微小RNA-203在胶质母细胞瘤干细胞中的表达及其对细胞增殖的影响

作     者：邓一帆 祝刚 黄小山 李百升 秦忠宗 Deng Yifan;Zhu Gang;Huang Xiaoshan;Li Baisheng;Qin Zhongzong

作者机构：惠州市中心人民医院神经外科广东516001 

出 版 物：《中华实验外科杂志》 (Chinese Journal of Experimental Surgery)

年 卷 期：2015年第32卷第9期

页      面：2085-2087页

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

基　　金：广东省医学科研基金资助项目(B2014417) 惠州市科技计划资助项目(20140802) 

主　　题：胶质母细胞瘤 胶质母细胞瘤干细胞 微小RNA-203 细胞增殖 

摘      要：目的 培养胶质母细胞瘤干细胞,检测微小RNA-203（miR-203）在胶质母细胞瘤干细胞中的表达,并观察其对肿瘤干细胞增殖的影响.方法 对胶质母细胞瘤组织行体外原代培养,以CD133为标志物,免疫磁珠法分选胶质母细胞瘤干细胞;免疫荧光染色检测分选所得细胞的CD133、巢蛋白（nestin）、神经胶质纤维酸性蛋白（GFAP）、微管相关蛋白2（MAP2）的表达,从而鉴定肿瘤干细胞.反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测分选后CD133＋细胞、CD133-细胞miR-203的表达;将miR-203模拟体和无意义寡核苷酸链（NC）分别转染胶质母细胞瘤干细胞作为miR-203、NC组,细胞计数试剂盒（CCK-8）法检测转染后24、48、72、96、120 h细胞生存率;流式细胞仪细胞检测转染后3d细胞凋亡率.结果 培养的胶质母细胞瘤干细胞成球样生长,表达干细胞标志物CD133、Nestin,分化后细胞表达星形胶质细胞的标志物GFAP、神经元的标志物MAP2;分选后CD133＋细胞中miR-203的表达低于CD133-细胞;转染miR-203后24、48、72、96、120 h组的细胞生存率均降低,差异有统计学意义（P0.05）;流式细胞仪检测显示miR-203组的细胞凋亡率为（9.74±2.81）％,高于NC组的（3.95±0.91）％,差异有统计学意义（P0.05）.结论 上调miR-203可能成为针对胶质母细胞瘤干细胞的基因治疗策略.