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饲料中添加缩合单宁、水解单宁和单宁酸对海鲈的饲喂效果研究

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动物营养学报 2025年

作者：孙文豪董芮绮邱建强田仁红陈冰赵红霞黄文鲁慧杰胡俊茹朱喜锋朱晓闻曹俊明彭凯广东省农业科学院动物科学研究所广东省畜禽育种与营养研究重点实验室农业农村部华南动物营养与饲料重点实验室广东省农业科学院水产研究中心广东海洋大学水产学院上海海洋大学水产与生命学院华中农业大学水产学院广州飞禧特生物科技有限公司广东省农业科学院

本试验旨在研究饲料中添加缩合单宁、水解单宁和单宁酸对海鲈生长性能、血清指标、肠道消化酶活性以及肠道和肝脏组织形态的影响。选取480尾初始体重为(4.24±0.26) g的健康海鲈,随机分为4组,每组3个重复,每个重复40尾鱼。4组分别饲喂... 详细信息

本试验旨在研究饲料中添加缩合单宁、水解单宁和单宁酸对海鲈生长性能、血清指标、肠道消化酶活性以及肠道和肝脏组织形态的影响。选取480尾初始体重为(4.24±0.26) g的健康海鲈,随机分为4组,每组3个重复,每个重复40尾鱼。4组分别饲喂基础饲料(对照,G1组)、缩合单宁饲料(含0.1%缩合单宁,G2组)、水解单宁饲料(含0.1%水解单宁,G3组)和单宁酸饲料(含0.1%单宁酸,G4组)。试验期56 d。结果表明:1)各组间海鲈生长性能指标均无显著差异(P>0.05);2)与G1组相比,G2组血清总胆固醇含量显著降低(P<0.05),G2组和G4组血清甘油三酯和低密度脂蛋白胆固醇含量显著降低(P<0.05);3)与G1组相比,G4组血清超氧化物歧化酶活性显著提高(P<0.05),G2组和G4组血清丙二醛含量显著降低(P<0.05);4)与G1组相比,G2组肠道胰蛋白酶活性显著降低(P<0.05);5)与G1组相比,G2组、G3组和G4组肠道绒毛长度显著降低(P<0.05),G2组绒毛宽度显著提高(P<0.05),G2组、G3组和G4组肌层厚度显著降低(P<0.05);6)G2组肝细胞形态正常,而G1组、G3组和G4组呈现不同程度的肝细胞脂质空泡化现象。综上所述,饲料中添加0.1%缩合单宁、水解单宁和单宁酸不影响海鲈生长性能,但降低了血清中总胆固醇、甘油三酯和丙二醛含量,以及肠道胰蛋白酶活性、绒毛长度和肌层厚度;其中,缩合单宁对海鲈肝脏组织和功能的影响较小,但对肠道胰蛋白酶活性的抑制以及肠道组织的破坏作用较强,单宁酸对增强海鲈抗氧化能力的效果较好。

关键词：缩合单宁水解单宁单宁酸海鲈饲喂效果

卵形鲳鲹促性腺激素β亚基的克隆鉴定及其受雌二醇的调控

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中山大学学报（自然科学版）（中英文） 2025年第1期64卷 172-181页

作者：黄春艳陈华谱郭煜文王岩杨浩李广丽广东省名特优鱼类生殖调控与繁育工程技术研究中心/广东省水产经济动物病原生物学及流行病学重点实验室/广东省海水养殖生物育种工程实验室/广东海洋大学水产学院广东湛江524088

促性腺激素(GtH,gonadotropin hormone)是垂体合成和分泌的一类重要糖蛋白激素,包括促卵泡生成素(Fsh,follicle stimulating hormone)和促黄体生成素(Lh,luteinizing hormone),在促进性腺发育和成熟过程中发挥重要作用。本研究成功克隆... 详细信息

促性腺激素(GtH,gonadotropin hormone)是垂体合成和分泌的一类重要糖蛋白激素,包括促卵泡生成素(Fsh,follicle stimulating hormone)和促黄体生成素(Lh,luteinizing hormone),在促进性腺发育和成熟过程中发挥重要作用。本研究成功克隆了卵形鲳鲹(Trachinotus ovatus)fshβ和lhβ基因的开放阅读框(ORF,open reading frame)序列,fshβORF长度为363 bp,lhβORF长度为447 bp。通过荧光定量PCR技术(qPCR,quantitative realtime PCR)检测,发现fshβ和lhβ基因在卵形鲳鲹的下丘脑-垂体-性腺轴(HPG,hypothalamus-pituitary-gonadal axis)显著表达,在垂体中的表达水平最高,其次是下丘脑和性腺。此外,通过体外实验评估17β-雌二醇(E2,17β-estradiol)对卵形鲳鲹垂体组织中fshβ和lhβ基因表达的影响。结果显示,10μmol/L E2处理6 h后,GtHβ亚基基因的表达被极显著抑制。最后,使用雌激素受体(ER,estrogen receptor)拮抗剂体外孵育卵形鲳鲹垂体组织,发现广谱性拮抗剂Fulvestrant、ERβ拮抗剂Cyclofenil和ERα拮抗剂MPP(MPP dihydrochloride)均能够消除E2对GtHβ亚基基因表达的抑制作用。综上所述,研究结果表明E2对卵形鲳鲹GtH的分泌具有负反馈调节作用,为卵形鲳鲹生殖调控机制提供了有价值的见解。

关键词：卵形鲳鲹(Trachinotus ovatus) 促性腺激素(GtH) 雌激素受体(ER) 17β-雌二醇(E2)

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大豆抗原蛋白7S和11S对凡纳滨对虾肠道细胞的致敏机制研究

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动物营养学报 2025年

作者：田仁红邱建强彭凯孙文豪董芮绮鲁慧杰赵红霞陈冰陈文淳郭慧朱喜锋李国立黄文广东海洋大学水产学院广东省农业科学院动物科学研究所广东省农业科学院水产协同创新中心广东省畜禽育种与营养研究重点实验室农业农村部华南动物营养与饲料重点实验室华中农业大学水产学院上海海洋大学水产与生命学院广州飞禧特生物科技有限公司

本试验旨在探究大豆抗原蛋白7S和11S对凡纳滨对虾肠道细胞的致敏机制。以凡纳滨对虾肠道细胞为研究对象,试验分为对照组(NC组)、7S组、11S组,每组3个重复。细胞培养48 h后,测定各组细胞活性、细胞膜完整性相关指标、细胞抗氧化指标、细... 详细信息

本试验旨在探究大豆抗原蛋白7S和11S对凡纳滨对虾肠道细胞的致敏机制。以凡纳滨对虾肠道细胞为研究对象,试验分为对照组(NC组)、7S组、11S组,每组3个重复。细胞培养48 h后,测定各组细胞活性、细胞膜完整性相关指标、细胞抗氧化指标、细胞炎症因子含量、细胞凋亡率、细胞凋亡与紧密连接蛋白相关基因表达。结果表明:与NC组相比,7S组和11S组碱性磷酸酶(AKP)、乳酸脱氢酶(LDH)活性及活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、干扰素-γ(IFN-γ)含量显著升高(P<0.05),总抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性及白细胞介素-10(IL-10)含量显著降低(P<0.05),细胞凋亡率显著升高(P<0.05),半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)、B淋巴细胞瘤/白血病-2相关X蛋白(Bax)、c-Jun氨基末端激酶(JNK)、p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)mRNA相对表达量显著上调(P<0.05),紧密连接蛋白-3(Claudin-3)、闭合蛋白(Occludin)和闭锁小带蛋白-1(ZO-1)mRNA相对表达量显著下调(P<0.05)。大豆抗原蛋白7S诱导ROS累积、加剧炎症反应、促进细胞凋亡及破坏细胞屏障的效果强于大豆抗原蛋白11S。综上所述,大豆抗原蛋白7S和11S通过破坏细胞膜完整性,释放AKP和LDH,诱导ROS累积,促进细胞促炎因子分泌,上调细胞凋亡因子和紧密连接蛋白基因表达水平,抑制细胞活性并导致细胞过敏反应。

关键词：凡纳滨对虾大豆抗原蛋白肠道细胞致敏机制

大鼠胰腺导管干细胞分化形成类胰岛的改良诱导方法

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解剖学报 2022年第3期53卷 387-395页

作者：张文琦杨洁吴江郎贯存效梅广东海洋大学滨海农业学院动物医学系广东湛江524088

目的对大鼠胰腺导管干细胞(rPDSCs)分化形成类胰岛的诱导方法进行改良。方法在基础培养液DMEM/F12+10%FBS+1%青霉素/1%链霉素中,分别添加2、4、6和8μmol/L全反式维A酸(ATRA),体外诱导rPDSCs分化形成类胰岛,筛选ATRA最适诱导浓度。以ATR... 详细信息

目的对大鼠胰腺导管干细胞(rPDSCs)分化形成类胰岛的诱导方法进行改良。方法在基础培养液DMEM/F12+10%FBS+1%青霉素/1%链霉素中,分别添加2、4、6和8μmol/L全反式维A酸(ATRA),体外诱导rPDSCs分化形成类胰岛,筛选ATRA最适诱导浓度。以ATRA最适诱导浓度为基础,再分别采用基质胶(matrigel)培养,悬浮培养或悬滴培养方式体外诱导rPDSCs分化形成类胰岛,筛选最适诱导培养方式。采用细胞形态学,双硫腙(DTZ)染色,细胞免疫荧光染色,Real-time PCR和ELISA方法对诱导类胰岛进行检测。结果与对照组相比,在基础培养液中,添加6μmol/L ATRA及采用基质胶培养方式诱导效果最好。诱导28 d,细胞富集分化形成胰岛样球形细胞团;DTZ染色呈阳性;在基因和蛋白水平上分别表达胰岛素(insulin)和胰腺十二指肠同源框1(Pdx1);葡萄糖刺激,释放胰岛素和C肽,且具有葡萄糖浓度依赖性。结论在基质胶培养方式下,采用6μmol/L ATRA+DMEM/F12+10%FBS+1%青霉素/1%链霉素可以成功诱导rPDSCs体外分化形成类胰岛。

关键词：胰腺导管干细胞全反式维A酸胰岛实时定量聚合酶链反应大鼠

黄芩苷通过抑制核因子-κB和激活核因子-E2相关因子2信号通路缓解脂多糖诱导的小鼠空肠炎症和氧化应激

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动物营养学报 2022年第2期34卷 1217-1229页

作者：鲍明隆孙心怡梁梅巨向红雍艳红马兴斌于志超郭依莹刘晓曦广东海洋大学滨海农业学院动物医学系湛江524000

本试验旨在探讨黄芩苷对脂多糖(LPS)诱导的小鼠空肠炎症和氧化应激的缓解作用及其分子机制。将36只小鼠随机分为对照组、阴性对照组、模型组以及低、中、高剂量黄芩苷组,每组6只。适应性生长7 d后开始试验。对照组小鼠不作处理,阴性对... 详细信息

本试验旨在探讨黄芩苷对脂多糖(LPS)诱导的小鼠空肠炎症和氧化应激的缓解作用及其分子机制。将36只小鼠随机分为对照组、阴性对照组、模型组以及低、中、高剂量黄芩苷组,每组6只。适应性生长7 d后开始试验。对照组小鼠不作处理,阴性对照组和模型组小鼠每天灌胃0.2 mL磷酸盐缓冲液(PBS),黄芩苷组小鼠每天灌胃黄芩苷药液0.2 mL(根据小鼠体重计算黄芩苷用量,低剂量组为100 mg/kg BW,中剂量组为200 mg/kg BW,高剂量组为400 mg/kg BW),连续灌胃7 d,第7天给模型组、黄芩苷组小鼠腹腔注射0.2 mL LPS(3.5 mg/kg BW)。注射LPS 24 h后处死小鼠,取空肠进行形态学观察,检测空肠中炎性因子mRNA表达量和含量以及核因子-κB(NF-κB)和核因子-E2相关因子2(Nrf2)/血红素氧合酶-1(HO-1)信号通路关键蛋白表达量的变化。结果显示:相比于对照组,模型组小鼠空肠组织绒毛结构损伤,绒毛高度与隐窝深度比值显著降低(P<0.05),空肠中Toll样受体4(TLR4)的mRNA表达量显著升高(P<0.05),炎性因子[白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)]的mRNA表达量和含量显著升高(P<0.05),P65的蛋白表达量、磷酸化NF-κB抑制蛋白α(P-IκBα)/NF-κB抑制蛋白α(IκBα)和磷酸化P65(P-P65)/P65比值显著升高(P<0.05),超氧化物歧化酶(SOD)活性和HO-1的蛋白表达量显著降低(P<0.05)。相对于模型组,黄芩苷组小鼠空肠组织结构得到明显改善,绒毛高度与隐窝深度的比值显著升高(P<0.05),TLR4和炎性因子的mRNA表达量显著下降(P<0.05),P-65、P-IκBα的蛋白表达量显著降低(P<0.05);高剂量黄芩苷组空肠中SOD的活性显著升高(P<0.05);中、高剂量黄芩苷组空肠中HO-1和醌氧化还原酶-1(NQO-1)的mRNA表达量显著升高(P<0.05),HO-1和胞核Nrf2的蛋白表达量显著升高(P<0.05)。综上可知,在LPS构建的小鼠空肠炎症模型中,黄芩苷在适宜剂量内可以通过抑制NF-κB信号通路发挥抗炎症作用,通过激活Nrf2信号通路发挥抗氧化作用,推荐剂量为200 mg/kg BW。

关键词：小鼠黄芩苷信号通路空肠炎症氧化应激

环境因子对渤海强壮滨箭虫四季种群结构的影响

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中国海洋大学学报（自然科学版） 2025年第1期55卷 107-117页

作者：孙颖陈学超沈阳孙跃王博渊朱丽岩中国海洋大学海洋生命学院山东青岛266003 深圳市海洋发展研究促进中心广东深圳518034 中国海洋大学水产学院山东青岛266003

为深入探究环境因子与渤海强壮滨箭虫四季种群结构动态的关系,并进一步丰富近年来渤海海域浮游动物的相关研究,本研究于2018年4月—2019年12月在渤海海区开展4个航次的海洋综合调查工作,对渤海强壮滨箭虫的时空分布以及生长繁殖状况进... 详细信息

为深入探究环境因子与渤海强壮滨箭虫四季种群结构动态的关系,并进一步丰富近年来渤海海域浮游动物的相关研究,本研究于2018年4月—2019年12月在渤海海区开展4个航次的海洋综合调查工作,对渤海强壮滨箭虫的时空分布以及生长繁殖状况进行了研究,并讨论了温度、盐度、深度以及饵料等环境因子对其种群结构产生的影响。研究结果显示:盐度与强壮滨箭虫的时空分布具有显著的相关性,在28.5~32.7的范围内,盐度的升高对强壮滨箭虫种群增长有抑制作用;温度通过影响强壮滨箭虫的摄食、代谢来影响其季节上的变化;桡足类作为强壮滨箭虫的主要饵料,也是影响强壮滨箭虫生长繁殖的重要因素。

关键词：环境因子渤海强壮滨箭虫时空分布生长状况

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狮头鹅PRL基因的克隆及原核表达

畜牧兽医学报 2011年第3期42卷 343-348页

作者：贾汝敏吴慧英刘铀张丽广东海洋大学动物科学系湛江524088 广东海洋大学动物医学系湛江524088

为了进一步研究PRL对狮头鹅繁殖性能的生理调节机制,采用RT-PCR方法从狮头鹅脑垂体组织扩增获得PRL基因的cDNA序列,克隆至pMD18-T载体获得重组质粒pMD18-PRL,并进行序列测定和分析。将测序正确的cDNA序列定向克隆到pET32a(+),构建表达载... 详细信息

为了进一步研究PRL对狮头鹅繁殖性能的生理调节机制,采用RT-PCR方法从狮头鹅脑垂体组织扩增获得PRL基因的cDNA序列,克隆至pMD18-T载体获得重组质粒pMD18-PRL,并进行序列测定和分析。将测序正确的cDNA序列定向克隆到pET32a(+),构建表达载体pET32a-PRL,并转化至BL21(DE3)大肠杆菌表达目的蛋白,经IPTG诱导后进行SDS-PAGE检测和Western Blot分析。狮头鹅PRL基因编码区含有600个核苷酸,编码199个氨基酸(GenBank ***856665),与其它禽类PRL具有高度保守性;狮头鹅PRL蛋白二级结构由多个α螺旋和β转角及无规卷曲构成,推测N端70～76、95～102、150～155和207～213区段为其抗原表位的优势区。SDS-PAGE检测表明狮头鹅PRL基因在大肠杆菌中获得了高效表达,可溶性表达产物约占全菌总蛋白的53.6%,融合蛋白分子量约41ku,并用镍柱亲和层析法分离纯化融合蛋白。Western Blot分析证实了所获的融合蛋白具有较强抗原性。试验结果为进一步研究PRL基因的生物功能及其对狮头鹅就巢、产蛋等生产性状的影响奠定了基础。

关键词：狮头鹅催乳素克隆基因表达 PRL蛋白

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四川白鹅PRL基因的克隆与生物信息学分析

华北农学报 2011年第1期26卷 105-111页

作者：吴慧英刘铀贾汝敏张丽广东海洋大学动物科学系广东湛江524088 广东海洋大学动物医学系广东湛江524088

为了探明鹅就巢性产生的分子机理及不同鹅种之间的遗传分化,采用RT-PCR方法从四川白鹅垂体组织克隆到了PRL基因,并对其核苷酸序列和推导的氨基酸序列等进行了分析。四川白鹅PRL基因编码区含有690个核苷酸(Gen-Bank ***202542),编码229... 详细信息

为了探明鹅就巢性产生的分子机理及不同鹅种之间的遗传分化,采用RT-PCR方法从四川白鹅垂体组织克隆到了PRL基因,并对其核苷酸序列和推导的氨基酸序列等进行了分析。四川白鹅PRL基因编码区含有690个核苷酸(Gen-Bank ***202542),编码229个氨基酸,与其他禽类PRL具有高度保守性;其中与东北白鹅和籽鹅的PRL基因核苷酸序列同源性最高,达到100%;与莱茵鹅、马岗鹅、皖西白鹅、浙东白鹅同源性达到99.4%～99.9%;与北京鸭和番鸭相比分别为98.6%和98.4%;与鹌鹑、家鸡、火鸡的同源性介于92.3%～93%。四川白鹅PRL蛋白二级结构由多个α螺旋和β转角及无规卷曲构成,在其胞外区有2个糖基化位点,推测N端70～76、95～102、150～155和207～213区段为其抗原表位优势区。四川白鹅及其他鹅种PRL氨基酸序列具有一个潜在信号肽剪切位点(28VTS-LP32),此位点的差异可能导致PRL前体翻译加工的不同,从而引起禽种在就巢行为上的差异。

关键词：四川白鹅催乳素(PRL)基因克隆生物信息学分析

海洋天然产物壳寡糖抑制细菌生长和黏附的作用评价

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动物营养学报 2022年第5期34卷 3297-3306页

作者：温佳颖牛雪婷陈圣威陈宗周王新晨吴淑婷巨向红刘晓曦雍艳红广东海洋大学滨海农业学院动物医学系湛江524000 广东海洋大学深圳研究院深圳518108

海产品加工副产物壳寡糖(COS)具有抗菌、消炎和黏膜修复等重要生物活性。为了解COS作为替抗天然产物的功能和作用,本研究检测了COS对致病性大肠杆菌、肠炎沙门菌、金黄色葡萄球菌和福氏志贺菌的最低抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC),... 详细信息

海产品加工副产物壳寡糖(COS)具有抗菌、消炎和黏膜修复等重要生物活性。为了解COS作为替抗天然产物的功能和作用,本研究检测了COS对致病性大肠杆菌、肠炎沙门菌、金黄色葡萄球菌和福氏志贺菌的最低抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC),通过羟基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺脂(CFSE)标记观察了COS对4种致病菌在猪肠道上皮细胞IPEC-J2黏附的抑制率,通过qPCR检测了细菌黏附相关基因的表达水平。结果表明:COS对这4种肠道致病菌均有良好的抑菌作用,其中对致病性大肠杆菌抑杀效果最明显;COS可抑制4种致病菌对IPEC-J2细胞的黏附作用,以对致病性大肠杆菌的黏附抑制效果最好,黏附率能下降至50%以下;COS对致病菌侵染的IPEC-J2细胞间黏附分子-1(ICAM-1)基因相对表达量的上调有极显著抑制作用(P<0.01),对黏蛋白(MUC)2、MUC4及闭锁蛋白(Occludin)基因相对表达量有显著上调作用(P<0.05)。结果说明,COS有明显的抑菌、黏附抑制和黏膜保护作用,具有作为替抗减抗功能饲料添加剂开发的潜力。

关键词：壳寡糖细菌黏附肠上皮肠道致病菌