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D-柠檬烯对胶质母细胞瘤细胞增殖的抑制作用及其机制

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吉林大学学报（医学版） 2024年第3期50卷 647-657页

作者：王腾飞陈凤齐玲雷婷宋美慧大理大学药学院云南大理671000 广州医科大学附属清远医院广东省清远市人民医院广东清远511500

目的:探讨D-柠檬烯对胶质母细胞瘤(GBM)细胞增殖和凋亡的影响,并阐明其可能的作用机制。方法:将GBM细胞分为对照组(0 mmol·L^(-1)D-柠檬烯)和0.2、 0.4、 0.6、 0.8及1.0 mmol·L^(-1) D-柠檬烯组。采用CCK-8法检测各组细胞增殖抑制率... 详细信息

目的:探讨D-柠檬烯对胶质母细胞瘤(GBM)细胞增殖和凋亡的影响,并阐明其可能的作用机制。方法:将GBM细胞分为对照组(0 mmol·L^(-1)D-柠檬烯)和0.2、 0.4、 0.6、 0.8及1.0 mmol·L^(-1) D-柠檬烯组。采用CCK-8法检测各组细胞增殖抑制率,克隆形成法检测各组细胞克隆形成率,AnnexinⅤ-FITC/PI法检测各组细胞凋亡率,Western blotting法检测各组细胞中蛋白激酶B(AKT)、B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)和多聚二磷酸腺苷(ADP)核糖聚合酶(PARP)蛋白表达水平,免疫荧光法检测各组细胞中裂解的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(cleaved Caspase)-3蛋白表达水平。15只建立皮下移植瘤模型小鼠随机分为空白组(0 mg·kg^(-1)·d^(-1) D-柠檬烯)、低剂量D-柠檬烯组(200 mg·kg^(-1)·d^(-1)D-柠檬烯)和高剂量D-柠檬烯组(400 mg·kg^(-1)·d^(-1)D-柠檬烯),每组5只。计算各组小鼠体内肿瘤抑制率,HE染色和免疫组织化学染色观察各组小鼠皮下肿瘤组织形态表现,并绘制肿瘤生长曲线,免疫组织化学法检测各组小鼠皮下瘤组织中Ki67蛋白阳性表达率,TUNEL染色法检测各组小鼠肿瘤细胞凋亡情况。结果:对照组细胞呈长梭形,状态良好,紧密且贴壁生长,细胞器和细胞质正常;给药48 h后,0.6 mmol·L^(-1) D-柠檬烯组细胞体积减小,细胞膜虽完整但通透性增强,细胞质皱缩,细胞内部产生空泡结构,部分呈碎片状漂浮在溶液表面;0.8和1.0 mmol·L^(-1) D-柠檬烯组细胞中有明显凋亡小体生成,呈现凋亡状态。CCK-8法,与对照组比较,0.6、0.8和1.0 mmol·L^(-1) D-柠檬烯组U87、 LN229及GL261细胞增殖抑制率均明显升高(P<0.01),0.4 mmol·L^(-1) D-柠檬烯组U87和GL261细胞增殖抑制率均明显升高(P<0.01)。克隆形成法,与对照组比较,0.4、0.6和0.8 mmol·L^(-1) D-柠檬烯组U87、LN229及GL261细胞克隆形成率均明显降低(P<0.05或P<0.01)。AnnexinⅤ-FITC/PI法,与对照组比较,D-柠檬烯处理48 h后,0.6、0.8和1.0 mmol·L^(-1) D-柠檬烯组LN229细胞凋亡率明显升高(P<0.01)。Western blotting法,与对照组比较,0.6、0.8和1.0 mmol·L^(-1) D-柠檬烯组LN229细胞中Bax蛋白表达水平均明显升高(P<0.01),AKT和Bcl-2蛋白表达水平均明显降低(P<0.01);0.8和1.0 mmol·L^(-1) D-柠檬烯组LN229细胞中PARP蛋白表达水平均明显升高(P<0.01)。免疫荧光法,与对照组比较,0.6、0.8和1.0 mmol·L^(-1) D-柠檬烯组LN229细胞中cleaved Caspase-3蛋白表达水平均明显升高(P<0.01)。与空白组比较,低和高剂量D-柠檬烯组小鼠肿瘤体积均明显减小(P<0.01)。与空白组比较,低和高剂量D-柠檬烯组小鼠肿瘤质量均明显降低(P<0.05),肿瘤抑制率均明显升高(P<0.05)。空白组小鼠肿瘤细胞弥漫分布,细胞核染色加深,核浆比增大;低和高剂量D-柠檬烯组小鼠肿瘤组织出现大量肿瘤细胞变性坏死。与空白组比较,低和高剂量D-柠檬烯组小鼠肿瘤组织中Ki67蛋白阳性表达率均明显降低(P<0.01)。与空白组比较,低和高剂量D-柠檬烯组小鼠肿瘤细胞凋亡率均明显升高(P<0.01)。结论:D-柠檬烯具有抑制GBM细胞增殖的作用,其作用机制可能与调控AKT蛋白的表达并激活Caspase-3通路诱导凋亡有关。

关键词： D-柠檬烯胶质母细胞瘤细胞凋亡移植瘤蛋白激酶B

基于学科核心素养的高中英语课堂教学评价实践与研究——以Unit 3 Environmental ProtectionWorkbook部分Small Waste,Big Problem读写课为例

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英语教师 2024年第17期24卷 114-116,126页

作者：陈红俊广东省清远市华侨中学广东清远511520

新课标背景下,英语课程评价应凸显以人为本的理念。这就要求教学评价在评价学生知识掌握程度的同时,评价他们核心素养的发展状况。特别是在“教—学—评”一体化的推动下,教师基于学科核心素养要求,重构高中英语课堂教学评价已成为一种... 详细信息

新课标背景下,英语课程评价应凸显以人为本的理念。这就要求教学评价在评价学生知识掌握程度的同时,评价他们核心素养的发展状况。特别是在“教—学—评”一体化的推动下,教师基于学科核心素养要求,重构高中英语课堂教学评价已成为一种流行趋势。立足学科核心素养背景,阐述基于学科核心素养的高中英语课堂教学评价的实施意义。结合人教版高中《英语》选择性必修三Unit 3 Environmental Protection Workbook部分Small Waste,Big Problem教学案例,就如何落实高中英语课堂教学评价给出一定的建议。

关键词：高中英语学科核心素养课堂教学评价

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大别山区茶树春霜冻时空演变规律及风险区划

中国农业气象 2024年第1期45卷 67-78页

作者：曹强杨咸贵董世杰罗晓丹李鸿飞陈曦岳伟安徽省六安市气象局六安237000 广东省清远市气象局清远511518 安徽省农业气象中心合肥230031

基于大别山区35个国家气象观测站1971-2020年逐日气象资料,利用趋势面插值和ArcGIS技术,分析大别山区茶树春霜冻时空分布特征,依据自然灾害风险理论,选取致灾因子危险性、孕灾环境暴露性、承载体脆弱性和防灾减灾能力等评价因子,利用加... 详细信息

基于大别山区35个国家气象观测站1971-2020年逐日气象资料,利用趋势面插值和ArcGIS技术,分析大别山区茶树春霜冻时空分布特征,依据自然灾害风险理论,选取致灾因子危险性、孕灾环境暴露性、承载体脆弱性和防灾减灾能力等评价因子,利用加权综合评价法构建茶树春霜冻灾害综合风险评估模型,并基于ArcGIS技术开展风险区划。结果表明:(1)1971-2020年大别山区不同等级春霜冻发生日数均显著下降,发生总日数及轻度、中度、重度春霜冻发生日数均值分别为9.6、5.2、3.0和1.4d,气候倾向率分别为-1.45、-0.61、-0.54和-0.30d·10a-1;春霜冻发生日数与海拔高度和纬度呈正相关,大别山区北部春霜冻发生日数较南部下降趋势更明显。(2)大别山区茶树春霜冻高、中和低风险区分别占研究区总面积的16.67%、41.88%和41.45%;高风险区主要位于金寨县、岳西县、霍山县和英山县等海拔600m以上高山区域,信阳市及零星阴坡(北坡)地带;中风险区主要位于海拔低于600m的山区及大别山北麓部分低海拔地区,零星分布在南麓阴坡(北坡)低海拔地区;低风险区主要位于大别山南麓低海拔地区,零星分布在北麓阳坡(南坡)低海拔地区。大别山区茶树春霜冻风险精细化评估可为优化茶产业布局、提升防灾减灾能力提供参考。

关键词：茶树春霜冻风险区划大别山区

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生态建设中营林造林的重要性与技术研究

花卉 2024年第16期 172-174页

作者：黄家伟清远市龙坪林场广东清远513438

以生态建设中的营林造林作业为研究对象,简单介绍了开展造林作业的重要性。并根据营林环境的不同,从抗旱造林与基础营林两个方面,详细阐述了套袋造林、覆膜造林、保水剂造林、分殖造林、播种造林、植苗造林、插条造林、混交造林这8种技... 详细信息

以生态建设中的营林造林作业为研究对象,简单介绍了开展造林作业的重要性。并根据营林环境的不同,从抗旱造林与基础营林两个方面,详细阐述了套袋造林、覆膜造林、保水剂造林、分殖造林、播种造林、植苗造林、插条造林、混交造林这8种技术的应用方法与技术原理,为提高林业生产水平、营林造林质量和平衡生态建设提供参考。

关键词：生态建设营林造林抗旱造林技术

RBMX通过下调PKM2抑制膀胱癌细胞的增殖、迁移、侵袭和糖酵解

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南方医科大学学报 2024年第1期44卷 9-16页

作者：颜秋霞曾鹏黄树强谭翠钰周秀琴乔静赵晓英冯玲朱振杰张国志胡鸿陈彩蓉广州医科大学附属第六医院//清远市人民医院生殖医学中心广东清远511518 广州医科大学附属第六医院//清远市人民医院泌尿外科广东清远511518 广东省尿控及生殖医学创新工程技术研究中心广东清远511518

目的探讨X连锁RNA结合基序蛋白(RBMX)对膀胱癌细胞(1376细胞和UC-3细胞)的增殖、迁移、侵袭的影响以及其在糖酵解中的作用。方法采用慢病毒表达系统和siRNA干扰技术,分别构建RBMX过表达和敲低的膀胱癌细胞模型(1376细胞和UC-3细胞)。采... 详细信息

目的探讨X连锁RNA结合基序蛋白(RBMX)对膀胱癌细胞(1376细胞和UC-3细胞)的增殖、迁移、侵袭的影响以及其在糖酵解中的作用。方法采用慢病毒表达系统和siRNA干扰技术,分别构建RBMX过表达和敲低的膀胱癌细胞模型(1376细胞和UC-3细胞)。采用RT-qPCR和Westernblotting分别在mRNA水平和蛋白水平上检测细胞模型是否构建成功。通过EdU增殖实验和克隆形成实验检测过表达和敲低RBMX后细胞的生长和集落形成能力,同时通过Transwell实验分析过表达和敲低RBMX后对细胞迁移、侵袭能力的影响;随后,采用Westernblotting检测过表达和敲低RBMX后糖酵解关键蛋白PKM1(M1型丙酮酸激酶)和PKM2(M2型丙酮酸激酶)的表达变化;最后,利用葡萄糖和乳酸检测试剂盒分析过表达和敲低RBMX对膀胱癌细胞糖酵解的影响。结果RT-qPCR和Westernblotting结果显示,过表达RBMX膀胱癌细胞的mRNA和蛋白表达水平显著高于阴性对照组(P<0.05),敲低RBMX膀胱癌细胞的mRNA和蛋白表达水平显著低于阴性对照组(P<0.05)。过表达RBMX明显抑制膀胱癌细胞的增殖、克隆形成、迁移和侵袭,敲低RBMX则作用相反。Westernblotting实验结果显示,过表达RBMX使PKM1表达上升,PKM2表达下降,敲低RBMX则作用相反。葡萄糖消耗及乳酸生成实验表明,过表达RBMX均能抑制膀胱癌细胞葡萄糖消耗及乳酸生成(P<0.05),敲低RBMX均能促进膀胱癌细胞葡萄糖消耗及乳酸生成(P<0.05)。结论RBMX通过下调PKM2抑制膀胱癌的发生发展和糖酵解能力,有望成为膀胱癌诊断和治疗的潜在分子靶标。

关键词： X连锁RNA结合基序蛋白 M2型丙酮酸激酶膀胱癌 PKM2 糖酵解

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林业造林技术与林业保护措施研究

花卉 2024年第14期 163-165页

作者：兰海花清远市银盏林场广东清远511500

为合理缓解林业资源发展的主要问题,提高林业造林技术的应用价值,科学加强林业保护,强化林业造林的效果,将结合广东省清远市林业实际情况,重点分析林业造林的作用与关键技术,如播种造林、植苗造林等。同时,提出林业保护的合理措施,如做... 详细信息

为合理缓解林业资源发展的主要问题,提高林业造林技术的应用价值,科学加强林业保护,强化林业造林的效果,将结合广东省清远市林业实际情况,重点分析林业造林的作用与关键技术,如播种造林、植苗造林等。同时,提出林业保护的合理措施,如做好造林规划工作、采取有效的病虫害防治技术等,以便为今后的林业产业价值提升与资源可持续发展提供参考。

关键词：林业保护造林技术造林方法

广东省不同地区雷电灾害的比较分析及防御策略

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中国减灾 2024年第19期 54-55页

作者：唐玫瑰秦建宁邓朝阳广东省清远市清新区气象局广东省清远市气象局

雷电具有高电压、大电流、强电磁辐射等特征,一旦击中地面物体,会造成严重的危害和经济损失。广东省地处低纬,地形地势总体北高南低,海洋、陆地、大气之间作用强烈,受低纬度热带天气系统和中高纬度天气系统交替影响,强对流天气引发的雷... 详细信息

雷电具有高电压、大电流、强电磁辐射等特征,一旦击中地面物体,会造成严重的危害和经济损失。广东省地处低纬,地形地势总体北高南低,海洋、陆地、大气之间作用强烈,受低纬度热带天气系统和中高纬度天气系统交替影响,强对流天气引发的雷电、暴雨等灾害性天气在此尤为常见。本文用对比方式分析了广东省不同地区雷电灾害频次,列举了近年来广东省发生的雷电灾害案例,在此基础上提出雷电灾害防御策略,以期为读者提供参考借鉴。

关键词：雷电灾害地面物体防御策略灾害性天气高电压地形地势强电磁辐射中高纬度

生涯教育融入高中人工智能课程的实践——以“智能农业机器人”项目教学为例

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新课程导学 2024年第8期 67-70页

作者：张可静广东省清远市华侨中学

在人工智能技术广泛应用的背景下，我们在讲授人工智能知识时，不能仅停留在知识教育层面，还要让学生认清自己未来职业发展方向，所以高中人工智能课程在日常教学中融合生涯教育是必不可少的。文章以“智能农业机器人”项目教学为例，... 详细信息

在人工智能技术广泛应用的背景下，我们在讲授人工智能知识时，不能仅停留在知识教育层面，还要让学生认清自己未来职业发展方向，所以高中人工智能课程在日常教学中融合生涯教育是必不可少的。文章以“智能农业机器人”项目教学为例，从生涯教育意义、融合策略、项目实施和职业体验等角度来阐述高中人工智能课程融合生涯教育，激发学生对人工智能课程的学习兴趣，增强学生生涯规划的能力，为学生未来发展奠基。

关键词：生涯教育人工智能项目式教学

清远市中老年女性膝骨关节炎相关因素的调查分析

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中国民间疗法 2024年第5期32卷 57-60页

作者：车伟伟冯世杰蔡显义李笔锋张文戈吕兴元覃小华邱晓梅广东省清远市中医院广东清远511500

目的:通过调查问卷方式对清远市中老年女性膝骨关节炎(KOA)的病因进行调查,了解该地区中老年女性KOA的流行病学特征及发病相关危险因素。方法:2020年3月至2022年6月,从清远地区的城市及农村中抽取年龄≥40岁且居住年限≥10年的中老年女... 详细信息

目的:通过调查问卷方式对清远市中老年女性膝骨关节炎(KOA)的病因进行调查,了解该地区中老年女性KOA的流行病学特征及发病相关危险因素。方法:2020年3月至2022年6月,从清远地区的城市及农村中抽取年龄≥40岁且居住年限≥10年的中老年女性为调查对象,实施横断面现场调查,调查对象统一填写《膝骨关节炎调查问卷》。将问卷信息输入SPSS22.0统计软件,建立数据库,对KOA影响危险因素进行统计分析。结果:共调查清远市40岁以上女性2910名,KOA的发病率为51.55%,发病率与年龄、肥胖相关,发病率农村高于城市。年龄≥40岁、肥胖、绝经、重体力劳动、居住高楼层、文化程度低均为KOA危险因素。结论:清远市中老年女性KOA的主要危险因素是年龄大、肥胖、绝经、重体力劳动、文化程度低。

关键词：清远膝骨关节炎中老年女性年龄肥胖流行病学相关因素调查分析