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纳米粒子PLGA介导HIF-1α基因转染的实验研究

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江苏医药 2010年第22期36卷 2669-2672页

作者：高文昌张波于如同徐州医学院附属医院神经外科 221002

目的研究纳米粒子PLGA携带特异性HIF-1α基因转染的可行性及其效率。方法构建HIF-1α基因的真核表达质粒pcDNA3.1(+)的重组体。应用复乳溶剂挥发法制备pcDNA3.1(+)-HIF-1α的PLGA纳米粒,用正交设计法对纳米粒子的制备工艺进行优化,检测... 详细信息

目的研究纳米粒子PLGA携带特异性HIF-1α基因转染的可行性及其效率。方法构建HIF-1α基因的真核表达质粒pcDNA3.1(+)的重组体。应用复乳溶剂挥发法制备pcDNA3.1(+)-HIF-1α的PLGA纳米粒,用正交设计法对纳米粒子的制备工艺进行优化,检测其包埋率、体外释放情况及粒度。观察纳米粒的形态、大小和粒度,研究体外释药特性、抗核酸酶降解性能。用PLGA-pcDNA3.1(+)-HIF-1α纳米粒转染U251细胞,Western blot检测PLGA纳米粒子中HIF-1α蛋白表达。结果用正交设计法优化制备工艺成功构建pcDNA3.1(+)-HIF-1α的PLGA纳米粒,形态圆整,大小均匀,平均粒径102 nm,含药量0.83%,包封率可达72%,有对抗核酸酶降解能力,体外释药缓慢。PLGA-pcDNA3.1(+)-HIF-1α纳米粒可持续高效表达HIF-1α蛋白。结论 PLGA-pcDNA3.1(+)-HIF-1α纳米粒可用于特异性基因的转染。

关键词： PLGA 纳米粒子 HIF-1α 基因转染

精子相关抗原9在前列腺癌中的表达及临床意义

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中华实验外科杂志 2015年第12期32卷 2976-2978页

作者：毛立军刘宁曹航范例陈家存徐州医学院附属医院泌尿外科 221002

目的探讨精子相关抗原9（SPAG9）在人前列腺癌中的表达及临床意义。方法应用免疫组织化学技术检测60例前列腺癌和30例前列腺增生症组织中SPAG9的表达，并分析与特异性核基质结合区结合蛋白1（SATB1）基因、临床分期、Gleason评分、前列... 详细信息

目的探讨精子相关抗原9（SPAG9）在人前列腺癌中的表达及临床意义。方法应用免疫组织化学技术检测60例前列腺癌和30例前列腺增生症组织中SPAG9的表达，并分析与特异性核基质结合区结合蛋白1（SATB1）基因、临床分期、Gleason评分、前列腺特异抗原（PSA）水平及年龄之间的相关性。结果SPAG9在前列腺癌组织中的阳性率为81．67％（49／60），而在前列腺增生组织中的阳性率为6．67％（2／30），差异有统计学意义（P〈0．01）；SPAG9在前列腺癌组织中的表达强度与SATBl表达水平、临床分期和Gleason评分呈正相关（P〈0．05），且与转移的前列腺癌组织中呈正相关（P〈0．01），而与PSA水平和年龄无明显相关（P〉0．05）。结论SPAG9可能参与人前列腺癌的发生、转移。

关键词：精子相关抗原9 特异性核基质结合区结合蛋白1 前列腺癌

下调高迁移率族蛋白A2表达对前列腺癌细胞迁移侵袭能力的影响

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中华实验外科杂志 2015年第12期32卷 2953-2956页

作者：时湛李想汤润陈仁富薛松孙晓青徐州医学院附属医院泌尿外科 221002

目的观察小干扰RNA（siRNA）靶向下调高迁移率族蛋白A2（HMGA2）基因表达对人雄激素非依赖性前列腺癌PC3细胞迁移、侵袭能力的影响。方法人前列腺癌PC3细胞培养后分为3组：小干扰（siRNA）组、阴性对照（NC）组通过LipofectaminTM2000... 详细信息

目的观察小干扰RNA（siRNA）靶向下调高迁移率族蛋白A2（HMGA2）基因表达对人雄激素非依赖性前列腺癌PC3细胞迁移、侵袭能力的影响。方法人前列腺癌PC3细胞培养后分为3组：小干扰（siRNA）组、阴性对照（NC）组通过LipofectaminTM2000分别将HMGA2siRNA、阴性对照siRNA转染到细胞，空白组（Blank）常规培养；采用反转录一聚合酶链反应（RT—PCR）及Westernblot法分别检测HMGA2mRNA和蛋白的表达；Transwell实验检测细胞的迁移和侵袭能力的变化；Westernblot法检测转染后上皮．间充质转化（EMT）相关标志物E-钙黏蛋白（E—cadherin）、N-钙黏蛋白（***）、波形蛋白（Vimentin）的表达变化。结果siRNA组HMGA2mRNA的相对表达量（0．561±0．087）较Blank组（0．932±0．037）、NC组（0．892±0．035）显著下降，差异均有统计学意义（P〈0．05）。siRNA组HMGA2、***、Vimentin蛋白表达水平较Blank组、NC组明显降低，siRNA组***蛋白表达水平较后两组显著升高，差异均有统计学意义（P〈0．05）。Transwell实验结果表明，siRNA组细胞的迁移和侵袭能力较后两组明显减弱（P〈0．05）。结论下调HMGA2的表达能够抑制前列腺癌PC3细胞的HMGA2基因mRNA及蛋白的表达，并能降低细胞迁移及侵袭能力，其作用机制可能是通过影响EMT实现的。

关键词：高迁移率族蛋白A2 前列腺癌小干扰RNA 上皮-间充质转化迁移侵袭

沉默LASP-1对人胶质瘤细胞的黏附、迁移和侵袭能力的影响及其机制

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中华实验外科杂志 2016年第4期33卷 986-988页

作者：倪洪早张芸崔晨晨朱一硕陈洪福范月超郑骏年徐州医学院附属医院神经外科 221002

目的探讨LASP-1基因在胶质瘤细胞迁移和侵袭中的作用及其机制.方法运用Control小干扰RNA （siRNA）（Ctrl组）、LASP-1 siRNA（siRNA组）分别转染人脑胶质瘤细胞U251、U87,Western blot检测LASP-1、磷酸化黏着斑激酶（p-FAK）、Src、... 详细信息

目的探讨LASP-1基因在胶质瘤细胞迁移和侵袭中的作用及其机制.方法运用Control小干扰RNA （siRNA）（Ctrl组）、LASP-1 siRNA（siRNA组）分别转染人脑胶质瘤细胞U251、U87,Western blot检测LASP-1、磷酸化黏着斑激酶（p-FAK）、Src、基质金属蛋白酶（MMP）-2和MMP-9蛋白表达量.检测沉默LASP-1基因对胶质瘤细胞黏附、迁移和侵袭能力的影响.结果与Ctrl组比较siRNA组U87和U251细胞中LASP-1蛋白表达量降低;U87和U251黏附能力下降了59.14％和62.37％,迁移能力分别下降55.61％和56.07％,侵袭能力分别下降48.62％和56.31％.干扰LASP-1表达后siRNA组p-FAK、Src、MMP-2和MMP-9蛋白表达量较Ctrl组均明显降低,差异均有统计学意义（P＜0.05）.结论干扰LASP-1基因通过p-FAK-Src信号通路,抑制MMP-2和MMP-9蛋白表达,从而抑制胶质瘤细胞的黏附、迁移和侵袭能力.

关键词： LASP-1 胶质瘤黏附迁移侵袭

173例低位直肠癌患者的骨盆解剖差异对腹腔镜ISR手术时间的影响

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医学新知 2024年第1期34卷 25-32页

作者：田顺化胡恒陈保祥胡航江从庆武汉大学中南医院结直肠肛门外科武汉430071

目的探索低位直肠癌患者骨盆解剖差异及对腹腔镜下内括约肌切除术(intersphincteric resection, ISR)手术时间的影响。方法回顾性收集了武汉大学中南医院2017年1月—2022年12月接受腹腔镜ISR手术患者的临床数据。基于CT/MRI从轴位、... 详细信息

目的探索低位直肠癌患者骨盆解剖差异及对腹腔镜下内括约肌切除术(intersphincteric resection, ISR)手术时间的影响。方法回顾性收集了武汉大学中南医院2017年1月—2022年12月接受腹腔镜ISR手术患者的临床数据。基于CT/MRI从轴位、矢状位、冠状位对骨盆入口、骨盆出口、骨盆深度等17种骨盆参数进行测量,并对男女性骨盆解剖进行比较分析,通过多元线性回归分析探索影响手术时间的因素。结果共纳入173例低位直肠癌患者,其中男性107例(61.8%),女性66例(38.2%),患者平均年龄为(58.06±9.91)岁,BMI为(22.65±3.15)kg/m^(2),手术时间为(271.53±53.74)min。不同性别患者在骨盆入口、骨盆出口、骨盆深度等15项骨盆参数指标上差异具有统计学意义。多元线性回归分析显示,坐骨结节间距越小[95%CI(-25.554,-3.671),P=0.009]是男性患者手术时间延长的独立危险因素,骶深越浅[95%CI(-166.166,-33.894),P=0.004]、α角越小[95%CI(0.051,5.499),P=0.046]是女性患者手术时间延长的独立危险因素,而骶深越浅[95%CI(-95.657,-18.082),P=0.004]、β角越大[95%CI(0.258,7.048),P=0.035],δ角越小[95%CI(-6.034,-0.627),P=0.016]、坐骨结节间距越小[95%CI(-18.589,-2.511),P=0.010]、系膜脂肪面积越大(P=0.043)是低位直肠癌患者手术时间延长的独立危险因素。结论低位直肠癌患者的骨盆解剖在不同性别间存在显著差异性,且影响腹腔镜ISR手术时间的解剖因素在不同性别患者中亦不相同,骶深、β角、δ角、坐骨结节间距、系膜脂肪面积是影响手术时间的独立危险因素。关注这些骨盆解剖差异,对指导临床决策和提高手术安全具有重要意义。

关键词：低位直肠癌内括约肌切除术骨盆测量手术时间

碘难治性分化型甲状腺癌诱导再分化治疗研究进展

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肿瘤防治研究 2022年第10期49卷 1086-1092页

作者：张亚奇朱锡群樊倩妤陈健华中科技大学同济医学院附属湖北肿瘤医院头颈外科武汉430079 湖北省肿瘤医院头颈外科武汉430079

分化型甲状腺癌(DTC)大多进展缓慢,经手术、促甲状腺素抑制治疗和(或)放射性碘(RAI)等规范化治疗后总体预后好,但仍有部分患者治疗后出现复发或远处转移,并可能在自然病程或治疗过程中丧失摄碘能力,不能从后续RAI治疗中获益,成为碘难治... 详细信息

分化型甲状腺癌(DTC)大多进展缓慢,经手术、促甲状腺素抑制治疗和(或)放射性碘(RAI)等规范化治疗后总体预后好,但仍有部分患者治疗后出现复发或远处转移,并可能在自然病程或治疗过程中丧失摄碘能力,不能从后续RAI治疗中获益,成为碘难治性分化型甲状腺癌(RAIR-DTC)。RAIR-DTC患者可选择的治疗方法有限,且效果欠佳。近年来,随着对RAIR-DTC分子机制研究的不断深入,诱导再分化联合RAI治疗在RAIR-DTC中展现出一定的应用前景。本文综述了信号通路抑制剂、组蛋白去乙酰化酶抑制剂(HDACi)、DNA甲基化酶抑制剂、维甲酸类药物及过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR)激动剂在RAIR-DTC诱导再分化治疗中的进展。

关键词：碘难治性分化型甲状腺癌再分化碘摄取放射性碘治疗

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WNT1诱导信号通路蛋白1在非酒精性脂肪性肝炎的作用及其机制

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中华实验外科杂志 2024年第5期41卷 963-968页

作者：何鑫张子龙金鑫黄乐温松奇游建武汉市第四医院肝胆胰疝外科武汉430033

目的:探究WNT1诱导信号通路蛋白1(WISP1)在非酒精性脂肪性肝炎(NASH)的功能定位及治疗作用机制。方法:60只雄性C57BL/6J小鼠购于北京维通利华公司,采取简单随机抽样法分为5组,每组10只,正常组喂养普通饲料,通过喂养高脂高胆固醇饲料14... 详细信息

目的:探究WNT1诱导信号通路蛋白1(WISP1)在非酒精性脂肪性肝炎(NASH)的功能定位及治疗作用机制。方法:60只雄性C57BL/6J小鼠购于北京维通利华公司,采取简单随机抽样法分为5组,每组10只,正常组喂养普通饲料,通过喂养高脂高胆固醇饲料14周制备NASH小鼠模型,在造模过程中分别腹腔注射IgG单克隆抗体,0.1 g/kg WISP1高亲和力单克隆抗体,0.2 g/kg WISP-1高亲和力单克隆抗体为IgG、低剂量WISP1抗体组和高剂量WISP1抗体组,每周2次,连续给药14周。检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、血糖水平。苏木精-伊红(HE)、糖原(PAS)染色、油红O染色观察肝组织病理变化。实时荧光定量聚合酶链反应(Real-time PCR)检测小鼠肝组织中白细胞介素(IL)-10、IL-6、IL-1β、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)mRNA表达水平。检测肝组织总胆固醇(TC)、甘油三脂(TG)水平,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测还原型谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)活性水平,活性氧(ROS)荧光染色检测肝组织中活性氧含量;免疫组织化学(IHC)检测肝组织WISP-1、乙酰辅酶a合成酶(ACS)蛋白表达,蛋白质印迹法(Western blot)检测肝组织肝组织腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)、磷酸化AMPK(p-AMPK)、肉碱棕榈酰转移酶-1(CPT1)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活因子-1(PCG-1α)蛋白表达水平。结果:模型组小鼠血清AST、ALT、血糖水平高于正常组[(245.01±57.57)U/L比(37.28±4.23)U/L、(218.96±55.27)U/L比(49.81±10.57)U/L、(25.73±2.29)mmol/L比(8.06±0.51)mmol/L,P<0.01];模型组病理表现为肝细胞脂肪变性、炎性细胞浸润、多处坏死灶;模型组小鼠肝组织炎症因子(IL-10、IL-6、IL-1β、TNF-α)mRNA水平高于正常组(7.49±059比1.00±0.38、5.57±3.22比1.00±0.59、4.86±3.86比1.00±0.34、10.18±3.24比1.00±0.17,P<0.01);MDA含量高于正常组[(3.75±0.40)nmol/ml比(2.22±0.24)nmol/ml,P<0.01],GSH、SOD活性低于正常组[(0.22±0.06)ng/ml比(0.49±0.15)ng/ml、(2.19±0.23)pg/ml比(4.59±0.22)pg/ml,P<0.01],ROS含量高于正常组(4.91±0.31比1.00±0.12,P<0.01);同时PGC-1α、ACS蛋白表达高于正常组[(2.19±0.084比1.00±0.09、(62.97±2.38)%比(26.72±0.73)%,P<0.01],CPT1表达低于正常组(0.55±0.01比1.00±0.13,P<0.01)。低、高剂量WISP1抗体组小鼠血清AST、ALT、血糖水平低于模型组[(65.53±25.85)、(53.49±12.22)U/L比(245.01±57.57)U/L,(73.93±23.670)、(60.88±23.38)U/L比(218.96±55.27)U/L,(20.07±2.03)、(16.46±3.71)mmol/L比(25.73±2.29)mmol/L,P<0.01],低、高剂量WISP1抗体组小鼠肝脏脂肪变性、炎症细胞浸润、坏死程度降低,低、高剂量WISP1抗体组小鼠肝组织IL-10、IL-6、IL-1β、TNF-αmRNA低于模型组(2.98±0.31、2.579±0.22比7.49±1.57,1.83±0.35、2.53±0.32比5.57±1.03,1.62±0.24、1.52±0.34比4.86±1.33,2.63±0.56、2.12±0.37比10.18±2.31,P<0.05),高剂量WISP1抗体组小鼠MDA含量低于模型组[(1.83±0.694)nmol/ml比(3.70±0.50)nmol/ml,P<0.01],GSH、SOD活性高于模型组[(0.45±0.12)ng/ml比(0.22±0.06)ng/ml、(5.50±0.98)pg/ml比(2.19±0.40)pg/ml,P<0.01],活性氧含量低于模型组(0.51±0.06比4.91±0.31,P<0.01)。低、高剂量WISP1抗体组PGC-1α、ACS蛋白表达低于模型组(1.22±0.16、1.07±0.05比2.19±0.08,(33.50±3.45)%、(35.38±3.65)%比(62.97±2.38)%,P<0

关键词： WNT1诱导信号通路蛋白1 非酒精性脂肪性肝炎脂质代谢腺苷酸活化蛋白激酶通路脂肪过氧化

经鼻插入肠梗阻导管联合NOSES微创治疗梗阻性结直肠癌的研究

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中华结直肠疾病电子杂志 2024年第3期13卷 189-196页

作者：张继新谢爽王雪莲武祖印梁延洋张春旭联勤保障部队第九八八医院普通外科郑州450000

目的观察经鼻插入肠梗阻导管联合经自然腔道取标本手术(NOSES)对梗阻性结直肠癌(OCRC)的临床治疗效果.方法前瞻性收集中国人民解放军联勤保障部队第九八八医院普通外科2021年6月至2023年8月OCRC 46例患者的临床资料,观察组23例应用经鼻... 详细信息

目的观察经鼻插入肠梗阻导管联合经自然腔道取标本手术(NOSES)对梗阻性结直肠癌(OCRC)的临床治疗效果.方法前瞻性收集中国人民解放军联勤保障部队第九八八医院普通外科2021年6月至2023年8月OCRC 46例患者的临床资料,观察组23例应用经鼻插入型肠梗阻导管联合NOSES手术治疗,对照组23例应用肠道支架联合腹腔镜手术治疗,对比两组围术期相关指标,分析对OCRC的治疗效果.结果观察组23例完成肠梗阻导管置入,对照组21例完成支架置入,观察组置入成功率(100%vs.91.3%)虽高于对照组,但差异无统计学意义(x2=0.523,P=0.470).其中观察组2例无效,对照组1例无效,两组缓解率(91.3%vs.95.2%)的差异无统计学意义(x2=0,P=1.000).观察组在肠梗阻导管置入的操作时间(t=-8.064,P<0.001)及植入后并发症(P=0.044)方面要优于对照组.在症状缓解时间(t=4.530,P<0.001)及排气/排便时间(t=14.115,P<0.001)方面观察组劣于对照组.观察组3例术中改行传统腹腔镜手术,其中1例加做预防性回肠造口,余18例顺利完成NOSES手术,NOSES手术完成率85.7%;对照组19例均完成腹腔镜手术,手术完成率100%,其中6例加做预防性回肠造口,两组Ⅰ期吻合率均为100%.在术前准备时间(t=-4.559,P<0.001)、造口率(P=0.040)、术后首次排气时间(t=-3.833,P=0.001)、术后住院时间(t=-2.049,P=0.048)和住院费用(t=-4.787,P<0.001)方面观察组要优于对照组.在手术时间(t=-1.682,P=0.105)、出血量(t=-1.815,P=0.078)、淋巴结清扫数目(t=-1.890,P=0.070)、术后并发症(x2=0.223,P=0.637)方面两组差异无统计学意义.结论经鼻插入型肠梗阻导管能有效缓解OCRC症状,避免支架弊端,同时联合NOSES手术是安全的,使OCRC的治疗更加经济、微创.

关键词：结直肠肿瘤肠梗阻经鼻插入型肠梗阻导管肠道支架经自然腔道取标本手术(NOSES)

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2021年胰腺神经内分泌肿瘤诊治的新进展

中国癌症杂志 2022年第9期32卷 772-778页

作者：高鹤丽徐近虞先濬复旦大学附属肿瘤医院胰腺外科复旦大学上海医学院肿瘤学系复旦大学胰腺肿瘤研究所上海市胰腺肿瘤研究所

胰腺神经内分泌肿瘤(pancreatic neuroendocrine neoplasm,PanNEN)发病率低且异质性强,有关PanNEN分子机制的研究逐渐增多,同时PanNEN临床诊断、治疗和预后预测也有新的进展。指南除常规推荐手术、介入治疗等局部治疗,以及生长抑素类似... 详细信息

胰腺神经内分泌肿瘤(pancreatic neuroendocrine neoplasm,PanNEN)发病率低且异质性强,有关PanNEN分子机制的研究逐渐增多,同时PanNEN临床诊断、治疗和预后预测也有新的进展。指南除常规推荐手术、介入治疗等局部治疗,以及生长抑素类似物、靶向治疗等系统治疗外,还存在一些手术问题和药物应用的争议,这些问题和争议也体现了PanNEN诊治过程中的个体化原则和全程管理。本文对2021年PanNEN基础和临床方面的研究进展进行综述。

关键词：胰腺神经内分泌肿瘤分子标志物诊断预后治疗