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棕点石斑鱼(♀)×清水石斑鱼(♂)杂交子代与亲本表型比较及遗传特征分析

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水生生物学报 2024年第3期48卷 444-453页

作者：王同方明宇杨扬宋乐玲蔡春有蒙子宁刘晓春中山大学生命科学学院有害生物控制与资源利用国家重点实验室广东省水生经济动物良种繁育重点实验室广州510006 海南晨海水产有限公司三亚572000 南方海洋科学与工程广东省实验室(珠海) 珠海519080

以棕点石斑鱼(Epinephelus fuscoguttatus)为母本、清水石斑鱼(***)为父本,开展了杂交育种试验,成功获得杂交子一代。由于棕点石斑鱼与清水石斑鱼外型相似,其杂交子代也与亲本难以区分,为探究双亲本与杂交子代表型差异和遗传差异,研究... 详细信息

以棕点石斑鱼(Epinephelus fuscoguttatus)为母本、清水石斑鱼(***)为父本,开展了杂交育种试验,成功获得杂交子一代。由于棕点石斑鱼与清水石斑鱼外型相似,其杂交子代也与亲本难以区分,为探究双亲本与杂交子代表型差异和遗传差异,研究利用外部形态数据及外型框架参数进行比较分析,同时使用微卫星标记对双亲本及杂交子代的遗传特征进行分析。在外部形态结构的探究中,杂交子代可量性状及外形框架更偏向于母本棕点石斑鱼。在遗传特征的分析中,采用ddRAD-seq技术在棕点石斑鱼上获得6266个微卫星标记,筛选出7对可以在双亲本及杂交子代中稳定扩增且遗传多样性较高的微卫星引物,其中,6对引物可以在部分群体中扩增出特异性条带以区分3个群体。通过分析,7个微卫星标记位点在杂交子代群体中的平均观测杂合度(H_(o))为0.891,平均期望杂合度(H_(e))为0.768,平均多态信息含量(PIC)为0.717,三者均高于双亲本,表明杂交子代在遗传信息的多样性方面有一定的提高。研究结果可为棕点石斑鱼、清水石斑鱼及两者杂交子代的鉴别提供方法,并为杂交石斑鱼的培育提供一定的理论基础。

关键词：杂交育种表型微卫星标记棕点石斑鱼清水石斑鱼

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他克莫司的分离提纯研究

中国抗生素杂志 2024年第2期49卷 175-180页

作者：王圆超赵辉王月谷岩翡高月麒李晓露微生物药物国家工程研究中心石家庄市微生物药物技术创新中心华北制药集团新药研究开发有限责任公司石家庄052165 华北制药华胜有限公司石家庄052160

目的开发一种他克莫司的分离提纯工艺。方法采用离子交换树脂脱色除杂、纳滤、结晶等手段得到高质量的他克莫司粗粉,再经反相色谱硅胶层析、复合溶液结晶,得到符合USP标准的他克莫司精粉。结果优选的脱色树脂为D002,所得他克莫司粗... 详细信息

目的开发一种他克莫司的分离提纯工艺。方法采用离子交换树脂脱色除杂、纳滤、结晶等手段得到高质量的他克莫司粗粉,再经反相色谱硅胶层析、复合溶液结晶,得到符合USP标准的他克莫司精粉。结果优选的脱色树脂为D002,所得他克莫司粗粉效价大于800μg/mg,二氢他克莫司含量小于4%;该粗粉经UniSil C8Ultra Plus层析纯化,精粉含量大于99.5%,最大单杂小于0.1%。结论该工艺操作简单、能耗低、收率高,适于他克莫司的产业化应用。

关键词：他克莫司分离提纯离子交换树脂层析结晶

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他克莫司高产菌株选育及发酵配方优化

中国抗生素杂志 2024年第2期49卷 168-174页

作者：王会会赵建辉孙术超刘雨任风芝赵建强微生物药物国家工程研究中心石家庄市微生物药物技术创新中心华北制药集团新药研究开发有限责任公司石家庄052165 华北制药华胜有限公司石家庄052160

目的选育他克莫司高产菌株,优化培养基配方,提高发酵产量。方法采用原生质体融合技术对2株筑波链霉菌进行基因组重排,并经响应面设计对发酵培养基配方进行优化。结果以紫外灭活作为遗传标记经过4轮基因组重排育种后,摇瓶筛选获得3株... 详细信息

目的选育他克莫司高产菌株,优化培养基配方,提高发酵产量。方法采用原生质体融合技术对2株筑波链霉菌进行基因组重排,并经响应面设计对发酵培养基配方进行优化。结果以紫外灭活作为遗传标记经过4轮基因组重排育种后,摇瓶筛选获得3株高产菌株,其中菌株FK22-71菌丝球松散、椭圆状,发酵浸泡液颗粒状。该菌株稳定高产,采用响应面设计优化后的配方在50 L罐发酵产量平均达1684 mg/L。结论基因组重排技术应用于他克莫司高产菌株选育,可大幅提高发酵产量,为其工业化发酵生产奠定了基础。

关键词：基因组重排他克莫司响应面设计培养基优化

德宏奶水牛乳腺组织miR-21-5p基因及其脂类代谢靶基因表达研究

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饲料研究 2024年第2期47卷 53-57页

作者：赵洪晓徐思慧庞双龙孙政杨忠李卫真黎明云南农业大学动物医学院云南昆明650201 武汉海吉力生物科技有限公司湖北武汉430000 云南生物制药有限公司云南昆明650503

试验旨在探究德宏奶水牛乳腺组织miR-21-5p基因及其靶基因的表达规律。选取饲养条件相同、同一胎次、年龄相近、处于泌乳中期的健康德宏奶水牛,分为高乳脂率组(H组)、中乳脂率组(M组)和低乳脂率组(L组)。每组选取3头奶水牛,屠宰后采集... 详细信息

试验旨在探究德宏奶水牛乳腺组织miR-21-5p基因及其靶基因的表达规律。选取饲养条件相同、同一胎次、年龄相近、处于泌乳中期的健康德宏奶水牛,分为高乳脂率组(H组)、中乳脂率组(M组)和低乳脂率组(L组)。每组选取3头奶水牛,屠宰后采集乳腺组织,提取总RNA。采用生物信息学方法预测miR-21-5p的靶基因。利用荧光定量PCR技术检测miR-21-5p及其靶基因的表达水平,并与课题组前期测定的乳脂率进行相关性分析。结果显示,miR-21-5p的靶基因可能为AGPAT6和GPAM。L组德宏奶水牛乳腺组织中miR-21-5p的表达水平高于M组和H组(P<0.01)。相关性分析结果显示,miR-21-5p与靶基因AGPAT6的表达水平呈极显著负相关(P<0.01),与靶基因GPAM的表达水平呈显著负相关(P<0.05),德宏奶水牛乳腺组织miR-21-5p表达量与乳脂率呈显著负相关(P<0.05),靶基因AGPAT6和GPAM与乳脂率呈极显著正相关(P<0.01)。蛋白互作网络结果显示,AGPAT6和GPAM互作关系最强。研究表明,miR-21-5p可能通过负调控靶基因AGPAT6和GPAM的表达影响乳脂合成,进而影响乳脂率。

关键词：德宏奶水牛乳脂率靶基因 miR-21-5p基因

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湿法研磨技术制备纳米制剂及质量评价研究进展

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聊城大学学报(自然科学版) 2024年

作者：魏其鹏吴恒乾布汝朋王利利王正平韩军聊城大学生物制药研究院聊城高新生物技术有限公司

随着高通量筛选和组合化学的不断发展，越来越多的新化学实体得以被发现，但这些新化学实体的研发进程常因其较差的水溶性而受限，这直接影响了药物在体内的生物利用度。近年来，为了提高难溶性药物的生物利用度，采用湿法研磨技术制备... 详细信息

随着高通量筛选和组合化学的不断发展，越来越多的新化学实体得以被发现，但这些新化学实体的研发进程常因其较差的水溶性而受限，这直接影响了药物在体内的生物利用度。近年来，为了提高难溶性药物的生物利用度，采用湿法研磨技术制备出更小粒径的纳米颗粒，已经成为研究的热点。本文综述湿法研磨效率的主要因素，纳米悬浮液的固化处理以及湿法研磨纳米制剂的质量评价，旨在为湿法研磨技术在纳米制剂中的应用提供理论基础和参考。

关键词：湿法介质研磨难溶性药物纳米制剂生物利用度质量评价

气相色谱法测定N,N-二甲基甲酰胺中的杂质含量

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广州化工 2024年第12期52卷 36-40页

作者：张俊杰侯慧杰丛臣日史大勇王英新山东达因海洋生物制药股份有限公司山东荣成264300

采用气相色谱法测定DMF中杂质的含量。具体方法:色谱柱:以二甲基聚硅氧烷为固定相的毛细管柱为色谱柱;进样口温度为240℃;检测器为FID检测器;检测器温度为300℃;进样体积为1μL,分流方式:分流进样,分流比为15∶1;载气:氮气;柱流量为1.5 ... 详细信息

采用气相色谱法测定DMF中杂质的含量。具体方法:色谱柱:以二甲基聚硅氧烷为固定相的毛细管柱为色谱柱;进样口温度为240℃;检测器为FID检测器;检测器温度为300℃;进样体积为1μL,分流方式:分流进样,分流比为15∶1;载气:氮气;柱流量为1.5 mL/min;柱温条件:起始柱温50℃,维持时间2 min,以25℃/min速率升温至150℃,维持6 min;以20℃/min速率升温至250℃,维持13 min。经验证,该方法专属性强、准确度及灵敏度较高,可用于DMF中杂质含量的测定。

关键词：气相色谱法杂质 DMF

气相色谱法测定3-氟-4-吗啉基苯胺中吗啉的含量

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广州化工 2024年第5期52卷 107-110,131页

作者：侯慧杰张俊杰王英新史大勇解春文山东达因海洋生物制药股份有限公司山东荣成264300

采用气相色谱法测定3-氟-4-吗啉基苯胺中吗啉的含量。具体方法:色谱柱:以5%苯基,95%二甲基聚硅氧烷为固定相的毛细管柱;载气:氦气;流速:2 mL/min;柱温条件:起始柱温40℃,维持时间2 min,以11℃/min速率升温至120℃,以33℃/min速率升温至... 详细信息

采用气相色谱法测定3-氟-4-吗啉基苯胺中吗啉的含量。具体方法:色谱柱:以5%苯基,95%二甲基聚硅氧烷为固定相的毛细管柱;载气:氦气;流速:2 mL/min;柱温条件:起始柱温40℃,维持时间2 min,以11℃/min速率升温至120℃,以33℃/min速率升温至250℃,维持3 min;进样口温度:200℃;FID检测器温度:240℃;分流比:10∶1;进样量:1μL。经方法学验证,方法专属性强,准确度及灵敏度较高,可用于3-氟-4-吗啉基苯胺中吗啉的含量测定。

关键词：气相色谱法吗啉 3-氟-4-吗啉基苯胺

猪伪狂犬病毒抗体gD-ELISA检测方法建立及其与中和抗体相关性分析

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中国动物传染病学报 2024年

作者：曾梦意黎家明潘静华陈秀巧颜广智刘明杰陈盛楠黄良宗佛山大学佛山市南海东方澳龙制药有限公司广东方道基因生物科技有限公司

为开发一种能测定中和抗体水平并有效评估猪伪狂犬疫苗免疫效果的ELISA试剂盒，本研究创新性采用HEK293T细胞表达的猪伪狂犬病毒（PRV）gD重组蛋白作为包被抗原建立gD-ELISA检测方法。该方法与衣原体（CP）、口蹄疫病毒（FMDV）、猪流... 详细信息

为开发一种能测定中和抗体水平并有效评估猪伪狂犬疫苗免疫效果的ELISA试剂盒，本研究创新性采用HEK293T细胞表达的猪伪狂犬病毒（PRV）gD重组蛋白作为包被抗原建立gD-ELISA检测方法。该方法与衣原体（CP）、口蹄疫病毒（FMDV）、猪流行性腹泻病毒（PEDV）、猪圆环病毒（PCV）、猪乙型脑炎病毒（JEV）、猪细小病毒（PPV）、猪瘟病毒（CSFV）、猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）无交叉反应，特异性好；PR阳性血清稀释64 000倍仍可检出，灵敏性高；批间和批内重复变异系数均小于10.58%，重复性好；与商品化抗体检测试剂盒平行检测180份猪血清样品，总符合率为83.33%；与中和试验结果比较，gD-ELISA符合率均为100%，相关系数r为0.903，相关性更高。本研究建立的gD-ELISA更适合作为中和试验的替代方法，为PRV中和抗体效价检测和疫苗免疫效果评估提供了新工具。

关键词：猪伪狂犬病毒中和抗体 gD-ELISA

酱香型和清香型白酒糟多酚类物质解析及对短链脂肪酸调节作用研究

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食品与发酵工业 2024年第3期50卷 110-118,I0004-I0006页

作者：钟江黄永光周蝶陆丽娟朱家合左乾程程玉鑫胡鹏刚贵州大学酿酒与食品工程学院贵州省发酵工程与生物制药重点实验室贵州贵阳550025 贵州岩博酒业有限公司贵州盘州553523 贵州省酣客君丰酒业有限公司贵州仁怀564500 贵州大学酿酒与食品工程学院贵州贵阳550025

该研究使用酱香型和清香型白酒糟作为原料,提取游离酚和结合酚,并测定其多酚含量。通过高效液相色谱-四级杆飞行时间串联质谱仪联用技术,对游离酚和结合酚的组成进行了鉴定。同时,还测定了多酚化合物的抗氧化活性。此外,通过体外模拟胃... 详细信息

该研究使用酱香型和清香型白酒糟作为原料,提取游离酚和结合酚,并测定其多酚含量。通过高效液相色谱-四级杆飞行时间串联质谱仪联用技术,对游离酚和结合酚的组成进行了鉴定。同时,还测定了多酚化合物的抗氧化活性。此外,通过体外模拟胃肠道消化模型,研究了酱香型和清香型白酒糟中游离酚和结合酚对短链脂肪酸的调节作用。结果显示,酱香型白酒糟的游离酚含量为5.67 mg/g,结合酚含量为3.03 mg/g;清香型白酒糟的游离酚含量为5.27 mg/g,结合酚含量为1.87 mg/g。2种类型的白酒糟中多酚化合物存在差异。在酱香型白酒糟中,杨梅素(377.72μg/g)和阿魏酸(2206.35μg/g)分别是游离酚和结合酚中含量最高的多酚化合物;而在清香型白酒糟中,对香豆酸(2331.17μg/g)和原儿茶素(552.18μg/g)分别是游离酚和结合酚中含量最高的多酚化合物。酱香型白酒糟多酚具有更高的抗氧化活性,且抗氧化活性与表儿茶素、丁香酸、紫杉叶素、原儿茶酸、咖啡酸、杨梅素、槲皮素和橙皮素呈显著正相关关系。此外,2种类型的白酒糟多酚促进了短链脂肪酸的产生。在模拟发酵24 h时,清香型白酒糟的游离酚和酱香型白酒糟的结合酚分别对丁酸和戊酸的促进效果最好;而在模拟发酵48 h时,酱香型白酒糟和清香型白酒糟的游离酚分别对乙酸和丙酸的促进效果最好。

关键词：酒糟多酚抗氧化短链脂肪酸