃3p靶向结合并抑制Caco⁃2细胞FOXP3蛋白表达。转染pcDNA3.1⁃FOXP3可降低miR⁃328⁃3p mimics对IL⁃17诱导的Caco⁃2细胞侵袭、迁移及细胞MMP2、MMP9活性的影响。结论miR⁃328⁃3p可能通过靶向抑制FOXP3减弱IL⁃17诱导的结直肠癌Caco⁃2细胞的侵袭和迁移能力。

关键词：结直肠癌 miR-328-3p 转移白细胞介素17(IL-17)

幽门螺杆菌阳性胃癌中vacA基因型的分布及其与MEX3A表达的关系

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中国医科大学学报 2022年第8期51卷 701-705页

作者：勾佳钰张忠薄威梁莉李佳琦李晓波王旭光沈阳医学院病理学教研室沈阳110034

目的探讨辽宁地区幽门螺杆菌(H.pylori)阳性胃癌患者的癌组织中细胞空泡毒素基因A (vacA)优势基因型分布及其与肌肉增生蛋白3A (MEX3A)表达的关系。方法选择2011年至2014年沈阳医学院附属中心医院外科手术切除的胃癌石蜡包埋病理标本9... 详细信息

目的探讨辽宁地区幽门螺杆菌(H.pylori)阳性胃癌患者的癌组织中细胞空泡毒素基因A (vacA)优势基因型分布及其与肌肉增生蛋白3A (MEX3A)表达的关系。方法选择2011年至2014年沈阳医学院附属中心医院外科手术切除的胃癌石蜡包埋病理标本98例,利用GT pureFFPE tissue DNA Extraction Kit提取DNA;利用PCR检测不同vacA基因型分布情况,用免疫组织化学染色法检测胃癌组织中MEX3A蛋白的表达情况,并分析二者的关系。结果在H.pylori阳性胃癌中vacA s1、vacA m1、vacA s1m亚型分布高于其他vacA亚型(P <0.05),其中,vacA m1亚型与MEX3A表达密切相关(P <0.05)。MEX3A表达情况与肿瘤分化程度有关,差异有统计学意义(P <0.05)。结论在辽宁地区H.pylori阳性胃癌患者的癌组织中,vacA m1为优势基因亚型,且表达与MEX3A有关,可能通过参与转录后调控相关细胞信号通路而影响胃癌发生、发展。

关键词：胃癌幽门螺杆菌细胞空泡毒素基因A 肌肉增生蛋白3A

梓醇抑制NADPH氧化酶保护2型糖尿病早期血管内皮功能

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中国中药杂志 2014年第15期39卷 2936-2941页

作者：刘江月潍坊医学院病理生理教研室

该研究观察梓醇对2型糖尿病(T2DM)大鼠血管内皮功能的保护作用并探讨其抑制NADPH氧化酶表达的机制。40只高糖高脂饮食联合腹腔注射链脲佐菌素致糖尿病大鼠随机分为模型组、梓醇低、中、高剂量组(10,50,100 mg·kg-1·d-1)。另以10只健康... 详细信息

该研究观察梓醇对2型糖尿病(T2DM)大鼠血管内皮功能的保护作用并探讨其抑制NADPH氧化酶表达的机制。40只高糖高脂饮食联合腹腔注射链脲佐菌素致糖尿病大鼠随机分为模型组、梓醇低、中、高剂量组(10,50,100 mg·kg-1·d-1)。另以10只健康Wistar大鼠作为正常组。正常组、模型组分别给予相当量的生理盐水。6周后全自动生化分析仪检测血糖、血脂;ELISA检测血清8-异前列腺素F2α(8-iso-PGF2α)含量;硝酸还原法检测血清一氧化氮(NO)水平;羟胺法检测血清超氧化物歧化酶(SOD)含量;观察离体胸主动脉环内皮依赖性血管舒张反应;荧光法检测主动脉组织活性氧(ROS)的水平;HE染色观察主动脉病理形态学改变;RT-PCR,western-blot分别检测主动脉组织Nox4,p22phox mRNA及蛋白表达。结果显示梓醇中、高剂量组血管内皮损伤明显减轻,主动脉ROS水平降低,血清NO水平升高,8-iso-PGF2α含量减少,SOD含量升高;主动脉组织Nox4,p22phox mRNA及蛋白表达均降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。因此梓醇对T2DM血管内皮具有保护作用,其机制可能与其下调Nox4,p22phox表达,抑制氧化应激反应有关。

关键词： 2型糖尿病内皮功能氧化应激 NADPH氧化酶

病理学特征聚类分析法在口腔组织病理学实验课教学中的应用

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中华口腔医学杂志 2023年第5期58卷 457-461页

作者：孙雅楠王丽杨邵东张佳莉武汉大学口腔医学院口腔组织病理学教研室武汉430079

本研究提出一种以学生为主导的新教学方法,即病理学特征聚类分析(pathological feature clustering,PFC)法,学生将具有相同病理特征的不同疾病进行聚类,并对这些疾病进行鉴别诊断。纳入武汉大学口腔医学院2018级77名本科生,采用分层随... 详细信息

本研究提出一种以学生为主导的新教学方法,即病理学特征聚类分析(pathological feature clustering,PFC)法,学生将具有相同病理特征的不同疾病进行聚类,并对这些疾病进行鉴别诊断。纳入武汉大学口腔医学院2018级77名本科生,采用分层随机抽样方法将学生分为4组,每组18~20名同学。每组学生将从以下4个主题中选择一类疾病作为主题并总结疾病的组织学特征:①口腔黏膜疾病;②牙源性肿瘤及瘤样病变,口腔颌面部囊肿;③唾液腺疾病;④上皮源性肿瘤和瘤样病变(简称为主题1、2、3、4)。在讨论特定类型疾病时,选择该类疾病为主题的小组为总结组(SG组),其他组为非总结组(NSG组)。各组学生通过相同的病理特征对疾病进行总结后,通过幻灯片分享展示总结结果,并由教师进行点评和补充。通过比较课前测试成绩和期末考试成绩评价教学效果。通过调查问卷评估学生对PFC教学方法的接受度(≥3分表示满意),问卷包括8个客观问题和1个主观问题,问卷采用李克特量表(Likert-scale)设计,每个问题1~5分,学生根据自身情况对每个问题打分。各组间的差异采用Mann-Whitney U非参数检验进行比较。课前测试结果显示,主题1、2、3的SG组学生得分[分别为(5.6±0.8)、5.0(1.0)和(2.9±1.0)分]均显著高于NSG组[分别为(5.1±1.0)、4.0(2.5)和1.5(2.5)分](U=402.50,P=0.047;U=392.00,P=0.026;U=295.00,P=0.003)。期末考试成绩显示,在主题1、2、3、4中,SG组与NSG组的分数差异均无统计学意义(P>0.05)。经过组间分享PFC教学方法的总结结果后,SG组与NSG组之间的差异缩小,进一步证明PFC教学方法的有效性。问卷调查结果显示,81.8%(63/77)学生对PFC教学方法非常满意,13.0%(10/77)学生感到满意,5.2%(4/77)学生基本满意。根据李克特量表客观评价问卷的反馈,每个问题的平均分在4.19~4.77分之间不等,表明学生认为PFC教学法对口腔病理学的学习有较积极的影响。本研究提出的PFC教学方法可提高本科生的病理鉴别诊断能力。

关键词：病理学,口腔实验课教学组织学特征聚类分析

宫颈鳞癌整合素α5β1蛋白和乙酰肝素酶蛋白的表达及相关性研究

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中国妇幼保健 2014年第22期29卷 3665-3667页

作者：王闯王明娟王一帆齐洁敏承德医学院病理教研室河北承德067000

目的:探讨宫颈鳞癌组织中整合素α5β1蛋白和乙酰肝素酶蛋白表达及临床意义。方法:应用组织芯片技术结合免疫组化方法 (SP法)检测68例宫颈鳞癌组织和20例宫颈正常组织整合素α5β1蛋白和乙酰肝素酶蛋白表达情况,分析两者在宫颈鳞癌组织... 详细信息

目的:探讨宫颈鳞癌组织中整合素α5β1蛋白和乙酰肝素酶蛋白表达及临床意义。方法:应用组织芯片技术结合免疫组化方法 (SP法)检测68例宫颈鳞癌组织和20例宫颈正常组织整合素α5β1蛋白和乙酰肝素酶蛋白表达情况,分析两者在宫颈鳞癌组织中表达的相关性。结果:宫颈鳞癌组织整合素α5β1蛋白和乙酰肝素酶蛋白的阳性表达率分别为77.9%和72.1%,均高于正常宫颈组织中的表达,差异有统计学意义(P<0.05);整合素α5β1蛋白和乙酰肝素酶蛋白在宫颈鳞癌组织中的表达呈正相关关系(r=0.570)。结论:整合素α5β1蛋白和乙酰肝素酶蛋白的高表达与宫颈鳞癌的发生、发展有关,并且具有正协同作用。

关键词：宫颈鳞癌整合素 α5β1 乙酰肝素酶组织芯片

P-选择素蛋白及mRNA在宫颈鳞癌中的表达及生物学行为的研究

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中国妇幼保健 2014年第31期29卷 5160-5162页

作者：王闯王明娟李键淇齐洁敏承德医学院病理教研室河北承德067000

目的：检测宫颈鳞癌组织中P-选择素蛋白及mRNA的表达情况,探讨其在宫颈鳞癌发生发展中的作用。方法：选取2011年1月～2014年4月承德市多家医院手术切除的宫颈鳞癌标本60例为病例组,宫颈正常组织40例为对照组。采用免疫组化方法与逆转录... 详细信息

目的：检测宫颈鳞癌组织中P-选择素蛋白及mRNA的表达情况,探讨其在宫颈鳞癌发生发展中的作用。方法：选取2011年1月～2014年4月承德市多家医院手术切除的宫颈鳞癌标本60例为病例组,宫颈正常组织40例为对照组。采用免疫组化方法与逆转录-聚合酶链式反应（RT-PCR）技术联合检测两组宫颈组织中P-选择素蛋白及mRNA的表达情况。结果：病例组P-选择素蛋白及mRNA的表达阳性率（63.3%和58.3%）均高于对照组（35.0%和27.5%）,差异有统计学意义（P〈0.05）;病例组P-选择素蛋白及mRNA的表达均与分化程度、p TNM分期、淋巴结转移和浸润深度相关（P〈0.05）,而与年龄无关（P〉0.05）。结论：宫颈鳞癌组织中P-选择素蛋白及mRNA的表达与宫颈鳞癌的发生、发展紧密相关。应用免疫组化方法与RT-PCR技术联合检测宫颈鳞癌组织中P-选择素蛋白及mRNA可评估宫颈鳞癌浸润和转移的能力,并为预后的预测提供理论依据。

关键词：宫颈鳞癌 P-选择素 mRNA 免疫组化 RT-PCR

白杨素调控NF-κB/Twist 1信号通路抑制Ⅱ型肺泡上皮细胞间质转分化的机制研究

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中国中药杂志 2021年第1期46卷 146-154页

作者：卢林明付裕李秋阳何晓伟汤娟李先伟皖南医学院病理学教研室安徽芜湖241002 皖南医学院药理学教研室安徽芜湖241002

研究白杨素(ChR)是否通过影响核转录因子κB(NF-κB)/Twist 1信号通路,进而抑制Ⅱ型肺泡上皮细胞间质转分化(EMT)而产生抗肺纤维化作用。动物实验设对照组、博莱霉素组(BLC)、BLC+ChR(50 mg·kg^(-1))和BLC+ChR(100 mg·kg^(-1))剂量组... 详细信息

研究白杨素(ChR)是否通过影响核转录因子κB(NF-κB)/Twist 1信号通路,进而抑制Ⅱ型肺泡上皮细胞间质转分化(EMT)而产生抗肺纤维化作用。动物实验设对照组、博莱霉素组(BLC)、BLC+ChR(50 mg·kg^(-1))和BLC+ChR(100 mg·kg^(-1))剂量组,每组动物15只。气管注射BLC(7500 U·kg^(-1))诱导肺纤维化大鼠模型,造模后连续灌胃给药28 d。细胞实验设对照组、转化生长因子-β1(TGF-β1)(5 ng·mL^(-1))组、TGF-β1+ChR(1,10,100μmol·L^(-1))组,Ⅱ型肺泡上皮细胞先用TGF-β1处理24 h,再用TGF-β1和(或)不同剂量ChR处理48 h。肺组织病理变化和胶原沉积情况分别采用HE染色、Masson染色和免疫组化法进行观察。肺组织和细胞内Ⅰ型胶原(collagenⅠ)、E钙粘蛋白(E-cadherin)、紧密连接蛋白-1(ZO-1)、波形蛋白(vimentin)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、核转录因子κB抑制因子α(IκBα)、NF-κB p65、磷酸化NF-κB p65(p-p65)和Twist 1 mRNA及蛋白表达分别采用qPCR和(或)Western blot法检测。动物实验结果显示,与BLC组相比,ChR给药28 d后,大鼠肺纤维化程度明显减轻;肺组织collagenⅠ表达明显下降(P<0.05或P<0.01);肺组织肺泡上皮细胞EMT程度明显受到抑制[ZO-1和E-cadherin的表达明显升高,α-SMA和vimentin的表达明显降低(P<0.05或P<0.01)];肺组织细胞浆内IκBα和p65磷酸化水平、胞核内NF-κB p65和Twist 1的表达水平明显降低(P<0.05或P<0.01)。细胞实验结果表明,不同剂量ChR能够明显减轻TGF-β1诱导的collagenⅠ的表达(P<0.05或P<0.01),显著抑制细胞EMT[E-cadherin和ZO-1的表达明显升高,vimentin和α-SMA的表达明显降低(P<0.05或P<0.01)],同时能够明显抑制TGF-β1诱导的细胞浆内IκBα和p65磷酸化水平并降低细胞核内NF-κB p65和Twist 1的表达(P<0.05或P<0.01)。综上结果推测ChR能够逆转肺泡Ⅱ型上皮细胞EMT、缓解肺纤维化,其机制可能与其降低细胞内IκBα磷酸化水平、抑制NF-κB p65的磷酸化和其核转移,进而下调Twist 1的表达有关。

关键词：白杨素上皮间质转分化(EMT) 核转录因子κB Twist 1 肺纤维化

侧脑室注射促性腺激素抑制激素/RF酰胺相关肽-3对卵巢摘除术后补充雌激素大鼠子宫腔液影响的蛋白质组学分析

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解剖学报 2021年第4期52卷 499-505页

作者：赵雪莹司丽娜魏萌乔跃兵杨松鹤程露阳承德医学院免疫学教研室承德医学院人体解剖学与组织学胚胎学教研室河北承德067000

目的运用生物信息学方法分析侧脑室注射促性腺激素抑制激素(GnIH)/RF酰胺相关肽-3(RFRP-3)对卵巢摘除术补充雌激素(OEP)大鼠子宫腔液蛋白的影响,探索GnIH/RFRP-3影响子宫的分子机制。方法本研究通过液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)技术结... 详细信息

目的运用生物信息学方法分析侧脑室注射促性腺激素抑制激素(GnIH)/RF酰胺相关肽-3(RFRP-3)对卵巢摘除术补充雌激素(OEP)大鼠子宫腔液蛋白的影响,探索GnIH/RFRP-3影响子宫的分子机制。方法本研究通过液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)技术结合生物信息学分析侧脑室微量注射GnIH对OEP模型大鼠(n=30)子宫腔液蛋白的影响。比较侧脑室注射GnIH/RFRP-3实验组(n=15,给予2 g/L RFRP-3,16μl/kg)与生理盐水对照组(n=15,给予生理盐水16μl/kg) 6 h后子宫腔液的蛋白质组分,利用Uni Prot数据库筛选差异蛋白并对所得差异蛋白进行基因本体论(GO)富集分析和京都基因与基因百科全书(KEGG)通路分析。从STRING数据库获得蛋白相互作用数据,利用Cytoscape 3.7.1软件构建蛋白相互作用网络(PPI)并筛选中心节点蛋白。结果应用LC-MS/MS技术所得质谱数据利用Uni Prot数据库进行搜索鉴定,筛选出差异蛋白419个,其中279个上调,138个下调;GO功能富集分析显示,差异蛋白主要富集于对有机物质的反应,对内源性刺激的反应,对含氧化合物的反应等生物过程;KEGG通路分析显示,差异蛋白在糖酵解、碳代谢、肌动蛋白骨架调节、甲状腺激素合成等代谢途径富集(P病理过程。

关键词：促性腺激素释放激素子宫腔液卵巢摘除术补充雌激素生物信息学大鼠

残余胆固醇水平对急性冠脉综合征患者发病的预测价值

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吉林大学学报（医学版） 2023年第3期49卷 765-769页

作者：巨名飞刘超马志刚赵娟王涂王智昊承德医学院附属医院急诊医学科河北承德067000 承德医学院病理生理学教研室河北承德067000 吉林大学第一医院老年病科吉林长春130021

目的:分析急性冠脉综合征(ACS)患者胆固醇水平的变化,探讨残余胆固醇(RC)水平对ACS发病的预测价值。方法:选取ACS患者220例作为ACS组,选取同期健康体验者220名作为对照组。收集2组研究对象的一般资料,包括血清总胆固醇(TC)、低密度脂蛋... 详细信息

目的:分析急性冠脉综合征(ACS)患者胆固醇水平的变化,探讨残余胆固醇(RC)水平对ACS发病的预测价值。方法:选取ACS患者220例作为ACS组,选取同期健康体验者220名作为对照组。收集2组研究对象的一般资料,包括血清总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-c)和高密度脂蛋白胆固醇(HDL-c)水平,计算血清中非HDL-c (non-HDL-c)和RC水平。采用Logistic回归分析ACS患者的危险因素及其与各血脂成分水平的相关性,采用受试者工作特征(ROC)曲线和曲线下面积(AUC)评价各血脂成分对ACS发病的预测价值。结果:单因素分析,与对照组比较,ACS组患者高血压和吸烟者所占百分率明显升高(P<0.01),血清中TC、RC、LDL-c和non-HDL-c水平明显升高(P<0.01),HDL-c水平明显降低(P<0.01)。多因素Logistic回归分析,高血压(OR=0.496,P=0.005)、吸烟(OR=0.458,P=0.002)、RC水平(OR=24.051,P<0.01)和non-HDL-c水平(OR=1.711,P<0.01)是ACS发病的独立危险因素。ROC曲线分析,与nonHDL-c水平比较,RC水平的AUC较大,对ACS患者发病的预测价值更高。结论:RC水平是ACS发病的独立危险因素,对ACS发病具有一定预测价值。

关键词：急性冠脉综合征血脂残余胆固醇危险因素