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TLR信号转导通路及其抗病毒感染机制的研究现状

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现代免疫学 2012年第4期32卷 348-352,F0003页

作者：朱博冷静王坤广西中医药大学微生物学与免疫学教研室南宁530001

Toll样受体(Toll like receptor,TLR)是近年来发现的机体识别病原相关分子模式(pathogen associated molecular pat-tern,PAMP)从而激活固有免疫应答的重要受体系统,并可激起适应性免疫应答,其通过介导多种信号转导通路激活固有免疫,与... 详细信息

Toll样受体(Toll like receptor,TLR)是近年来发现的机体识别病原相关分子模式(pathogen associated molecular pat-tern,PAMP)从而激活固有免疫应答的重要受体系统,并可激起适应性免疫应答,其通过介导多种信号转导通路激活固有免疫,与宿主抵抗病毒感染、炎症反应及自身免疫性疾病有直接关系。本文就TLR的分子结构、分布、识别的配体、信号转导通路及抗病毒感染机制等的研究现状作一综述。

关键词： Toll样受体信号转导固有免疫抗病毒感染

慢性HBV感染者CD8^+T细胞CD95、CD38、HLA-DR表达的变化和意义

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广东医学 2016年第20期37卷 3043-3045页

作者：杨洋冷静彭丽珊刘显王登嵘李中华肖健广西中医药大学组织胚胎学教研室南宁530001 广西中医药大学医学免疫学与微生物学教研室南宁530001

目的检测慢性HBV感染者外周血CD8^+T细胞CD95、CD38、HLA-DR表达水平,探索HBV感染过程中CD8^+T细胞活化与耗竭的相关性。方法收集未经抗病毒治疗的HBV感染者76例及健康对照者14例外周血,根据外周血HBV DNA水平分为高病毒载量组与低病毒... 详细信息

目的检测慢性HBV感染者外周血CD8^+T细胞CD95、CD38、HLA-DR表达水平,探索HBV感染过程中CD8^+T细胞活化与耗竭的相关性。方法收集未经抗病毒治疗的HBV感染者76例及健康对照者14例外周血,根据外周血HBV DNA水平分为高病毒载量组与低病毒载量组;使用流式细胞术检测HBV感染者CD8^+T细胞CD95、CD38、HLA-DR的表达以及共表达水平,同时进行相关性分析。结果与健康对照组比较,慢性HBV感染者CD8^+T细胞CD95、HLA-DR的表达、CD38和HLA-DR的共表达水平显著升高(P<0.01);CD8^+T细胞CD95与HLA-DR表达呈正相关(P<0.05)。结论慢性HBV感染过程中CD95的表达可能对外周血CD8^+T细胞的耗竭过程发挥重要作用,而HLA-DR的表达升高和CD38+HLA-DR+CD8^+T细胞频率的升高提示CD8^+T细胞仍然维持着一定的效应潜能。

关键词： CD8^+T细胞 CD95 CD38 HLA-DR HBV 活化与耗竭

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核因子κB在病毒感染过程中的研究进展

医学综述 2016年第10期22卷 1877-1880页

作者：彭丽珊刘显肖健广西中医药大学医学免疫学与微生物学教研室

核因子κB(NF-κB)广泛地存在于各种真核细胞中,通过调控靶基因的表达参与多种病理和生理过程,包括免疫应答、炎症反应、发育、细胞生长和凋亡等。近年研究发现,NF-κB的活化在病毒感染中也有重要作用,各种病毒通过介导NF-κB信号通路,... 详细信息

核因子κB(NF-κB)广泛地存在于各种真核细胞中,通过调控靶基因的表达参与多种病理和生理过程,包括免疫应答、炎症反应、发育、细胞生长和凋亡等。近年研究发现,NF-κB的活化在病毒感染中也有重要作用,各种病毒通过介导NF-κB信号通路,促使病毒在宿主体内复制转录。该文主要介绍NF-κB信号通路的分子组成与结构及其在病毒感染中的作用机制和研究进展。

关键词：核因子κB 信号通路病毒感染

基于免疫信息学的结核分枝杆菌多阶段多表位疫苗构建

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细胞与分子免疫学杂志 2023年第6期39卷 494-500页

作者：宁钰蔡一涵刘晓玲谷晨晨孟祥英乔晋娟潍坊医学院医学检验学院临床微生物学教研室山东潍坊261053

目的构建一种包含结核分枝杆菌(MTB)早期分泌蛋白和潜伏感染相关抗原表位的多阶段多表位疫苗。方法运用免疫信息学方法预测12个MTB蛋白的B细胞、细胞毒性T淋巴细胞(CTL)和辅助性T细胞(HTL)表位,从中筛选具有抗原性且无细胞毒性和致敏性... 详细信息

目的构建一种包含结核分枝杆菌(MTB)早期分泌蛋白和潜伏感染相关抗原表位的多阶段多表位疫苗。方法运用免疫信息学方法预测12个MTB蛋白的B细胞、细胞毒性T淋巴细胞(CTL)和辅助性T细胞(HTL)表位,从中筛选具有抗原性且无细胞毒性和致敏性的表位构建多表位疫苗,并进行理化性质分析、二级结构预测,3D建模,模型精制、质量验证,与Toll样受体4(TLR4)受体分子对接,最后进行免疫模拟。结果MTB表位疫苗共包含12个B细胞表位、11个CTL表位和12个HTL表位,具有灵活、稳定的球形构象,热稳定性和亲水性好,可与TLR4稳定相互作用。免疫模拟表明该疫苗能够同时激发有效的细胞和体液免疫应答。结论提出了一种基于免疫信息学技术的多阶段多表位MTB疫苗构建策略,该疫苗可能对活动期和潜伏性MTB感染有预防作用。

关键词：结核分枝杆菌(MTB) 疫苗免疫信息学潜伏性结核感染表位

结核分枝杆菌PE22/PPE36融合蛋白对耻垢分枝杆菌表型及巨噬细胞功能影响的研究

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中国人兽共患病学报 2023年第6期39卷 523-532页

作者：杨雨婷李玉洁余海燕杨国平大理大学基础医学院医学微生物学与免疫学教研室大理671000 大理大学云南省昆虫生物医药研发重点实验室大理671000

目的将结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,Mtb)PE/PPE家族重组融合蛋白PE22/PPE36异源表达于耻垢分枝杆菌(Mycobacterium smegmatis,Ms)后,探讨其对Ms表型及巨噬细胞功能的影响,分析其在Mtb感染过程中发挥的作用。方法原核表达... 详细信息

目的将结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,Mtb)PE/PPE家族重组融合蛋白PE22/PPE36异源表达于耻垢分枝杆菌(Mycobacterium smegmatis,Ms)后,探讨其对Ms表型及巨噬细胞功能的影响,分析其在Mtb感染过程中发挥的作用。方法原核表达获取融合蛋白PE22/PPE36,纯化后免疫6~8周龄小鼠制备多克隆抗体;电击法构建重组菌Ms_PE22/PPE36及Ms_vec,并用所制备的多克隆抗体验证重组融合蛋白在Ms中的表达。将重组菌接种于2×YT培养基中观察其菌落形态及生长曲线;点板法及菌落计数法检测重组菌在H_(2)O_(2)、SDS、溶菌酶、NaNO_(2)、低pH、饥饿等压力条件下的存活情况,以分析PE22/PPE36融合蛋白对Ms表型的影响;重组菌侵染巨噬细胞ANA-1及RAW 264.7后,流式细胞术检测ANA-1细胞凋亡率,ELISA法检测ANA-1细胞TNF-α及IL-6分泌量,Griess法检测ANA-1及RAW 264.7细胞NO分泌量并用通道抑制剂检测所涉及的通路,菌落计数法检测重组菌在ANA-1及RAW 264.7细胞内的存活情况。结果与Ms_vec组相比,Ms_PE22/PPE36的菌落形态、生物膜形成及在溶菌酶、NaNO_(2)、低pH等压力条件下的存活率差异无统计学意义(溶菌酶:t 3 h=0.082,t 6 h=0.174,t 9 h=0.355;NaNO_(2):t 3 h=0.950,t 6 h=1.274;低pH:t 3 h=1.869,t 6 h=1.119,t 9 h=0.091;均P>0.05);在H_(2)O_(2)、SDS压力条件下存活率明显降低(H_(2)O_(2):t 6 h=4.35,t 8 h=4.80;SDS:t 4 h=10.43,t 6 h=2.793;均P0.05),在RAW 264.7细胞内的存活率明显降低(t_(48)h=5.509,t_(72)h=5.417;均P免疫应答。

关键词：结核分枝杆菌耻垢分枝杆菌 PE22/PPE36融合蛋白巨噬细胞

基于CRISPR/Cas9技术建立 Pkd1基因条件敲除的多囊肾小鼠模型

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中华肾脏病杂志 2023年第9期39卷 697-704页

作者：马广强王荣亮牛玲万红娇闫成花王立元江西中医药大学中医学院病原生物学与免疫学教研室南昌330004 江西中医药大学图书馆南昌330004

目的基于CRISPR/Cas9和Cre-loxP基因编辑技术建立多囊肾病1(polycystic kidney disease 1, Pkd1)基因条件敲除小鼠模型, 为深入研究Pkd1基因在多囊肾病发生中的作用提供动物模型。方法采用In-Fusion技术构建打靶载体, 根据Pkd1基因制备... 详细信息

目的基于CRISPR/Cas9和Cre-loxP基因编辑技术建立多囊肾病1(polycystic kidney disease 1, Pkd1)基因条件敲除小鼠模型, 为深入研究Pkd1基因在多囊肾病发生中的作用提供动物模型。方法采用In-Fusion技术构建打靶载体, 根据Pkd1基因制备对应的gRNA、Cas9 mRNA及携带loxP位点的供体载体, 共同注射于C57BL/6N小鼠的受精卵内。将受精卵转移至有假孕状态雌性小鼠的输卵管内部。幼鼠出生后经PCR鉴定及测序分析分选出Pkd1flox/flox基因型F0代阳性小鼠, 后者与野生型小鼠配繁, 筛选出后代基因型为Pkd1flox/+的F1代杂合子小鼠, 内部扩繁获得基因型为Pkd1flox/flox的F2代纯合子小鼠, 该基因型小鼠再与Cre阳性表达的Ggt1-Cre小鼠杂交, 获得Pkd1flox/+Ggt1Cre基因型的F3代小鼠, F3代自交或与F2代Pkd1flox/flox回交得到Pkd1flox/floxGgt1Cre基因型的F4代小鼠, 即肾脏特异性Pkd1基因敲除(Ggt1-cKO)小鼠。采用PCR法鉴定小鼠基因型, 按基因鉴定结果分为野生型对照(WT)组(n=6)、Pkd1纯合子对照(PKD)组(n=6)和Ggt1-cKO敲除验证(CKO)组(n=6)。实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测各组小鼠肾脏和其他器官组织中Pkd1 mRNA的表达;HE染色检查各组小鼠肾组织病理改变;自动生化检测仪检测小鼠血清尿素氮和血清肌酐含量, 并计算肾脏系数。结果 PCR检测结果显示, CKO组子代小鼠基因型符合Pkd1flox/floxGgt1Cre。Pkd1基因仅在肾脏特异性表达, 其余组织中均未见表达。RT-qPCR结果显示, CKO组小鼠肾脏髓质Pkd1 mRNA相对表达量显著低于WT组和PKD组(均P<0.05)。肉眼可见CKO组小鼠肾脏体积较WT组增大了1倍左右, 光镜下可观察到CKO组小鼠肾脏有多个大小形态不一的空泡, 髓质组织间隙明显增加。CKO组小鼠肾脏系数、血清尿素氮和血清肌酐含量均显著高于WT组和PKD组(均P<0.05)。结论基于CRISPR/Cas9和Cre-loxP基因编辑技术可成功构建Pkd1基因条件敲除小鼠, 为进一步研究Pkd1基因在多囊肾病发生中的作用机制提供动物模型。

关键词：多囊肾疾病小鼠基因敲除 CRISPR-Cas系统 Pkd1基因 Cre-loxP

结核分枝杆菌ESX-1分泌系统与宿主巨噬细胞相互作用的研究进展

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中国人兽共患病学报 2023年第12期39卷 1218-1225页

作者：余海燕杨国平大理大学基础医学院医学微生物学及免疫学教研室大理671000 大理大学云南省昆虫生物医药研发重点实验室大理671000

结核分枝杆菌(Mtb)侵入宿主细胞并在宿主细胞中持续存在是Mtb感染引起致病的重要原因。当Mtb感染宿主时,可与宿主巨噬细胞(M?)相互作用并调节M?的功能,影响机体的固有免疫和适应性免疫应答反应。ESX-1分泌系统作为Mtb的主要分泌系统,能... 详细信息

结核分枝杆菌(Mtb)侵入宿主细胞并在宿主细胞中持续存在是Mtb感染引起致病的重要原因。当Mtb感染宿主时,可与宿主巨噬细胞(M?)相互作用并调节M?的功能,影响机体的固有免疫和适应性免疫应答反应。ESX-1分泌系统作为Mtb的主要分泌系统,能将Mtb分泌的蛋白质转运到宿主细胞中,发挥毒力及免疫调节作用;某些分泌蛋白具有高度免疫原性,并是强有效的T细胞抗原,可作为结核疫苗设计及结核病诊断的重要抗原。对ESX-1分泌系统与M?相互作用过程的机制研究是分析Mtb毒力因子的致病机理及疫苗研发的途径之一。因此,本文对Mtb的ESX-1分泌系统组成以及分泌蛋白对M?调控作用进行综述,分析ESX-1分泌系统因子在Mtb与宿主相互作用中发挥的作用,对于开发新的结核疫苗和药物控制结核病至关重要。

关键词： ESX-1分泌系统巨噬细胞结核分枝杆菌

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益生菌的作用机制及临床应用研究进展

轻工科技 2017年第5期33卷 28-30页

作者：农清栋屈泽强许凤妙肖健广西中医药大学医学免疫学与微生物学教研室广西南宁530200

益生菌是指对宿主人体有利而能够促进人类健康的微生物,主要通过调节肠道菌群、改善肠上皮细胞屏障功能、调节免疫应答等作用对机体产生有益的影响。益生菌被应用于多种临床疾病防治的研究,包括肠易激综合征、感染性腹泻、抗生素相关性... 详细信息

益生菌是指对宿主人体有利而能够促进人类健康的微生物,主要通过调节肠道菌群、改善肠上皮细胞屏障功能、调节免疫应答等作用对机体产生有益的影响。益生菌被应用于多种临床疾病防治的研究,包括肠易激综合征、感染性腹泻、抗生素相关性腹泻、炎症性肠病等。本文阐述益生菌的作用机制及临床应用进展,旨在为进一步研究开发益生菌提供参考依据。

关键词：益生菌作用机制临床应用

《医学免疫学》课程中引入自主学习的实践与体会

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中国免疫学杂志 2017年第11期33卷 1716-1717,1722页

作者：官妍汪长中安徽中医药大学微生物与免疫学教研室合肥230031

培养＂知识宽、基础厚、能力强、素质高＂的医学人才是我国医学教育的根本目标。提倡学生的全面发展、自我发展、持续发展,加强对医学人才整体素质的培养,也是医学教育改革面临的重大课题之一[1]。目前,提高教育质量的潮流指向,是以学... 详细信息

培养＂知识宽、基础厚、能力强、素质高＂的医学人才是我国医学教育的根本目标。提倡学生的全面发展、自我发展、持续发展,加强对医学人才整体素质的培养,也是医学教育改革面临的重大课题之一[1]。目前,提高教育质量的潮流指向,是以学生为中心,以价值观为导向,培养创新精神[2]。创新精神的培养,重点体现在以问题为中心的探究式学习、实践式学习、合作式学习等方面。学习方式的转变是当前我国进行的课程改革的显著特征。

关键词：自主学习医学免疫学医学教育改革合作式学习自我发展教育质量学习效果创新精神临床免疫学合作探究