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皮肤桥蛋白通过TGF-β/NF-κB通路促进扩张型心肌病的发生发展

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武汉大学学报(医学版) 2025年第1期 14-19+47页

作者：黄霞任伟阮永乐胡锐石烽吴智勇武汉大学人民医院心血管外科心血管病湖北省重点实验室武汉大学心血管病研究所

目的：探讨皮肤桥蛋白(DPT)在扩张型心肌病中纤维化和重塑中的作用及其分子机制。方法：选取确诊为扩张型心肌病的患者为扩心病组，另选取健康器官捐献者作为对照组，检测两组心脏DPT表达水平。用阿霉素培养人心脏成纤维细胞(HCFs)以模... 详细信息

目的：探讨皮肤桥蛋白(DPT)在扩张型心肌病中纤维化和重塑中的作用及其分子机制。方法：选取确诊为扩张型心肌病的患者为扩心病组，另选取健康器官捐献者作为对照组，检测两组心脏DPT表达水平。用阿霉素培养人心脏成纤维细胞(HCFs)以模拟体外心脏损伤，并对HCFs进行DPT敲低及过表达处理，检测HCFs中DPT及TGF-β/NF-κB信号通路相关蛋白TGF-β1、Smad2、NF-κB p65、p-NF-κB p65表达水平。通过CCK-8和细胞划痕实验检测HCFs的增殖和迁移能力。结果：在人体组织中，通过免疫组化染色及Western Blot发现，扩心病组心脏中DPT的表达显著升高（P病的发生、发展密切相关。

关键词：皮肤桥蛋白扩张型心肌病 TGF-β/NF-κB信号通路心脏成纤维细胞

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转录因子NKX2.1促进诱导多能干细胞向肺干细胞的分化

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中国组织工程研究 2025年

作者：邓丽刘洋王慧杨秋董明清成都市第五人民医院医学研究与转化中心

背景：如何促进诱导多能干细胞向肺干细胞分化对肺损伤修复具有重要意义。NKX2.1是肺上皮分化过程中最早的标志物，在肺发育过程中发挥重要调控作用，然而其表达对诱导多能干细胞向肺干细胞分化的影响还知之甚少。目的：探究NKX2.1对诱... 详细信息

背景：如何促进诱导多能干细胞向肺干细胞分化对肺损伤修复具有重要意义。NKX2.1是肺上皮分化过程中最早的标志物，在肺发育过程中发挥重要调控作用，然而其表达对诱导多能干细胞向肺干细胞分化的影响还知之甚少。目的：探究NKX2.1对诱导多能干细胞向肺干细胞方向分化的影响。方法：体外培养人诱导多能干细胞，采用实时荧光定量PCR和免疫荧光检测多能干细胞特异基因的表达；通过瞬时转染向人诱导多能干细胞中过表达NKX2.1，再诱导其向肺干细胞方向分化，诱导分化7 d采用实时荧光定量PCR、免疫荧光检测FoxA2、SOX9和P63的表达，诱导分化13 d采用免疫荧光检测肺泡细胞标记分子SPB和SPC的表达。结果与结论：(1)诱导多能干细胞紧密集结呈典型克隆样生长，显著高表达干细胞特异表达基因OCT-4、SOX2和NANOG；(2)与未转染对照组相比，过表达NKX2.1组人诱导多能干细胞中NKX2.1表达显著升高(P <0.000 1)；(3)诱导分化7 d，与未转染对照组相比，过表达NKX2.1组肺干细胞相关标记物FoxA2、SOX9和P63的表达显著升高(P <0.000 1)；(4)诱导分化13 d，与未转染对照组相比，过表达NKX2.1组肺泡细胞标记分子SPB和SPC荧光强度显著增加。结果表明NKX2.1可以促进诱导多能干细胞向肺干细胞方向分化。

关键词：诱导多能干细胞肺干细胞 NKX2.1 定型内胚层前肠内胚层肺损伤工程化干细胞

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急性心肌梗死后缺血性脑卒中的研究进展

临床心血管病杂志 2025年第01期 14-19页

作者：李媛媛荣晶晶潘宏伟湖南师范大学附属第一医院(湖南省人民医院)心血管内科湖南省心力衰竭临床医学研究中心

急性心肌梗死(acute myocardial infarction, AMI)是成年人死亡的主要原因之一，而缺血性脑卒中则是AMI后的严重并发症。目前AMI与缺血性脑卒中发生风险之间的关系仍存在争议。本文拟对AMI合并缺血性脑卒中的发病率、风险因素、病理机... 详细信息

急性心肌梗死(acute myocardial infarction, AMI)是成年人死亡的主要原因之一，而缺血性脑卒中则是AMI后的严重并发症。目前AMI与缺血性脑卒中发生风险之间的关系仍存在争议。本文拟对AMI合并缺血性脑卒中的发病率、风险因素、病理机制、治疗以及预后进行综述。

关键词：急性心肌梗死缺血性脑卒中治疗策略

调整细胞培养条件提高间充质干细胞外泌体治疗骨关节炎的潜能

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中国组织工程研究 2025年第1期29卷 164-174页

作者：钱燕刘启颂深圳国家感染性疾病临床医学研究中心南方科技大学深圳市第三人民医院广东省深圳市518112

背景:间充质干细胞外泌体有望发展成为治疗骨关节炎的无细胞疗法,而通过调整细胞培养条件,可以进一步提高其治疗活性和临床转化潜能。目的:综述分析细胞培养条件对外泌体活性的影响,分析其临床转化潜力。方法:查阅国内外有关骨关节炎/... 详细信息

背景:间充质干细胞外泌体有望发展成为治疗骨关节炎的无细胞疗法,而通过调整细胞培养条件,可以进一步提高其治疗活性和临床转化潜能。目的:综述分析细胞培养条件对外泌体活性的影响,分析其临床转化潜力。方法:查阅国内外有关骨关节炎/软骨损伤修复与间充质干细胞来源外泌体的文献。检索词分别为“外泌体,间充质干细胞,骨关节炎,软骨修复”和“exosomes,extracellular vesicles,mesenchymal stem cells,osteoarthritis,cartilage repair”,检索数据库分别为PubMed和中国知网数据库,检索时限为2010-2023年,最后纳入100篇文献进行总结和分析。结果与结论:(1)在间充质干细胞的培养过程中,提供有利于软骨细胞生长的物理环境,或添加软骨保护小分子、成软骨诱导因子和炎症因子等刺激细胞,可以进一步提高间充质干细胞外泌体在维持软骨细胞表型、促进软骨再生和免疫抑制等方面的调控活性;因此,其他具有相似特征的物理或化学因素,也有可能提升间充质干细胞外泌体治疗骨关节炎的疗效。(2)低氧诱导、脉冲电磁场刺激、生物反应器及软骨保护分子(如人甲状旁腺素1-34)刺激等细胞培养方案具有安全、可规模化生产等优点,可用于制备临床用途的、疗效好的间充质干细胞外泌体。(3)间充质干细胞外泌体有望实现骨关节炎的修正治疗,通过调整细胞培养方案提升治疗活性,可进一步提高其临床转化的可行性。

关键词：间充质干细胞外泌体骨关节炎软骨修复细胞培养低氧诱导预处理三维培养软骨保护因子炎症因子

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线粒体自噬在特发性肺纤维化中的生物学机制

中国组织工程研究 2025年第31期29卷 6708-6716页

作者：谢铱子林雪莹张欣欣黄秀芳詹少锋江勇蔡彦广州中医药大学第一临床医学院广东省广州市510000 广州中医药大学第一附属医院广东省广州市510000 广州中医药大学岭南医学研究中心广东省广州市510000 广东省中医临床研究院广东省广州市510000 深圳市中西医结合医院广东省深圳市518104 广东省中医院珠海医院广东省珠海市519015

背景:线粒体自噬与特发性肺纤维化的发生发展关系密切,但其作用机制尚不清楚。目的:探讨线粒体自噬在特发性肺纤维化中的生物学机制,为临床特发性肺纤维化风险预测及亚型区分提供思路。方法:通过GEO和Reactome Pathway数据库等获取特发... 详细信息

背景:线粒体自噬与特发性肺纤维化的发生发展关系密切,但其作用机制尚不清楚。目的:探讨线粒体自噬在特发性肺纤维化中的生物学机制,为临床特发性肺纤维化风险预测及亚型区分提供思路。方法:通过GEO和Reactome Pathway数据库等获取特发性肺纤维化的线粒体自噬相关基因,基于组间差异、随机森林模型筛选特发性肺纤维化的线粒体自噬特征基因。采用g:Profiler数据库进行GO功能富集分析和KEGG、Reactome、WIKI通路富集分析。通过共识聚类法区分特发性肺纤维化线粒体自噬亚型,进行亚型间免疫浸润分析,并筛选出线粒体自噬关键基因。最后,通过列线图模型量化线粒体自噬关键基因对临床特发性肺纤维化发生风险的预测价值,并探索线粒体自噬关键基因与特发性肺纤维化临床特征的相关性。结果与结论:①特发性肺纤维化中与线粒体自噬相关的基因共13个,经组间差异、随机森林模型筛选出线粒体自噬特征基因5个,分别是PINK1、RPS27A、SRC、HIF1A和CDH6;②GO分析主要涉及泛素蛋白连接酶结合、细胞对缺氧的反应;通路富集分析主要涉及PINK1-PRKN介导的线粒体自噬、NOTCH信号通路、EGFR的信号传递和血管生成等;③HIF1A在不同特发性肺纤维化亚型间具有显著的表达差异,可能成为特发性肺纤维化线粒体自噬亚型区分的关键基因;④免疫浸润分析提示骨髓来源抑制性细胞、中性粒细胞与1型辅助性T细胞可能在不同亚型之间存在浸润差异,而HIF1A与多种免疫细胞浸润程度呈正相关;⑤列线图模型提示通过HIF1A的表达水平可能预测临床特发性肺纤维化的发生风险;⑥临床特征分析提示,HIF1A高表达患者可能肺功能更差,纤维化程度更严重。结果表明,PINK1、RPS27A、SRC、HIF1A和CDH6可能通过线粒体自噬影响特发性肺纤维化的发生发展,其中HIF1A可能成为特发性肺纤维化风险预测及临床亚型区分的关键基因,且与患者的肺功能水平密切相关。

关键词：特发性肺纤维化线粒体自噬自噬关键基因亚型分析富集分析免疫浸润分析肺功能生物信息学

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全胸腔镜微创修复Barlow’s病长期随访结果的回顾性队列研究

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中国胸心血管外科临床杂志 2025年第1期32卷 114-120页

作者：钟丽珊黄燕莹汪珍忠肖硕李玉欣方斗王秋吉张朝龙黄焕雷广东省心血管病研究所广东省人民医院广东省医学科学院南方医科大学附属广东省人民医院广东省医学科学院华南理工大学医学院南方医科大学

目的探讨全胸腔镜微创（totally endoscopic minimally invasive,TEMI）二尖瓣修复手术在Barlow’s病治疗中的安全性、有效性和耐久性。方法本研究采用回顾性研究方法，连续收集2010年1月—2021年6月在广东省人民医院接受二尖瓣成形... 详细信息

目的探讨全胸腔镜微创（totally endoscopic minimally invasive,TEMI）二尖瓣修复手术在Barlow’s病治疗中的安全性、有效性和耐久性。方法本研究采用回顾性研究方法，连续收集2010年1月—2021年6月在广东省人民医院接受二尖瓣成形手术的Barlow’s病患者的临床资料。根据手术入路方式将患者分为正中胸骨切开术（median sternotomy,MS）组和TEMI组。结果最终纳入196例患者，其中男133例、女63例，年龄（43.8±14.9）岁。MS组103例，TEMI组93例。全组无在院死亡病例。TEMI组人工腱索植入率高于MS组（P=0.020），但两组在其他修复技术使用率方面差异无统计学意义（P>0.05）。两组总手术时间差异无统计学意义（P=0.265）,TEMI组体外循环时间（P血管不良事件发生率方面差异均无统计学意义（P>0.05）。结论在Barlow’s病的二尖瓣成形手术治疗方面，TEMI安全、可行和有效，可获得良好的远期修复效果。

关键词： Barlow’s病二尖瓣反流全胸腔镜微创正中胸骨切开术二尖瓣成形

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心肾综合征生物标志物研究新进展

临床心血管病杂志 2025年第01期 20-23页

作者：刘天承胡政琪唐毅刘志斌何晋湖南师范大学附属第一医院湖南省人民医院心血管内科湖南省心力衰竭临床医学研究中心

心肾综合征(CRS)是一种心脏和肾脏功能障碍并存的疾病，显著影响患者预后。本文介绍了CRS相关生物标志物，包括利钠肽、致瘤抑制因子-2(suppression of tumorigenicity-2,ST2)、半乳糖凝集素-3(galectin-3,Gal-3)、中性粒细胞明胶酶相... 详细信息

心肾综合征(CRS)是一种心脏和肾脏功能障碍并存的疾病，显著影响患者预后。本文介绍了CRS相关生物标志物，包括利钠肽、致瘤抑制因子-2(suppression of tumorigenicity-2,ST2)、半乳糖凝集素-3(galectin-3,Gal-3)、中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(neutrophil gelatinase-associated lipocalin, NGAL)等的研究新进展，重点探讨其在疾病诊断、预后评估及治疗指导中的作用，并强调了多种标志物联合应用可更准确反映疾病的复杂病理过程，提高诊断和治疗效果。新型标志物为改善CRS患者预后提供了潜在可能，但仍需进一步研究验证其临床价值。

关键词：心肾综合征生物标志物心力衰竭慢性肾脏病急性肾损伤

多发性骨髓瘤患者外周血Treg和Th17的水平检测及其临床价值

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现代肿瘤医学 2025年第1期 90-95页

作者：冯睿婷宋银森赵继智秦娜门颖丽郑州人民医院转化医学研究中心

目的:检测多发性骨髓瘤患者外周血Treg和Th17水平并研究其临床价值。方法:选择多发性骨髓瘤患者（MM组）及正常健康人（CON）为研究对象，流式细胞仪检测外周血Treg和Th17水平，采用实时荧光定量PCR（RT-qPCR）检测Foxp3及RORγt水平，... 详细信息

目的:检测多发性骨髓瘤患者外周血Treg和Th17水平并研究其临床价值。方法:选择多发性骨髓瘤患者（MM组）及正常健康人（CON）为研究对象，流式细胞仪检测外周血Treg和Th17水平，采用实时荧光定量PCR（RT-qPCR）检测Foxp3及RORγt水平，比较不同临床病理特征中Treg、Th17、Foxp3及RORγt的差异。采用ROC曲线分析Treg联合Th17预测多发性骨髓瘤患者1年预后不良的敏感度和特异度。多因素Cox回归分析多发性骨髓瘤患者死亡的危险因素。结果:MM组患者Treg、Th17、Foxp3及RORγt均高于CON组，差异有统计学意义（P病灶残留（P病灶残留MRD+为多发性骨髓瘤患者死亡的独立危险因素（P病情及预后密切相关，可作为多发性骨髓瘤病情及预后评估的标志物，两者联合检测时可显著提高预测多发性骨髓瘤预后不良的敏感度及特异度。

关键词：多发性骨髓瘤 Treg Th17 Foxp3 RORγt 临床价值

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利用双萤光素酶报告基因系统筛选有效的siRNA

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南方医科大学学报 2009年第8期29卷 1577-1581,1584页

作者：单志新林秋雄谭虹虹邓春玉刘晓颖肖定璋余细勇广东省人民医院医学研究中心.广东省心血管病研究所广东广州510080

目的建立一种利用双萤光素酶报告基因系统筛选能有效抑制目的基因表达的小干扰RNA(siRNA)的方法。方法以绿色荧光蛋白(GFP)基因为研究对象,构建3个候选的靶向GFP的siRNA表达质粒pSi-GFPsiRNA1、pSi-GFPsiRNA2、pSi-GFPsiRNA3和阴性对照p... 详细信息

目的建立一种利用双萤光素酶报告基因系统筛选能有效抑制目的基因表达的小干扰RNA(siRNA)的方法。方法以绿色荧光蛋白(GFP)基因为研究对象,构建3个候选的靶向GFP的siRNA表达质粒pSi-GFPsiRNA1、pSi-GFPsiRNA2、pSi-GFPsiRNA3和阴性对照pSi-Negative。构建拥有同一Kozak共有翻译启始序列、翻译启始密码子ATG的GFP与萤光素酶基因(LUC)的融合表达载体pGL3-GFPf。将包含3个GFPsiRNA靶序列的GFP片段插入到改建过的pGL3-promoter载体上LUC的3'非翻译区(UTR),构建pGL3-GFPp。将GFPsiRNA表达质粒联同内参照质粒pRL-TK分别与pGL3-GFPf、pGL3-GFPp共转化HEK293细胞。利用双萤光素酶检测试剂盒测定各组细胞中萤光素酶的活力水平,用荧光定量PCR检测各组细胞中GFPmRNA的表达水平。结果同对照组相比,与pGL3-GFPf共转化GFPsiRNA表达质粒的各组细胞中萤火虫萤光素酶/海肾萤光素酶比值明显降低,其中GFPsiRNA1表达组中降低最显著(P<0.01);定量PCR检测也显示,GFPsiRNA1表达组中GFPmRNA的表达水平降低最明显(P<0.01)。双萤光素酶活性检测和定量PCR结果还显示,与pGL3-GFPp共转化GFPsiRNA表达质粒的各组细胞中,GFPsiRNA1抑制GFP的表达最显著(P<0.01)。结论本文建立了通过双萤光素酶活性检测来筛选有效的siRNA的方法,并为进行多个基因的有效siRNA的筛选提供解决方案。

关键词：双萤光素酶报告基因系统 RNA干扰荧光定量PCR 绿色荧光蛋白