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基于单细胞转录组探讨新型冠状病毒感染后慢性疲劳综合征与炎症反应、氧化应激、细胞凋亡之间分子机制及其潜在干预中药预测

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中草药 2024年第11期55卷 3774-3788页

作者：黎祖鸣封杰妮陈雪如卢月黄涛亮李际强杨荣源陈剑坤刘云涛广州中医药大学第二临床医学院广东广州510405 广州中医药大学第二附属医院(广东省中医院) 广东广州510120 中医证候全国重点实验室广东广州510120 广东省中医急症研究重点实验室广东广州510120

目的通过分析新型冠状病毒感染后(简称“新冠后”)慢性疲劳综合征(chronic fatigue syndrome,CFS)患者与正常受试者的单细胞转录组数据,探讨新冠后CFS与炎症反应、氧化应激和细胞凋亡之间的分子机制,并预测调控关键基因的潜在中药,为治... 详细信息

目的通过分析新型冠状病毒感染后(简称“新冠后”)慢性疲劳综合征(chronic fatigue syndrome,CFS)患者与正常受试者的单细胞转录组数据,探讨新冠后CFS与炎症反应、氧化应激和细胞凋亡之间的分子机制,并预测调控关键基因的潜在中药,为治疗新冠后CFS提供理论支持。方法使用R语言4.2.1中的“Seurat”包处理新冠后CFS患者与正常受试者的外周血单细胞测序数据,“CellChat”包进行细胞通讯分析,“scMetabolism”包评估细胞代谢特征,综合5种算法(AddModuleScore、AUCell、UCell、singscore和ssGSEA)计算新冠后CFS患者与正常受试者中5种免疫细胞炎症反应、氧化应激和细胞凋亡评分,并比较两者间的差异。使用“scCODE”包鉴定各类免疫细胞在正常受试者与新冠后CFS患者之间的差异表达(differential expression,DE)基因。Upset图分析得到新冠后CFS炎症反应相关基因(inflammatory response related genes,IRGs)、氧化应激相关基因(oxidative stress related genes,OSRGs)和细胞凋亡相关基因(apoptosis related genes,ARGs)。使用“ClusterProfiler”包分别对IRGs、OSRGs、ARGs进行基因本体生物学过程(gene ontology biological process,GOBP)富集分析。基于STRING数据库及Cytoscape软件构建“IRGs-OSRGs-ARGs”分子交互复杂网络,使用cytoHubba插件筛选关键基因。利用COREMINE数据库预测调控关键基因的中药,并通过古今医案云平台统计中药的性味归经、药物功效分类。结果共鉴定出5种免疫细胞,分别为B细胞、CD4^(+)T细胞、CD8^(+)T细胞、NK细胞和单核细胞。相比于正常受试者,新冠后CFS患者的细胞通讯更为丰富且强度更大,两者之间并无明显差异的细胞代谢特征。新冠后CFS患者中各类免疫细胞的炎症反应、氧化应激和细胞凋亡评分普遍高于正常受试者。共得到33个IRGs、17个OSRGs和54个ARGs。“IRGs-OSRGs-ARGs”分子交互网络显示,IRGs、OSRGs和ARGs之间存在密切联系,最后鉴定出8个关键基因。干预中药药性以寒为主,温、平次之;药味以苦、辛、甘为主;归经以肝、脾、肺为主;功效分类以补虚药(甘草、人参等)、清热药(黄芩、鱼腥草等)、活血化瘀药(郁金、丹参等)为主。结论新冠后CFS患者存在异常的炎症反应、氧化应激和细胞凋亡状态,且三者之间密切关联。8个关键基因(TNF、BCL2、CTNNB1、CXCL8、IFNG、HIF1A、MCL1、CYCS)可能是新冠后CFS的潜在治疗靶标。临床治疗新冠后CFS应注重补虚药、清热药及活血化瘀等药物的配伍使用。

关键词：新型冠状病毒感染慢性疲劳综合征单细胞转录组炎症反应氧化应激细胞凋亡甘草人参黄芩鱼腥草郁金丹参

膝关节股骨内侧髁自发性骨坏死的阶梯治疗策略

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中国组织工程研究 2024年第12期28卷 1907-1913页

作者：潘建科杨美平韩燕鸿赵第黄和涛曹厚然刘军罗明辉李想陈红云杨伟毅广州中医药大学第二附属医院(广东省中医院)运动医学科广东省广州市510120 广州中医药大学第二临床医学院广东省广州市510405 广东省第二中医院广东省广州市510095

背景:目前临床上对于膝关节自发性骨坏死已经有多种保守治疗和手术的方案,并取得了优良的效果,但在手术指征和具体手术方案选择方面尚未形成广泛的共识,临床中仍存在一发现膝关节自发性骨坏死就行单髁置换或全膝关节置换的误区,亟需普... 详细信息

背景:目前临床上对于膝关节自发性骨坏死已经有多种保守治疗和手术的方案,并取得了优良的效果,但在手术指征和具体手术方案选择方面尚未形成广泛的共识,临床中仍存在一发现膝关节自发性骨坏死就行单髁置换或全膝关节置换的误区,亟需普及阶梯治疗的理念。目的:从文献和临床病例中总结发现导致膝关节股骨内侧髁自发性骨坏死保守治疗效果欠佳的因素,同时与Koshino分期结合,提出膝关节股骨内侧髁自发性骨坏死阶梯治疗的策略。方法:系统检索文献数据库,总结发现导致膝关节股骨内侧髁自发性骨坏死保守治疗效果欠佳的因素。同时检索住院电子病例系统回顾性分析2017年1月至2023年1月在广东省中医院骨科因膝关节股骨内侧髁自发性骨坏死行保守和手术治疗的病例,对典型病例治疗成功和失败的原因进行总结分析。结果与结论:①膝关节自发性骨坏死的早诊断和早治疗,对预后有着非常重要的意义。临床上对突发的膝关节疼痛,X射线片检查未见明显异常时,如症状持续不能缓解大于1周,建议行MRI检查,可以发现早期的膝关节自发性骨坏死。②膝关节股骨内侧髁自发性骨坏死的Koshino1期和2期的影像在X射线片下较难区分,需借助MR进行区分,Koshino 1期MR图像主要以骨髓水肿为主,尚未形成边界清晰的骨坏死区,而Koshino 2期MR上可见边界清晰的坏死区。③总结出5个导致膝关节股骨内侧髁自发性骨坏死保守治疗效果欠佳的因素:a.坏死区面积>5 cm^(2);b.坏死区占比超过髁的40%;c.内侧半月板相对挤压百分比≥33%(伴或不伴随内侧半月板损伤、软骨下骨髓水肿);***上坏死区深度(矢状位坏死区域前后径)>20 mm;e.下肢力线内翻>6°。④Koshino 1期的膝关节自发性骨坏死保守治疗效果良好。Koshino 2期的膝关节自发性骨坏死,优先选择保守治疗方案;或在保守治疗方案的基础上配合行钻孔减压治疗;如果保守治疗3个月后症状没有减轻或MR上没有改善时,患者同时存在5个因素中的任一个,则应考虑行保膝手术治疗。Koshino 3期和4期的膝关节自发性骨坏死,需在考虑5个因素的基础上,同时兼顾患者年龄、性别和活跃程度,选择保膝手术治疗。对于合并症状性髌股关节炎、外翻畸形、坏死区范围大影响单髁假体稳定性等的Koshino 4期膝关节股骨内侧髁自发性骨坏死,采用全膝关节置换治疗。

关键词：膝关节自发性骨坏死膝关节软骨下不全骨折半月板突出半月板损伤阶梯诊疗决策

外周血单核细胞预测老年重症流感风险模型的建立及靶向中药预测

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中草药 2024年第10期55卷 3420-3432页

作者：黎祖鸣封杰妮符珊珊陈俊旭甘考卢月陈剑坤刘云涛杨荣源李际强黄涛亮广州中医药大学第二临床医学院广东广州510405 广州中医药大学第一临床医学院广东广州510405 广州中医药大学第二附属医院(广东省中医院) 广东广州510120 广东省中医急症研究重点实验室广东广州510120 中医证候全国重点实验室广东广州510120

目的综合分析老年流感单细胞转录组测序(single cell transcriptome sequencing,scRNA-seq)和转录组测序(transcriptome sequencing,RNA-seq)数据集,构建老年重症流感风险预测模型,并预测调控相关免疫细胞群的中药。通过统计分析中药的... 详细信息

目的综合分析老年流感单细胞转录组测序(single cell transcriptome sequencing,scRNA-seq)和转录组测序(transcriptome sequencing,RNA-seq)数据集,构建老年重症流感风险预测模型,并预测调控相关免疫细胞群的中药。通过统计分析中药的性味归经、药物分类,为中医药治疗老年流感提供理论支持。方法通过scRNA-seq和RNA-seq数据集得到具有较高预测能力的老年流感相关免疫细胞群及其关键基因。基因本体生物学过程(gene ontology biological process,GOBP)、标志性基因集(Hallmark gene set)、京都基因与基因组百科全书(Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)和Reactome生物通路知识库富集分析揭示关键基因参与的生物过程及通路。循环算法用于构建老年重症流感风险预测模型。CTD和COREMINE数据库查找对关键基因有调控作用的化学成分及中药,并通过古今医案云平台统计高频中药的性味归经、药物分类。结果单核细胞及其相关基因对于老年流感具有较高的预测能力。老年流感单核细胞相关基因显著富集在感染、代谢和炎症免疫等生物过程及信号通路。5个基因(BCL6、PLSCR1、FCGR1A、RETN、RPL9)的组合可较为准确预测老年重症流感。根据参考文献筛选出42种化学成分,得到高频中药石斛、灵芝、地骨皮、人参、桑叶等;药性以平、寒、温为主;药味以甘、苦、辛为主;归经以肝、脾、肺经居多;以补虚药、清热药、利水渗湿药、解表药、活血化瘀药、消食药、止咳平喘药为主。结论单核细胞可能在老年流感中发挥重要作用。BCL6、PLSCR1、FCGR1A、RETN、RPL9可能是老年重症流感的潜在诊断及治疗靶标。通过生物信息学分析得出老年流感单核细胞相关基因及对应的高频中药,为治疗老年流感的中药新药开发及临床应用提供了新思路。

关键词：老年重症流感单细胞转录组转录组风险预测模型单核细胞石斛灵芝地骨皮人参桑叶

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血液代谢物与骨质疏松症的孟德尔随机化研究

中国骨质疏松杂志 2024年第8期30卷 1164-1168,1203页

作者：高志杰汪悦东张志海广州中医药大学第二临床医学院广东广州510000 广东省中医院广东广州510000 广州中医药大学第一附属医院广东广州510000 广州中医药大学第三附属医院广东广州510000

目的采用孟德尔随机化分析方法研究1400种血液代谢物与骨质疏松症发病风险的因果关系。方法获取1400种血液代谢物与骨质疏松症的全基因组关联研究数据,将单核苷酸多态性作为工具变量并选择敏感的SNPs进行分析。通过IVW、WM、MR-Egger回... 详细信息

目的采用孟德尔随机化分析方法研究1400种血液代谢物与骨质疏松症发病风险的因果关系。方法获取1400种血液代谢物与骨质疏松症的全基因组关联研究数据,将单核苷酸多态性作为工具变量并选择敏感的SNPs进行分析。通过IVW、WM、MR-Egger回归法进行两样本孟德尔随机化分析,以OR值检验1400种血液代谢物与骨质疏松症之间的因果关系,并完成敏感性和多效性检验。结果6种血液代谢物与骨质疏松症显著相关,GCST90199879、GCST90200092、GCST90200368、GCST90200656、GCST90200664、GCST90200973与骨质疏松症的孟德尔随机化分析结果显示,IVW法的OR值分别为0.973(95%CI:0.954~0.991,P=0.004)、0.883(95%CI:0.805~0.968,P=0.008)、1.111(95%CI:1.030~1.197,P=0.006)、1.147(95%CI:1.038~1.267,P=0.007)、1.069(95%CI:1.022~1.119,P=0.004)、0.741(95%CI:0.602~0.914,P=0.005),表明血液代谢物与骨质疏松症之间存在因果关系。IVW(P>0.05)和MR-Egger回归(P>0.05)的Cochran Q检验表明SNPs并不存在异质性。MR-Egger法的egger_intercept和0差异没有统计学意义(P>0.05),SNPs不存在水平多效性。结论本研究提示了6种血液代谢物与骨质疏松症之间存在因果关系,这为探讨血液代谢物介导的骨质疏松症的发病机制提供了新的认知。

关键词：骨质疏松症血液代谢物孟德尔随机化因果关系

基于急诊床旁超声多维联合教学模式在急诊住院医师规范化培训教学中的应用

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中华急诊医学杂志 2024年第6期33卷 853-857页

作者：刘荃乐李尊江吴绮琪陈瑞陈墩帆李国炜丁邦晗广州中医药大学第二附属医院广东省中医院广州中医药大学第二临床医学院急诊科广州510120

目的探讨基于急诊床旁超声多维联合教学模式在急诊住院医师规范化教学中的应用价值。方法选取2020年1月至2022年12月在广州中医药大学第二附属医院急诊科参加临床工作的住院医师规范化培训的学生,将受试者随机分为教学改革组(HC组)和传... 详细信息

目的探讨基于急诊床旁超声多维联合教学模式在急诊住院医师规范化教学中的应用价值。方法选取2020年1月至2022年12月在广州中医药大学第二附属医院急诊科参加临床工作的住院医师规范化培训的学生,将受试者随机分为教学改革组(HC组)和传统教学组(N组),比较两组不同教学模式在理论试题测试、操作测试及问卷调查的考核成绩。结果HC组在理论考试总分、操作总分均高于N组,差异均具有统计学意义(P<0.05)。问卷调查结果显示,HC组在提高学习效率、学习兴趣、自主学习能力、增强学习自信心、知识的掌握程度等项目的评价均高于N组,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论急诊床旁超声多维联合教学法较传统讲授式教学法可切实提高教学效果和教学质量,在急诊规培医生教学中具有重要价值。

关键词：慕课思维导图问题导向急诊床旁超声教学住院医师规范化培训

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肺结节中西医结合恶性风险预测模型的建立与验证

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中国实验方剂学杂志 2024年

作者：杨倩肖晶旻陈远彬吴蕾广州中医药大学第二临床医学院广东省中医院

目的：基于临床数据探索肺结节恶性风险的危险因素，构建肺结节中西医结合恶性风险预测模型并使用列线图将预测结果可视化。方法：基于横断面调查研究设计，纳入2023年4月-2024年1月于广东省中医院呼吸与心胸外科住院的肺结节患者，按7... 详细信息

目的：基于临床数据探索肺结节恶性风险的危险因素，构建肺结节中西医结合恶性风险预测模型并使用列线图将预测结果可视化。方法：基于横断面调查研究设计，纳入2023年4月-2024年1月于广东省中医院呼吸与心胸外科住院的肺结节患者，按7∶3随机将数据集分成训练集和验证集。在训练集中，通过单因素Logistic回归分析及LASSO回归分析选择预测因素，经Logistic回归方法建模，对西医及中西医结合预测模型的区分度、校准度及临床决策曲线等性能进行比较，筛选出最优模型，并使用列线图对模型进行可视化呈现。结果：本研究共纳入366例患者，划分为训练集（258例）及验证集（108例），可纳入年龄、嗜食肥甘厚腻、环境或职业暴露史、气虚质、阳虚质、结节密度及结节直径等7个预测因素。采用Logistic回归构建模型，仅以年龄、环境或职业暴露史、结节密度及结节直径为预测因素建立的西医模型定义为model1，而在以上基础上增加嗜食肥甘厚腻、气虚质和阳虚质为预测因素建立的中西医结合模型定义为model2，model2在训练集及验证集中具有更好的预测效能，其训练集准确率为0.740，精确率为0.825，召回率为0.829，F1分数为0.827，曲线下面积（Area Under the Curve，AUC）为0.865（95%CI：0.815-0.915），布里尔评分为0.122；验证集准确率为0.731，精确率为0.776，召回率为0.831，F1分数为0.803，AUC为0.852（95%CI：0.776-0.927），布里尔评分为0.149，校准曲线及决策曲线分析显示该模型在预测中具有较好的一致性与临床效用性。构建方程为肺结节恶性概率p= eY/(1+eY)，其中Y=-4.187+0.022×（年龄）+1.079×（环境或职业暴露史）+0.718×（嗜食肥甘厚腻）+1.403×（气虚质）+0.732×（阳虚质）+0.349×（纯磨玻璃密度结节）+1.304×（部分实性密度结节）+0.148×（结节直径），并采用直观的列线图进行展示。结论：本研究开发了一个肺结节恶性风险的综合评估模型，结合了中医和西医的因素，将中医元素嵌入预测模型可以多维度评估结节恶变的相关危险因素，具有良好的诊断效能，为早期识别肺癌提供一定的参考价值。

关键词：肺结节中西医结合预测模型

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揿针治疗变应性鼻炎临床疗效的Meta分析

针刺研究 2024年第5期49卷 534-543页

作者：何水恩凌曦淘刘一铭陈汉华广州中医药大学第二临床医学院广州510006 广东省中医院儿科广州510120 广东省中医院罗笑容名医工作室广州510120

目的:运用Meta分析评估揿针治疗变应性鼻炎(AR)的有效性和安全性。方法:检索自建库至2022年11月中国知网、万方数据库、维普中文科技期刊数据库、中国生物医学文献数据库、PubMed、Embase、Web of Science中关于揿针治疗AR的临床研究。... 详细信息

目的:运用Meta分析评估揿针治疗变应性鼻炎(AR)的有效性和安全性。方法:检索自建库至2022年11月中国知网、万方数据库、维普中文科技期刊数据库、中国生物医学文献数据库、PubMed、Embase、Web of Science中关于揿针治疗AR的临床研究。两名研究人员独立筛选文献并提取有关资料,其中总有效率、AR视觉模拟量尺(VAS)评分、鼻结膜炎生存质量评分(RQLQ)、复发率为主要结局指标,次要结局指标包括症状体征量化评分、“四分法”症状评价量表等。用Stata软件对所有纳入的研究数据进行Meta分析。结果:共纳入22篇临床研究,涉及1 491名参与者。Meta分析结果显示,揿针治疗AR的总有效率高于中西医常规疗法[RR=1.20,95%CI(1.14,1.26),P<0.001];复发率低于中西医常规疗法[OR=0.35,95%CI(0.14,0.89),P=0.027];VAS评分低于中西医常规疗法[WMD=-1.30,95%CI(-1.85,-0.75),P<0.001];RQLQ评分低于中西医常规疗法[WMD=-6.75,95%CI(-12.74,-0.76),P=0.027]。结论:基于目前的研究,揿针疗法可提高总有效率,降低疾病复发,改善AR发作的不适,并且无明显不良反应。但研究之间的异质性偏大,仍需大样本、设计严谨、符合国际规范的临床研究方案提高证据质量级别。

关键词：变应性鼻炎揿针临床研究临床疗效安全性 Meta分析

基于“血水同病”理论探讨中药调控子宫内膜异位症炎症微环境的研究进展

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中药新药与临床药理 2024年第6期35卷 928-934页

作者：郑玮琳符之逸温丹婷刘浩曹立幸广东省第二人民医院广东广州510220 广州中医药大学第二临床医学院广东广州511400 广州中医药大学第二附属医院广东省中医院广东广州510030

子宫内膜异位症(Endometriosis,EMs)是一种炎症性疾病,炎症微环境是其发生发展的关键环节。中医学认为“血水同病”,即湿瘀互结是EMs的关键病机,炎症微环境是EMs湿瘀状态的体现,正气不足导致水湿内生,瘀血停滞是湿瘀互结状态形成的基础... 详细信息

子宫内膜异位症(Endometriosis,EMs)是一种炎症性疾病,炎症微环境是其发生发展的关键环节。中医学认为“血水同病”,即湿瘀互结是EMs的关键病机,炎症微环境是EMs湿瘀状态的体现,正气不足导致水湿内生,瘀血停滞是湿瘀互结状态形成的基础。从现代分子生物学阐释EMs的发病机制,巨噬细胞调控的炎症微环境是“湿”形成的基础,巨噬细胞参与的血管生成是“血瘀”形成的关键。探讨EMs炎症微环境与“血水同病”理论的微观联系,有助于从新的视角阐明EMs的中医病机内涵;以巨噬细胞为靶点,可为EMs的中医证治提供有益参考。

关键词：子宫内膜异位症炎症微环境巨噬细胞重编程血水同病湿瘀互结生物学内涵

探讨活血养阴法调控Bcl-2/Bax通路改善精索静脉曲张大鼠生精功能的作用机制

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北京中医药大学学报 2024年

作者：梁仪春王文梁树麟付瑞杰覃湛耿立果何超拔袁少英广州中医药大学第二临床医学院广东省中医院珠海医院

目的基于Bcl-2/Bax通路探讨活血养阴法改善精索静脉曲张大鼠生精功能的作用机制。方法选取8周龄SD雄性大鼠30只，按随机数字表法分为假手术组、模型组、左卡尼汀组（1g/kg）、活血养阴法低剂量组（5.2g/kg）、活血养阴法中剂量组（10.... 详细信息

目的基于Bcl-2/Bax通路探讨活血养阴法改善精索静脉曲张大鼠生精功能的作用机制。方法选取8周龄SD雄性大鼠30只，按随机数字表法分为假手术组、模型组、左卡尼汀组（1g/kg）、活血养阴法低剂量组（5.2g/kg）、活血养阴法中剂量组（10.4g/kg）及活血养阴法高剂量组（20.8g/kg），每组5只。除假手术组外，其余大鼠均通过经典的Turner法复制精索静脉曲张模型。手术后4周，假手术组及模型组大鼠灌胃生理盐水，各给药组灌胃相应药物，每日1次，连续4周。灌胃结束后，使用计算机辅助精子分析仪检测精子质量，采用HE染色观察睾丸组织病理学形态并通过Johnsen评分评价睾丸生精功能，TUNEL法检测睾丸细胞凋亡情况，RT-qPCR检测睾丸组织Bcl-2及Bax mRNA表达，免疫组织化学法检测细胞色素C蛋白表达。结果与假手术组比较，模型组大鼠的精子总数、精子活动率及（a+b）级精子率均降低（P＜0.05）；睾丸组织中生精小管排列紊乱，有明显空泡样改变，Johnsen评分下降（P＜0.05）；睾丸细胞凋亡率增加（P＜0.05）；睾丸组织Bax mRNA表达上升（P＜0.05）；细胞色素C的阳性表达增加（P＜0.05）。与模型组比较，左卡尼汀组与各剂量活血养阴法组大鼠的精子总数、精子活动率及（a+b）级精子率均上升（P＜0.05）；大鼠睾丸病理学结构有不同程度的改善，活血养阴法中剂量组Johnsen评分增加（P＜0.05）；左卡尼汀组与各剂量活血养阴法组睾丸细胞凋亡率均下降（P＜0.05）；低剂量与高剂量活血养阴法组Bcl-2 mRNA表达上升（P＜0.05），左卡尼汀组与中剂量活血养阴法组BaxmRNA表达下降（P＜0.05）；中剂量活血养阴法组细胞色素C阳性表达下降（P＜0.05）。结论活血养阴法可提高精索静脉曲张大鼠的精子质量，修复损伤的睾丸组织结构，改善生精功能，其作用机制可能与激活Bcl-2/Bax凋亡通路、抑制细胞凋亡有关。

关键词：活血养阴法精索静脉曲张生精功能细胞凋亡 Bcl-2/Bax通路大鼠