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“连黄”中草药添加剂对东兰乌鸡生长性能以及血清生化、免疫、抗氧化指标的影响

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饲料研究 2022年第16期45卷 33-38页

作者：杨翠孙俊丽邱磊严静吴强朱敏罗斯聪廖玉英广西畜牧研究所广西南宁530001 广西兽医研究所广西南宁530001

研究旨在探讨日粮添加“连黄”中草药对东兰乌鸡生长性能以及血清生化、免疫、抗氧化指标的影响。将480羽1日龄东兰乌鸡随机分为4组,每组6个重复,每个重复20羽。A组为基础日粮(对照组);B组、C组、D组分别在基础日粮中添加0.25%、0.50%和... 详细信息

研究旨在探讨日粮添加“连黄”中草药对东兰乌鸡生长性能以及血清生化、免疫、抗氧化指标的影响。将480羽1日龄东兰乌鸡随机分为4组,每组6个重复,每个重复20羽。A组为基础日粮(对照组);B组、C组、D组分别在基础日粮中添加0.25%、0.50%和1.00%的“连黄”中草药。试验期49 d。结果显示:与对照组相比,B组乌鸡22~35 d的平均日增重显著提高(P研究表明,日粮添加“连黄”中草药可以改善东兰乌鸡的蛋白质和脂类代谢,显著提高东兰乌鸡的抗氧化性能,适宜添加量为0.25%。

关键词： “连黄”中草药添加剂东兰乌鸡血清生化指标免疫功能抗氧化能力

“连黄”中草药添加剂对东兰乌鸡生长性能及日粮养分代谢的影响

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中国饲料 2022年第7期 34-39页

作者：杨翠孙俊丽朱敏卢文学罗斯聪吴强黄丽吴亮廖玉英杨家晃广西畜牧研究所广西南宁530001 广西兽医研究所广西南宁530001

为探讨“连黄”中草药添加剂对东兰乌鸡生长性能及日粮养分代谢率的影响,试验将1日龄东兰乌鸡480羽分为4组,每组设6个重复,每个重复20羽。其中A组喂基础日粮为对照组;B、C、D组为试验组,分别在基础日粮中添加0.25%、0.50%和1.00%的“连... 详细信息

为探讨“连黄”中草药添加剂对东兰乌鸡生长性能及日粮养分代谢率的影响,试验将1日龄东兰乌鸡480羽分为4组,每组设6个重复,每个重复20羽。其中A组喂基础日粮为对照组;B、C、D组为试验组,分别在基础日粮中添加0.25%、0.50%和1.00%的“连黄”中草药添加剂,试期70 d;饲养试验结束时,从每组中抽取24羽体重相似的试验鸡,以饲养试验相同设计,继续饲喂原日粮进行代谢试验,测定养分代谢率。结果显示:除了50~70 d之外,B组在其他各阶段的平均日增重(ADG)分别比A组提高了5.00%~9.15%(P 0.05);36~49 d时A组的平均日采食量(ADFI)高于B组6.04%(P 0.05);料重比(F/G):在22~35 d和1~70 d时B组低于A组6.32%和3.41%(P 0.05);养分代谢:本添加剂的3种不同添加量,对日粮的DM、CP、CF、NFE、CA、Ca、P、TE等养分的代谢率均有不同程度提高,其中尤以0.25%和0.50%添加量的提高程度显著。综上所述,日粮添加0.25%的“连黄”中草药添加剂可显著提高东兰乌鸡的生长性能及主要养分代谢率。

关键词： “连黄”中草药添加剂东兰乌鸡生长性能养分代谢率

微生物添加剂对甘蔗尾叶青贮细菌多样性的影响

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南方农业学报 2020年第9期51卷 2254-2260页

作者：周俊华黄光云黄丽霞罗鲜青何仁春周志扬梁琪妹黄香廖玉英王启芝广西畜牧研究所南宁530001 广西兽医研究所南宁530000

【目的】研究微生物添加剂对甘蔗尾叶青贮细菌多样性的影响,为甘蔗尾叶青贮技术优化提供参考依据。【方法】试验设3个处理:处理1在新鲜甘蔗尾叶中添加1%植物乳杆菌和3%米曲霉,处理2添加1%饲用复合微生物制剂,以新鲜甘蔗尾叶直接青贮为... 详细信息

【目的】研究微生物添加剂对甘蔗尾叶青贮细菌多样性的影响,为甘蔗尾叶青贮技术优化提供参考依据。【方法】试验设3个处理:处理1在新鲜甘蔗尾叶中添加1%植物乳杆菌和3%米曲霉,处理2添加1%饲用复合微生物制剂,以新鲜甘蔗尾叶直接青贮为对照处理。青贮原料切碎后与添加剂充分混匀,密封,室温青贮45 d后采样,放入无菌样品袋,-80℃保存。采用Miseq高通量测序分析甘蔗尾叶青贮细菌门、属水平群落结构,并对3个处理的甘蔗尾叶青贮进行感官评定。【结果】对照、处理1和处理2甘蔗尾叶青贮的感官评定等级分别为良好、良好和一般。3个处理甘蔗尾叶青贮细菌共有操作分类单元(OTU)182个,对照、处理1和处理2特有OTUs分别为179、319和3321个,OTUs总数分别为845、1115和3815个。处理2的甘蔗青贮细菌群落Shannon指数和Chao1指数均显著高于对照和处理1(P<0.05,下同),处理1的Shannon指数和Simpson指数显著高于对照,3个处理的覆盖指数均接近1.00。在门水平上,对照和处理1甘蔗尾叶青贮的优势细菌门均为厚壁菌门(Firmicutes)和变形菌门(Proteobacteria),相对丰度分别为95.92%、2.46%和84.90%、13.79%;处理2的优势细菌门为变形菌门、厚壁菌门和拟杆菌门(Bacteroidetes),相对丰度分别为74.67%、23.52%和1.61%。在属水平上,对照甘蔗尾叶青贮细菌中相对丰度在1.00%以上的属有乳杆菌属(Lactobacillus)、梭菌属IV群(ClostridiumIV)和严格梭菌属(Clostridiumsensustricto),三者相对丰度分别为84.28%、1.18%和5.14%;处理1中,乳杆菌属、醋酸杆菌属(Acetobacter)和芽孢杆菌属(Bacillus)3个属的相对丰度在1.00%以上,分别为78.56%、12.78%和4.14%;处理2甘蔗尾叶青贮细菌中相对丰度在1.00%以上的属有10个,其中腐败菌肠杆菌科未分类菌属(Enterobacteriaceaeunclassified)(47.64%)、梭菌科未分类菌属(Clostridiaceae1unclassified)(7.62%)、梭菌属IV群(ClostridiumIV)(4.79%)和肠杆菌属(Enterobacter)(7.38%)占绝对优势,乳杆菌属相对丰度仅为0.81%。【结论】甘蔗尾叶添加饲用复合微生物制剂进行青贮,其物种数最丰富,但腐败菌未得到抑制;甘蔗尾叶添加植物乳杆菌和米曲霉进行青贮可显著提高甘蔗尾叶青贮细菌群落的繁殖生长,进而提高甘蔗尾叶青贮的微生物多样性及群落相对丰度,可在甘蔗尾叶青贮中应用。

关键词：甘蔗尾叶微生物添加剂青贮细菌多样性

新型阿卡斑病毒SYBR Green Ⅰ荧光定量RT-PCR建立及广西边境地区蚊携带新型阿卡斑病毒调查

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南方农业学报 2022年第6期53卷 1734-1741页

作者：马玲孟菲陆晨阳陈赫威蔡畅秦树英覃绍敏刘金凤陈凤莲吴健敏广西兽医研究所/广西兽医生物技术重点实验室广西南宁530001

【目的】建立检测新型阿卡斑病毒(AKAV)的SYBR Green Ⅰ荧光定量RT-PCR,并结合序列测定开展广西边境地区蚊携带新型AKAV调查,了解其流行趋势及遗传进化特征,为建立重要蚊媒病毒病预警机制提供技术支持。【方法】分别针对新型AKAV的S基因... 详细信息

【目的】建立检测新型阿卡斑病毒(AKAV)的SYBR Green Ⅰ荧光定量RT-PCR,并结合序列测定开展广西边境地区蚊携带新型AKAV调查,了解其流行趋势及遗传进化特征,为建立重要蚊媒病毒病预警机制提供技术支持。【方法】分别针对新型AKAV的S基因和M基因主要变异位点设计引物,建立SYBR Green Ⅰ荧光定量RT-PCR并通过Ct值、标准曲线斜率、相关系数、扩增效率及扩增准确性等指标确定最佳反应体系及扩增程序;以优化的SYBR Green Ⅰ荧光定量RT-PCR检测2019年6-10月在广西边境地区采集的139份蚊样品,获得的新型AKAV经测序后采用ClustalW构建遗传进化树。【结果】SYBR Green Ⅰ荧光定量RT-PCR最佳反应体系:SYBR Premix Ex Taq Ⅱ 10.0μL,上、下游引物(4μmol/L)各1.0μL,标准品或反转录产物2.0μL,双蒸水补齐至20.0μL。扩增程序:95℃预变性30 s;95℃30 s,64℃(S基因)/66℃(M基因)30 s,72℃30 s,进行40个循环。SYBR Green Ⅰ荧光定量RT-PCR检测新型AKAV S基因和M基因的极限为1.0×101copies/μL和1.0×102copies/μL,对应的扩增效率分别为98.61%和105.81%,但不能扩增蓝舌病病毒、鹿流行性出血热病毒、竹鼠圆环病毒和布鲁氏杆菌;检测S基因和M基因的批内重复试验、批间重复试验变异系数(CV)均低于5.00%。采用建立的SYBR Green I荧光定量RT-PCR成功从广西边境地区防城港市、东兴市、宁明县、大新县及北海市的阿蚊和库蚊中检出新型AKAV,且均属于基因Ia型,尤其与广东和湖南蠓虫、中华按蚊、致倦库蚊分离毒株具有较高的相似性。【结论】针对新型AKAV S基因和M基因建立的SYBR Green Ⅰ荧光定量RT-PCR具有特异性强、灵敏度高、重复性好的特点,更适用于检测病毒拷贝数低的样品。此外,从广西边境地区蚊样品中检出的AKAV毒株均为新型AKAV,属于基因Ia型,与广东和湖南蠓虫、中华按蚊、致倦库蚊分离毒株具有较高的相似性,推测新型AKAV已在广西周边省份流行。

关键词：新型阿卡斑病毒(AKAV) 蚊媒病毒 SYBR GreenⅠ荧光定量RT-PCR 广西边境地区

广西地区牛库布病毒RT-PCR检测及其遗传进化分析

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黑龙江畜牧兽医 2023年第9期 73-79页

作者：吴翠兰禤雄标李军彭昊陶立李常挺兰美益贺会利冯世文钟舒红马春霞白慧丽李小宁胡帅广西兽医研究所广西兽医生物技术重点实验室南宁530001

为了了解广西地区奶牛、肉牛的牛库布病毒(bovine Kobuvirus, BKV)感染情况及分子特征,试验采用RT-PCR的方法对从广西地区采集的奶牛粪便177份、肉牛粪便27份(共204份粪便,其中腹泻牛粪便82份,健康牛粪便122份)进行BKV和其他肠道病毒的... 详细信息

为了了解广西地区奶牛、肉牛的牛库布病毒(bovine Kobuvirus, BKV)感染情况及分子特征,试验采用RT-PCR的方法对从广西地区采集的奶牛粪便177份、肉牛粪便27份(共204份粪便,其中腹泻牛粪便82份,健康牛粪便122份)进行BKV和其他肠道病毒的检测,分析BKV与其他肠道病毒的共感染情况,以及不同地点和不同季节BKV的感染情况,同时对广西地区BKV的3D基因与国内外30株库布病毒的3D基因进行核苷酸序列同源性分析和遗传进化分析。结果表明:广西地区BKV的感染率为2.94%(6/204),均从腹泻牛粪便中检出,其中奶牛和肉牛的感染率分别为2.26%(4/177)、7.41%(2/27),将6株毒株分别命名为BKV-GXGG01(贵港株)、BKV-GXHC01(河池株)、BKV-GXHC02(河池株)、BKV-GXNN01(南宁株)、BKV-GXNN02(南宁株)和BKV-GXNN03(南宁株);BKV与牛病毒性腹泻病毒、牛肠道病毒和牛星状病毒存在混合感染,感染率为66.67%(4/6),而单一感染率为33.33%(2/6);6株广西地区BKV毒株的3D基因间的核苷酸序列同源性为93.5%~100%,与国内外Aichivirus B类型参考毒株间的核苷酸序列同源性为89.9%~95.1%,与其他库布病毒参考毒株的核苷酸同源性为35.9%~75.2%;6株广西地区毒株在遗传进化分析中均属于Aichivirus B类型,毒株BKV-GXNN01与日本株K-35、河南株B4、内蒙古株H6和H18、山东株C2、黑龙江株SC7-5、辽宁株H9同属一分支,其余5株毒株BKV-GXGG01、BKV-GXHC01、BKV-GXHC02、BKV-GXNN02、 BKV-GXNN03与北京株B1213、泰国株CMB02、日本株U-1同属一分支。说明在广西地区奶牛、肉牛的腹泻病例中均存在BKV感染,推测BKV可能与牛腹泻有关。

关键词：广西地区牛库布病毒腹泻 3D序列共感染

广西巴马小型猪内源性反转录病毒进化年代分析

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中国农业科学 2015年第4期48卷 778-787页

作者：饶桂波钟雅婷欧阳康马玲黄红梅吴健敏广西兽医研究所

【目的】确定广西巴马小型猪内源性反转录病毒（PERV-BM）的进化年代。【方法】对先前扩增、测序获得的9个PERV-BM的LTRs,一个PERV-BM全长基因组序列,登录号为HM159246及Gen Bank上发表的所有背景清楚的猪内源性反转录病毒（PERV）的LTR... 详细信息

【目的】确定广西巴马小型猪内源性反转录病毒（PERV-BM）的进化年代。【方法】对先前扩增、测序获得的9个PERV-BM的LTRs,一个PERV-BM全长基因组序列,登录号为HM159246及Gen Bank上发表的所有背景清楚的猪内源性反转录病毒（PERV）的LTRs及env序列进行分析。首先利用DAMBE软件对上述序列比对分析,合并同源性较高的,筛选有差异代表性的核酸序列的数据集。然后利用MEGA5.2软件Neighbor-Joining方法计算PERV-BM遗传进化关系。利用DAMBE软件对上述筛选的序列集进行替换饱和度计算,分析核酸进化速率的稳定性;利用MEGA5.2软件,通过最大相似法对筛选数据制作的遗传进化树进行分子钟行为分析。最后对广西封闭群内的广西巴马小型猪3′-LTR序列进行替代饱和度及分子钟分析,对符合分子钟行为的LTRs序列,以假设的恒定进化速率计算PERV-BM的进化年代。【结果】经过DAMBE软件分析后,选出80多个Gen Bank上发表的有代表性的env、LTRs序列数据集。对PERV-BM（HM159246）序列全长遗传进化分析显示,PERV-BM与中国的PERV核酸序列EF133960和GU980187,荷兰的AF356697亲缘关系较近,与韩国的HQ540595和美国的AF038600和NC;03059亲缘关系则较远。利用DAMBE软件对筛选数据集替换饱和度检测结果显示,S和V值随PERV序列之间进化分歧的增加呈线性的增加。LTRs序列数据集替换饱和曲线呈线性关系,没有替换饱和现象发生,LTRs的进化随时间持续且稳定。数据集env序列替换饱和曲线不完全呈线性关系,表明env序列集进化速率不稳定。利用MEGA5.2的最大相似法对LTRs和env数据集的进化树进行分子钟行为检测结果显示,LTRs序列集接受分子钟假说,env进化不符合分子钟行为,这和不饱和度检测的结果一致。因此可用LTRs进化的近分子钟行为进行PERV进化年代的计算。利用DAMBE软件对广西封闭群内的广西巴马小型猪3′-LTR序列进行替代饱和度及分子钟分析结果显示,3′-LTR的进化符合分子钟行为可用于进化年代计算。假设以灵长类ERV的积累突变率,每个核苷酸每年的替换率2.3×10-9—5.0×10-9,计算PERV-BM约进化于3.3×106—7.1×106年前。【结论】PERV-BM进化年代与欧洲小型猪PERV进化时间7.6×106年前相近。

关键词：广西巴马小型猪猪内源性反转录病毒进化年代

2株广西鹅源基因XII型新城疫病毒的病原学分析

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南方农业学报 2022年第7期53卷 2007-2014页

作者：曾婷婷谢芝勋华俊谢丽基李孟黄娇玲张民秀张艳芳苑亚东撒薇广西兽医研究所/广西兽医生物技术重点实验室广西南宁530001 广西大学养禽与禽病学研究所广西南宁530004

【目的】深入了解2株广西鹅源基因XII型新城疫病毒(NDV)的病原学特征,为NDV流行分布的系统监测和新城疫(ND)的科学防控提供参考依据。【方法】对2株广西鹅源基因XII型NDV(Goose/China/GX02/2018和Goose/China/GX17/2018)进行病毒噬斑纯... 详细信息

【目的】深入了解2株广西鹅源基因XII型新城疫病毒(NDV)的病原学特征,为NDV流行分布的系统监测和新城疫(ND)的科学防控提供参考依据。【方法】对2株广西鹅源基因XII型NDV(Goose/China/GX02/2018和Goose/China/GX17/2018)进行病毒噬斑纯化,通过致死鸡胚平均死亡时间(MDT)和脑内接种致病指数(ICPI)试验确定其致病性,分析F蛋白和HN蛋白氨基酸序列与参考毒株的差异位点,并基于F基因全长进行遗传进化分析。【结果】经过DF-1细胞4个代次噬斑纯化可获得2株分离株的纯化株,对应的MDT分别为54和48 h,ICPI均为1.65。2株分离株的基因组长度均为15192 nt,其3'端引导序列为55 nt,5'端尾随序列为114 nt;基于F基因核苷酸序列相似性构建的基因XII型NDV系统发育进化树显示,2株分离株(Goose/China/GX02/2018和Goose/China/GX17/2018)均属于基因XIIb亚型,与我国广东分离株属于同一基因亚型,且我国2010年的分离株、2011年的分离株及2017年后的分离株分别形成3个小分支。2株分离株的F蛋白裂解位点均为^(112)RRQKRF^(117),与南美分离株(XIIa亚型)和越南分离株(XIId亚型)相比,在信号肽区域、融合肽区域、七肽重复区和跨膜区共有14个氨基酸差异位点,其中2个氨基酸差异位点(^(19)I→V和^(294)N→S)是广西分离株所特有。2株分离株的HN蛋白跨膜区及抗原中和区氨基酸序列与我国广东分离株均一致,与南美分离株(XIIa亚型)相比存在7个氨基酸差异位点(^(27)V→I、^(28)A→S、^(34)V→I、^(41)A→T、^(42)V→A、^(263)K→R和^(347)E→D)。【结论】我国分离株(XIIb亚型)与南美分离株(XIIa亚型)和越南分离株(XIId亚型)在F蛋白和HN蛋白的氨基酸差异可能与其对鸡群的致病力差异有关。此外,基因XII型NDV一直处于不断进化中,而需持续监测该基因型NDV的流行分布情况。

关键词：新城疫病毒基因XII型致病性氨基酸变异遗传进化分析

猪圆环病毒2型GX-FSH株全基因组及ORF2的克隆与结构分析

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广西农业科学 2007年第4期38卷 459-464页

作者：雄标陈泽祥郑列丰谢永平许力干杨威广西区兽医研究所南宁530001

参考GenBank中猪圆环病毒2型（PCV2）基因的全序列,利用反向PCR技术设计一对特异引物,用PCR方法扩增从本室分离的猪圆环病毒2型GX-FSH株全基因,另设一对引物扩增编码ORF2完整基因,将它们分别连接到pMD 18-T载体,筛选获得重组阳性质粒并... 详细信息

参考GenBank中猪圆环病毒2型（PCV2）基因的全序列,利用反向PCR技术设计一对特异引物,用PCR方法扩增从本室分离的猪圆环病毒2型GX-FSH株全基因,另设一对引物扩增编码ORF2完整基因,将它们分别连接到pMD 18-T载体,筛选获得重组阳性质粒并对其测序分析。结果表明,所克隆的GX-FSH株全基因序列与Gen-Bank上已发表的部分PCV2毒株全基因序列同源性在94.6%-99.4%之间;相应ORF2开放阅读框的核苷酸同源性在90.0%-99.1%之间,氨基酸序列同源性为90.1%-98.7%;利用生物学软件对ORF2蛋白质结构特征分析,结果提示其成熟蛋白二级结构为β类结构。

关键词：猪圆环病毒2型全基因 ORF2基因结构分析

血清4型禽腺病毒感染LMH细胞后干扰素刺激基因在转录水平表达量的动态变化

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中国畜牧兽医 2024年第5期51卷 2081-2090页

作者：万丽军王盛谢芝勋任红玉谢丽基范晴罗思思李孟张艳芳曾婷婷黄娇玲张民秀谢志勤李小凤韦悠广西壮族自治区兽医研究所广西兽医生物技术重点实验室南宁530001

【目的】了解鸡肝癌细胞(LMH)感染血清4型禽腺病毒(FAdV-4)后干扰素(IFN)和干扰素刺激基因(ISGs)的表达量变化,为研究FAdV-4与ISGs的相互作用提供参考依据。【方法】试验将FAdV-4感染LMH细胞,观察不同时间点细胞病变,并收集感染0、12、2... 详细信息

【目的】了解鸡肝癌细胞(LMH)感染血清4型禽腺病毒(FAdV-4)后干扰素(IFN)和干扰素刺激基因(ISGs)的表达量变化,为研究FAdV-4与ISGs的相互作用提供参考依据。【方法】试验将FAdV-4感染LMH细胞,观察不同时间点细胞病变,并收集感染0、12、24、36、48、60、72、84和96 h的细胞样品,通过实时荧光定量PCR技术检测感染病毒后不同时间点IFN-α和IFN-β及ISGs基因在转录水平上表达量的动态变化规律。【结果】LMH细胞感染FAdV-448 h时出现典型的细胞病变;在感染12 h后,FAdV-4快速增殖,60 h时达到峰值;感染病毒后各时间点,与对照组相比,IFN-α基因转录水平表达量均显著下调(P所下降且趋于稳定,但仍显著高于对照组(P所下降,但仍显著高于对照组(P<0.05);与对照组相比,CD 47、OAS和PKR基因均呈现下调表达。【结论】在FAdV-4感染LMH细胞后,IFN及多种ISGs在转录水平呈现规律性变化,与病毒在LMH细胞中复制存在一定的联系,表明这些天然免疫因子可能在抗FAdV-4反应中发挥着重要作用。

关键词：血清4型禽腺病毒(FAdV-4) LMH细胞干扰素干扰素刺激基因转录