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益肺宣肺降浊方调控miR-485/AIM2炎症小体途径治疗血管性痴呆的机制研究

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海南医学院学报 2024年

作者：黄德庆任昕怡陈炜卓桂锋张金枝苏明阳吴林广西中医药大学第一附属医院广西中医药大学广西中医药大学研究生院

目的：研究miR-485/黑色素瘤缺乏因子2（AIM2）炎症小体途径在血管性痴呆（VaD）中的作用，并探讨益肺宣肺降浊方治疗VaD的作用机制。方法：双侧颈总动脉永久性结扎法建立VaD大鼠模型，分为模型组及益肺宣肺降浊方组，并设假手术组，采... 详细信息

目的：研究miR-485/黑色素瘤缺乏因子2（AIM2）炎症小体途径在血管性痴呆（VaD）中的作用，并探讨益肺宣肺降浊方治疗VaD的作用机制。方法：双侧颈总动脉永久性结扎法建立VaD大鼠模型，分为模型组及益肺宣肺降浊方组，并设假手术组，采用高通量测序分析差异表达的miRNA，并通过在线数据库预测miRNA的靶基因，双萤光素酶报告基因实验进行验证。基于miR-485采用动物实验进一步研究，将同法造模的大鼠分为假手术组、模型组、益肺宣肺降浊方组、miR-485过表达组、益肺宣肺降浊方+miR-485过表达组，并设假手术组。益肺宣肺降浊方组及益肺宣肺降浊方+miR-485过表达组予益肺宣肺降浊汤灌胃，假手术组和模型组大鼠每日予相等体积的生理盐水进行灌胃。miR-485过表达组和益肺宣肺降浊方+miR-485过表达组予注射1.5 μL病毒载体至大鼠双侧海马。采用水迷宫实验评价大鼠学习及空间记忆能力；苏木素-伊红（HE）染色及透射电镜观察海马组织形态及神经元超微结构；免疫印迹法（Western Blot）检测AIM2、凋亡相关斑点样蛋白（ASC）、胱天蛋白酶1（Caspase-1）、白细胞介素-1β（IL-1β）和IL-18的蛋白表达水平；实时荧光定量聚合酶链式反应（RT-PCR）分析相关基因的mRNA水平以及miR-485的表达水平。结果：miR-485存在于3组大鼠的共同异表达中，AIM2是miR-485的靶基因。动物实验发现，假手术组偶见神经元死亡，模型组大鼠海马神经元损伤严重，其余3组神经元损伤较模型组明显改善，其中益肺宣肺降浊方+miR-485过表达组改善最明显。模型大鼠学习及空间记忆能力明显下降，海马组织miR-485水平下降，AIM2、ASC、Caspase-1、IL-1β和IL-18的蛋白水平及mRNA水平升高（P＜0.05）；与模型组相比，益肺宣肺降浊方组、miR-485过表达组以及益肺宣肺降浊方+miR-485过表达组的学习及记忆能力均显著改善，并伴随miR-485水平的升高以及AIM2、ASC、Caspase-1、IL-1β和IL-18的蛋白水平及mRNA水平下降（P＜0.05）。结论：miR-485能够抑制AIM2炎症小体活化，改善VaD大鼠的学习和记忆能力；益肺宣肺降浊方治疗VaD的作用与调控miR-485/AIM2炎症小体途径、减轻神经炎症及减少神经元死亡有关。

关键词：益肺宣肺降浊方血管性痴呆 miR-485 黑色素瘤缺乏因子2炎症小体

基于中医阴阳理论探讨肠道微生态对糖尿病肾脏病的影响

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中国实验方剂学杂志 2024年第3期30卷 178-186页

作者：莫超黄国东史伟赵洁广西中医药大学研究生院南宁530200 广西中医药大学第一附属医院南宁530000 广西中医药大学附属国际壮医医院南宁530219 湖南中医药大学研究生院长沙410208

糖尿病肾脏病是导致终末期肾脏病的主要原因,具有患病率高、死亡率高、医疗费用高等特点,给社会、家庭带来沉重的经济负担,已成为全球当前严重的公共卫生问题之一。肠道微生态是人体最主要的、最复杂的微生态系统,参与人体物质能量代谢... 详细信息

糖尿病肾脏病是导致终末期肾脏病的主要原因,具有患病率高、死亡率高、医疗费用高等特点,给社会、家庭带来沉重的经济负担,已成为全球当前严重的公共卫生问题之一。肠道微生态是人体最主要的、最复杂的微生态系统,参与人体物质能量代谢、免疫系统调节、信号传导等重要生命活动,进而维持人体内环境动态平衡。肠道微生态之间及其与机体之间的动态平衡本质上是阴阳平衡。一旦阴阳平衡关系被打破,则出现肠道菌群失调、肠道黏膜屏障受损、免疫功能异常、代谢物短链脂肪酸减少等,他们在糖尿病肾脏病的发生进展中扮演着重要角色。在中医阴阳理论视域下,糖尿病肾脏病的肠道微生态失衡犹如中医阴阳制约太过,或制约不及,或阴损及阳,或阳损及阴,或阴消,或阳消。针对不同的病机变化,采取“阴病治阳”或“阳中求阴”或“阴中求阳”等方法,通过中医药调节肠道菌群、抑制免疫炎症反应、保护肠道黏膜屏障、提高短链脂肪酸含量,以调整阴阳,达到“阴平阳秘”状态。该文拟基于中医阴阳理论,以肠道微生态为靶标,以中医药调控肠道微生态干预糖尿病肾脏病为切入点,阐释中医药干预糖尿病肾脏病的科学内涵,以期为揭示糖尿病肾脏病的发生发展规律和中医药的效应机制提供了全新的视角。

关键词：糖尿病肾脏病肠道微生态阴阳理论中医药

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广西中医药大学附属瑞康医院广西壮族自治区中西医结合医院医院简介

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广西中医药 2024年第05期 82-82页

广西中医药大学附属瑞康医院(广西壮族自治区中西医结合医院)始建于1951年，是国家公立三级甲等综合性中西医结合医院、全国卫生系统先进集体、全国百姓放心示范医院、国家重点中西医结合医院，国家中医药管理局国际交流合作基地，国家...

广西中医药大学附属瑞康医院(广西壮族自治区中西医结合医院)始建于1951年，是国家公立三级甲等综合性中西医结合医院、全国卫生系统先进集体、全国百姓放心示范医院、国家重点中西医结合医院，国家中医药管理局国际交流合作基地，国家中医药传承创新工程重点中医医院、国家中西医协同“旗舰”医院建设试点项目单位、国家中医疫病防治队伍和疫病防治基地依托单位、国家中管局原发性肝癌防治协作组组长单位、广西壮族自治区人民政府人才小高地、中西医结合陈可冀院士工作站、广西博士后创新实践基地、广西中西医结合肾脏疾病临床医学研究中心、广西中医外治法示范基地、广西中医特色医养结合示范基地、广西药膳食疗建设基地。现有华东院区、空港院区、田阳院区、凤岭南医院“一院四区”，占地近400亩(1亩666.667m’)，总床位数3 000张。

关键词：

广西中医药大学附属瑞康医院广西壮族自治区中西医结合医院产科

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广西中医药 2024年第05期 81-81页

[科室概况]广西中医药大学附属瑞康医院产科是国家青年文明号集体、全国“孕妇学校”管理示范单位、国家中医药管理局十二五重点专科建设单位、国家中医药管理局重点产科专科基地、国家分娩镇痛试点医院、国家PAC人流后关爱优质服务医...

[科室概况]广西中医药大学附属瑞康医院产科是国家青年文明号集体、全国“孕妇学校”管理示范单位、国家中医药管理局十二五重点专科建设单位、国家中医药管理局重点产科专科基地、国家分娩镇痛试点医院、国家PAC人流后关爱优质服务医院、中华护理学会建设基地(盆底康复)、全国中医妇科联盟成员单位、全区首批国家级“爱婴医院”、广西孕产妇专科联盟单位、广西出生缺陷联盟单位、自治区药腾食疗示范病区、

关键词：

基于生物信息学与机器学习的坐骨神经痛与内质网应激相关生物标志物筛选及调控中药预测

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中华中医药学刊 2024年

作者：韦业陈广辉覃小伶蒙映彤邓豪祁祥何育风广西中医药大学广西中医药大学第一附属医院河南中医药大学

目的：本研究旨在筛选坐骨神经痛发病进程中的诊断性生物标志物，分析该病进程中的内质网应激相关基因。方法：检索GEO（http://***/geo）数据库获得坐骨神经痛芯片数据，分析差异表达基因（differentiallyexpressedgenes，DEGs）与内... 详细信息

目的：本研究旨在筛选坐骨神经痛发病进程中的诊断性生物标志物，分析该病进程中的内质网应激相关基因。方法：检索GEO（http://***/geo）数据库获得坐骨神经痛芯片数据，分析差异表达基因（differentiallyexpressedgenes，DEGs）与内质网应激基因取交集获得内质网应激相关差异基因，对差异基因进行富集分析，对差异基因进行免疫细胞浸润分析，结果进一步结合加权基因共表达网络分析获得免疫相关差异表达基因。基于最小绝对收缩和选择算子(leastabsoluteshrinkageandselectionoperator，LASSO)、极限梯度提升算法(eXtremeGradientBoosting，XGBoost)与随机森林（RandomForest，RF）方法筛选关键基因构建诊断性模型并进行验证。分析内质网应激相关基因与诊断性基因的相关性，然后预测能干预坐骨神经痛发病过程中与内质网应激基因相关的中药。结果：差异分析获得286个DEGs，DEGs主要富集于细胞对活性氧的反应，细胞对化学应激的反应，免疫受体活性，氧化还原酶活性等生物学过程，以及过氧化物酶增殖物激活受体(peroxisomeproliferater-activatedreceptor，PPAR)信号通路，磷脂酶D信号通路，坏死性凋亡等信号通路。免疫浸润分析发现调节性T细胞、滤泡辅助性T细胞、记忆性CD4T细胞差异表达，这也表明以上3种免疫细胞对坐骨神经痛发病发挥着一定作用。加权基因共表达网络分析（Weightedcorrelationnetworkanalysis，WGCNA）结合免疫浸润分析获得83个关键模块基因，蛋白-蛋白互作（protein-proteininteraction，PPI）分析得到含锌指CCCH型15(ZincfingerCCCHdomain-containingprotein15，ZC3H15)、核糖体蛋白L7（ribosomalproteinL7，RPL7）、核糖体蛋白L26样1（RPL26L1-ribosomalproteinL26like1，RPL26L1）、肿瘤蛋白，翻译控制1（tumorprotein，translationally-controlled1，TPT1）、核糖体蛋白L22样1（ribosomalproteinL22like1，RPL22L1）、核糖体蛋白S15A （ribosomalproteinS15a，RPS15A）、核糖体蛋白S3A （ribosomalproteinS3A，RPS3A）、核糖体蛋白L36A（ribosomalproteinL36a，RPL36A）、核糖体蛋白S24（ribosomalproteinS24，RPS24）、核糖体蛋白L30（ribosomal protein L30，RPL30）等 10个Hub基因。机器学习方法筛选出KLF9、SCARF1、CYP27A1、CEBPA等4个诊断性基因，4个诊断性基因与Hub基因的表达具有相关性。最后预测得到可调控Hub基因的中药共计36味。结论：KLF9、SCARF1、CYP27A1、CEBPA基因对坐骨神经痛具有诊断价值，内质网应激相关基因在坐骨神经痛发病中起着一定作用，预测出的全蝎，眼镜蛇，紫河车，硫磺，鹿茸等中药可能是防治坐骨神经痛的潜在药物。

关键词：坐骨神经痛中药机器学习生物信息学内质网应激

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女贞子活性成分防治骨质疏松症的分子机制

中国组织工程研究 2024年

作者：王文驰夏天武瑞骐梁浩瀚倪振扬章震浩李振兴陈广辉苏晗广西中医药大学附属瑞康医院广西中医药大学皖南医学院附属太和医院广西中医药大学第一附属医院

背景：目前，中医药已被证实在抗骨质疏松方面具有显著作用，女贞子活性成分的抗骨质疏松有效性及作用机制逐渐得到学者们的关注。目的：分析总结女贞子活性成分在体内外发挥抗骨质疏松方面的研究进展。方法：检索中国知网及PubMed数据... 详细信息

背景：目前，中医药已被证实在抗骨质疏松方面具有显著作用，女贞子活性成分的抗骨质疏松有效性及作用机制逐渐得到学者们的关注。目的：分析总结女贞子活性成分在体内外发挥抗骨质疏松方面的研究进展。方法：检索中国知网及PubMed数据库收录的相关文献，中文检索词为“骨质疏松症，骨髓间充质干细胞，成骨细胞，破骨细胞，女贞子，信号通路”；英文检索词为“Osteoporosis,Bone marrow mesenchymal stem cells,Osteoblast,Osteoclast,Ligustri Lucidi Fructus,Signal path”，并根据研究需要确立相应的标准，对所得文献进行筛选，最终纳入82篇文献进行综述。结果与结论：女贞子活性成分在体内外发挥抗骨质疏松作用主要涉及以下几种重要成分：(1)红景天苷通过抑制骨硬化蛋白(SOST)和Dickkopf相关蛋白1(Dkk1)的表达，激活了Wnt/β-catenin信号通路，该激活过程增强了去卵巢大鼠和原代成骨细胞中磷酸化低密度脂蛋白受体相关蛋白6(p-LRP6)的表达，同时降低了糖原合酶激酶3β的表达。进一步地，红景天苷促进了细胞核内β-catenin、特异性转录因子2(Runx2)和骨髓细胞瘤病毒癌基因(c-Myc)的表达，从而促进了成骨细胞的骨形成能力。红景天苷可直接作用于成骨细胞，促进骨形成，为骨质疏松症的治疗提供了新的策略。(2)橄榄苦苷显著提高了SD大鼠的骨密度，并通过降低终末白细胞介素6和碱性磷酸酶浓度来调节骨代谢。体外实验表明，橄榄苦苷促进了成骨细胞的增殖，并上调了骨保护素蛋白和mRNA的表达，同时抑制了核转录因子κB受体活化因子配体(receptor activator of nuclear factor-κB ligand,RANKL)蛋白和mRNA的表达。这一作用机制与调节骨保护素/RANKL系统的平衡密切相关，展现出能提高骨密度，又能通过调节骨代谢相关因子来维护骨骼健康的优势，但对Ca2+浓度无显著影响，可能限制了其在某些特定骨质疏松类型中的应用。(3)松果菊苷通过降低磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidylinositol 3 kinase,PI3K)的表达、减少蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)的磷酸化程度和破骨特殊标记蛋白(c-Fos)的表达，有效抑制了破骨细胞中PI3K/Akt/c-Fos通路的激活。这一抑制作用降低了破骨细胞的增殖和成熟能力，从而有助于减少骨吸收，其优势能直接针对破骨细胞进行干预，为骨质疏松症的治疗提供了新的靶点，但是目前对破骨细胞的具体调控机制尚需深入研究，且其长期效果和安全性需进一步评估。(4)女贞子活性成分在骨质疏松方面展现出良好的治疗效果，但其作用机制复杂，涉及多个基因、蛋白和信号通路的相互作用，未来需开展大规模的临床试验以验证其有效性和安全性，同时需要进一步探索女贞子活性成分与其他药物的联合应用策略，以期获得更好的治疗效果。

关键词：女贞子骨质疏松症氧化应激骨吸收成骨分化信号通路发病机制综述Wnt/β-catenin通路

不同归经寄主桑寄生对去卵巢骨质疏松大鼠的骨保护作用及机制

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中国实验方剂学杂志 2024年第7期30卷 112-120页

作者：韦迪张维琦莫琼韦少宣覃文慧广西中医药大学药学院南宁530200 广西中医药大学广西中药药效研究重点实验室南宁530001 广西中医药大学第一附属医院南宁530200 桂林市人民医院广西桂林541002

目的:比较不同归经寄主桑寄生对去卵巢骨质疏松大鼠骨微观结构、骨代谢的影响,并探析其作用机制。方法:选取88只SPF级雌性SD大鼠,随机分为11组:假手术组,模型组,桑树寄生低、中、高剂量组(2.5、5、10 g·kg^(-1)),肉桂寄生低、中、高剂... 详细信息

目的:比较不同归经寄主桑寄生对去卵巢骨质疏松大鼠骨微观结构、骨代谢的影响,并探析其作用机制。方法:选取88只SPF级雌性SD大鼠,随机分为11组:假手术组,模型组,桑树寄生低、中、高剂量组(2.5、5、10 g·kg^(-1)),肉桂寄生低、中、高剂量组(2.5、5、10 g·kg^(-1)),阴香寄生低、中、高剂量组(2.5、5、10 g·kg^(-1))。药物干预12周后进行取材,使用双能X射线骨密度仪(DXA)和微计算机断层扫描(Micro-CT)检测大鼠股骨近端骨密度及骨微结构情况;苏木素-伊红(HE)染色观察大鼠股骨组织病理学变化;采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测大鼠血清中雌二醇(E_(2))、骨钙素(BGP)、骨碱性磷酸酶(BALP)、抗酒石酸酸性磷酸酶(TRACP-5b)、Ⅰ型前胶原氨基端原肽(PINP)的含量;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测大鼠肱骨中骨形态发生蛋白-2(BMP-2)、Smad1、Smad9、Runt相关转录因子2(Runx2)的mRNA表达;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测大鼠肱骨中BMP-2、p-Smad1/5/9、Runx2蛋白表达量。结果:与假手术组比较,模型组大鼠股骨微结构明显破坏,骨密度(BMD)、骨体积分数(BV/TV)、骨小梁数量(Tb.N)、骨小梁厚度(***)显著下降(P<0.01),骨小梁分离度(***)、结构模型指数(SMI)显著上升(P<0.01);血清中BGP、BALP、TRACP-5b和PINP含量明显升高(P<0.05,P<0.01),E_(2)含量显著降低(P<0.01);大鼠肱骨中BMP-2、Smad1、Smad9、Runx2 mRNA表达显著降低(P<0.01),BMP-2、p-Smad1/5/9、Runx2蛋白表达显著降低(P<0.01)。与模型组比较,不同归经寄主桑寄生给药组均能提升骨质疏松大鼠股骨BMD和BV/TV、Tb.N、***,降低***、SMI,改善骨微结构,提高骨质疏松大鼠血清E_(2)含量(P<0.05,P<0.01),降低骨质疏松大鼠血清BGP、BALP、TRACP-5b、PINP含量,上调BMP-2、Smad1、Runx2 mRNA表达,上调Smad9 mRNA表达(P<0.05,P<0.01),上调BMP-2、p-Smad1/5/9、Runx2的蛋白表达(P<0.01);其中多项指标显示肉桂寄生组效果最好。结论:不同归经寄主桑寄生均可改善去卵巢大鼠的骨质疏松症,其中肉桂寄生给药组药效最佳,其治疗骨质疏松症可能是通过调控BMP/Smad信号通路,调节骨转换的平衡。

关键词：桑寄生不同归经寄主骨质疏松骨密度骨形态发生蛋白(BMP)/Smad通路

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枢经推拿对神经病理性疼痛大鼠去泛素化酶OTUB1介导mTORC1信号通路的调控及镇痛机制研究

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辽宁中医杂志 2024年

作者：王天翊杨旺石罗玉梁英业唐宏亮广西中医药大学防城港市中医医院广西中医药大学第一附属医院

目的：探讨枢经推拿对神经病理性疼痛(neuropathicpain，NPP)大鼠去泛素化酶OTUB1介导mTORC1信号通路去泛素化修饰的影响及其镇痛分子学机制。方法：将56只SD大鼠随机分为7组：空白对照组、假手术组、阴性对照组、模型组、假推拿组、枢... 详细信息

目的：探讨枢经推拿对神经病理性疼痛(neuropathicpain，NPP)大鼠去泛素化酶OTUB1介导mTORC1信号通路去泛素化修饰的影响及其镇痛分子学机制。方法：将56只SD大鼠随机分为7组：空白对照组、假手术组、阴性对照组、模型组、假推拿组、枢经推拿组和OTUB1过表达组，每组8只。除空白对照组和假手术组，其余5组均建立L5脊神经结扎模型（SNL模型）。OTUB1过表达组和阴性对照组在造模后实施鞘内注射腺病毒和阴性对照试剂；于术后第1d开始对枢经推拿组、假推拿组进行干预，连续干预14d。于术前（0d）、术后1d、3d和第14d对各组大鼠测定其机械性刺激缩足阈值（PWMT）和热痛缩足反应潜伏期(PWTL)；于术后第14d检测各组大鼠OTUB1、DEPTOR、mTORC1蛋白、DEPTOR蛋白的泛素化状态以及ULK1复合物的蛋白以及血清IL-1β的含量。结果：（1）术后14d，与模型组比较，枢经推拿组的PWMT和PWTL升高；与阴性对照组比较，OTUB1过表达组的PWMT和PWTL升高（P均<0.05）。（2）术后14d，与模型组相比较，枢经推拿组的OTUB1、ULK1复合物的水平含量升高，与UB的结合水平明显增多，mTORC1和血清IL-1β表达水平明显下降；与阴性对照组比较，OTUB1过表达组的OTUB1、ULK1复合物的水平含量升高，与UB的结合水平明显增多，血清IL-1β表达水平明显下降（P均<0.05）。结论：枢经推拿能缓解SNL大鼠痛觉过敏症状。其机制可能与通过上调去泛素化酶OTUB1，抑制DEPTOR的泛素化，增强DEPTOR的稳定性，从而抑制下游mTORC1蛋白的活性，激活ULK1复合物的表达，减少炎症因子IL-1β的表达相关。

关键词：神经病理性疼痛枢经推拿去泛素化镇痛机制

基于miR-153/TREM1探讨健神利水方对脑出血大鼠神经细胞凋亡的作用机制

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世界科学技术-中医药现代化 2024年第3期26卷 829-836页

作者：高玉广钟洁刘永辉黄德庆黄树武刘泰广西中医药大学第一附属医院南宁530023

目的探究健神利水方对脑出血大鼠神经细胞凋亡的作用机制。方法通过miRNA微阵列芯片和RT-PCR分析出脑出血中miR-153的表达,观察并分析miR-153与脑出血神经细胞凋亡关系;预测miR-153的靶基因,采用双荧光素酶报告基因实验观察其与靶基因... 详细信息

目的探究健神利水方对脑出血大鼠神经细胞凋亡的作用机制。方法通过miRNA微阵列芯片和RT-PCR分析出脑出血中miR-153的表达,观察并分析miR-153与脑出血神经细胞凋亡关系;预测miR-153的靶基因,采用双荧光素酶报告基因实验观察其与靶基因的结合情况,观察过表达和抑制miR-153对靶基因的影响,随后,明确靶基因与脑出血神经细胞凋亡关系,最后观察健神利水方对miR-153、靶基因的影响,最终探究健神利水方对脑出血大鼠神经细胞凋亡的相关机制。结果微阵列芯片和RT-PCR检测表明miR-153在脑出血中是低表达的(P区域,双荧光素酶报告基因实验证明两者具有结合关系,当miR-153过表达时,TREM1表达量会下调,相反,当miR-153抑制时,TREM1表达量会上调,TREM1与神经细胞凋亡呈正相关(R:0.857,P<0.001)。健神利水方组的TREM1表达量、神经细胞凋亡数量、神经功能缺损评分均低于模型组(P<0.05),miR-153表达量高于模型组(P<0.05)。健神利水方+miR-153抑制组的TREM1表达量、神经细胞凋亡数量、神经功能缺损评分均高于健神利水方组(P<0.05)。结论健神利水方通过促进miR-153表达,抑制TREM1表达来达到抑制脑出血大鼠神经细胞凋亡,保护神经功能。

关键词：脑出血健神利水方 miR-153 TREM1 外泌体神经细胞凋亡

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