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基于UPLC-MS/MS测定比格犬血浆中炒酸枣仁提取物9种成分及其药代动力学研究

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中国中药杂志 2024年第9期49卷 2501-2511页

作者：夏可欣于歆吴思玚赵丽凤王玉艳康琛袁征李鹰飞中国中医科学院中药研究所北京100700 山东中医药大学中医学院山东济南250301

该研究建立了一种简便、快速、灵敏的超高效液相色谱-串联质谱法(UPLC-MS/MS),能够同时测定给药炒酸枣仁提取物后比格犬血浆中木兰花碱、乌药碱、维采宁Ⅱ、异斯皮诺素、斯皮诺素、当药黄素、N-去甲基荷叶碱、6'''-阿魏酰斯皮诺素和酸... 详细信息

该研究建立了一种简便、快速、灵敏的超高效液相色谱-串联质谱法(UPLC-MS/MS),能够同时测定给药炒酸枣仁提取物后比格犬血浆中木兰花碱、乌药碱、维采宁Ⅱ、异斯皮诺素、斯皮诺素、当药黄素、N-去甲基荷叶碱、6'''-阿魏酰斯皮诺素和酸枣仁皂苷B的含量。采用Waters HSS-T3 C_(18)色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.8μm),流动相为甲醇-水(含0.01%甲酸),梯度洗脱,9种成分和2种内标于8 min内完全分离;质谱检测在电喷雾离子源正、负离子切换模式下,采用多反应监测模式进行检测。分析方法经特异性、选择性、线性范围、准确度、精密度、回收率、基质效应和稳定性验证,可满足犬灌胃炒酸枣仁提取物后的药代动力学的研究要求。结果显示,比格犬单次灌胃给药后,木兰花碱、乌药碱、维采宁Ⅱ、异斯皮诺素、斯皮诺素、6'''-阿魏酰斯皮诺素和酸枣仁皂苷B的T_(max)为2.40~3.20 h,t1/2为2.08~6.79 h,其中木兰花碱和斯皮诺素的暴露量相对较高,C_(max)分别为76.7、31.5 ng·mL^(-1),AUC_(0-∞)分别为581、315 ng·h·mL^(-1);其余5种暴露较弱的化合物的C_(max)为0.81~13.0 ng·mL^(-1),AUC_(0-∞)为6.00~106 ng·h·mL^(-1)。该研究为炒酸枣仁后续相关药理研究提供了参考依据。

关键词：炒酸枣仁比格犬药代动力学 UPLC-MS/MS

中药治疗慢性肾炎合并脂代谢紊乱的临床应用和作用机制研究进展

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中草药 2024年第19期55卷 6820-6830页

作者：马东云张露颜培正范晓璇江明翰张庆祥山东中医药大学中医学院

慢性肾炎是由多种原因导致的肾功能不全性疾病，临床发现，本病多伴有脂代谢紊乱，而脂代谢紊乱又会加重肾炎的发生。慢性肾炎合并脂代谢紊乱的病位在肾，与脾肺肝相关，基本病机为本虚标实，治疗上注重健脾益肾、活血祛湿，又可根据其... 详细信息

慢性肾炎是由多种原因导致的肾功能不全性疾病，临床发现，本病多伴有脂代谢紊乱，而脂代谢紊乱又会加重肾炎的发生。慢性肾炎合并脂代谢紊乱的病位在肾，与脾肺肝相关，基本病机为本虚标实，治疗上注重健脾益肾、活血祛湿，又可根据其病机特点，分别予以养肝、调肺之法。中医学注重整体观念和辨证论治，结合望闻问切四诊合参，采用个体化处方，临床疗效显著。将对近10年慢性肾炎合并脂代谢紊乱的病因病机、中药治疗以及作用机制进行总结，以期为中医药治疗本病提供优选思路，进而更好的服务于临床。

关键词：慢性肾炎脂代谢紊乱临床应用机制研究黄芪茯苓

基于中药超分子探究甘草配伍石膏与CaSO·2HO的汤剂相态、物质形态和晶型状态差异

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中国中药杂志 2024年

作者：张瑶芝皮雯敏谭心如徐冉王旭许明阳黄雪梅王鹏龙北京中医药大学中药学院&中医学院

以甘草-石膏药对为研究对象，运用中药超分子化学研究矿物药石膏与其主要成分CaSO4·2H2O分别配伍植物药甘草的差异性，以初步探讨临床配伍应用石膏的科学内涵。采用马尔文粒度仪、扫描电子显微镜、电导率仪观察并测定石膏、CaSO4·2H2... 详细信息

以甘草-石膏药对为研究对象，运用中药超分子化学研究矿物药石膏与其主要成分CaSO4·2H2O分别配伍植物药甘草的差异性，以初步探讨临床配伍应用石膏的科学内涵。采用马尔文粒度仪、扫描电子显微镜、电导率仪观察并测定石膏、CaSO4·2H2O及二者分别与甘草共煎后水煎液的微观形貌、粒径、电导率等物理指标；运用电感耦合等离子体发射光谱仪检测甘草-石膏、甘草-CaSO4·2H2O中的无机金属元素，采用等温滴定量热仪量化石膏、CaSO4·2H2O与甘草间的相互作用，利用傅里叶变换红外光谱仪分析甘草-石膏、甘草-CaSO4·2H2O的特征吸收峰变化，结合X-射线衍射仪测定2种配伍组合的晶体结构、物相组成；进一步以甘草酸代替甘草，分别与石膏、CaSO4·2H2O的药材/水煎液冻干粉进行共煎，以XRD结果进行验证分析。结果表明CaSO4·2H2O虽为石膏主要成分，但二者单煎液以及与甘草的共煎液存在明显不同，具体表现在：①CaSO4·2H2O与石膏药材的微观形貌均为无定形纤维状，但二者单煎液的粒径、电导率差异明显；②电镜下，甘草-CaSO4·2H2O的形貌不规则，甘草-石膏的形貌呈均匀纳米级颗粒；③甘草-CaSO4·2H2O、甘草-石膏的粒径、电位、电导率等结果差别较大，且较单煎结果趋势不一致；④甘草-石膏较甘草-CaSO4·2H2O间的分子结合能力、官能团结构变化程度更强；⑤CaSO4·2H2O与石膏单煎液冻干粉的晶型差别明显，且二者与甘草共煎液的冻干粉晶型也明显不同。引起上述差异的原因是石膏具有较CaSO4·2H2O更丰富的微量元素，甘草酸代替甘草分别与石膏和CaSO4·2H2O的共煎物XRD结果进一步证明了石膏中微量元素对中药超分子形成的重要性，该研究初步揭示配伍矿物药石膏与CaSO4·2H2O对汤剂相态、物质形态和晶型状态的影响，为中医临床合理使用石膏提供依据。

关键词：矿物药石膏甘草 CaSO ·2H O 微量元素中药超分子

中药调控肠道菌群改善溃疡性结肠炎大肠湿热证的研究进展

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中国实验方剂学杂志 2024年第1期30卷 244-254页

作者：龙静怡梁爱华天津中医药大学中医学院天津301617 中国中医科学院中药研究所中药鉴定与安全性检测评估北京市重点实验室北京100700

结合溃疡性结肠炎(UC)主要证候大肠湿热证的相关临床变化及其机制,收集UC该证型各肠道菌群的变化规律,探索其变化机制。通过对大肠湿热证UC治疗手段的分类归纳,发现其中代表性的中药及复方,并探索其治病机制,因而与肠道菌群相关机制相结... 详细信息

结合溃疡性结肠炎(UC)主要证候大肠湿热证的相关临床变化及其机制,收集UC该证型各肠道菌群的变化规律,探索其变化机制。通过对大肠湿热证UC治疗手段的分类归纳,发现其中代表性的中药及复方,并探索其治病机制,因而与肠道菌群相关机制相结合,根据其相同的机制探索其可能的内在联系。从而发现中药及复方对大肠湿热证UC患者肠道菌群精准调控的可行性。整理知网大量相关文献发现,目前特征菌群嗜黏蛋白阿克曼菌、大肠埃希菌、肠球菌、双歧杆菌和乳酸杆菌等益生菌与中药在大肠湿热证UC中关系最为密切,但由于临床研究仍有诸多不足,肠道菌群受多方面影响,目前还不能精准刻画肠道菌群和疾病相关的变化,且中药调控肠道菌群相关机制研究也有欠缺,中药及复方对大肠湿热证UC患者肠道菌群精准调控的可行性仍然值得商榷。对于此,阐明大肠湿热证UC临床证候的生物学内涵及证候与肠道菌群的相互关系等科学问题成为首要研究任务,除此之外,还应重视机体中药的肠腔暴露谱与肠道菌群的相互作用研究。最后,中医思维与现代医学理念应互相结合,积极开展并推进制定中医药调控肠道菌群治疗UC策略的研究。

关键词：溃疡性结肠炎肠道菌群大肠湿热证综述中药调控

人参皂苷Rg通过miR-155/Notch1/Hes1通路调控自噬减轻HL-1细胞缺氧/复氧损伤的机制研究

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中国中药杂志 2024年

作者：张会雨辛高杰陈原原曹策崔晓珊高佳明郭浩付建华滨州医学院中医学院中国中医科学院西苑医院基础医学研究所

该文探讨人参皂苷Rg1通过微小RNA155（miR-155）/神经源性基因Notch同源蛋白1（neurogenic gene Notch homologous protein 1，Notch1）/发状分裂相关增强子1（hairy and enhancer of split 1，Hes1）通路调控细胞自噬减轻HL-1心肌细胞缺氧复氧（hypoxia/reoxygenation，H/R）损伤的具体机制。构建H/R损伤HL-1细胞模型，使用人参皂苷Rg1和（或）Notch1抑制剂（DAPT）、miR-155 mimics处理细胞。cell counting kit（CCK）-8检测H/R损伤HL-1细胞的相对活力；乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase，LDH）试剂盒检测细胞培养基上清液中LDH的含量；透射电镜观察细胞自噬小体；MDC法检测细胞自噬水平；荧光定量聚合酶链式反应检测miR-155、Notch1、Hes1、微管相关蛋白1轻链3（microtubule-associated protein1 light chain 3，LC3）的mRNA水平；蛋白免疫印迹法检测Notch1、Hes1、LC3Ⅰ、LC3Ⅱ的蛋白表达水平。结果显示，H/R损伤后HL-1细胞活性降低、LDH漏出量增加，细胞内自噬小体增多，LC3的mRNA水平和LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值升高；人参皂苷Rg1能提高细胞活性，减少LDH漏出量，减少细胞内自噬小体数量，降低细胞内LC3的mRNA水平，降低LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值，通过抑制细胞自噬发挥心肌细胞保护作用，Notch1抑制剂或miR-155过表达则抑制人参皂苷Rg1的作用，促进细胞自噬，加重HL-1细胞H/R损伤；人参皂苷Rg1抑制H/R损伤造成的Notch1、Hes1 mRNA水平和蛋白表达降低、miR-155 mRNA水平升高，Notch1抑制剂或miR-155过表达则呈现相反作用。综上所述，人参皂苷Rg1通过miR-155/Notch1/Hes1通路调控自噬减轻HL-1心肌细胞H/R损伤。

关键词： MIRI 自噬人参皂苷Rg miR-155 Notch1 Hes1

湿生扁蕾呫吨酮对UC肠纤维化-CAC演变模型大鼠TGF-β1/Smad通路及EMT因子表达的影响

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中药药理与临床 2024年第7期40卷 63-67页

作者：卢年华靳展洪叶张永鹏张萌张海霞李俊珂赵慧巧靳国印河北北方学院中医学院张家口075000

目的:探讨湿生扁蕾呫吨酮对大鼠溃疡性结肠炎(UC)肠纤维化向结肠炎相关性结肠癌(CAC)演变中TGF-β1/Smad通路及上皮间质转化(EMT)因子表达的影响。方法:70只Wistar大鼠随机分为正常对照组、UC肠纤维模型对照组、CAC模型对照组、湿生扁... 详细信息

目的:探讨湿生扁蕾呫吨酮对大鼠溃疡性结肠炎(UC)肠纤维化向结肠炎相关性结肠癌(CAC)演变中TGF-β1/Smad通路及上皮间质转化(EMT)因子表达的影响。方法:70只Wistar大鼠随机分为正常对照组、UC肠纤维模型对照组、CAC模型对照组、湿生扁蕾呫吨酮35、70、140 mg/kg组和沙利度胺14 mg/kg组,每组10只。除正常对照组外,其余60只大鼠灌肠给予三硝基苯磺酸(TNBS)建立UC肠纤维模型,从中选取50只注射二甲苯肼(DMH)建立CAC模型,其中40只给予相应药物干预;对大鼠疾病活动指数(DAI)、结肠长度、壁厚和结肠湿质量指数等进行基础评价;Masson染色观察结肠病理变化;Western blot和qPCR法分别检测转化生长因子β1(TGF-β1)、磷酸化smad2/3(p-Smad2/3)蛋白表达和E-钙粘蛋白(Ecad)、β-连环蛋白(Bcatenin)mRNA表达,免疫组化(IHC)检测锌指蛋白Snail表达(AOD)。结果:与正常对照组比较,CAC模型对照组结肠长度缩短,壁厚和结肠湿质量指数显著升高(P<0.01),结肠内壁可见高分化腺瘤,TGF-β1和p-Smad2/3蛋白表达显著下调(P<0.01),Ecad mRNA显著下调,Bcatenin mRNA显著上调(P<0.01),Snail蛋白表达显著升高(P<0.01);与CAC模型对照组比较,湿生扁蕾呫吨酮70、140 mg/kg组结肠长度显著增加(P<0.01),壁厚、结肠湿质量指数、DAI得分显著降低(P<0.05或P<0.01),湿生扁蕾呫吨酮35、70、140 mg/kg组胶原容积百分率显著升高(P<0.01),但结肠腺瘤分化程度降低,各给药组TGF-β1和p-smad2/3蛋白表达显著上调(P<0.01),Ecad mRNA表达上调、Bcatenin mRNA表达下调,Snail蛋白表达降低(P<0.01)。结论:湿生扁蕾呫吨酮可有效抑制UC肠纤维化向CAC演变,其机制可能与促进TGF-β1/Smad通路中TGF-β1和p-Smad2/3表达,干预和调控EMT因子Ecad、Bcatenin mRNA和Snail表达有关。

关键词：湿生扁蕾呫吨酮 UC肠纤维结肠炎相关性结肠癌转化生长因子β1 上皮间质转化

白虎加人参汤治疗肥胖症合并2型糖尿病的潜在活性成分及作用机制分析

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中国实验方剂学杂志 2024年第13期30卷 1-10页

作者：谭丹妮向琴俞赟丰喻嵘湖南中医药大学中医学院长沙410208

目的:通过网络药理学结合体内实验验证,探讨白虎加人参汤治疗肥胖症合并2型糖尿病(T2DM)的潜在活性成分和作用靶点。方法:利用超高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱法(UPLC-Q-Exactive Orbitrap MS)分析鉴定白虎加人参汤物质... 详细信息

目的:通过网络药理学结合体内实验验证,探讨白虎加人参汤治疗肥胖症合并2型糖尿病(T2DM)的潜在活性成分和作用靶点。方法:利用超高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱法(UPLC-Q-Exactive Orbitrap MS)分析鉴定白虎加人参汤物质基础。在ChEMBL、疗效药靶数据库(TTD)、YaTCM、DisGeNET和中药免疫肿瘤学(TCMIO)等数据库中查询活性成分作用的潜在靶点,并将这些靶点与疾病靶点取交集确定共同靶点。将共同靶点导入STRING数据库构建蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络,通过cytoHubba插件确定hub基因,利用分子对接验证hub基因与白虎加人参汤中生物活性成分的结合能。同时,将共同靶点导入DAVID平台进行基因本体(GO)功能注释及京都基因和基因组百科全书(KEGG)通路富集分析。通过动物实验验证预测结果,将18只8周龄雄性骨骼肌胰岛素样生长因子-1受体功能缺失(MKR)小鼠高脂饮食饲养12周,制备肥胖症合并T2DM小鼠模型。随机将小鼠均分为模型组、二甲双胍组(0.2 g·kg^(-1))、白虎加人参汤组(以生药计27 g·kg^(-1)),另设6只同龄雄性FVB小鼠作为正常组,各组小鼠给予相应药物灌胃,正常组及模型组灌胃等量蒸馏水,1次/d,连续6周。给药结束后,检测各组小鼠的体质量、Lee's指数、空腹血糖(FBG)、口服糖耐量试验(OGTT),观察附睾白色脂肪组织病理形态,并采用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测附睾白色脂肪组织中hub基因mRNA的表达水平。结果:共鉴定出白虎加人参汤200种化合物,其中64种生物活性成分反向匹配到384个靶点,与肥胖症合并T2DM相关的靶点共308个。hub基因包括丝裂原活化蛋白激酶1(MAPK1)、信号转导与转录激活因子3(STAT3)、MAPK3、白细胞介素(IL)-2、Janus酪氨酸蛋白激酶1(JAK1)、核转录因子-κB p65(RELA)、雌激素受体1(ESR1)、转录因子AP-1(JUN)、MAPK14和淋巴细胞特异性蛋白酪氨酸激酶(LCK)。GO功能注释结果显示,主要富集于细胞内的胞质、胞膜和胞核等成分,且与肽丝氨酸磷酸化、蛋白质磷酸化、炎症反应等重要生物过程密切相关。在KEGG富集分析中,代谢途径、脂质与动脉粥样硬化、磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)和MAPK等信号通路被明显富集。分子对接结果显示,hub基因与白虎加人参汤中的槲皮素、异甘草素、桑黄素等10种生物活性成分具有稳定的结合关系。动物实验结果显示,白虎加人参汤能够显著降低肥胖症合并T2DM小鼠的体质量、Lee's指数和FBG水平(P研究通过网络药理学及动物实验验证确定了白虎加人参汤中槲皮素、异甘草素、桑黄素等10种潜在活性成分,可能通过调节代谢途径、脂质与动脉粥样硬化、PI3K/Akt和MAPK等信号通路治疗肥胖症合并T2DM,为其机制与临床研究提供了重要的线索和理论基础。

关键词：白虎加人参汤 2型糖尿病肥胖胰岛素抵抗网络药理学超高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱法(UPLC-Q-Exactive Orbitrap MS) hub基因

基于中医传承辅助平台与网络药理学探析中药干预新型冠状病毒感染后遗症肺纤维化的作用机制

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中草药 2024年第1期55卷 190-204页

作者：卫博凯胡静上海中医药大学中医学院上海201203

目的运用中医传承辅助平台V3.0软件探析中医药治疗肺纤维化的组方用药规律,获取核心药物组合;运用网络药理学探析其干预新型冠状病毒感染后遗症肺纤维化作用机制。方法筛选2000年1月—2023年6月中医药治疗肺纤维化的临床研究文献,利用... 详细信息

目的运用中医传承辅助平台V3.0软件探析中医药治疗肺纤维化的组方用药规律,获取核心药物组合;运用网络药理学探析其干预新型冠状病毒感染后遗症肺纤维化作用机制。方法筛选2000年1月—2023年6月中医药治疗肺纤维化的临床研究文献,利用中医传承辅助平台的统计分析、关联规则分析等功能,归纳出中医药治疗肺纤维化的用药特点及核心药物组合,并运用网络药理学方法探寻核心药物组合干预新型冠状病毒感染及其后遗症肺纤维化的潜在有效成分、作用靶点及信号通路。结果共筛选出118首有效处方,使用中药185味,使用频次前20位中药以补气类与活血化瘀类为主,在支持度≥10、置信度≥0.6时筛选出21味重要中药组合。确定在支持度≥20、置信度≥0.8时的药物组合“黄芪-当归-川芎”为中药核心药物组合,共含有38个有效成分,121个共同靶点,涉及蛋白激酶B1(protein kinase B1,AKT1))、丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)14、MAPK1、AP-1转录因子亚基(AP-1 transcription factor subunit,JUN)等关键靶点,核心中药成分包括槲皮素、山柰酚、川芎哚等。结论临床上中医药治疗肺纤维化以活血化瘀法及补气类、活血化瘀类中药为主,中药核心药物组合“黄芪-当归-川芎”可能通过晚期糖基化终末产物-晚期糖基化终末产物受体(advanced glycation end products-receptor for advanced glycation end products,AGE-RAGE)信号通路、白细胞介素-17(interleukin-17,IL-17)信号通路、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)信号通路、流体剪切力与动脉粥样硬化信号通路干预新型冠状病毒感染后遗症肺纤维化。

关键词：新型冠状病毒感染肺纤维化中医药活血化瘀法黄芪-当归-川芎槲皮素山柰酚川芎哚

NLRP3炎症小体在心力衰竭中的作用及中医药干预的研究进展

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中国中药杂志 2024年第4期49卷 894-901页

作者：王栋李芳赫于雪高阔郭淑贞北京中医药大学中医学院北京102488

心力衰竭存在高发病率、高病死率的特征,寻求针对心力衰竭的有效治疗策略并进一步提升临床疗效一直是重要的研究方向。炎症失衡已被证明是心力衰竭的重要病理环节之一,与心功能障碍、心肌纤维化等不良事件呈正相关。近些年研究证实NOD... 详细信息

心力衰竭存在高发病率、高病死率的特征,寻求针对心力衰竭的有效治疗策略并进一步提升临床疗效一直是重要的研究方向。炎症失衡已被证明是心力衰竭的重要病理环节之一,与心功能障碍、心肌纤维化等不良事件呈正相关。近些年研究证实NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NOD-like receptor thermal protein domain-associated protein 3,NLRP3)炎症小体激活在不同因素诱导心力衰竭的炎症失衡环节中具有共性调控机制,并且部分中药及其有效成分能够显著抑制NLRP3炎症小体激活而改善心力衰竭。该文首先概述了NLRP3炎症小体的基本情况,然后总结了NLRP3炎症小体在不同因素诱导心力衰竭中的调控机制,最后介绍了近年来抑制NLRP3炎症小体而改善心力衰竭的中药及有效成分的研究进展,以期为中西医结合防治心力衰竭的创新药物研究提供参考。

关键词：心力衰竭炎症 NLRP3炎症小体中药