RBMX通过下调PKM2抑制膀胱癌细胞的增殖、迁移、侵袭和糖酵解

作     者：颜秋霞 曾鹏 黄树强 谭翠钰 周秀琴 乔静 赵晓英 冯玲 朱振杰 张国志 胡鸿 陈彩蓉 YAN Qiuxia;ZENG Peng;HUANG Shuqiang;TAN Cuiyu;ZHOU Xiuqin;QIAO Jing;ZHAO Xiaoying;FENG Ling;ZHU Zhenjie;ZHANG Guozhi;HU Hong;CHEN Cairong

作者机构：广州医科大学附属第六医院//清远市人民医院生殖医学中心广东清远511518 广州医科大学附属第六医院//清远市人民医院泌尿外科广东清远511518 广东省尿控及生殖医学创新工程技术研究中心广东清远511518 

出 版 物：《南方医科大学学报》 (Journal of Southern Medical University)

年 卷 期：2024年第44卷第1期

页      面：9-16页

核心收录：

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金青年基金(82002671) 广东省基础与应用基础研究基金(2019A1515010249) 清远市科技计划项目(2020KJJH023) 广东省中医药局科研项目(20241387) 广州医科大学附属第六医院/清远市人民医院开放课题基金(202301-306) 广东省大学生创新训练计划项目(S202310570055) 广州医科大学第六临床学院大学生科技创新项目(019,018) 

主　　题：X连锁RNA结合基序蛋白 M2型丙酮酸激酶 膀胱癌 PKM2 糖酵解 

摘      要：目的探讨X连锁RNA结合基序蛋白(RBMX)对膀胱癌细胞(1376细胞和UC-3细胞)的增殖、迁移、侵袭的影响以及其在糖酵解中的作用。方法采用慢病毒表达系统和siRNA干扰技术,分别构建RBMX过表达和敲低的膀胱癌细胞模型(1376细胞和UC-3细胞)。采用RT-qPCR和Westernblotting分别在mRNA水平和蛋白水平上检测细胞模型是否构建成功。通过EdU增殖实验和克隆形成实验检测过表达和敲低RBMX后细胞的生长和集落形成能力,同时通过Transwell实验分析过表达和敲低RBMX后对细胞迁移、侵袭能力的影响;随后,采用Westernblotting检测过表达和敲低RBMX后糖酵解关键蛋白PKM1(M1型丙酮酸激酶)和PKM2(M2型丙酮酸激酶)的表达变化;最后,利用葡萄糖和乳酸检测试剂盒分析过表达和敲低RBMX对膀胱癌细胞糖酵解的影响。结果RT-qPCR和Westernblotting结果显示,过表达RBMX膀胱癌细胞的mRNA和蛋白表达水平显著高于阴性对照组(P0.05),敲低RBMX膀胱癌细胞的mRNA和蛋白表达水平显著低于阴性对照组(P0.05)。过表达RBMX明显抑制膀胱癌细胞的增殖、克隆形成、迁移和侵袭,敲低RBMX则作用相反。Westernblotting实验结果显示,过表达RBMX使PKM1表达上升,PKM2表达下降,敲低RBMX则作用相反。葡萄糖消耗及乳酸生成实验表明,过表达RBMX均能抑制膀胱癌细胞葡萄糖消耗及乳酸生成(P0.05),敲低RBMX均能促进膀胱癌细胞葡萄糖消耗及乳酸生成(P0.05)。结论RBMX通过下调PKM2抑制膀胱癌的发生发展和糖酵解能力,有望成为膀胱癌诊断和治疗的潜在分子靶标。