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脑立体定向损毁中央中核、杏仁核治疗癌性顽痛

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中山医科大学学报 2002年第2期23卷 143-144,147页

作者：荆国杰杨魁元张学军祝刚姚晓腾徐纲广东省惠州市中心人民医院神经外科广东惠州516001

【目的】应用脑立体定向技术 ,对顽固癌痛进行有效治疗 ,并探讨癌性顽痛的发生机制。【方法】使用安柯ASA 6 0 2型定向仪 ,对 46例癌痛患者分别采用CT直接定位 ,MR成像定位及脑室造影确定大脑原点等不同方法 ,对颅内阴性靶点进行三维成... 详细信息

【目的】应用脑立体定向技术 ,对顽固癌痛进行有效治疗 ,并探讨癌性顽痛的发生机制。【方法】使用安柯ASA 6 0 2型定向仪 ,对 46例癌痛患者分别采用CT直接定位 ,MR成像定位及脑室造影确定大脑原点等不同方法 ,对颅内阴性靶点进行三维成像 ,确定靶点位置并用射频对其进行损毁 ,并与 38例长期口服吗啡类止痛药物的同类患者进行对照。【结果】 46例不同晚期癌痛病人中 ,手术组术后疼痛控制 43例 ,疼痛缓解 3例 ;药物组疼痛控制 3例 ,缓解 35例 (χ2 =5 4 16 ,P <0 0 1)。【结论】立体定向丘脑中央中核、杏仁核损毁术操作简单、创伤小、易于推断靶点位置 ,对癌性顽痛止痛效果明显优于传统药物治疗。

关键词：癌性疼痛脑立体定向损毁术丘脑核损毁治疗

人脂肪组织来源的基质细胞分化为神经元样细胞的体外研究

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中国修复重建外科杂志 2006年第8期20卷 783-786页

作者：杨立业郑佳坤汪朝阳林小聪李文玉许曼丹潮州市中心医院神经外科广东潮州521021

目的探讨人脂肪组织来源的基质细胞(adiposetissue-derivedstromalcells,ADSCs)向神经元样细胞分化的可能性,为神经移植探索新的细胞来源。方法采用胶原酶消化法分离培养成人的ADSCs,含血清的培养基进行培养,胰蛋白酶消化传代,采用第3～... 详细信息

目的探讨人脂肪组织来源的基质细胞(adiposetissue-derivedstromalcells,ADSCs)向神经元样细胞分化的可能性,为神经移植探索新的细胞来源。方法采用胶原酶消化法分离培养成人的ADSCs,含血清的培养基进行培养,胰蛋白酶消化传代,采用第3～9代的ADSCs进行诱导。应用异丁基甲基黄嘌呤、消炎痛、胰岛素和地塞米松,诱导其向神经元样细胞和脂肪细胞分化,采用苏丹黑B和免疫细胞化学方法对ADSCs进行鉴定。结果成功培养出ADSCs来源的基质细胞,细胞在体外生长形态类似成纤维细胞,可维持在未分化状态并稳定增殖,体外扩增可达20代。细胞表达波形蛋白和巢蛋白,大部分细胞还表达平滑肌肌动蛋白和β管蛋白;应用异丁基甲基黄嘌呤、消炎痛、胰岛素和地塞米松,可诱导ADSCs向神经元样细胞和脂肪细胞分化,其中0.1%～0.2%的细胞分化为神经元样细胞,40%～50%分化为脂肪细胞。分化的神经元样细胞具有典型的神经元形态,并能表达神经元标志物;部分分化的神经元样细胞仍然表达平滑肌肌动蛋白。结论脂肪组织中存在能分化为神经元样细胞的基质细胞,并能克服间充质细胞的限制,分化为神经元样细胞,但这种细胞是否为有功能的神经元,还需深入研究。

关键词：脂肪组织来源的基质细胞分化神经元样细胞

核素肾动态显像在上尿路结石手术前后监测中的临床意义

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中山大学学报（医学科学版） 2006年第B04期27卷 197-198页

作者：廖锦先叶向阳陈景宇陈庆生惠州市中心医院泌尿外科广东惠州516001

[目的]探讨核素肾动态显像与上尿路结石手术前后肾功能恢复的相关性。[方法]64例上尿路结石左侧34例,右侧38例,患者常规肾动态显像检测分肾功能,其中52例行取石后复查。综合分析动态图像,清除曲线,肾小球滤过率(GFR)。[结果]64例病人中... 详细信息

[目的]探讨核素肾动态显像与上尿路结石手术前后肾功能恢复的相关性。[方法]64例上尿路结石左侧34例,右侧38例,患者常规肾动态显像检测分肾功能,其中52例行取石后复查。综合分析动态图像,清除曲线,肾小球滤过率(GFR)。[结果]64例病人中病肾72个(肾功能受损轻度21个,中度27个,重度15个,无功能肾9个)。肾曲线受损为B段较低平,C段下降延迟、中度为基本呈抛物线型。重度为低水平延长线型。GFR随病程不同而有不同程度降低。轻度GFR无明显降低、中度GFR下降较为明显(P0.05),中度受损组GFR明显增高(P<0.05)。[结论]肾动态功能对了解分肾功能,病情发展,选择治疗方法有很高价值。

关键词：肾输尿管结石肾动态显像

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恶性血液病中合并急腹症手术治疗的探讨

中山医科大学学报 2002年第B09期23卷 146-147页

作者：翁清江许先吟张舜玲陈超黄学军惠州市中心医院外科广东惠州516001

【目的】探索血液病中并发急腹症时手术治疗的问题。【方法】对 14例恶性血液病中并发急腹症的患者手术与非手术治疗进行临床研究 ,检测 10例手术治疗者术前、术中及术后 2 4h血液成分血红蛋白、白细胞、血小板等 ,探索其耐受手术治疗... 详细信息

【目的】探索血液病中并发急腹症时手术治疗的问题。【方法】对 14例恶性血液病中并发急腹症的患者手术与非手术治疗进行临床研究 ,检测 10例手术治疗者术前、术中及术后 2 4h血液成分血红蛋白、白细胞、血小板等 ,探索其耐受手术治疗的最低值。【结果】围手术期血红蛋白≤ 80g/L、血小板≤ 5 0× 10 9/L补充红细胞和血小板 ,使血红蛋白≥ 80g/L、血小板≥ 5 0× 10 9/L ;白细胞数≥ 2 0× 10 9/L术前无输注白细胞 ,但给予强有力的抗生素预防感染 ,以及对机体的支持措施。 9例安全度过围手术期 ,1例 6 0岁患者因消化道穿孔第 3天多器官功能衰竭死亡。【结论】恶性血液病中并发急腹症时 ,围手术期必须保持患者血红蛋白≥ 80 g/L ,血小板≥ 5 0× 10 9/L才能保证手术治疗的安全性。

关键词：血液肿瘤急腹症/治疗消化系统外科手术

微小RNA-203在胶质母细胞瘤干细胞中的表达及其对细胞增殖的影响

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中华实验外科杂志 2015年第9期32卷 2085-2087页

作者：邓一帆祝刚黄小山李百升秦忠宗惠州市中心人民医院神经外科广东516001

目的培养胶质母细胞瘤干细胞,检测微小RNA-203（miR-203）在胶质母细胞瘤干细胞中的表达,并观察其对肿瘤干细胞增殖的影响.方法对胶质母细胞瘤组织行体外原代培养,以CD133为标志物,免疫磁珠法分选胶质母细胞瘤干细胞;免疫荧光染色检... 详细信息

目的培养胶质母细胞瘤干细胞,检测微小RNA-203（miR-203）在胶质母细胞瘤干细胞中的表达,并观察其对肿瘤干细胞增殖的影响.方法对胶质母细胞瘤组织行体外原代培养,以CD133为标志物,免疫磁珠法分选胶质母细胞瘤干细胞;免疫荧光染色检测分选所得细胞的CD133、巢蛋白（nestin）、神经胶质纤维酸性蛋白（GFAP）、微管相关蛋白2（MAP2）的表达,从而鉴定肿瘤干细胞.反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测分选后CD133＋细胞、CD133-细胞miR-203的表达;将miR-203模拟体和无意义寡核苷酸链（NC）分别转染胶质母细胞瘤干细胞作为miR-203、NC组,细胞计数试剂盒（CCK-8）法检测转染后24、48、72、96、120 h细胞生存率;流式细胞仪细胞检测转染后3d细胞凋亡率.结果培养的胶质母细胞瘤干细胞成球样生长,表达干细胞标志物CD133、Nestin,分化后细胞表达星形胶质细胞的标志物GFAP、神经元的标志物MAP2;分选后CD133＋细胞中miR-203的表达低于CD133-细胞;转染miR-203后24、48、72、96、120 h组的细胞生存率均降低,差异有统计学意义（P＜0.05）;流式细胞仪检测显示miR-203组的细胞凋亡率为（9.74±2.81）％,高于NC组的（3.95±0.91）％,差异有统计学意义（P＜0.05）.结论上调miR-203可能成为针对胶质母细胞瘤干细胞的基因治疗策略.

关键词：胶质母细胞瘤胶质母细胞瘤干细胞微小RNA-203 细胞增殖

微小RNA-203抑制胶质母细胞瘤干细胞的干细胞特性

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中华实验外科杂志 2016年第3期33卷 675-677页

作者：邓一帆祝刚黄小山李百升秦忠宗惠州市中心人民医院神经外科广东516001

目的培养胶质母细胞瘤干细胞，观察微小RNA（miR）-203对其干细胞的影响，探讨其在胶质母细胞瘤基因治疗中的应用。方法体外原代培养胶质母细胞瘤组织，免疫磁珠法分选CD133^＋细胞；免疫荧光染色检测分选后细胞CD133、巢蛋白（Nestin... 详细信息

目的培养胶质母细胞瘤干细胞，观察微小RNA（miR）-203对其干细胞的影响，探讨其在胶质母细胞瘤基因治疗中的应用。方法体外原代培养胶质母细胞瘤组织，免疫磁珠法分选CD133^＋细胞；免疫荧光染色检测分选后细胞CD133、巢蛋白（Nestin）、神经胶质纤维酸性蛋白（GFAP）、微管相关蛋白2（MAP2）的表达。将人miR-203模拟体和无意义寡核苷酸链（NC）分别转染胶质母细胞瘤干细胞作为miR-203组、NC组，用成球试验检测miR-203对胶质母细胞瘤干细胞自我更新能力的影响。反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）、免疫荧光染色分别检测两组细胞CD133、Nestin、GFAP、MAP2的mRNA和蛋白的表达。结果培养的胶质母细胞瘤干细胞表达干细胞标记物CD133、Nestin，分化后细胞表达星形胶质细胞的标志物GFAP、神经元的标志物MAP2；转染后7d，当NC组细胞球数目为100％时，miR-203组一、二次球数目分别为（67．84±13．79）％和（30．53±8．91）％，差异均有统计学意义（P〈0．05）；RT-PCR结果显示与NC组比较，miR-203组细胞CD133mRNA的相对表达水平为0．29士0．15，nestinmRNA为0．27±0．18；GFAP、MAP2mRNA表达升高，分别为7．89±3．99和2．59±1．16，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论miR-203可以抑制胶质母细胞瘤干细胞的自我更新能力并促进其多向分化，可能成为新的针对胶质母细胞瘤的治疗策略。

关键词：胶质母细胞瘤胶质母细胞瘤干细胞微小RNA-203 自我更新多向分化

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伴糖尿病的脑肿瘤38例手术治疗体会

中华神经外科杂志 1995年第5期11卷 299-301页

作者：林时松广东汕头市中心医院神经外科

伴糖尿病的脑肿瘤３８例手术治疗体会林时松我科自１９８０年１０月～１９９４年１０月共施行脑肿瘤切除术７４６例，其中合并糖尿病者３８例（５．０９％），现报告如下。临床资料１．一般资料：男２３例，女１５例。年龄４１～７５岁... 详细信息

伴糖尿病的脑肿瘤３８例手术治疗体会林时松我科自１９８０年１０月～１９９４年１０月共施行脑肿瘤切除术７４６例，其中合并糖尿病者３８例（５．０９％），现报告如下。临床资料１．一般资料：男２３例，女１５例。年龄４１～７５岁，作者单位：５１５０３１广东汕头市...

关键词：脑肿瘤并发症糖尿病外科手术

胶质瘤干细胞与胶质瘤非干细胞生物学特性的差异性研究

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中华神经医学杂志 2019年第3期18卷 225-232页

作者：吕一帆罗均然荆国杰祝刚罗洪海李百升谢乙团惠州市中心人民医院神经外科 516002 惠州市第一人民医院神经外科 516001

目的探讨胶质瘤干细胞(GSC)与胶质瘤非干细胞(nGSC)在生物学特性及相关蛋白表达方面的差异。方法体外培养GSC1、GSC2及nGSC1、nGSC2,培养2、4、6、8、10和12d后采用CCK8法检测4种细胞的增殖能力;培养2d后采用CCK8法检测细胞对替莫唑胺(T... 详细信息

目的探讨胶质瘤干细胞(GSC)与胶质瘤非干细胞(nGSC)在生物学特性及相关蛋白表达方面的差异。方法体外培养GSC1、GSC2及nGSC1、nGSC2,培养2、4、6、8、10和12d后采用CCK8法检测4种细胞的增殖能力;培养2d后采用CCK8法检测细胞对替莫唑胺(TMZ)的敏感性;粘附实验检测细胞的粘附能力;Transwell实验检测细胞的迁移、侵袭能力;明胶酶谱实验检测细胞分泌基质金属蛋白酶-2(MMP-2)的活性;Westernblotting、免疫荧光染色检测细胞Notchl、表皮生长因子受体(EGFR)蛋白的表达。结果培养4、6、8、10和12d时nGSC1细胞存活率均高于GSC1,nGSC2细胞存活率均高于GSC2,差异均有统计学意义(P<0.05);TMZ对GSC1、nGSC1和GSC2、nGSC2的半数抑制浓度(IC50)分别为(1536.0±17.67)μmol/L、(514.5±13.44)μmol/L,(2543.0±39.87)μmol/L、(889.6±17.43)μmol/L;GSC1粘附于细胞外纤维链接蛋白、胶原蛋白I的细胞数均多于nGSC1,GSC2粘附于纤维链接蛋白、胶原蛋白I的细胞数均多于nGSC2,差异均有统计学意义(P<0.05);GSC1迁移12、24h的细胞数均多于nGSC1,GSC2迁移12、24h的细胞数均多于nGSC2,差异均有统计学意义(P<0.05);GSC1侵袭24、36h的细胞数多于nGSC1,GSC2侵袭24、36h的细胞数多于nGSC2,差异均有统计学意义(P<0.05);GSC1分泌MMP-2的活性高于nGSC1,GSC2分泌MMP-2的活性高于nGSC2,差异均有统计学意义(P<0.05);Westernblotting检测显示GSC1中EGFR/Notch1蛋白相对表达量低于nGSC1,GSC2中EGFR/Notch1蛋白相对表达量低于nGSC2,差异均有统计学意义(P<0.05);免疫荧光染色结果与Westernblotting检测结果一致,EGFR蛋白在nGSC中强表达,在GSC中弱表达。Notch1蛋白在GSC中强表达,在nGSC中弱表达。结论相对于高表达EGFR并具有较强增殖能力的nGSC,高表达Notch1的GSC分泌的MMP-2活性高,具有更强的粘附、迁移、侵袭能力,这可能是胶质瘤治疗抵抗和复发的重要原因。

关键词：胶质瘤干细胞细胞增殖细胞迁移细胞侵袭替莫唑胺异质性

壳聚糖/胡须/磷酸钙骨水泥复合生物材料的力学性能及对诱导多能干细胞成骨潜能的影响

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中国修复重建外科杂志 2018年第7期32卷 959-967页

作者：康明黄杰华张理选王新光郭汉明何瑞轩惠州市中心人民医院关节外科广东惠州516001

目的观察新型强化型磷酸钙骨水泥(calcium phosphate cement,CPC)生物支架材料的力学性能以及对诱导多能干细胞(induced potential stem cells,i PS)生物活性及成骨潜能的影响。方法根据制备的支架材料不同,将实验分为4组,A组为单纯CPC... 详细信息

目的观察新型强化型磷酸钙骨水泥(calcium phosphate cement,CPC)生物支架材料的力学性能以及对诱导多能干细胞(induced potential stem cells,i PS)生物活性及成骨潜能的影响。方法根据制备的支架材料不同,将实验分为4组,A组为单纯CPC支架组,B组为CPC∶10%wt壳聚糖为2∶1比例混合支架组,C组为CPC∶10%wt壳聚糖∶胡须为2∶1∶1比例混合支架组,D组为CPC∶10%wt壳聚糖∶胡须为2∶1∶2比例混合支架组。检测各组支架材料力学性能(抗弯强度、断裂功、硬度及弹性模量)。与第5代i PS-MSCs复合培养1、3、7、14 d采用细胞计数试剂盒8(cell counting kit 8,CCK-8)法检测各组吸光度(A)值;1、7、14 d行ALP活性检测、Live/Dead荧光染色及定量检测、RT-PCR检测成骨基因ALP、Runx2、Ⅰ型胶原、骨钙蛋白(osteocalcin,OC)及BMP-2表达;1、7、14、21 d行茜素红染色观察。取3月龄雄性SD大鼠24只,建立8 mm颅骨骨缺损模型,随机分为4组(n=6),分别植入对应的4组支架材料,术后8周取材行HE染色观察骨缺损修复情况,并检测新生骨体积百分比和新生血管密度。结果 B、C、D组抗弯强度、断裂功、弹性模量及硬度均显著高于A组,C、D组高于B组,D组高于C组,差异均有统计学意义(P0.05)。Live/Dead荧光染色示,7、14 d时B、C、D组活细胞比例均显著高于A组(P0.05);茜素红染色示随培养时间延长,各组支架材料表面的红色钙盐沉积均逐渐加深变厚,14、21 d时B、C、D组A值均显著高于A组,C、D组高于B组(P0.05)。动物体内修复实验显示,各组新生骨主要填充于支架材料间隙中,成骨细胞和新生血管被基质中的新生骨组织包围,成骨细胞排列在新生骨边界上,B、C、D组新生骨显著多于A组,C、D组显著多于B组。B、C、D组新生骨体积百分比和新生血管密度均显著高于A组,C、D组高于B组,差异有统计学意义(P0.05)。结论复合壳聚糖、胡须和CPC制备的新型强化型复合生物支架材料的机械性能明显优于单纯CPC支架材料,可满足皮质骨及松质骨的机械性能要求。i PS-MSCs在新型强化型复合生物支架材料上黏附、增殖,骨组织修复效果良好,可满足骨植入材料的生物活性及成骨活性要求。

关键词：磷酸钙骨水泥壳聚糖胡须诱导多能干细胞骨组织工程复合生物材料