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天然药食单体防治酒精性肝损伤的研究进展

临床肝胆病杂志 2023年第10期39卷 2476-2484页

作者：叶敬榕林彦段涵怡任晓岚杨雪张凤英承德医学院中药研究所河北省中药研究与开发重点实验室河北承德067000 承德医学院基础医学院河北承德067000

大量数据显示,酒精性肝损伤(ALI)的患病率呈逐年攀升趋势,且成为肝硬化、肝癌等慢性肝病致死的主要原因之一。现代医学对于ALI的预防主要是通过戒酒,治疗主要是采用具有抗氧化、抗纤维化作用的西药以及后期的营养支持。但西药的整体治... 详细信息

大量数据显示,酒精性肝损伤(ALI)的患病率呈逐年攀升趋势,且成为肝硬化、肝癌等慢性肝病致死的主要原因之一。现代医学对于ALI的预防主要是通过戒酒,治疗主要是采用具有抗氧化、抗纤维化作用的西药以及后期的营养支持。但西药的整体治疗效果并不理想,仅可缓解初期症状,若ALI较为严重,仍需采取手术治疗。研究表明,从天然药物、食物中提取的单体成分对ALI具有明显的防治作用,且安全性高、获取便利。因此,本文系统地概述了防治ALI的主要天然药食单体,并提出药食联用防治ALI的构想。从关注健康全过程的角度出发,以期探求更为有效的预防、保健及治疗方法,为ALI的防控提供研究思路。

关键词：酒精性肝损伤药物疗法饮食疗法

半胱氨酸蛋白酶抑制剂C对脑缺血再灌注大鼠脑皮质中热休克蛋白70、微管相关蛋白轻链3蛋白表达和神经元超微结构的影响

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解剖学报 2019年第2期50卷 158-165页

作者：陈萌杜超田焕娜王爱乐夏晓晓承德医学院基础医学院电子显微镜室承德医学院基础医学院生物化学教研室承德医学院基础医学院基础医学研究所承德市中医院ICU室承德医学院

目的应用不同浓度的半胱氨酸蛋白酶抑制剂C(Cys C)干预脑缺血再灌注大鼠,检测热休克蛋白70(HSP70)和微管相关蛋白轻链3(LC3)蛋白的表达,观察其对神经元超微结构的影响。方法成年雄性SD大鼠60只,随机分成5组:假手术组(sham)、缺血再灌注... 详细信息

目的应用不同浓度的半胱氨酸蛋白酶抑制剂C(Cys C)干预脑缺血再灌注大鼠,检测热休克蛋白70(HSP70)和微管相关蛋白轻链3(LC3)蛋白的表达,观察其对神经元超微结构的影响。方法成年雄性SD大鼠60只,随机分成5组:假手术组(sham)、缺血再灌注组(IR),Cys C低浓度组(Cys C1)、Cys C中浓度组(Cys C2)、Cys C高浓度组(Cys C3),每组12只。采用线栓法制备脑缺血再灌注损伤模型,缺血2 h再灌注24 h后进行改良神经功能损伤严重程度评分(m NSS)。Western blotting半定量检测损伤中心脑皮质组织中HSP70、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ蛋白表达;免疫组织化学法检测HSP70、LC3的阳性细胞个数;免疫荧光双标记法检测皮质神经元自噬相关蛋白LC3和神经元核抗原(Neu N)共染的阳性细胞平均吸光度值;透射电子显微镜下观察神经元超微结构的变化。结果与IR组相比,Cys C1、Cys C2组m NSS评分明显减少(P0. 05); Cys C3组HSP70的表达明显降低(P所改善,而Cys C3组脑皮质神经细胞损伤较重。结论 Cys C可能在一定浓度范围内对缺血再灌注损伤神经细胞有保护作用。浓度过高则导致神经细胞自噬性死亡。

关键词：脑缺血再灌注自噬热休克蛋白70 微管相关蛋白轻链3 免疫印迹法免疫荧光大鼠

新生SD大鼠原代海马组织中神经干细胞的培养和鉴定

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吉林大学学报（医学版） 2023年第3期49卷 795-801页

作者：张玲娣赵亮由涌许倩杨振军承德医学院人体解剖教研室河北承德067000 承德医学院药理学教研室河北承德067000 承德医学院免疫学教研室河北承德067000 承德医学院基础医学研究所河北承德067000

目的:观察原代海马组织中神经干细胞(NSCs)的形态表现和生长规律,为NSCs提取和培养提供依据。方法:提取新生SD大鼠海马组织中NSCs,观察海马组织中NSCs形态表现,流式细胞术检测海马组织中NSCs纯度,免疫荧光法检测NSCs中Nestin和EdU蛋白表... 详细信息

目的:观察原代海马组织中神经干细胞(NSCs)的形态表现和生长规律,为NSCs提取和培养提供依据。方法:提取新生SD大鼠海马组织中NSCs,观察海马组织中NSCs形态表现,流式细胞术检测海马组织中NSCs纯度,免疫荧光法检测NSCs中Nestin和EdU蛋白表达,细胞计数法和CCK-8法检测NSCs增殖活性。结果:培养第0天海马组织中NSCs以单细胞形式悬浮于培养基中;培养第2天海马组织中NSCs开始聚集成大小不等和形态不规则的细胞团块,悬浮生长;培养第8天神经球大小不一,呈圆形或椭圆形,边界清晰,无明显突起。培养第8天NSCs纯度为76.50%~85.40%。NSCs细胞质中Nestin阳性表达呈绿色,细胞核中EdU阳性表达呈红色,神经球为Nestin与EdU共染细胞构成。培养5~11 d,NSCs处于对数生长期,细胞增殖活性较高。结论:NSCs增殖能力强,培养至第8天时纯度较高,体外培养5~11 d时细胞增殖活性较高。

关键词：神经干细胞海马组织增殖活性生长曲线免疫荧光

敲低膜联蛋白A5对人胃癌MGC-803和MKN-45细胞周期的影响

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解剖学报 2018年第3期49卷 342-346页

作者：王小杰赵依纳李欣承德医学院基础医学研究所河北承德067000

目的探讨敲低膜联蛋白A5(ANXA5)对人胃癌细胞系MGC-803、MKN-45细胞周期相关蛋白表达的影响。方法将细胞分为干扰组、阴性对照组及空白对照组,采用脂质体转染法将靶向膜联蛋白A5的siRNA以及阴性siRNA分别转染干扰组和阴性对照组MGC-803... 详细信息

目的探讨敲低膜联蛋白A5(ANXA5)对人胃癌细胞系MGC-803、MKN-45细胞周期相关蛋白表达的影响。方法将细胞分为干扰组、阴性对照组及空白对照组,采用脂质体转染法将靶向膜联蛋白A5的siRNA以及阴性siRNA分别转染干扰组和阴性对照组MGC-803、MKN-45细胞,空白对照组不加任何试剂。转染后48 h采用Real-time PCR和Western bloting分别从mRNA和蛋白水平检测ANXA5的表达,确定ANXA5被敲低之后,Realtime PCR和Western bloting检测各组p21^(cip1)mRNA和P21^(cip1)的表达,Western bloting检测各组细胞周期蛋白D1(cyclin D1)蛋白的表达,流式细胞术检测各组细胞周期的变化情况。结果敲低ANXA5后,与阴性对照组和空白对照组相比,两种细胞的p21^(cip1)mRNA和P21^(cip1)蛋白均显著降低(P<0.05),cyclin D1(P<0.05)也显著降低。结论敲低ANXA5可下调MGC-803、MKN-45细胞中p21^(cip1)mRNA和P21^(cip1)蛋白以及cyclin D1的表达,推测ANXA5可能通过作用于细胞周期相关蛋白而引发细胞周期阻滞从而影响着胃癌的发展。

关键词：膜联蛋白A5 MGC-803细胞 MKN-45细胞细胞周期蛋白D1 实时定量聚合酶链反应免疫印迹法流式细胞术人

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微波辅助热水浸提黄芩茎叶多糖的工艺优化

饲料工业 2024年第10期45卷 106-112页

作者：林彦段涵怡叶敬榕杨雪张凤英承德医学院中药研究所河北省中药研究与开发重点实验室河北承德067000 承德医学院基础医学院河北承德067000

为确定黄芩茎叶多糖的最佳提取工艺,采用单因素逐级优化试验与响应面分析法,以提取液中的多糖含量为指标,优化微波辅助热水浸提黄芩茎叶多糖的提取工艺。试验结果表明:单因素逐级优化试验筛选获得黄芩茎叶多糖的最佳提取条件为:微波预... 详细信息

为确定黄芩茎叶多糖的最佳提取工艺,采用单因素逐级优化试验与响应面分析法,以提取液中的多糖含量为指标,优化微波辅助热水浸提黄芩茎叶多糖的提取工艺。试验结果表明:单因素逐级优化试验筛选获得黄芩茎叶多糖的最佳提取条件为:微波预处理时间5 min,微波预处理功率800 W,料液比1∶35(g/mL),水提时间4 h,水提温度100℃,在此条件下黄芩茎叶多糖的提取率为17.39%。通过响应面分析法优化后所得黄芩茎叶多糖的最佳提取条件为:微波预处理时间312 s,微波预处理功率800 W,料液比1∶34(g/mL),水提时间280 min,水提温度100℃,在此条件下黄芩茎叶多糖的提取率为17.49%。优化得到的黄芩茎叶多糖提取工艺操作简单,合理可行。

关键词：黄芩茎叶多糖微波响应面工艺优化

膜联蛋白A7低表达对胃癌MGC-803细胞增殖和凋亡的影响

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中国肿瘤生物治疗杂志 2015年第3期22卷 322-325页

作者：田焕娜梁秀军王小杰陈龙李欣承德医学院基础医学研究所河北承德067000

目的:探讨RNA干扰技术靶向沉默膜联蛋白A7(anexin A7,ANXA7)的表达对人胃癌MGC-803细胞增殖和凋亡的影响。方法:实验分为3组,以靶向ANXA7的siRNA转染MGC-803细胞为siRNA干扰组,另设阴性siRNA对照和空白对照组。Western blotting检测转染... 详细信息

目的:探讨RNA干扰技术靶向沉默膜联蛋白A7(anexin A7,ANXA7)的表达对人胃癌MGC-803细胞增殖和凋亡的影响。方法:实验分为3组,以靶向ANXA7的siRNA转染MGC-803细胞为siRNA干扰组,另设阴性siRNA对照和空白对照组。Western blotting检测转染后MGC-803细胞中ANXA7蛋白的表达,应用MTT、集落形成和流式细胞术检测ANXA7下调对MGC-803细胞增殖、凋亡的影响。结果:靶向ANXA7的siRNA转染后MGC-803细胞中ANXA7的表达较阴性对照和空白对照组细胞明显降低[(21.79±1.72)%vs(99.87±5.13)%、(93.45±4.89)%,均P0.05)。结论:ANXA7低表达可抑制胃癌细胞MGC-803增殖,而对细胞凋亡无明显影响。

关键词：胃癌 MGC-803细胞膜联蛋白7 增殖凋亡

黄芩黄酮的微波-超声法提取及降胆固醇活性评价

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饲料工业 2023年第11期44卷 98-104页

作者：王昱文段涵怡董悦君范怡然杨颖赵佳迪杨雪承德医学院基础医学院河北承德067000 承德医学院中药研究所河北省中药研究与开发重点实验室河北承德067000

试验选择黄芩根为原料,以黄芩中黄酮提取率为评价指标,对比了微波、超声波、超声-微波及微波-超声四种方法对黄芩黄酮水提效果的影响,并通过体外降胆固醇试验研究不同处理所得黄芩黄酮的降胆固醇效果。结果表明:微波-超声法对黄芩黄酮... 详细信息

试验选择黄芩根为原料,以黄芩中黄酮提取率为评价指标,对比了微波、超声波、超声-微波及微波-超声四种方法对黄芩黄酮水提效果的影响,并通过体外降胆固醇试验研究不同处理所得黄芩黄酮的降胆固醇效果。结果表明:微波-超声法对黄芩黄酮提取率的效果最明显,优化后的工艺条件为物料浓度40 g/L、提取时间75 min、微波时间3 min、微波功率300 W、超声时间20 min、超声频率40 kHz、超声功率密度100 W/L,该条件下黄芩黄酮提取率为6.71%,与单一溶剂提取相比提高了32.11%。体外降胆固醇试验结果表明,黄芩黄酮能显著抑制胆固醇的溶解度,与对照组相比提高了26.70%。因此,采用微波-超声法所提取的黄芩黄酮的含量较高,并具有一定的降胆固醇活性。

关键词：黄芩黄酮微波超声降胆固醇

Galecin-3在膜联蛋白A7表达抑制的HeLa细胞中的表达变化

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解剖学报 2014年第2期45卷 234-238页

作者：李欣王小杰许倩陈龙梁秀军承德医学院基础医学研究所河北承德067000

目的探讨膜联蛋白A7(ANXA7)表达抑制的HeLa细胞galectin-3(gal-3)的表达改变。方法将细胞分为实验组、阴性对照组和空白对照组。采用RNA干扰技术将靶向ANXA7的siRNA和阴性对照siRNA脂质体2000转染法分别转染宫颈癌细胞系HeLa细胞,空白... 详细信息

目的探讨膜联蛋白A7(ANXA7)表达抑制的HeLa细胞galectin-3(gal-3)的表达改变。方法将细胞分为实验组、阴性对照组和空白对照组。采用RNA干扰技术将靶向ANXA7的siRNA和阴性对照siRNA脂质体2000转染法分别转染宫颈癌细胞系HeLa细胞,空白对照组不予任何处理。转染48h后采用Western blotting法和RT-PCR法分别在蛋白水平和mRNA水平进行抑制效果的鉴定。Western blotting和实时定量PCR法分别检测ANXA7表达抑制的HeLa细胞中galectin-3的表达改变。结果靶向ANXA7的siRNA可显著抑制ANXA7的表达;当ANXA7表达受抑后,galectin-3在HeLa细胞中的表达显著下降,与阴性对照组和空白对照组相比,差异有显著性(P<0.05)。结论 ANXA7表达抑制的宫颈癌细胞系HeLa细胞中galectin-3的表达显著下调,这可能是ANXA7表达受抑的细胞行为学发生改变的机制之一。

关键词：膜联蛋白A7 galectin-3 宫颈癌细胞系HeLa RNA干扰实时定量聚合酶链反应人

基于体外消化筛选黄芩抗氧化成分的提取工艺研究

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中国饲料 2023年第19期 45-53页

作者：叶敬榕林彦段涵怡杨雪任晓岚张凤英承德医学院中药研究所河北省中药研究与开发重点实验室河北承德067000 承德医学院基础医学院河北承德067000

为获得具有高抗氧化活性的黄芩提取物,本试验对比水提和醇提两种提取方式,并将提取物冻干后复溶成水提水溶、醇提醇溶、醇提水溶三种状态,以胃肠模拟消化后产物的DPPH自由基清除率、总抗氧化能力、·OH自由基清除率、总还原能力和超氧... 详细信息

为获得具有高抗氧化活性的黄芩提取物,本试验对比水提和醇提两种提取方式,并将提取物冻干后复溶成水提水溶、醇提醇溶、醇提水溶三种状态,以胃肠模拟消化后产物的DPPH自由基清除率、总抗氧化能力、·OH自由基清除率、总还原能力和超氧阴离子清除率五种抗氧化活性指标的综合秩和比(RSR值)为判断标准,确定出最佳的提取溶剂。并在此基础上采用单因素试验初步确定其提取工艺的主要影响因素及水平,再结合析因设计试验分析提取工艺各因素之间的交互作用,最终获得最佳的提取工艺参数。通过RSR值排序的结果表明:两种冻干粉在复溶后的抗氧化活性从大到小的顺序为:水提水溶、醇提水溶、醇提醇溶。单因素试验最佳提取工艺为:温度保持微沸,提取时间120 min,液料比50:1(mL/g)。析因设计试验最佳提取工艺为:温度保持微沸,提取时间120 min,液料比60:1(mL/g)。优选的工艺提取液其经过消化后DPPH自由基清除率为39.48%、ABTS+自由基清除率为58.85%、·OH自由基清除率为48.63%、总还原能力为0.49、超氧阴离子清除率为28.87%,可为黄芩抗氧化活性物质的提取提供重要参考依据。

关键词：黄芩提取物抗氧化胃肠模拟消化水提