一种人巨细胞病毒中和抗体效价快速检测方法的建立

作     者：刘兰军 杨春 秦婷婷 刘瑞熙 李小姣 张航 武志强 LIU Lan-jun;YANG Chun;QIN Ting-ting;LIU Rui-xi;LI Xiao-jiao;ZHANG Hang;WU Zhi-qiang

作者机构：成都蓉生药业有限责任公司成都610061 

出 版 物：《中国生物制品学杂志》 (Chinese Journal of Biologicals)

年 卷 期：2011年第24卷第7期

页      面：849-852页

核心收录：

学科分类：1007[医学-药学(可授医学、理学学位)] 100705[医学-微生物与生化药学] 1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100102[医学-免疫学] 100103[医学-病原生物学] 10[医学] 

主　　题：巨细胞病毒 中和抗体 免疫球蛋白 

摘      要：目的建立一种人巨细胞病毒(Human cytomegalovirus,HCMV)中和抗体效价检测方法。方法系列稀释的待检样品与等体积HCMV混合,中和反应1 h后,接种MRC-5细胞,37℃孵育过夜,依次加入HCMV anti-IE1单抗、Biotin-SP-Goat antiMouse IgG、Peroxidase-Labeled Streptavidin及底物,对HCMV感染细胞的细胞核进行特异性染色和定位,采集显微图像,计数每孔中感染细胞数。采用Reed-Muench计算样品的中和效价。并对建立的方法进行精密性、耐用性和专属性验证。结果感染HCMV的MRC-5细胞,出现典型的CPE,且其细胞核出现特异性着色颗粒,而未感染的细胞则未出现着色颗粒。该方法重复性检测的变异系数为3.26%,中间精密性检测的变异系数为1.05%;样品与等体积中和病毒液于37℃中和反应55、60和65 min,中和抗体效价差异无统计学意义(P0.05);水痘病毒感染的MRC-5细胞未出现特异性着色颗粒,10份不同类型的样品与MRC-5细胞共同孵育后,也未出现特异性着色颗粒。结论已建立了一种HCMV中和抗体效价检测方法,该方法快速、客观,精密性高,耐用性好,专属性强,可用于血浆和IVIG中HCMV中和抗体效价的检测。