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基于概念操作化的以证统病干预性临床研究方法学框架的构建

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中国循证医学杂志 2024年第10期24卷 1192-1197页

作者：黄仟禤美玲郭晓慧曹文聪刘冰清邱幸莹周莉温泽淮广州中医药大学第二附属医院/广东省中医院广州510120 广州中医药大学第二临床医学院广州510405

目的借鉴社会学领域的概念操作化方法,建立中医以证统病干预性临床研究方法学框架。方法对以证统病临床研究模式进行操作化定义,明确方法学框架构建的范围和方向。开展概况性评价总结以证统病临床研究的设计特征,归纳方法学框架的基本... 详细信息

目的借鉴社会学领域的概念操作化方法,建立中医以证统病干预性临床研究方法学框架。方法对以证统病临床研究模式进行操作化定义,明确方法学框架构建的范围和方向。开展概况性评价总结以证统病临床研究的设计特征,归纳方法学框架的基本结构与内容,并通过深度访谈获取中医专家的观点及建议,完善充实方法学框架。开展问卷调查初步评价方法学框架的合理性。结果共纳入74项以证统病临床研究进行分析,访谈了12位中医临床及科研领域专家,综合文献及访谈研究的结果形成了初步方法学框架;共32位专家参与问卷调查,大多数专家对方法学框架的合理性持积极评价,根据专家意见修订确立的最终方法学框架为四级结构,共25个细目。结论本研究遵循国际通用的方法学框架开发步骤,建立了合理、可行的以证统病干预性临床研究方法学框架,为未来同类研究提供了设计、实施和评价的技术参考。

关键词：异病同治以证统病临床研究概念操作化方法学框架

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阶梯整群随机试验的统计分析方法介绍

中国循证医学杂志 2024年第3期24卷 355-363页

作者：董昱黄闪闪赵梦娇张侨曾婧纯陆丽明广州中医药大学针灸康复临床医学院广州510000 广州中医药大学华南针灸研究中心临床研究与大数据实验室广州510000 广州中医药大学第一附属医院康复中心广州510405

阶梯整群随机试验(SW-CRT)是近年来出现的、主要应用于公共卫生政策领域的一种整群随机对照试验方法,逐渐引起卫生领域工作者的关注。而目前在国内外,这一试验方法的应用尚不广泛,样本量估算和统计学分析存在多种方式。本文介绍阶梯整... 详细信息

阶梯整群随机试验(SW-CRT)是近年来出现的、主要应用于公共卫生政策领域的一种整群随机对照试验方法,逐渐引起卫生领域工作者的关注。而目前在国内外,这一试验方法的应用尚不广泛,样本量估算和统计学分析存在多种方式。本文介绍阶梯整群随机试验原理、类别、与传统随机对照试验的差异,概述样本量估算及统计分析方法。总体而言,SW-CRT以群组、交叉设计、多个时间点的结果测量为特点;在样本量估算方面,需区分群组大小相同及不同的情况,常用的样本量估算程序可在Stata、R、SAS软件及固定的在线网站中实现,包括“Steppedwedge”程序、“swCRTdesign”程序、“Swdpwr”程序、“CRTpowerdist”程序、“Shiny CRT Calculator”工具等;依据SW-CRT的设计特点,在统计分析中,研究者还应该考虑时间效应、重复测量的混杂因素,常以广义线性混合模型(GLMM)和广义估计方程(GEE)分析方法为主。然而以上模型多数基于横断面研究提出,目前还缺少针对队列设计及存在过渡期的SW-CRT的统计方法,未来仍需开展更为全面的方法学探索。

关键词：阶梯整群随机试验 SW-CRT 交叉设计样本量计算统计分析

铁死亡对压疮的调控机制:生物信息学分析及实验结果验证

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中国组织工程研究 2024年第35期28卷 5656-5661页

作者：唐路路潘晓佳赖英桃王力广州中医药大学第一临床医学院广东省广州市510405 广州中医药大学第一附属医院广东省广州市510405 广州中医药大学基础医学院广东省广州市510006

背景:铁死亡介导的缺血再灌注损伤对压疮的发生发展起重要作用,可能存在压疮相关的铁死亡生物标志物,但其机制尚未阐明。目的:通过生物信息学手段探讨压疮的分子机制,寻找压疮过程中铁死亡相关差异基因,为其临床治疗提供新的视角。方法... 详细信息

背景:铁死亡介导的缺血再灌注损伤对压疮的发生发展起重要作用,可能存在压疮相关的铁死亡生物标志物,但其机制尚未阐明。目的:通过生物信息学手段探讨压疮的分子机制,寻找压疮过程中铁死亡相关差异基因,为其临床治疗提供新的视角。方法:使用GEO数据库和FerrDb数据库下载数据集并进行预处理。对单细胞转录组测序数据进行聚类和占比分析、代谢活性和拟时序分析、细胞通讯分析、铁死亡基因集细胞识别和富集分析,确定铁死亡差异基因,并通过动物实验进一步验证。将20只SD大鼠随机分为正常组和模型组,每组10只。正常组大鼠不进行任何处理,模型组大鼠采用缺血再灌注循环周期模式制备压疮大鼠模型,采用荧光定量PCR和免疫印迹检测压疮大鼠创面组织内差异表达基因和蛋白的变化。结果与结论:(1)单细胞转录组测序数据聚类划分为6种细胞类型,压疮组2型和3型角质形成细胞占比较高。(2)不同细胞亚群之间具有明显的代谢异质性和演变轨迹。(3)2型和3型角质形成细胞在细胞通讯中作用最强,2型角质形成细胞配体-受体强度最佳。(4)2型角质形成细胞铁死亡得分较高,有显著上调或下调的差异基因,并得到27个GO富集条目、20个KEGG富集条目和24个铁死亡相关差异基因,以谷胱甘肽过氧化物酶4(glutathione peroxidase 4,GPX4)和长链酯酰辅酶A合成酶4(acyl-CoA synthetase long chain family member 4,ACSL4)为主。(5)动物实验验证了与正常组相比,模型组大鼠铁死亡抑制蛋白GPX4表达下调,铁死亡促进蛋白ACSL4表达上调。上述结果证实,压疮组织中存在铁死亡,GPX4和ACSL4为调控压疮组织中铁死亡的重要基因。

关键词：生物信息学单细胞转录组测序压疮缺血再灌注组织损伤慢性创面铁死亡氧化应激 GPX4 ACSL4

痰热清注射液治疗老年重症肺炎的Meta分析与试验序贯分析

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中国中药杂志 2024年第4期49卷 1091-1101页

作者：姜艳辉倪世豪张先进黄婕刘浩辉许露廖慧丽薛东升杨忠奇广州中医药大学第一临床医学院广东广州510405 广州中医药大学第一附属医院广东广州510405 上海凯宝药业股份有限公司上海201401

该研究旨在系统评价痰热清注射液治疗老年重症肺炎的有效性及安全性,检索中、英文数据库以及临床试验注册平台,纳入18篇随机对照试验(RCTs),涉及1457例老年重症肺炎患者。采用Cochrane偏倚风险评估工具评价纳入文献的质量,采用RevMan 5.... 详细信息

该研究旨在系统评价痰热清注射液治疗老年重症肺炎的有效性及安全性,检索中、英文数据库以及临床试验注册平台,纳入18篇随机对照试验(RCTs),涉及1457例老年重症肺炎患者。采用Cochrane偏倚风险评估工具评价纳入文献的质量,采用RevMan 5.4及Stata 17软件进行Meta分析,采用TSA 0.***.5.10 beta软件进行试验序贯分析(TSA)。Meta分析结果显示,与常规西医治疗相比,痰热清注射液+常规西医能显著提高老年重症肺炎患者的临床有效率(RR=1.26,95%CI[1.20,1.32],P临床有效率的结果具有稳定性和可靠性。结果表明,痰热清注射液作为一种中药制剂,对老年重症肺炎具有显著的治疗效果和良好的安全性。考虑纳入文献质量偏低,研究结论仍需更多高质量的RCT提供证据支持。

关键词：痰热清注射液老年重症肺炎 Meta分析试验序贯分析

龙胆苦苷通过抑制LINC00473表达降低胃癌细胞HGC-27增殖、迁移和侵袭能力

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中国老年学杂志 2024年第1期44卷 203-206页

作者：邓明邓芳陈志坚广州中医药大学第一临床医学院广东广州510405 香港大学深圳医院中医科广州中医药大学第二临床医学院

目的探讨龙胆苦苷对胃癌细胞HGC-27增殖、迁移和侵袭的影响及作用机制。方法HGC-27细胞分为对照组(正常培养)和不同剂量龙胆苦苷组(分别用含10、20、40μmol/L龙胆苦苷的培养液培养24 h),MTT法检测细胞增殖,Transwell检测细胞迁移和侵袭... 详细信息

目的探讨龙胆苦苷对胃癌细胞HGC-27增殖、迁移和侵袭的影响及作用机制。方法HGC-27细胞分为对照组(正常培养)和不同剂量龙胆苦苷组(分别用含10、20、40μmol/L龙胆苦苷的培养液培养24 h),MTT法检测细胞增殖,Transwell检测细胞迁移和侵袭,实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测细胞中LINC00473和miR-6838-5p表达。转染LINC00473小干扰RNA或miR-6838-5p模拟物至HGC-27细胞,MTT法、Transwell实验观察细胞增殖、迁移和侵袭。双荧光素酶报告基因实验验证LINC00473和miR-6838-5p的调控关系。转染LINC00473过表达载体至HGC-27细胞,然后用40μmol/L龙胆苦苷干预24 h,MTT法、Transwell实验观察细胞增殖、迁移和侵袭。结果与对照组比较,龙胆苦苷显著降低了HGC-27细胞OD值、迁移数和侵袭数及LINC00473表达(P<0.05),显著增加了miR-6838-5p表达(P<0.05),且呈剂量依赖性(P<0.05)。敲减LINC00473或表达miR-6838-5p后,GC-27细胞OD值、迁移和侵袭数均显著降低(P<0.05)。LINC00473靶向负调控miR-6838-5p。过表达LINC00473显著逆转了龙胆苦苷对HGC-27细胞OD值、迁移数和侵袭数及miR-6838-5p表达的影响(P<0.05)。结论龙胆苦苷可能通过调控LINC00473/miR-6838-5p轴抑制了胃癌细胞HGC-27增殖、迁移和侵袭。

关键词：胃癌龙胆苦苷 LINC00473 细胞增殖迁移侵袭

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基于临床实践指南选择糖尿病中医研究问题

中国循证医学杂志 2024年第10期24卷 1162-1171页

作者：程婷唐淇于东东李庚温泽淮广州中医药大学第二临床医学院广州510405 安徽中医药大学第一附属医院合肥230031 广州中医药大学第二附属医院(广东省中医院) 广州510120 广州中医药大学科技创新中心广州510405

目的系统分析目前中医临床实践指南中糖尿病研究证据分布情况。方法计算机检索PubMed、Embase、Cochrane Library、CNKI、WanFang Data、VIP、CBM数据库及相关指南网站,搜集2023年12月之前发布的中医、中西医结合有关糖尿病的指南。对... 详细信息

目的系统分析目前中医临床实践指南中糖尿病研究证据分布情况。方法计算机检索PubMed、Embase、Cochrane Library、CNKI、WanFang Data、VIP、CBM数据库及相关指南网站,搜集2023年12月之前发布的中医、中西医结合有关糖尿病的指南。对纳入指南的证据分布信息进行系统梳理。结果27部糖尿病相关中医指南的内容主要涵盖了辨证论治、专病专药、饮食、外治法、传统功法等方面。纳入的指南涉及三种证据分级标准,其总体证据级别主要集中于中、低水平(67.3%),其中糖尿病骨质疏松症、糖尿病心肌病、糖尿病前期、糖尿病周围神经病变相关指南中高等级证据占比较低,分别仅有7.2%、7.6%、13.2%和13.3%。仅糖尿病肾病指南有关于中药毒性的证据信息,其他指南均未涉及。针刺、太极拳、八段锦等特色疗法在不同类型并发症中的证据级别存在较大差异。低级别证据主要集中于糖尿病及相关并发症的辨证论治、辨症治疗、辨体征治疗、辨指标治疗、中成药、专病专方等方面。结论目前,指南中低/无证据支持的意见、新增主题、指南间不一致内容、交叉靶点的证据源、经典名方、中药毒性、中医特色疗法等可以为今后糖尿病中医研究提供选题方向,倡议针对性解决糖尿病相关重要问题,从而提高研究价值,减少不必要、重复研究和资源浪费,推进中医糖尿病研究领域的良性发展。

关键词：糖尿病指南中医药证据问题

加味芍药甘草汤含药血清对子宫腺肌病异位子宫内膜间质细胞迁移、侵袭和血管生成的影响

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中药药理与临床 2024年

作者：温小慧刘学红黄诗雅李坤寅关永格广州中医药大学第三临床医学院广州中医药大学第三附属医院

目的：通过体外实验探讨加味芍药甘草汤对子宫腺肌病（Adenomyosis，AM）异位子宫内膜间质细胞（Endometrial stromal cells，EScs）的迁移、侵袭和血管生成过程的影响。方法：原代收集、培养并分离EScs，利用细胞免疫组化法进行细胞鉴... 详细信息

目的：通过体外实验探讨加味芍药甘草汤对子宫腺肌病（Adenomyosis，AM）异位子宫内膜间质细胞（Endometrial stromal cells，EScs）的迁移、侵袭和血管生成过程的影响。方法：原代收集、培养并分离EScs，利用细胞免疫组化法进行细胞鉴定，通过Transwell迁移、侵袭实验检测加味芍药甘草汤对EScs迁移、侵袭能力的影响，通过实时荧光定量PCR（RT-qPCR）法检测EScs中血管生成相关因子mRNA的表达，通过免疫荧光标记细胞中微血管密度（Microvascular density，MVD）。结果：收集、培养并分离的6例人AM原代细胞均为EScs。与空白对照组相比，1.69 g/kg加味芍药甘草汤10%含药血清组和地诺孕素组的细胞迁移和侵袭能力均显著降低（P<0.01），加味芍药甘草汤10%含药血清组Vegf、Hif-1α、Pdgf、Ang、Fgf1和Fgf2的mRNA表达明显下调（P<0.05或P<0.01），MVD免疫荧光明显降低（P<0.05），地诺孕素组Vegf、Pdgf、Ang和Fgf1的mRNA表达明显下调（P<0.05或P<0.01）；与正常对照血清组相比，加味芍药甘草汤10%含药血清组和地诺孕素组的细胞迁移和侵袭能力明显降低（P<0.05或P<0.01），加味芍药甘草汤10%含药血清组Fgf1和Fgf2的mRNA表达明显下调（P<0.05），地诺孕素组Ang的mRNA表达明显下调（P<0.05）。结论：所获细胞为EScs，加味芍药甘草汤含药血清可以限制EScs的迁移、侵袭能力，抑制血管生成相关因子的表达。

关键词：加味芍药甘草汤子宫腺肌病迁移侵袭血管生成

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气虚痰湿证小鼠模型的构建及评价

中国实验方剂学杂志 2024年

作者：周绮纯朱港星邹永春蓝宝仪崔展瑜王晰徐梦菲唐青王苏美广州中医药大学第二临床医学院中医药防治非小细胞肺癌临床与基础研究团队广州中医药大学第二临床医学院广州中医药大学第二临床医学院中医证候全国重点实验室广州中医药大学第二临床医学院省部共建中医湿证国家重点实验室

目的：气虚痰湿证是中医临床常见的证型，但目前尚无规范的、科学准确的气虚痰湿证候动物模型的构建方法报道。本研究旨在运用多因素复合造模的方法构建气虚痰湿证小鼠模型，并对模型进行评价。方法：将21只C57BL/6小鼠随机分为3组，每... 详细信息

目的：气虚痰湿证是中医临床常见的证型，但目前尚无规范的、科学准确的气虚痰湿证候动物模型的构建方法报道。本研究旨在运用多因素复合造模的方法构建气虚痰湿证小鼠模型，并对模型进行评价。方法：将21只C57BL/6小鼠随机分为3组，每组7只，分别为正常组、模型组和参苓白术散组。正常组采用普通饮食，于正常环境下饲养；模型组和参苓白术散组采用高脂饮食喂养、高湿环境饲养、负重力竭游泳和冷水或猪油灌胃的方法构建气虚痰湿证小鼠模型。为了以方测证，在模型构建后参苓白术散组小鼠给予参苓白术散治疗14天。测定小鼠的力竭游泳时长、体质量、血清血脂水平、舌象、“气虚痰湿型”评估量表评分和盲肠指数。将各组小鼠的粪便送检宏基因组和代谢组测序，分析其中肠道菌群和代谢物的变化。结果：气虚痰湿造模后，小鼠的力竭游泳时长明显减短（P<0.01），血清总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇和非高密度脂蛋白胆固醇明显升高（均P<0.01），舌象明显区别于正常组，评估量表评分也显著高于正常组（P<0.01），同时盲肠指数明显减小（P<0.01），而参苓白术散组的血清血脂水平、舌象、评估量表评分和盲肠指数均发生逆转。宏基因组和代谢组测序结果显示，气虚痰湿证候造模后小鼠体内肠道菌群和粪便代谢物发生显著改变，阿克曼氏菌、啮齿粪杆菌、Eubacterium plexicaudatum、Eubacterium sp 14＿2、Candida glabrata、Romboutsia ilealis、Turicibacter sp TS3等菌种发生显著变化，肠道代谢物鹅去氧胆酸、胆碱、L-苯丙氨酸甜菜碱、2-苯基丁酸等等的表达也明显变化，影响了亚油酸代谢、初级胆汁酸生物合成、赖氨酸降解、精氨酸生物合成、α-亚麻酸代谢等等相关代谢通路。结论：高脂饮食喂养、高湿环境饲养、负重力竭游泳和冷水或猪油灌胃的多因素复合造模法可以构建气虚痰湿型小鼠模型，可以将小鼠的血清血脂水平、舌象、“气虚痰湿型”评估量表评分、盲肠指数以及相关肠道菌群和代谢物的变化作为模型评价的关键指标。

关键词：气虚痰湿证小鼠模型多因素复合造模肠道菌群代谢

基于项目反应理论修订中西医结合围手术期康复量表的研究

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中国循证医学杂志 2024年第4期24卷 439-444页

作者：刘冰清温泽淮周莉广州中医药大学第二临床医学院广州510000 广州中医药大学第二附属医院广州510000 广东省中医院中医药临床研究方法学重点研究室广州510000

目的基于项目反应理论(IRT)修订中西医结合围手术期康复量表(PRSIM)。方法在IRT指导下,利用PRSIM在广东省中医院调查时获得的349例患者数据,采用SPSS 18.0软件进行主成分分析,检测其单维性;使用R软件进行参数估计,计算各条目区分度、难... 详细信息

目的基于项目反应理论(IRT)修订中西医结合围手术期康复量表(PRSIM)。方法在IRT指导下,利用PRSIM在广东省中医院调查时获得的349例患者数据,采用SPSS 18.0软件进行主成分分析,检测其单维性;使用R软件进行参数估计,计算各条目区分度、难度和平均信息量,绘制项目特征曲线,评估条目的质量,并对项目功能差异进行估计。同时结合专家咨询、患者评价和核心小组讨论综合筛选。结果所有条目的区分度取值范围为-0.535~2.195;难度的取值范围为-10.343~5.461,条目平均信息量的取值范围为0.043~1.075,根据相应参数的筛选标准共保留9项条目。专家咨询结果显示删除5项条目,修改7项条目。经核心小组讨论后,最终删除5项条目。结论综合项目反应理论和专家咨询意见,经核心小组讨论后,在原20项条目的基础上保留并修改形成15项条目的修订版。

关键词：项目反应理论中西医结合围手术期康复量表条目筛选