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高效液相色谱法测定甜叶菊中Stevioside和Rebaudioside A的含量

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天然产物研究与开发 2010年第B08期22卷 80-83页

作者：寇彦杰秦岭阳明福成都华高药业有限公司成都610041

建立高效液相色谱法测定甜叶菊中甜菊甙（Stevioside）和莱鲍迪甙A（Rebaudioside A）的含量。色谱条件：色谱柱为Agilent ZORBAX NH2 4．6×250mm 5μm；流动相为乙腈-pH3．0磷酸溶液（80：20）；流速1．0mL·min^-1；检测波长210nm；... 详细信息

建立高效液相色谱法测定甜叶菊中甜菊甙（Stevioside）和莱鲍迪甙A（Rebaudioside A）的含量。色谱条件：色谱柱为Agilent ZORBAX NH2 4．6×250mm 5μm；流动相为乙腈-pH3．0磷酸溶液（80：20）；流速1．0mL·min^-1；检测波长210nm；柱温40℃；进样量20μL。线性范围为0．1268～2．0456mg·mL^-1（r=1），加标平均回收率为98．16％，RSD为0．80％（n=6）。本方法准确度高、精密度高、重复性好、简捷易操作，可以作为甜叶菊中甜菊甙和莱鲍迪甙A含量的测定方法。

关键词：甜叶菊 stevioside rebaudioside A 高效液相色谱法

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十五味赛尔斗丸的质量标准研究

中国现代应用药学 2021年第20期38卷 2524-2529页

作者：潘琳高洁毕若红韩云凤石懿唐茜张金魁切尼项毛赖先荣成都中医药大学成都611137 青海久美藏药药业有限公司西宁810000

目的建立十五味赛尔斗丸定性定量检测方法,为其质量标准提高提供依据。方法采用薄层色谱法,对制剂中诃子、小檗皮、风毛菊进行定性鉴别。通过HPLC同时测定没食子酸、木兰花碱、芒果苷、鞣花酸、盐酸小檗碱的含量。结果TLC鉴别方法专属性... 详细信息

目的建立十五味赛尔斗丸定性定量检测方法,为其质量标准提高提供依据。方法采用薄层色谱法,对制剂中诃子、小檗皮、风毛菊进行定性鉴别。通过HPLC同时测定没食子酸、木兰花碱、芒果苷、鞣花酸、盐酸小檗碱的含量。结果TLC鉴别方法专属性好,斑点清晰且分离度好,阴性对照无干扰;含量测定结果显示,没食子酸在0.05464~0.43712μg,木兰花碱在0.09012~0.72096μg,芒果苷在0.01264~0.10272μg,鞣花酸0.04056~0.32448μg,盐酸小檗碱在0.03468~0.27744μg,线性关系良好。仪器精密度、重复性、稳定性、加样回收率的RSD值均符合要求。结论所建立的方法操作简单,重复性较好,可用于十五味赛尔斗丸的质量控制研究。

关键词：十五味赛尔斗丸质量标准薄层色谱含量测定

高效液相色谱示差折射法测定青蒿中青蒿素的含量

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天然产物研究与开发 2007年第B08期19卷 277-279页

作者：寇彦杰刘智宇成都华高药业有限公司成都610041

采用高效液相色谱示差折射法测定青蒿中青蒿素的含量。色谱条件：Kromasil KR100-C18 E17580（250×4．6mm×5μm）色谱柱；流动相甲醇-水（72：28）；流速1．0mL／min；柱温：30℃，进样量20μL。结果表明：其线性范围为82．43-1648．6... 详细信息

采用高效液相色谱示差折射法测定青蒿中青蒿素的含量。色谱条件：Kromasil KR100-C18 E17580（250×4．6mm×5μm）色谱柱；流动相甲醇-水（72：28）；流速1．0mL／min；柱温：30℃，进样量20μL。结果表明：其线性范围为82．43-1648．6μg／mL（r=0．9999）；平均回收率98．22％；RSD为1．04％（n=6）。本方法准确度高、重现性好、精密度高、简捷易操作。可以作为检测青蒿中青蒿素含量的检测方法。

关键词：青蒿青蒿素高效液相色谱示差折射法含量测定

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平凡的人们给我太多感动!

中国水产 2008年第6期 10-11页

作者：李悦悦成都芳草药业有限公司 610091

2008年5月12日14时28分，四川省发生里氏8．0级慢烈地震，全国大半地区有明显震感，震中位于阿坝州汶川县，地震造成了严重的生命和财产损失。这次受灾的范围主要集中在四川，另外陕西、甘肃、重庆等地也有不小的损失，灾区的水产养殖... 详细信息

2008年5月12日14时28分，四川省发生里氏8．0级慢烈地震，全国大半地区有明显震感，震中位于阿坝州汶川县，地震造成了严重的生命和财产损失。这次受灾的范围主要集中在四川，另外陕西、甘肃、重庆等地也有不小的损失，灾区的水产养殖业也遭到了重大损失。身处离震中90公里的成都，我们没有亲身经历瞬间的生死离别，没有见证千钧一发的一线救援，我们却一次又一次被平凡的人们感动着，豪迈的语言，撕心的呼喊，离我们很近，却又离我们很远。平凡中看到四川水产人的坚强!全国水产人的团结。

关键词：水产养殖业财产损失四川省汶川县阿坝州地震

DV50纳米过滤去除静注人免疫球蛋白中的病毒时流速的影响因素

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中国生物制品学杂志 2012年第12期25卷 1712-1713,1718页

作者：郑丰平王炳郑琪吕家成成都蓉生药业有限责任公司成都610041

目的分析DV50纳米过滤去除静注人免疫球蛋白(Human immunoglobulin for intravenous injection,IVIG)病毒时流速的影响因素。方法分别采用浊度仪、密度仪检测IVIG原液的浊度及浓度,随机选取5批浓度相近、浊度不同的IVIG原液及5批浊度相... 详细信息

目的分析DV50纳米过滤去除静注人免疫球蛋白(Human immunoglobulin for intravenous injection,IVIG)病毒时流速的影响因素。方法分别采用浊度仪、密度仪检测IVIG原液的浊度及浓度,随机选取5批浓度相近、浊度不同的IVIG原液及5批浊度相近、浓度不同的IVIG原液,分别经同一批号纳米滤芯过滤,计算平均流速;随机选取5批浊度、浓度相近的IVIG原液,经不同批号的纳米滤芯过滤,计算平均流速。结果随着制品浊度的升高,平均流速逐渐降低;制品浓度与平均流速不呈线性对应关系;不同批号的纳米滤芯,纳米平均流速相差较大。结论制品浊度对流速具有一定的影响,浓度对流速基本无影响,纳米滤芯对流速的影响最大。本实验为实际生产中控制纳米过滤去除病毒时的流速及改进生产工艺提供了参考。

关键词：纳米过滤病毒浊度静注人免疫球蛋白

免疫抗体文库的构建及亚nM高亲和力人源抗体的筛选

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中国生物制品学杂志 2010年第12期23卷 1286-1290页

作者：聂艳桃何太平雷韬葛永红柏玉碧张聪明宋春雷谭晓晶唐菁燕杨波成都蓉生药业有限责任公司成都610023

目的构建免疫抗体文库,并筛选亚nM高亲和力人源抗体。方法采用破伤风类毒素(Tetanus toxoid,TT)免疫的高效价人B淋巴细胞,经PCR扩增可变区基因,构建免疫抗体文库,并筛选高亲和力人源抗体。将获得的抗体基因片段转换成全分子,进行真核表... 详细信息

目的构建免疫抗体文库,并筛选亚nM高亲和力人源抗体。方法采用破伤风类毒素(Tetanus toxoid,TT)免疫的高效价人B淋巴细胞,经PCR扩增可变区基因,构建免疫抗体文库,并筛选高亲和力人源抗体。将获得的抗体基因片段转换成全分子,进行真核表达和纯化,并与人抗TT多克隆抗体进行比较分析。结果构建的人破伤风免疫噬菌体抗体库库容为4.5×106,多样性符合引物设计要求,经筛选获得相对亲和力为10-10M的高亲和力人源抗体,其体内中和活性高于人多克隆抗体。结论根据抗体基因使用频率设计引物构建小容量免疫抗体文库,可获得亚nM的高亲和力人源抗体,该策略可用于抗感染性疾病人源抗体的开发。

关键词：噬菌体文库人源抗体抗体亲和力中和活性破伤风毒素

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静注甲型H1N1流感人免疫球蛋白的研制

中国生物制品学杂志 2011年第11期24卷 1314-1317页

作者：杨汇川张燕高阳何建琴吕加成刘素芳王焰吴强杨春张雪梅成都蓉生药业有限责任公司成都610041

目的研制高效价静注甲型H1N1流感人免疫球蛋白。方法用甲型H1N1流感疫苗(简称甲流)对固定供血浆者按疫苗说明书免疫后2周开始采集原料血浆,采用血凝抑制法检测原料血浆和制品的甲流抗体效价;采用柱层析法从高效价甲流免疫血浆中提取富含... 详细信息

目的研制高效价静注甲型H1N1流感人免疫球蛋白。方法用甲型H1N1流感疫苗(简称甲流)对固定供血浆者按疫苗说明书免疫后2周开始采集原料血浆,采用血凝抑制法检测原料血浆和制品的甲流抗体效价;采用柱层析法从高效价甲流免疫血浆中提取富含IgM免疫球蛋白的样品,模拟低温乙醇蛋白分离法工艺从小量混合血浆分离IgG样品,测定血浆和提取样品的甲流抗体效价,分析甲流中和抗体效价与IgG、IgM含量的对应关系,判断甲流中和抗体的免疫球蛋白类型;按本公司静脉注射人免疫球蛋白(Intravenous immunoglobulin,IVIG)生产工艺制备静注甲型H1N1流感人免疫球蛋白,并与普通IVIG及相应合并血浆的甲流抗体效价进行比较。结果筛选到甲流抗体效价≥320 HU/ml的合格血浆9 866袋,合格率达33.5%,其中抗体效价≥640 HU/ml的血浆占合格血浆的49%,血浆质量符合《中国药典》三部(2010版)"血液制品生产用人血浆规程"要求;甲流抗体效价与IgG含量呈相应比例关系,而与IgM含量无关,甲流中和抗体的免疫球蛋白类型以IgG为主;制备的甲流人免疫球蛋白制品的甲流中和抗体效价达2 560 HU/ml,为普通IVIG的197倍,其他质量指标符合《中国药典》三部(2010版)"静注人免疫球蛋白制检规程"要求。结论成功研制了静注甲型H1N1流感人免疫球蛋白,在甲流疫情得到有效控制的情况下,仍具有战略储备意义。

关键词：流感病毒A型 H1N1亚型血浆免疫球蛋白G

四川地区供浆员中肠道病毒71型中和抗体效价的分布

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中国生物制品学杂志 2011年第11期24卷 1282-1284,1292页

作者：秦婷婷杨春李小姣刘瑞熙武志强张航刘波刘兰军成都蓉生药业有限责任公司成都610061

目的通过检测EV71中和抗体效价(EV71-NT),对四川地区供浆员中EV71-NT的分布进行分析。方法应用基于细胞病变抑制的EV71-NT检测方法,检测四川地区349份健康人血浆的EV71-NT,同时用肠道病毒(EV)71型抗体诊断试剂盒(酶联免疫法)检测其EV71... 详细信息

目的通过检测EV71中和抗体效价(EV71-NT),对四川地区供浆员中EV71-NT的分布进行分析。方法应用基于细胞病变抑制的EV71-NT检测方法,检测四川地区349份健康人血浆的EV71-NT,同时用肠道病毒(EV)71型抗体诊断试剂盒(酶联免疫法)检测其EV71抗体,并分析二者的相关性;检测四川地区21 817份健康人血浆中EV71-NT的分布。结果该EV71-NT检测方法具有较好的重复性,测定高效价和低效价EV71中和抗体标准品的变异系数分别为30.9%和33.6%;该方法与ELISA法的相关性较差(r=0.024);四川地区21 817份健康人血浆中含高效价EV71中和抗体的比例在7.1%～18.4%之间,EV71高效价血浆占10.3%。结论在四川地区供浆员血浆中含有一定比例的高效价EV71中和抗体,可以直接从自然感染人群中筛选EV71抗体血浆进行EV71特异性免疫球蛋白的研制。

关键词：肠道病毒A型人中和抗体免疫球蛋白类静脉内四川

一种人巨细胞病毒中和抗体效价快速检测方法的建立

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中国生物制品学杂志 2011年第7期24卷 849-852页

作者：刘兰军杨春秦婷婷刘瑞熙李小姣张航武志强成都蓉生药业有限责任公司成都610061

目的建立一种人巨细胞病毒(Human cytomegalovirus,HCMV)中和抗体效价检测方法。方法系列稀释的待检样品与等体积HCMV混合,中和反应1 h后,接种MRC-5细胞,37℃孵育过夜,依次加入HCMV anti-IE1单抗、Biotin-SP-Goat antiMouse IgG、Peroxidase-Labeled Streptavidin及底物,对HCMV感染细胞的细胞核进行特异性染色和定位,采集显微图像,计数每孔中感染细胞数。采用Reed-Muench计算样品的中和效价。并对建立的方法进行精密性、耐用性和专属性验证。结果感染HCMV的MRC-5细胞,出现典型的CPE,且其细胞核出现特异性着色颗粒,而未感染的细胞则未出现着色颗粒。该方法重复性检测的变异系数为3.26%,中间精密性检测的变异系数为1.05%;样品与等体积中和病毒液于37℃中和反应55、60和65 min,中和抗体效价差异无统计学意义(P>0.05);水痘病毒感染的MRC-5细胞未出现特异性着色颗粒,10份不同类型的样品与MRC-5细胞共同孵育后,也未出现特异性着色颗粒。结论已建立了一种HCMV中和抗体效价检测方法,该方法快速、客观,精密性高,耐用性好,专属性强,可用于血浆和IVIG中HCMV中和抗体效价的检测。

关键词：巨细胞病毒中和抗体免疫球蛋白