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左归丸调控DKK1靶点防治糖皮质激素性骨质疏松

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中国组织工程研究 2018年第16期22卷 2520-2525页

作者：张志达任辉沈耿杨张玉卓招文华余翔尚奇余佩沅梁德杨志东姚珍松江晓兵广州中医药大学广东省广州市510405 广州中医药大学第一附属医院广东省广州市510405

背景:中医药可有效防治糖皮质激素性骨质疏松,但其防治机制尚不明确。DKK1是Wnt/β-catenin信号通路的抑制剂,糖皮质激素可诱导其上调。因此,DKK1蛋白是防治糖皮质激素性骨质疏松的重要靶点。目的:探讨左归丸防治糖皮质激素性骨质疏松中... 详细信息

背景:中医药可有效防治糖皮质激素性骨质疏松,但其防治机制尚不明确。DKK1是Wnt/β-catenin信号通路的抑制剂,糖皮质激素可诱导其上调。因此,DKK1蛋白是防治糖皮质激素性骨质疏松的重要靶点。目的:探讨左归丸防治糖皮质激素性骨质疏松中对DKK1的调控作用。方法:18只3月龄雌性SD大鼠随机均分为3组:空白组、模型组和左归丸组。模型组和左归丸组大鼠皮下注射地塞米松建立糖皮质激素性骨质疏松模型;空白组给予等体积生理盐水;左归丸组皮下注射地塞米松同时给予左归丸水提液灌胃。1个月后取大鼠腰椎进行micro-CT检测骨量及骨微细结构、压缩试验检测生物力学性能,q PCR测定腰椎DKK1、Runx2和CTSK m RNA表达;血清检测碱性磷酸酶活性。结果与结论:(1)与空白组比较,模型组体积骨密度、相对骨体积、骨小梁数量和骨小梁厚度显著降低(P<0.05),骨小梁间距和结构模型指数较空白组显著增大(P<0.05),血清碱性磷酸酶活性较空白组呈降低趋势,DKK1 m RNA表达显著上调(P<0.05),成骨相关因子Runx2 m RNA表达呈下调趋势,破骨相关因子CTSK m RNA呈上调趋势;(2)与模型组比较,左归丸组体积骨密度、相对骨体积和骨小梁数量显著提升(P<0.05),结构模型指数显著降低(P<0.05),骨小梁间距有减小趋势但差异无显著性意义,血清碱性磷酸酶活性较模型组呈升高趋势,DKK1 m RNA表达显著下调(P<0.05),Runx2 m RNA表达呈上调趋势,CTSK m RNA呈下调趋势;(3)与模型组比较,左归丸组椎体压缩强度显著提升(P<0.05);(4)结果说明,左归丸可能通过下调DKK1的表达防治糖皮质激素性骨质疏松。

关键词：中草药骨密度碱性磷酸酶骨质疏松组织工程左归丸激素性骨质疏松 DKK1 组织构建

基于细胞焦亡探讨琴叶榕提取物对急性酒精性肝损伤的保护机制

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中国实验方剂学杂志 2020年第13期26卷 125-131页

作者：冯会婷戴卫波白莎莎沈崇坤温文浩崔赛男崔永飞张荣彭伟文广州中医药大学广州510405 广州中医药大学附属中山医院广东中山528400

目的:研究细胞焦亡在琴叶榕根的不同溶剂提取物保护急性酒精性肝损伤中的作用。方法:56只雄性C57BL/6小鼠随机分为正常组,模型组,水飞蓟宾组(60 mg·kg^-1),鲜药水提物组(48 g·kg^-1),干药水提物组(48 g·kg^-1),干药50%醇提物组(48 g... 详细信息

目的:研究细胞焦亡在琴叶榕根的不同溶剂提取物保护急性酒精性肝损伤中的作用。方法:56只雄性C57BL/6小鼠随机分为正常组,模型组,水飞蓟宾组(60 mg·kg^-1),鲜药水提物组(48 g·kg^-1),干药水提物组(48 g·kg^-1),干药50%醇提物组(48 g·kg^-1),干药95%醇提物组(48 g·kg^-1),每组8只。其中水飞蓟宾和不同溶剂的琴叶榕提取物,各组小鼠灌胃给药18 d,正常组与模型组小鼠灌胃给予等体积的纯水。灌胃给药15 d后,模型组、水飞蓟宾组和各个琴叶榕根提取物组小鼠给予50%乙醇(12 mL·kg^-1)灌胃,建立急性酒精性肝损伤模型。末次造模结束后禁食14 h后摘眼球取血,开腹取肝脏,计算肝脏指数,苏木素-伊红(HE)染色观察肝脏组织病理学变化;试剂盒检测小鼠血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT),天门冬氨酸氨基转移酶(AST)活性;硫代巴比妥酸(TBA)法检测肝脏丙二醛(MDA)含量,微板法检测乳酸脱氢酶(LDH)水平;肝脏组织切片末端标记法(TUNEL)染色检测肝细胞焦亡;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测细胞焦亡相关蛋白。结果:与正常组比较,模型组ALT,AST,MDA,LDH水平显著升高,肝脏指数显著升高,TUNEL染色阳性、炎症因子、焦亡相关蛋白表达显著升高(P<0.05);与模型组比较,各个琴叶榕根提取物给药干预组小鼠ALT,AST,MDA,LDH水平均明显下降(P<0.05),肝脏指数有不同程度的下降,TUNEL染色阳性、炎症因子、焦亡相关蛋白表达水提物处理组明显下降(P<0.05);肝脏病理切片表明,琴叶榕根提取物能改善小鼠急性酒精肝损伤肝组织病理学变化。结论:琴叶榕根提取物对急性酒精性肝损伤具有一定的保护作用,且其水提物作用机制可能与焦亡通路相关。

关键词：琴叶榕急性酒精性肝损伤丙氨酸氨基转移酶(ALT) 天门冬氨酸氨基转移酶(AST) 细胞焦亡

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中国组织工程研究 2022年第29期26卷 4643-4650页

作者：罗臻黄禹僖柴生颋李飞龙陈群群广州中医药大学广东省广州市510006 广州中医药大学第三附属医院广东省广州市510378

背景:补肾健脾活血方是临床常用于治疗骨质疏松症的经验用方,但其潜在的分子作用机制尚需深入探讨。目的:通过网络药理学方法探讨补肾健脾活血方治疗骨质疏松症的潜在分子机制,并初步验证其通过组蛋白甲基化修饰发挥作用的可能性。方法... 详细信息

背景:补肾健脾活血方是临床常用于治疗骨质疏松症的经验用方,但其潜在的分子作用机制尚需深入探讨。目的:通过网络药理学方法探讨补肾健脾活血方治疗骨质疏松症的潜在分子机制,并初步验证其通过组蛋白甲基化修饰发挥作用的可能性。方法:通过网络药理学的方法,利用相关数据库及软件筛选出补肾健脾活血方的活性药物成分及作用靶点,获取骨质疏松症相关疾病靶点,取交集得到补肾健脾活血方治疗骨质疏松症的潜在作用靶点。使用String和Cytoscape软件构建药物成分-靶点网络,筛选出核心作用靶点。于GO生物学分析结果提取组蛋白修饰相关功能及相关基因,从核心作用靶点中找到与组蛋白修饰相关靶点基因。结合文献分析靶点基因在骨质疏松症与组蛋白修饰中可能发挥的生物学作用,采用体外细胞实验验证补肾健脾活血方影响与靶点密切相关的组蛋白去甲基化酶JMJD2B在骨质疏松症中可能发挥的促成骨分化作用。结果与结论:①共筛选出补肾健脾活血方治疗骨质疏松症相关活性药物成分118个,对应靶点165个,核心靶点为IL6、TP53、FOS、JUN、STAT3、RELA、CCND1、MYC、MAPK1、MAPK8、MAPK14、VEGFA、AKT1、ESR1、TNF、NR3C1等;②GO生物学功能分析得出,对药物的反应、对营养水平的反应、对氧化应激的反应、对类固醇激素的反应、转录调节、转录因子结合、磷酸酶结合、蛋白酶结合、类固醇激素受体活性等生物学功能与共同靶点密切相关;③MAPK8、VEGFA和TP53等核心靶点与组蛋白修饰功能有关,木犀草素、槲皮素和山奈酚等可能是影响组蛋白修饰功能治疗骨质疏松症的主要药物成分;④体外细胞实验结果表明,补肾健脾活血方含药血清干预下大鼠骨髓间充质干细胞的成骨相关碱性磷酸酶和JMJD2B、RUNX2蛋白表达均升高(P<0.05);⑤与补肾健脾活血方网络药理学靶点密切相关的组蛋白去甲基化酶JMJD2B可能发挥着促成骨分化作用以治疗骨质疏松症。

关键词：组蛋白去甲基化酶骨质疏松症 JMJD2B 成骨分化网络药理学

基于红外热像特征探讨柴芍龙牡汤加减治疗肝郁脾虚型失眠的疗效观察

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中国实验方剂学杂志 2023年第23期29卷 106-113页

作者：郑浪花梁丽嫦黄学成邱建文张智伟宾炜林嬿钊广州中医药大学第二临床医学院广州510405 广州中医药大学深圳医院(福田) 广东深圳518000 广州中医药大学第二附属医院广东省中医院广州510120

目的:观察柴芍龙牡汤加减对肝郁脾虚型失眠的疗效,以及红外热成像与肝郁脾虚型失眠的相关性。方法:选取2022年5月至2022年12月,广州中医药大学深圳医院(福田)治未病科门诊72例失眠患者,随机分为治疗组和对照组,各36例。治疗组采用柴芍... 详细信息

目的:观察柴芍龙牡汤加减对肝郁脾虚型失眠的疗效,以及红外热成像与肝郁脾虚型失眠的相关性。方法:选取2022年5月至2022年12月,广州中医药大学深圳医院(福田)治未病科门诊72例失眠患者,随机分为治疗组和对照组,各36例。治疗组采用柴芍龙牡汤加减,对照组采用右佐匹克隆片,治疗4周。观察两组治疗前后临床疗效、匹兹堡睡眠质量指数(PSQI)评分、中医证候积分及红外热成像表现特征(额部睡眠线、额部、躯干前区、中脘、任脉、左胁、右胁、躯干背区、督脉温度及温差变化)。结果:治疗后,两组临床有效率分别为91.67%(33/36)、66.67%(24/36),治疗组优于对照组(Z=−2.617,P中医证候积分显著降低(P中医证候积分降低更显著(P<0.01)。治疗后,治疗组睡眠线改善总有效率为86.11%(31/36),对照组睡眠线改善总有效率为66.67%(24/36),治疗组明显高于对照组(Z=−2.591,P<0.05)。与本组治疗前比较,两组额部温度显著降低(P<0.01);与本组治疗前比较,两组躯干前区、中脘、任脉、左胁、右胁、躯干背区、督脉温度显著上升(P<0.01);治疗后与对照组比较,治疗组额部温度下降更显著(P<0.01);治疗后与对照组比较,治疗组躯干前区、中脘、任脉、左胁、右胁、躯干背区、督脉温度上升更显著(P<0.01)。与本组治疗前比较,治疗组督脉区域温差(ΔT)显著减小(P<0.01),中脘、任脉、左胁、右胁ΔT明显增大(P<0.05,P<0.01);对照组中脘ΔT显著增大(P<0.01);治疗后与对照组比较,治疗组督脉ΔT显著减小(P<0.01),中脘、任脉、左胁、右胁ΔT明显增大(P<0.05,P<0.01)。与本组治疗前比较,两组督脉与任脉温度差明显上升(P<0.01),根据红外热像特征,督脉与任脉温度差正常值在0.5~1,治疗组治疗后的中位数为0.69(0.52,0.88),处于温差正常范围内,表明治疗组明显优于对照组。结论:柴芍龙牡汤加减能有效改善短期失眠,具有疏肝健脾、调和枢机、通调任督二脉之功效,临床疗效确切,值得推广。同时研究发现肝郁脾虚型失眠红外热像可以通过额温、睡眠线、中脘ΔT、任脉ΔT、督脉与任脉温度差作为诊断和评价指标。

关键词：失眠柴芍龙牡汤红外热成像肝郁脾虚

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氧化应激促进成骨细胞铁死亡介导激素性股骨头坏死的病理过程

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中国组织工程研究 2024年第20期28卷 3202-3208页

作者：章家皓刘予豪周驰莫亮方汉军陈镇秋广州中医药大学广东省广州市510405 广州中医药大学第一附属医院广东省广州市510405

背景:研究表明,糖皮质激素诱发股骨头坏死过程中骨代谢失衡与氧化应激密切相关。目的:探究氧化应激诱导成骨细胞铁死亡、促进成骨细胞凋亡、参与激素性股骨头坏死的病理机制。方法:收集47例激素性股骨头坏死患者的一般资料、血清标本和... 详细信息

背景:研究表明,糖皮质激素诱发股骨头坏死过程中骨代谢失衡与氧化应激密切相关。目的:探究氧化应激诱导成骨细胞铁死亡、促进成骨细胞凋亡、参与激素性股骨头坏死的病理机制。方法:收集47例激素性股骨头坏死患者的一般资料、血清标本和6例股骨头标本,根据ARCO分期标准将血清标本分为ARCOⅡ期、Ⅲ期及Ⅳ期,股骨头标本分为ARCOⅢ期及Ⅳ期。检测血清中丙二醛、超氧化物歧化酶1水平;通过DIA蛋白定量测序、免疫蛋白印迹试验及碱性磷酸检测并验证患者股骨头中超氧化物歧化酶1、谷胱甘肽过氧化物酶4、Bcl-2蛋白的表达。结果与结论:①激素性股骨头坏死患者的ARCO分期与年龄、性别、侧别无关;②ARCOⅢ期患者血清中丙二醛、超氧化物歧化酶1水平较Ⅱ期、Ⅳ期高;③在坏死区域与正常区域对比中,DIA蛋白定量测序结果显示,差异蛋白的功能主要与氧化还原相关,其中坏死区域中超氧化物歧化酶1、谷胱甘肽过氧化物酶4、Bcl-2蛋白表达较正常区域低,且ARCOⅣ期低于Ⅲ期;Western blot验证了DIA蛋白定量结果,且坏死区域中碱性磷酸酶活性低于正常区域,Ⅳ期低于Ⅲ期;④在坏死区域与硬化带区域中,差异蛋白的功能同样与氧化还原相关,且坏死区域中超氧化物歧化酶1、谷胱甘肽过氧化物酶4、Bcl-2蛋白表达及碱性磷酸酶活性较硬化带区域低,且Ⅳ期低于Ⅲ期;⑤结果说明,糖皮质激素可通过上调氧化应激水平,诱导成骨细胞铁死亡的发生,抑制成骨功能,影响激素性股骨头坏死的进展。

关键词：氧化应激铁死亡成骨细胞激素性股骨头坏死 SOD1 GPX4

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血管生长细胞因子与股骨头坏死（英文）

中国组织工程研究 2016年第15期20卷 2197-2205页

作者：洪郭驹何伟魏秋实陈雷雷广州中医药大学广东省广州市510006 广州中医药大学第一附属医院广东省广州市510407

背景:多种血管生长细胞因子参与损伤股骨头的愈合。目的:探索血管生长细胞因子在股骨头坏死中的作用及其作用机制。方法:应用计算机检索1980年11月至2015年5月Pub Med数据库、Google数据库和Springer Link数据库中的相关文章,检索词为"a... 详细信息

背景:多种血管生长细胞因子参与损伤股骨头的愈合。目的:探索血管生长细胞因子在股骨头坏死中的作用及其作用机制。方法:应用计算机检索1980年11月至2015年5月Pub Med数据库、Google数据库和Springer Link数据库中的相关文章,检索词为"angiogenic factors,osteonecrosis of the femoral head,vascular endothelial growth factor,angiopoietin-1,fibroblast growth factor-2,hypoxia inducible factor-1,calcitonin gene related peptide and hypoxia inducible factor-1α"。结果与结论:最终纳入符合标准的文献68篇。骨血管化和骨修复关系密切,而血管化是基于微环境内特定的信号因子。血管内皮生长因子、血管形成素1、纤维生长因子2、血小板衍生生长因子、降钙素基因相关肽、缺氧诱导因子α等血管生长细胞因子已被证实从不同途径调控股骨头中血管化过程,且对股骨头坏死区域修复有重要的作用。

关键词：细胞因子类新生血管化,生理性骨生成组织工程组织构建骨组织工程血管生长细胞因子股骨头坏死骨血管化成骨血管内皮生长因子国家自然科学基金

水凝胶搭载骨髓间充质干细胞治疗大鼠子宫内膜损伤

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中国组织工程研究 2022年第31期26卷 4940-4945页

作者：吕妍关永格宋阳李玥广州中医药大学广东省广州市510405 广州中医药大学第三附属医院广东省广州市510360

背景:水凝胶作为一类组织工程的支架材料,为移植细胞在体内增殖分化提供了良好的物理支持。目的:探讨水凝胶搭载骨髓间充质干细胞对大鼠受损子宫内膜的修复效果。方法:将分离培养的SD大鼠骨髓间充质干细胞进行CM-Dil标记,然后制备成泊... 详细信息

背景:水凝胶作为一类组织工程的支架材料,为移植细胞在体内增殖分化提供了良好的物理支持。目的:探讨水凝胶搭载骨髓间充质干细胞对大鼠受损子宫内膜的修复效果。方法:将分离培养的SD大鼠骨髓间充质干细胞进行CM-Dil标记,然后制备成泊洛沙姆407-骨髓间充质干细胞复合物。取30只8周龄SD雌性大鼠随机分为5组:假手术组、模型组、水凝胶组、干细胞组、复合物组,除假手术组外,其余4组建立子宫内膜机械损伤模型,然后每侧宫角分别注射0.2 mL PBS、泊洛沙姆407水凝胶、骨髓间充质干细胞悬液或泊洛沙姆407水凝胶-骨髓间充质干细胞悬液。观察7 d后取出子宫组织,进行苏木精-伊红染色、免疫荧光染色和酶联免疫吸附检测。结果与结论:①与假手术组相比,模型组、水凝胶组、干细胞组与复合物组内膜厚度变薄(P0.05);②与干细胞组相比,复合物组CM-Dil标记的骨髓间充质干细胞迁移至子宫内膜数量更多(P0.05);④结果表明,泊洛沙姆407水凝胶搭载骨髓间充质干细胞治疗子宫内膜损伤具有可行性,为修复受损子宫内膜提供新思路。

关键词：水凝胶骨髓间充质干细胞组织修复子宫内膜损伤组织工程

基于LS-DYNA模拟老年股骨颈骨折的有限元分析

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中国组织工程研究 2016年第44期20卷 6606-6611页

作者：李鹏飞杜根发林梓凌庞智晖樊粤光何祥鑫孙文涛陈锦伦广州中医药大学广东省广州市510405 广州中医药大学第一附属医院广东省广州市510405

背景:随着老龄化的加剧,骨质疏松性髋部骨折的发生率及死亡率上升,研究其发病机制和防治方法具有重大意义。目前应用有限元分析法判断骨折的依据仅限于骨折失效的起始点或剖面视图的分布走势,未能完全反映骨折断裂的实际情况。目的:拟基... 详细信息

背景:随着老龄化的加剧,骨质疏松性髋部骨折的发生率及死亡率上升,研究其发病机制和防治方法具有重大意义。目前应用有限元分析法判断骨折的依据仅限于骨折失效的起始点或剖面视图的分布走势,未能完全反映骨折断裂的实际情况。目的:拟基于LS-DYNA有限元分析软件建立模拟跌倒外力致老年股骨颈骨折的断裂模型,评估断裂效果。方法:选取1例老年股骨颈骨折的CT影像资料;运用Mimics软件对健侧进行区域增长、腔隙填充、编辑蒙罩、重建健侧股骨近端模型;导入Hypermesh和LS-DYNA软件,划分网格、定义材料属性;设置失效参数和界面属性;模拟跌倒外力设置载荷和边界约束;计算出股骨颈骨折断裂模型,评估断裂效果。结果与结论:(1)健侧股骨近端三维模型有效性得到验证,基于LS-DYNA的老年股骨颈骨折三维有限元断裂模型与患侧骨折线走向的匹配度接近83%;(2)结果发现,基于LS-DYNA有限元分析软件能够较好地模拟出股骨颈骨折断裂情况,为不同跌倒外力致股骨颈骨折分型机制的探索提供实验基础。

关键词：股骨颈骨折老年人有限元分析组织工程骨科植入物数字化骨科老年股骨颈骨折 LS-DYNA软件断裂国家自然科学基金

归肾丸水提物干预SD大鼠骨髓间充质干细胞增殖及PI3K、AKT蛋白的表达

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中国组织工程研究 2020年第13期24卷 1983-1988页

作者：刘燕关永格宋阳广州中医药大学广东省广州市510405 广州中医药大学第三附属医院广东省广州市510360

背景:补肾类方剂对骨髓间充质干细胞的促增殖作用已经被证实,但其作用机制尚不明确,该研究以归肾丸为例,探讨其可能的作用机制。目的:通过观察归肾丸水提物对骨髓间充质干细胞增殖的影响,探究归肾丸滋补肾精与骨髓间充质干细胞增殖之间... 详细信息

背景:补肾类方剂对骨髓间充质干细胞的促增殖作用已经被证实,但其作用机制尚不明确,该研究以归肾丸为例,探讨其可能的作用机制。目的:通过观察归肾丸水提物对骨髓间充质干细胞增殖的影响,探究归肾丸滋补肾精与骨髓间充质干细胞增殖之间的关系。方法:从3周龄雄性SD大鼠股骨骨髓中分离提取骨髓间充质干细胞,采用全骨髓贴壁法将其纯化,选用纯度较高的第3代细胞进行药物干预,将其分为空白对照组和10,20,40,80,100 mg/L归肾丸水提物组,在体外连续培养5 d以观察量效关系和时效关系。倒置显微镜下观察细胞形态,CCK-8法评估细胞增殖活性,Western blot检测细胞中PI3K、AKT蛋白表达。结果与结论:①归肾丸水提物组的细胞增殖能力明显高于空白对照组,存在一定的量效和时效关系,尤以80 mg/L归肾丸水提物干预3 d时作用效果最佳;②归肾丸水提物组骨髓间充质干细胞中PI3K、AKT蛋白的表达明显高于空白对照组;③结果提示,归肾丸水提物能有效促进骨髓间充质干细胞的增殖,可能与其参与调控PI3K/AKT信号通路有关。

关键词：骨髓间充质干细胞归肾丸细胞增殖 PI3K AKT 滋补肾精