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CRISPR/Cas9介导的酿酒酵母ADH2基因中断及反义RNA干扰GPD1的表达

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现代食品科技 2018年第10期34卷 64-71页

作者：刘奎梁丽敏李振辉叶浩盈潘艳飞何文锦陈由强薛婷福建师范大学海洋生物医药与制品产业化开发技术公共服务平台福建师范大学南方海洋研究院福建省微藻种质改良工程技术研究中心福建福州350117

CRISPR/Cas9是一个简单、高效的用于靶向目的基因和无标记的基因组工程的工具。本文通过构建酿酒酵母沉默组件PGK-SGPD1-CYC1,使甘油-3-磷酸脱氢酶I(Glycerol-3-phosphate dehydrogenase,GPD1)基因在PGK强启动子、CYC1终止子在特定区域... 详细信息

CRISPR/Cas9是一个简单、高效的用于靶向目的基因和无标记的基因组工程的工具。本文通过构建酿酒酵母沉默组件PGK-SGPD1-CYC1,使甘油-3-磷酸脱氢酶I(Glycerol-3-phosphate dehydrogenase,GPD1)基因在PGK强启动子、CYC1终止子在特定区域内进行干扰和表达。应用CRISPR/Cas9基因编辑技术,在中断乙醇脱氢酶Ⅱ(alcohol dehydrogenase Ⅱ,ADH2)基因的同时,定点敲入GPD1基因的反义干扰组件,从而特定地干扰GPD1的表达。采用高效的酵母化学转化法将反应组件敲入酿酒酵母Y1H中,CRISPR/Cas9介导的同源重组效率达43.48%,由此获得了ADH2基因中断和GPD1反义干扰的酿酒酵母突变株。发酵实验结果表明,酿酒酵母突变菌株SG1-1与出发菌株Y1H相比,乙醇产率提高了9.07%,甘油产率下降了12.05%,乙酸产率下降了12.30%,结果表明通过中断ADH2基因及插入GPD1反义干扰组件,既能够中断ADH2基因的功能,减少乙醇转化为乙醛,同时也能在一定程度上干扰GPD1基因的表达,提高乙醇产率。

关键词：酿酒酵母中断乙醇脱氢酶Ⅱ基因中断甘油-3-磷酸脱氢酶Ⅰ

南海西北部过去~55 ka以来元素地球化学记录的古气候环境演变

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地球科学 2021年第3期46卷 975-985页

作者：田成静蔡观强李明坤李波赵利广州海洋地质调查局自然资源部海底矿产资源重点实验室广东广州510075 华南师范大学地理科学学院广东广州510631

南海西北部的西沙碳酸盐台地北坡受到陆源和海洋自生物质的供应,蕴含丰富的气候变化信息.为探究该区域的古气候环境演变历史,选取长828 cm的SS7岩心,利用AMS14C测年以及有孔虫氧同位素建立该区域的年代学框架,并进行元素地球化学分析.... 详细信息

南海西北部的西沙碳酸盐台地北坡受到陆源和海洋自生物质的供应,蕴含丰富的气候变化信息.为探究该区域的古气候环境演变历史,选取长828 cm的SS7岩心,利用AMS14C测年以及有孔虫氧同位素建立该区域的年代学框架,并进行元素地球化学分析.该岩心底部年龄为~55 ka BP,沉积物的元素主要受到陆源碎屑输入、海洋自生作用、氧化还原条件、海洋化学沉积作用等因素的控制.碎屑组分元素比值K/Rb和K/Ti能用于反映源区地表化学风化程度,进而反映源区过去55 ka的东亚夏季风的演化.区域东亚夏季风在约40 ka BP明显减弱,且对Heinrich、新仙女木等北半球快速变冷的事件有明显地响应.过去55 ka的东亚夏季风,不仅受到北半球低纬度夏季日照辐射量的控制,还受到赤道太平洋大气动力(如太平洋沃克环流)的影响.

关键词：南海东亚夏季风元素西沙群岛末次冰期地球化学

广东电子垃圾污染区水体底层鱼类对PCBs的富集效应

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中国环境科学 2011年第4期31卷 637-641页

作者：吴江平管运涛张荧罗孝俊张锡辉麦碧娴清华大学环境科学与工程系北京100084 清华大学深圳研究生院环境工程与管理研究中心广东深圳518055 中国科学院广州地球化学研究所有机地球化学国家重点实验室广东广州510640

采用GC/MS分析方法测试了广东电子垃圾回收地水体沉积物中多氯联苯（PCBs）含量,并利用以前测定的底栖性鱼类（鲮鱼、鲫鱼和乌鳢）PCBs含量数据,计算了生物/沉积物富集因子（BSAF）和生物放大因子（BMF）,研究底栖性鱼类对PCBs的富集能... 详细信息

采用GC/MS分析方法测试了广东电子垃圾回收地水体沉积物中多氯联苯（PCBs）含量,并利用以前测定的底栖性鱼类（鲮鱼、鲫鱼和乌鳢）PCBs含量数据,计算了生物/沉积物富集因子（BSAF）和生物放大因子（BMF）,研究底栖性鱼类对PCBs的富集能力及其影响因素.研究表明,沉积物中总PCBs含量达到24.5~38.6μg/g干重,证实当地环境已受到PCBs严重污染.鲮鱼、鲫鱼和乌鳢的BSAF范围分别为0.05~2.52、0.01~1.20和0.01~5.03.根据乌鳢/鲮鱼和乌鳢/鲫鱼食物关系计算的BMF范围分别为0.14~2.23和0.14~4.93,其中大部分PCB同系物的BMF〉1,表明乌鳢对PCBs具有生物放大作用.BSAF及BMF均与PCBs的KOW和氯原子取代数具有显著相关性,说明化合物的理化性质是控制其生物富集的主要因素.

关键词：多氯联苯生物富集生物放大生态风险电子垃圾

水溶性C_(60)-脱氢枞胺衍生物的合成及生物活性

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南京林业大学学报（自然科学版） 2012年第2期36卷 29-34页

作者：范旭林中祥邓慧敏徐艳梅南京林业大学化学工程学院江苏南京210037 中山大学仪器分析与研究中心广东广州510275

以C60-脱氢枞胺吡咯烷衍生物和C60-脱氢枞胺氮烯加成物为原料,通过两种不同的水性化途径分别合成了两种水溶性的C60-脱氢枞胺富勒醇衍生物和两种水溶性的C60-脱氢枞胺甘氨酸衍生物。产物经TEM、FT-IR、ESI-MS、1H NMR和HPLC等分析方法... 详细信息

以C60-脱氢枞胺吡咯烷衍生物和C60-脱氢枞胺氮烯加成物为原料,通过两种不同的水性化途径分别合成了两种水溶性的C60-脱氢枞胺富勒醇衍生物和两种水溶性的C60-脱氢枞胺甘氨酸衍生物。产物经TEM、FT-IR、ESI-MS、1H NMR和HPLC等分析方法检测确认为目标产物,且为加成度不同的混合物。对合成出的4种水溶性C60-脱氢枞胺衍生物进行了生物活性测试。结果表明,4种水溶性C60-脱氢枞胺衍生物对rTaq DNA聚合酶和HIV-1反转录酶均表现出一定的抑制作用,对卵巢癌细胞株几乎不表现出抑制活性。

关键词：水溶性C60-脱氢枞胺衍生物 HIV-1反转录酶 rTaq DNA聚合酶生物活性

过剩^210Pb年代学的多种计算模式的比较研究

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海洋环境科学 2008年第4期27卷 370-374,382页

作者：张敬牟德海杜金洲张经华东师范大学河口海岸国家重点实验室上海200062 广东省化学应急检测重点实验室广东分析测试中心广州510070

简述了利用沉积物中过剩210Pb测定沉积物年代和沉积通量的几种常用方法:恒定比活度模式(CA)、稳恒放射性通量模式(CF)、阶段恒通量模式(PF)以及沉积物断面同位素法(SIT),探讨了不同的方法所适用的沉积物对象,并通过大亚湾柱样的数据分... 详细信息

简述了利用沉积物中过剩210Pb测定沉积物年代和沉积通量的几种常用方法:恒定比活度模式(CA)、稳恒放射性通量模式(CF)、阶段恒通量模式(PF)以及沉积物断面同位素法(SIT),探讨了不同的方法所适用的沉积物对象,并通过大亚湾柱样的数据分析发现CA、CF和PF三种模式的沉积年代和沉积通量存在着一定的差异:计算结果显示CA模式计算得出的年龄比CF和PF的结果小很多,而CF的沉积通量略大于PF的沉积通量。同时本文还讨论了210Pb的分析方法应该注意的问题以及对于测年结果的误差分析。

关键词： ^210Pb 沉积物年代沉积通量 CA CF

南海造礁珊瑚Favia palauensis营养方式的空间差异及其对环境适应性的影响

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中国科学：地球科学 2021年第6期51卷 927-940页

作者：许慎栋张志楠余克服黄学勇陈汉吉覃祯俊梁日升广西大学海洋学院广西大学珊瑚礁研究中心广西南海珊瑚礁研究重点实验室南宁530004 青岛海洋科学与技术国家实验室海洋地质过程与环境功能实验室青岛266061 南方海洋科学与工程广东省实验室(珠海) 珠海519000

造礁珊瑚具有自养/异养双重营养模式.但是珊瑚能否通过调节其营养方式以提高其应对不同环境胁迫的能力,目前仍不清楚.文章以中国南海不同纬度礁区(三亚鹿回头、西沙群岛和南沙群岛)的70个帛琉蜂巢珊瑚(Favia palauensis)样品为材料,利... 详细信息

造礁珊瑚具有自养/异养双重营养模式.但是珊瑚能否通过调节其营养方式以提高其应对不同环境胁迫的能力,目前仍不清楚.文章以中国南海不同纬度礁区(三亚鹿回头、西沙群岛和南沙群岛)的70个帛琉蜂巢珊瑚(Favia palauensis)样品为材料,利用同位素地球化学指标(珊瑚骨骼δ^(13)C(δ^(13)C_(s))、虫黄藻δ^(13)C(δ^(13)C_(z))、宿主有机质δ^(13)C(δ^(13)C_(h))以及δ^(13)C_(h)和δ^(13)C_(z)之间的差值(Δ^(h-z )^(13)C)),结合共生虫黄藻密度(ZD)、共生组织生物量等珊瑚的生理指标和环境参数,研究了南海Favia palauensis营养方式的空间差异及其受控因素,探讨了营养方式的灵活性调节对其环境适应性的潜在影响.结果显示:南海北部三亚鹿回头珊瑚具有较高的ZD和δ^(13)C_(z)值,表明该区域的珊瑚比南海中部西沙和南部南沙群岛的珊瑚有更高的自养能力;而西沙和南沙群岛的珊瑚具有相对低的δ^(13)C_(h)和Δ^(h-z) ^(13)C值,意味着该区域的珊瑚比三亚鹿回头的珊瑚有更高的异养摄食能力.此外,珊瑚共生组织生物量、δ^(13)C_(s)与Δ^(h-z) ^(13)C之间的负相关关系,表明珊瑚共生体所产生的有机物质越多,珊瑚的异养摄食强度越大.珊瑚营养模式的空间差异表明,当外部环境条件和/或其自身生理指标发生改变时,珊瑚会调节其营养方式.这种光合自养与异养营养之间的动态调节机制对提高珊瑚的环境适应性具有重要意义.

关键词：造礁珊瑚共生虫黄藻密度稳定碳同位素营养方式空间差异南海

超高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱联用鉴定椴树蜂蜜中的抗氧化活性肽

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质谱学报 2020年第3期41卷 244-253,I0002页

作者：谢博傅红杨方福州大学生物科学与工程学院福建福州350108 福州海关技术中心福建福州350001 福建省检验检疫技术研究重点实验室福建福州350001 福州大学福建省海洋酶工程重点实验室福建福州350108

应用超高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱联用法(UPLC-Q-Exactive)鉴定椴树蜂蜜蛋白经胰蛋白酶水解后获得的肽类物质的组成和结构,并探讨椴树蜂蜜酶解多肽与其抗氧化活性的关系。椴树蜂蜜经三氯乙酸溶液沉淀,所得蛋白用胰蛋... 详细信息

应用超高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱联用法(UPLC-Q-Exactive)鉴定椴树蜂蜜蛋白经胰蛋白酶水解后获得的肽类物质的组成和结构,并探讨椴树蜂蜜酶解多肽与其抗氧化活性的关系。椴树蜂蜜经三氯乙酸溶液沉淀,所得蛋白用胰蛋白酶酶解,酶解肽段经C18固相萃取柱富集净化后,采用0.1%甲酸(A)-乙腈(B)作为流动相进行梯度洗脱,以高分辨质谱(Q-Exactive)的Full MS/ddMS2模式对其进行鉴定。采用MaxQuant软件分析质谱结果,所得肽段在Uniprot上进行Blast序列对比,共鉴定出52种椴树蜂蜜胰蛋白酶解多肽,其中71.15%来自蜂王浆主要蛋白(MRJPs),鉴定出的肽段归属于10种蛋白质,其中6种(60%)属于MRJP家族蛋白。对椴树蜂蜜酶解多肽质谱鉴定结果进行重复性分析,2次以上重复质谱分析可实现对椴树蜂蜜多肽(87.1%)的可靠鉴定。结合文献报道的蜂蜜多肽抗氧化活性的构效关系,筛选出11条可能具有抗氧化活性的多肽。化学合成11条多肽后,进行4种不同的抗氧化活性实验。结果表明,这11条多肽的抗氧化活性存在较大差异,其中1 g/L VIYEWK多肽显示出较强的ABTS自由基清除活性(33.8%±0.6%)、DPPH自由基清除活性(96.5%±0.0%),并表现出一定的还原力(0.010±0.001)和Fe2+螯合活性(4.0%±0.2%)。该方法能快速有效鉴定椴树蜂蜜多肽结构,可为揭示椴树蜂蜜多肽结构与抗氧化活性的关系提供依据。

关键词：多肽椴树蜂蜜超高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱(UPLC-Q-Exactive) 抗氧化活性

泉州湾溶解无机氮的含量分布组成及其与环境因子的关系

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应用海洋学学报 2017年第3期36卷 349-355页

作者：侯昱廷高爱国林建杰张延颇朱旭旭龚松柏厦门大学海洋与地球学院福建厦门361102 福州市海洋与渔业技术中心福建福州350026

分析了泉州湾溶解无机氮(DIN)春季的含量分布、组成、潮周期及其与环境因子的关系.根据高值区判断洛阳江口以县区农田养殖输入硝酸氮(NO_3^--N)为主,而晋江口以市区生活污水输入氨氮(NH_4^+-N)为主,DIN含量的平面分布受NO_3^--N与NH_4^... 详细信息

分析了泉州湾溶解无机氮(DIN)春季的含量分布、组成、潮周期及其与环境因子的关系.根据高值区判断洛阳江口以县区农田养殖输入硝酸氮(NO_3^--N)为主,而晋江口以市区生活污水输入氨氮(NH_4^+-N)为主,DIN含量的平面分布受NO_3^--N与NH_4^+-N共同控制.DIN的平均组成为NO_3^--N最高,NH_4^+-N其次,NO_2^--N远低于二者,NH_4^+-N平均占比达35%左右,DIN的组成未达到热力学平衡.根据DIN含量与溶解氧(DO)及化学需氧量(COD)的相关性分析,推测三氮转换不仅受到氧化还原过程的影响,还受更为复杂的来源、人类活动及生物过程等的影响;根据DIN含量与盐度的关系,NO_3^--N及NO2--N均呈现保守行为,NH_4^+-N淡水端有一定的增加现象,DIN含量与盐度的关系受NO_3^--N和NH_4^+-N共同控制;DIN含量还受到悬浮物含量、温度、盐度及p H值等环境因子的控制,结合DIN含量与叶绿素a的相关性及分布情况,可推测春季DIN主要来源不是浮游植物分解.不同站位DIN含量的潮期变化相似,基本上都表现为涨潮冲淡作用下含量降低而落潮后回升.除此之外,泉州湾DIN含量的年际增长及超标均比较严重,需要采取相应的治理措施.

关键词：海洋化学无机氮季节分布环境因子组成转化泉州湾

热解温度对典型南方木本园林废弃物生物质炭理化特性的影响

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浙江农林大学学报 2018年第6期35卷 1007-1016页

作者：赵伟宁杨兴何丽芝郭佳王海龙浙江农林大学环境与资源学院浙江杭州311300 浙江农林大学浙江省土壤污染生物修复重点实验室浙江杭州311300 诚邦生态环境股份有限公司浙江杭州310008 佛山科学技术学院环境与化学工程学院广东佛山528000 广东省生物炭工程技术研究中心广东佛山528000

园林废弃物处理不合理,不仅会造成植物营养元素的流失,还会造成环境污染。以法国梧桐Platanus orientalis,桂花Osmanthus fragrans,红叶石楠Photiniax fraseri和樟树Cinnamomum camphora等南方城市典型园林绿化废弃物生物质为原材料,研... 详细信息

园林废弃物处理不合理,不仅会造成植物营养元素的流失,还会造成环境污染。以法国梧桐Platanus orientalis,桂花Osmanthus fragrans,红叶石楠Photiniax fraseri和樟树Cinnamomum camphora等南方城市典型园林绿化废弃物生物质为原材料,研究热解温度(350, 500和650℃)对不同园林废弃物生物质炭产率和理化特性的影响。结果表明:生物质炭的产率随着热解温度的升高呈下降趋势,且在350~500℃温度段变化较明显;原材料灰分质量分数对生物质炭产率有明显影响,法国梧桐叶片炭产率最高,其枝条炭产率最低。高温度条件下制备的生物质炭芳香性增强,亲水性和极性减弱, 650℃制备的红叶石楠枝条炭和法国梧桐枝条炭的芳香性较强, 350℃制备的法国梧桐叶炭亲水性和极性最强。桂花和樟树叶片炭的全氮质量分数较高,叶片炭全硫质量分数高于枝条炭。随着热解温度的升高,生物质炭表面的含氧官能团种类和数量逐渐减少,红叶石楠叶片炭在高温条件下官能团仍明显存在。利用扫描电镜和X-ray能谱分析生物质炭(500℃)发现,樟树枝条炭和法国梧桐枝条炭孔隙结构较发达,红叶石楠叶片炭中磷、镁、钾、钙等元素质量分数较高。综上所述,园林废弃物生物质炭的特性主要受原材料和热解温度的影响,不同温度下制备的园林废弃物生物质炭具有不同的产率和理化特性。

关键词：土壤学园林废弃物热解温度生物质炭理化性质