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罗伊氏粘液乳杆菌K07的生物学特性及其基因分析

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现代食品科技 2024年第4期40卷 73-83页

作者：黄志钰黎旭李幸金庭飞陶纯长刘宗争广东益可维生物技术有限公司广东广州510630

从新疆昭苏县传统发酵乳酪中分离出2株罗伊氏粘液乳杆菌(编号K07、K08),对2株菌的生长和产酸性能、耐酸耐胆盐、模拟胃肠道的耐受、产罗伊氏菌素能力和抗氧化活性进行了评估;此外还测定了2株菌的抑菌性能并对K07菌株进行基因分析。结果... 详细信息

从新疆昭苏县传统发酵乳酪中分离出2株罗伊氏粘液乳杆菌(编号K07、K08),对2株菌的生长和产酸性能、耐酸耐胆盐、模拟胃肠道的耐受、产罗伊氏菌素能力和抗氧化活性进行了评估;此外还测定了2株菌的抑菌性能并对K07菌株进行基因分析。结果表明,2株菌均在培养12 h后进入对数生长末期,发酵终点pH值为4.45。K07对酸、胆盐和模拟胃肠道的耐受及抗氧化能力强于K08。pH值2.50处理4 h,K07存活率为73.27%。0.15%胆盐胁迫下K07菌株OD_(600 nm)上升0.3个单位需5.50 h,模拟胃肠道试验K07的存活率为74.13%。两株菌的无细胞提取物抗氧化活性高于完整细胞,其中K07无细胞提取物对DPPH自由基和羟自由基的清除率为42.39%、15.69%,还原力17.96%。K07产罗伊氏菌素量为183.05 mmol/L显著高于K08,且K07抑菌性能较好,对白色念珠菌和无乳链球菌的抑菌圈直径为22.20 mm、18.26 mm。K07基因组全长1950440 bp,预测蛋白质编码基因2067种,GC含量为38.69%。研究结果显示罗伊氏粘液乳杆菌K07具有良好的益生特性,为后续产业化应用提供理论依据。

关键词：罗伊氏粘液乳杆菌益生特性基因分析

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后生元的作用机制及其在食品领域的应用

食品科学 2024年第8期45卷 354-363页

作者：谢莹莹庞旭周海泳徐健祁姣姣朱剑锋李雪玲杨美艳胡文锋华南农业大学食品学院应用微生物实验室广东广州510642 广州柏芳生物科技有限公司广东广州510765 生物源生物技术(深圳)股份有限公司广东深圳518118 筠海食品(深圳)有限公司广东深圳518000

后生元是由对宿主健康有益的无生命的微生物细胞和/或其成分,以及其代谢产物制成的微生态制剂。后生元具有调节肠道菌群平衡、增强免疫力、抗炎抗菌等功效。与由活性细胞组成的益生菌相比,后生元更安全、更稳定、更有效和更方便。本文... 详细信息

后生元是由对宿主健康有益的无生命的微生物细胞和/或其成分,以及其代谢产物制成的微生态制剂。后生元具有调节肠道菌群平衡、增强免疫力、抗炎抗菌等功效。与由活性细胞组成的益生菌相比,后生元更安全、更稳定、更有效和更方便。本文概述了后生元的由来、来源菌株、制备途径及其优点,并与益生菌进行对比,阐述了后生元的作用机制。此外,本文从功能性食品补充剂、食品品质改良剂、食品防腐剂以及食品脱毒剂4个方面介绍后生元在食品的应用。相信随着后生元的定义、分类、作用成分变得更加清晰,它将会更广泛地应用于普通食品、营养保健品、特殊医学食品、婴幼儿食品和个护日化产品等领域,还将推动一系列基础科学与应用科学的跨越式发展。

关键词：后生元灭活乳酸菌作用机制食品应用

基于衍生化3-氨基-2-恶唑烷酮的夹心酶联免疫分析

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食品科学 2024年第6期45卷 271-276页

作者：张世伟吴会玲周迎春王炳志杨星星杜业刚汤璐冯荣虎郭继平深圳市计量质量检测研究院广东深圳518000 深圳市易瑞生物技术股份有限公司广东深圳518000

建立一种3-氨基-2-恶唑烷酮(3-amino-2-oxazolidinone,AOZ)夹心免疫检测方法。通过1,6-己二醇连接2-硝基-4-羧基苯甲醛和生物素合成针对AOZ的新型衍生试剂。在样品前处理时加入衍生试剂可对AOZ进行衍生,衍生产率为89%。在酶标板上包被抗... 详细信息

建立一种3-氨基-2-恶唑烷酮(3-amino-2-oxazolidinone,AOZ)夹心免疫检测方法。通过1,6-己二醇连接2-硝基-4-羧基苯甲醛和生物素合成针对AOZ的新型衍生试剂。在样品前处理时加入衍生试剂可对AOZ进行衍生,衍生产率为89%。在酶标板上包被抗AOZ单克隆抗体并以辣根过氧化物酶标记的亲和素或抗生物素抗体作为第二结合物可实现AOZ的夹心酶联免疫吸附检测(enzyme-linked immunosorbnent assay,ELISA)。从实际应用的角度,得到双抗夹心和抗体-亲和素夹心模式下两个表位的极限距离,分别为12Å和13Å,理想距离分别为16Å和17Å。在双抗夹心和抗体-亲和素夹心模式下的检出限分别达到1.8 pg/mL和0.8 pg/mL(以AOZ质量浓度计),相对于竞争ELISA,其灵敏度最高提高了25倍。平均回收率为73%~85%,平均相对标准偏差为9.0%。

关键词： 3-氨基-2-恶唑烷酮夹心酶联免疫分析表位间隔距离辣根过氧化物酶标记亲和素

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真空预冷对松茸木质化及相关酶活力的影响

食品科学 2024年第10期45卷 249-256页

作者：赵焯然王凤玲王璇关文强胡昕刘镇国姚刚路鹏天津商业大学生物技术与食品科学学院天津市食品生物技术重点实验室天津300134 深圳顺丰泰森控股(集团)有限公司广东深圳518000

为探究真空预冷处理对松茸贮藏过程中木质化的影响,以松茸为实验材料,对贮藏期间松茸菌盖、菌柄的硬度、果肉紧实度、木质素、几丁质和纤维素含量及纤维素酶(cellulase,CX)、苯丙氨酸转氨酶(phenylalanine ammonia-lyase,PAL)、多酚氧化... 详细信息

为探究真空预冷处理对松茸贮藏过程中木质化的影响,以松茸为实验材料,对贮藏期间松茸菌盖、菌柄的硬度、果肉紧实度、木质素、几丁质和纤维素含量及纤维素酶(cellulase,CX)、苯丙氨酸转氨酶(phenylalanine ammonia-lyase,PAL)、多酚氧化酶(polyphenol oxidase,PPO)、过氧化物酶(peroxidase,POD)活力的变化规律进行研究。结果表明,与对照组相比,真空预冷处理能够显著抑制菌盖与菌柄硬度和果肉紧实度的下降,有效抑制细胞壁中几丁质降解和CX活力的上升,维持较高的纤维素含量,延缓木质素积累,其菌盖和菌柄的PAL活力峰值分别比对照组低8.2%和2.9%,POD活力峰值分别比对照组低10%和3.7%,PPO活力峰值分别比对照组低23.1%和5.2%。此外,与菌盖相比,松茸菌柄木质化高峰出现时间早,更易出现木质化现象。真空预冷处理能够延缓松茸木质化进程,较好地维持松茸品质。

关键词：真空预冷木质化松茸保鲜

用ELISA法检测血清中抗TNF-α单克隆抗体药物浓度的方法开发与验证

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中国临床药理学杂志 2024年第11期40卷 1642-1645页

作者：胡振湘何丽秀王博陈曦刘桂丽秦玉敏珠海市丽珠单抗生物技术有限公司广东珠海519090

目的建立检测一种测定血清中抗肿瘤坏死因子α(TNF-α)单克隆抗体浓度的间接酶联免疫吸附测定(ELISA)方法。方法对TNF-α包被浓度及酶标抗体种类、存放稳定性和浓度等进行考察,确定关键试验参数。考察优化后方法的专属性、精密度与回收... 详细信息

目的建立检测一种测定血清中抗肿瘤坏死因子α(TNF-α)单克隆抗体浓度的间接酶联免疫吸附测定(ELISA)方法。方法对TNF-α包被浓度及酶标抗体种类、存放稳定性和浓度等进行考察,确定关键试验参数。考察优化后方法的专属性、精密度与回收率、标准曲线与定量下限。结果TNF-α包被浓度为400 ng·mL^(-1),选择Sigma辣根过氧化物酶标记羊抗人免疫球蛋白G,以1∶3.0×10^(5)倍进行稀释;稀释后的酶标抗体4℃保存3 d稳定性良好。同时确认了方法专属性良好,回收率为84.00%~10^(6).82%,不同浓度样品精密度的变异系数均≤10%,方法线性良好,曲线方程为y=(-8.37×10^(3)-2.37×10^(6))/[1+(x/29.80)1.06]+2.37×10^(6)(R^(2)=0.999),定量下限:1 ng·mL^(-1),均符合要求。结论本研究建立了一种准确、可靠的ELISA法测定血清中抗TNF-α单克隆抗体药物的浓度。

关键词：肿瘤坏死因子α 酶联免疫吸附测定法单克隆抗体血清药物浓度

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重组亚胺还原酶工程菌快速高密度发酵研究

食品与发酵工业 2024年第3期50卷 16-20页

作者：吴子蓥李荣旭白少钰胡浩轩黄佳俊卢宇靖佛山市汇腾生物技术有限公司广东佛山528225 广东工业大学生物医药学院广东广州510006

通过快速高密度发酵培养,以重组亚胺还原酶大肠杆菌工程菌的菌体生物量及酶活力作为评价标准,利用低成本的发酵培养基,在短时间内获得菌体的最大生物量和最佳酶活力。采用2 L发酵体系,对该工程菌的接种量和诱导条件进行优化。结果表明,... 详细信息

通过快速高密度发酵培养,以重组亚胺还原酶大肠杆菌工程菌的菌体生物量及酶活力作为评价标准,利用低成本的发酵培养基,在短时间内获得菌体的最大生物量和最佳酶活力。采用2 L发酵体系,对该工程菌的接种量和诱导条件进行优化。结果表明,该菌株的快速高密度发酵最佳接种量为10%,当生物量OD_(600)值达到12时,发酵体系降温至20℃,加入0.4 mmol/L异丙基-β-D-硫代半乳糖苷,为最佳诱导条件,并以此条件进行20 L快速高密度发酵,诱导12 h酶活力最高,为4.56 U/g。该研究为进一步放大发酵体系以实现亚胺还原酶工业化快速高产量制备的生产奠定基础。

关键词：亚胺还原酶大肠杆菌高密度发酵生物量酶活力

农产品抗生素残留现状及快速检测方法研究进展

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应用生态学报 2024年第5期35卷 1408-1418页

作者：张根陈宝锐潘璐璐王慧杨波卜钦鹏安徽师范大学生态与环境学院安徽芜湖241002 维塔探索(广东)科技有限公司广东佛山528329 深圳金普迈生物科技有限公司广东深圳518101 深圳大瑞生物技术有限公司广东深圳518115

在农业上,抗生素广泛用于动物的疾病预防和治疗。但抗生素的过度使用,甚至滥用,使得抗生素残留和抗生素耐药性问题日渐严重。抗生素通过食物链的生物富集和放大,将影响生态环境安全,并最终危害人体健康。传统的抗生素检测技术存在程序... 详细信息

在农业上,抗生素广泛用于动物的疾病预防和治疗。但抗生素的过度使用,甚至滥用,使得抗生素残留和抗生素耐药性问题日渐严重。抗生素通过食物链的生物富集和放大,将影响生态环境安全,并最终危害人体健康。传统的抗生素检测技术存在程序繁琐、操作复杂、耗时长等一系列问题,难以满足即时、高效和准确的现场检测需求。因此,为应对抗生素引起的食品安全问题、规范抗生素在农业上的使用,建立农产品抗生素的快速检测技术显得十分重要。本文综述了世界主要国家地区抗生素在养殖业的使用和管理情况,以及抗生素在农产品中的残留特征和对生物体及环境的危害,归纳了近5年内农产品中抗生素快速检测技术的发展情况,对各项快速检测技术的优缺点进行了对比,最后对未来发展方向进行了展望。本文可为农产品抗生素管控和即时检测提供借鉴。

关键词：农产品抗生素养殖业食品安全即时检测

猪等孢球虫顶膜抗原蛋白AMA1的生物信息学分析及原核表达

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华南农业大学学报 2024年第4期45卷 469-476页

作者：叶欣欧璇黄仪娟陆肖翁亚彪林瑞庆华南农业大学兽医学院广东广州510642 佛山市正典生物技术有限公司广东佛山528138

[目的]预测分析猪等孢球虫顶膜抗原蛋白AMA1的生物学特性、结构及功能,并构建AMA1基因的原核表达载体,表达、纯化AMA1蛋白。[方法]本研究从NCBI数据库中获得猪等孢球虫AMA1基因序列,使用相关生物信息学预测工具对AMA1基因编码的蛋白进... 详细信息

[目的]预测分析猪等孢球虫顶膜抗原蛋白AMA1的生物学特性、结构及功能,并构建AMA1基因的原核表达载体,表达、纯化AMA1蛋白。[方法]本研究从NCBI数据库中获得猪等孢球虫AMA1基因序列,使用相关生物信息学预测工具对AMA1基因编码的蛋白进行分析。构建原核表达载体pET23a-AMA1,并将其转入至大肠埃希菌表达菌株BL21 (DE3)中,对诱导时间、温度及IPTG浓度进行优化,确定最佳诱导表达条件。采用镍柱亲和层析法进行蛋白纯化,获得AMA1重组蛋白并进行SDS-PAGE和Western blot鉴定分析。[结果]生物信息学预测显示,AMA1蛋白由317个氨基酸组成,蛋白分子式为C1 512H2 310N394O490S14,是不稳定的亲水性蛋白;其二级结构α螺旋占17.74%,β折叠占30.65%,转角占30.65%,无规则卷曲占20.96%;属于无信号肽的跨膜蛋白,具有5个B细胞抗原表位。成功构建pET23a-AMA1重组表达质粒,经诱导表达条件优化后,确定最佳诱导表达条件为0.2 mmol/L IPTG浓度下于28℃诱导12 h,主要以可溶性蛋白形式存在,蛋白相对分子质量约为25 800,纯化蛋白质量浓度为0.25 mg/mL。[结论]阐明了猪等孢球虫AMA1蛋白的结构特征,通过原核诱导表达获得了重组蛋白,为建立猪等孢球虫病的免疫学诊断方法奠定了基础,并为后续疫苗的研发提供了新的候选基因。

关键词：猪等孢球虫顶膜抗原 AMA1 原核表达生物信息学

抗副溶血弧菌卵黄抗体制备及其与不同血清型菌株交叉反应研究

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南方水产科学 2024年第5期20卷 176-185页

作者：陈静妮仲颖黄春萍李硕黄锦炉王贵平赵立宁广东海大集团股份有限公司广东广州511440 广东海大畜牧兽医研究院有限公司广东广州511400 清远海贝生物技术有限公司广东清远511800

为探索卵黄抗体对防控凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)养殖中副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)病的潜在作用,将2种血清型(O1:KUT和OUT:KUT)的3株副溶血弧菌制备成灭活疫苗,分别免疫产蛋鸡制备卵黄抗体。通过ELISA实验和试管凝集实... 详细信息

为探索卵黄抗体对防控凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)养殖中副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)病的潜在作用,将2种血清型(O1:KUT和OUT:KUT)的3株副溶血弧菌制备成灭活疫苗,分别免疫产蛋鸡制备卵黄抗体。通过ELISA实验和试管凝集实验,评估了卵黄抗体的效价消长规律、抑菌效果和交叉反应情况。结果显示:3株副溶血弧菌均能诱导高特异性水平的卵黄抗体,抗体凝集效价和ELISA效价的消长趋势相近,均在4免后10~60 d达到卵黄抗体的效价平台期,凝集效价在1∶8以上,ELISA效价在1∶6400以上;卵黄抗体与血清型相同的其他副溶血弧菌发生强烈的交叉ELISA和交叉凝集反应,但与血清型不同的副溶血弧菌有较低的交叉ELISA反应,无交叉凝集反应。研究表明副溶血弧菌能刺激蛋鸡产生高特异性水平的卵黄抗体,对不同血清型菌株不具有交叉保护效果,可为抗副溶血弧菌卵黄抗体产品的开发与应用提供参考。

关键词：副溶血弧菌凡纳滨对虾高特异性卵黄抗体 ELISA 凝集