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M2型小胶质细胞移植促进小鼠脊髓损伤修复的实验研究

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中国修复重建外科杂志 2024年第2期38卷 198-205页

作者：张静张潇月江琪曲迪胡羽生戚超付海涛青岛大学青岛医学院山东青岛266073 青岛大学附属医院运动医学科山东青岛266103

目的探讨M2型小胶质细胞(M2 microglia,M2-MG)移植促进小鼠脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)修复的效果。方法取15只新生2~3 d C57BL/6乳鼠大脑皮质,通过胰蛋白酶消化法分离原代细胞并进行Iba1免疫荧光染色鉴定为MG后,以IL-4极化诱导培... 详细信息

目的探讨M2型小胶质细胞(M2 microglia,M2-MG)移植促进小鼠脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)修复的效果。方法取15只新生2~3 d C57BL/6乳鼠大脑皮质,通过胰蛋白酶消化法分离原代细胞并进行Iba1免疫荧光染色鉴定为MG后,以IL-4极化诱导培养48 h(实验组),通过精氨酸酶1(Arginase 1,Arg-1)、Iba1免疫荧光染色鉴定其是否极化为M2-MG;以正常培养MG作为对照组。另取5只新生1周C57BL/6乳鼠背根神经节(dorsal root ganglion,DRG)与M2-MG共培养5 d,观测轴突长度;以单纯DRG作为对照。取42只6周龄雌性C57BL/6小鼠随机分为假手术组(n=6)、SCI组(n=18)及SCI+M2-MG组(n=18)。手术暴露脊柱T10节段后,假手术组仅切除椎板,SCI组及SCI+M2-MG组行SCI造模后,SCI+M2-MG组同时注射M2-MG。术后观测各组小鼠存活情况,并于术后当天(0)、3、7、14、21、28 d采用BMS(Basso Mouse Scale)评分评价小鼠运动功能恢复情况,28 d行足迹实验评价小鼠步态。术后取SCI组及SCI+M2-MG组脊髓组织行免疫荧光染色,其中7、14、28 d胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)染色观测SCI损伤区域面积,28 d神经元核抗原染色观察神经元存活情况,7、14 d GFAP/C3双重荧光染色观察表示A1星形胶质细胞数量变化。结果免疫荧光染色鉴定体外培养细胞为MG且纯度可达90%,经IL-4诱导培养后Arg-1免疫荧光染色示极化为M2表型。M2-MG与DRGs体外共培养5 d后可促进轴突生长(P<0.05)。动物实验示,术后各组小鼠均存活至实验完成。SCI组及SCI+M2-MG组小鼠术后后肢运动功能随时间延长逐渐恢复,其中21、28 d SCI+M2-MG组BMS评分较SCI组更高(P<0.05),28 d时拖曳步态明显减轻,但尚未达假手术组水平。免疫荧光染色示,与SCI组相比,SCI+M2-MG组在7、14、28 d损伤区域面积均缩小,28 d时存活神经元数量增加,7、14 d时A1星形胶质细胞减少,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论M2-MG移植可促进小鼠SCI神经元存活和轴突再生,改善小鼠后肢运动功能,分析这种神经保护作用与A1星形胶质细胞极化被抑制有关。

关键词：脊髓损伤 M2型小胶质细胞星形胶质细胞细胞移植小鼠

计算机导航辅助与单纯关节镜下重建后交叉韧带胫骨骨道术中应用效果比较

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中国修复重建外科杂志 2024年第2期38卷 155-161页

作者：曲迪张静李利平付海涛张东芳唐新宇韩新坤戚超青岛大学青岛医学院山东青岛266073 青岛市中心医院骨科山东青岛266042 青岛大学附属医院运动医学科山东青岛266103

目的比较计算机导航辅助与单纯关节镜下重建后交叉韧带(posterior cruciate ligament,PCL)胫骨骨道的术中应用效果。方法回顾分析2021年6月—2022年6月收治且符合选择标准的73例PCL撕裂患者临床资料,其中34例采用导航辅助关节镜下行PCL... 详细信息

目的比较计算机导航辅助与单纯关节镜下重建后交叉韧带(posterior cruciate ligament,PCL)胫骨骨道的术中应用效果。方法回顾分析2021年6月—2022年6月收治且符合选择标准的73例PCL撕裂患者临床资料,其中34例采用导航辅助关节镜下行PCL胫骨骨道重建(导航组),39例采用单纯关节镜下行PCL胫骨骨道重建(对照组)。两组患者性别、年龄、身体质量指数、损伤侧别、受伤至手术时间及术前后抽屉试验、膝关节活动度(range of motion,ROM)、Tegner评分、Lysholm评分、国际膝关节文献委员会(IKDC)评分等基线资料比较差异均无统计学意义(P>0.05)。记录并比较两组围术期指标(手术时间及导针钻孔次数);于术后1 d MRI上测量移植物与胫骨骨道间角度及冠状位、矢状位、横断位上胫骨骨道出口位置;术前及末次随访时采用膝关节ROM、Tegner评分、Lysholm评分及IKDC评分评价临床疗效。结果导航组手术时间较对照组短,术中导针钻孔次数较对照组少,差异均有统计学意义(P0.05);但导航组移植物与胫骨骨道间角度大于对照组(P0.05)。两组膝关节ROM、Tegner评分、Lysholm评分及IKDC评分均较术前显著改善(P0.05)。结论计算机导航辅助关节镜下PCL胫骨骨道重建可快速且准确地制备具有良好位点及方向的骨道,术后功能评分与单纯关节镜下行PCL胫骨骨道重建效果相当。

关键词：后交叉韧带重建计算机导航关节镜胫骨骨道

热致自卷曲左旋聚乳酸/聚乳酸-羟基乙酸共聚物纳米纤维血管支架制备及其性能

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纺织学报 2024年第7期45卷 18-23页

作者：于承浩王元非于腾波吴桐青岛大学医学部山东青岛266071 青岛市市立医院山东青岛266071 青岛大学神经再生与康复研究院山东青岛266071

为研究热致自卷曲与生长因子梯度化修饰对血管内皮化的促进作用,使用左旋聚乳酸(PLLA)和聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)作为材料,通过静电纺丝技术制备了具有热致自卷曲特性的PLLA/PLGA纳米纤维血管支架。通过静电喷雾技术制备了梯度生长... 详细信息

为研究热致自卷曲与生长因子梯度化修饰对血管内皮化的促进作用,使用左旋聚乳酸(PLLA)和聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)作为材料,通过静电纺丝技术制备了具有热致自卷曲特性的PLLA/PLGA纳米纤维血管支架。通过静电喷雾技术制备了梯度生长因子修饰血管支架内层,并对其自卷曲、微观结构、生物相容性及内皮化功能进行表征。结果表明:制备的PLLA/PLGA血管支架具备多层取向纳米纤维结构,厚度为(6.75±0.4)μm,具有出色的生物相容性,可在37℃条件下自卷曲成管状结构;血管支架内层膜对生长因子成功进行了梯度修饰,修饰后血管支架的细胞迁移距离是未修饰的3.5倍,从而加快了内皮细胞迁移,促进血管内层的快速内皮化。

关键词：静电纺丝血管支架自卷曲左旋聚乳酸聚乳酸-羟基乙酸共聚物

预制裂纹的预备后椭圆形根管牙根有限元模型构建及分析

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医用生物力学 2024年第4期39卷 724-729页

作者：陈词王通李慧影付静郭婧涵许海平青岛大学附属医院口腔内科山东青岛266003 青岛大学附属医院信息管理部山东青岛266003 青岛大学附属医院口腔修复科山东青岛266003 青岛大学口腔医学院山东青岛266003

目的分析椭圆形根管牙根两种预备形态下,根管壁微裂纹对牙根受力的影响。方法选择椭圆形根管的前磨牙20颗,器械扩大预备根管、制造微裂纹并染色,切片后显微镜下观察牙本质微裂纹的产生及分布。据此构建两种预备形态下预制裂纹的牙根模型... 详细信息

目的分析椭圆形根管牙根两种预备形态下,根管壁微裂纹对牙根受力的影响。方法选择椭圆形根管的前磨牙20颗,器械扩大预备根管、制造微裂纹并染色,切片后显微镜下观察牙本质微裂纹的产生及分布。据此构建两种预备形态下预制裂纹的牙根模型,评估受力时微裂纹处及牙根的应力分布。结果椭圆形根管牙根的微裂纹总是出现在颊舌侧,由根管壁向牙根表面扩展,与有限元分析所展示的应力集中在根管壁颊舌侧的规律一致。微裂纹使根管壁的应力集中点向裂纹尖端处转移,且在尖端极小区域内出现近5倍的应力剧增,使微裂纹极易沿尖端方向扩展,尤其在牙体长轴方向。结论微裂纹的存在不改变椭圆形根管牙根颊舌侧应力集中的特点,但微裂纹的产生使其尖端极小区域内出现剧增的应力集中,这可能是微裂纹迅速扩展为牙根纵裂的机制,临床操作需提高警惕。

关键词：椭圆形根管根管预备微裂纹应力分析

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前扣带回至伏隔核GABA能神经通路调控小鼠肠易激综合征及潜在机制研究

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中国病理生理杂志 2024年第5期40卷 815-826页

作者：郭瑞晓高胜利冯旭菲刘华明星孙金秋栾心驰刘震宇刘蔚毅郭菲菲青岛大学基础医学院生理学与病理生理学系山东青岛266071 青岛大学生物医学中心山东青岛266071 青岛大学附属医院消化内科山东青岛266071 青岛大学青岛医学院山东青岛266071

目的:探讨前扣带回(ACC)至伏隔核(NAc)的γ-氨基丁酸(GABA)能神经通路对小鼠肠易激综合征(IBS)的调控作用及潜在机制。方法:(1)慢急性联合应激法(CACS)建立C57BL/6J小鼠IBS模型,分为正常组和IBS组(均n=8),通过行为学测试、肠动力实验和... 详细信息

目的:探讨前扣带回(ACC)至伏隔核(NAc)的γ-氨基丁酸(GABA)能神经通路对小鼠肠易激综合征(IBS)的调控作用及潜在机制。方法:(1)慢急性联合应激法(CACS)建立C57BL/6J小鼠IBS模型,分为正常组和IBS组(均n=8),通过行为学测试、肠动力实验和腹部退缩反射评分观察小鼠IBS样症状。(2)采用荧光金(FG)逆行追踪结合荧光免疫组织化学法检测ACC-NAc的GABA能通路和IBS小鼠ACC中GABA神经元兴奋性(均n=8)。(3)在正常和IBS小鼠NAc分别注射1.5μL生理盐水(NS)、GABA_A受体拮抗剂荷包牡丹碱(BIC)或激动剂异四氢烟酸(Isog),并据此将小鼠分为3组(均n=8):NS组、BIC组和Isog组,观察其IBS样症状。(4)采用化学遗传法将腺相关病毒载体AAV2/9-mDlx-iCre-WPRE-pA定向注射于ACC,AAV2/2Retro Plus-hSyn-DIO-hM3D(Gq)-eGFP-WPRE-pA注射于NAc,小鼠分为4组(均n=8):NS(腹腔注射)+NS(NAc注射)组、NS+BIC组、氯氮平N-氧化物(CNO)+NS组和CNO+BIC组;或AAV2/2Retro-hSyn-DIO-hM4D(Gi)-EGFP-WPRE-pA注射于NAc,小鼠分为3组(均n=8):NS+NS组、NS+BIC组和CNO+NS组,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测结肠组织中组胺和5-羟色胺(5-HT)的表达,并观察ACC-NAc的GABA能神经通路对小鼠IBS样症状的影响。结果:CACS诱导小鼠出现IBS样症状;FG逆行追踪结合免疫荧光组织化学实验结果显示,ACC的GABA神经元可以投射至NAc。NAc注射BIC后IBS小鼠的焦虑样行为、腹泻样症状和内脏超敏反应显著减轻(P<0.05)。化学遗传法抑制投射至NAc的ACC内GABA能神经元可显著减轻IBS小鼠的症状(P<0.05)。结论:ACC^(GABA)-NAc神经通路可参与小鼠IBS样症状的调控,其机制可能与肠道组胺和5-HT的释放有关。

关键词：前扣带回伏隔核 γ-氨基丁酸焦虑样行为肠易激综合征内脏超敏反应

脓毒症大鼠血小板受体CD62P的表达及替格瑞洛的心脏保护作用

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中华急诊医学杂志 2024年第2期33卷 172-178页

作者：郭沛雨郭飞黄海单亮青岛大学附属医院重症医学科青岛266061 青岛大学医学部青岛266061

目的探讨脓毒症大鼠血小板受体CD62P表达情况以及替格瑞洛的抗炎作用及其对脓毒症大鼠心肌损伤的保护作用。方法采用SD雄性大鼠32只,以随机数字表法将大鼠分为4组:假手术组(sham)、脓毒症组(cecal ligation and puncture,CLP)、低剂量... 详细信息

目的探讨脓毒症大鼠血小板受体CD62P表达情况以及替格瑞洛的抗炎作用及其对脓毒症大鼠心肌损伤的保护作用。方法采用SD雄性大鼠32只,以随机数字表法将大鼠分为4组:假手术组(sham)、脓毒症组(cecal ligation and puncture,CLP)、低剂量给药组(low dose,LD):给药剂量为10 mg/kg、高剂量给药组(high dose,HD):给药剂量为50 mg/kg,每组8只。假手术组大鼠仅进行开关腹并剥离盲肠处理,脓毒症组、低剂量给药组和高剂量给药组的大鼠采用CLP法构建脓毒症大鼠模型,给药组分别按照10 mg/kg及50 mg/kg用量进行替格瑞洛灌胃给药,假手术组及脓毒症组则按照1 mL/kg进行生理盐水灌胃处理。分别于手术前12 h及手术后12 h两次对大鼠进行灌胃给药。各组大鼠造模后24 h经腹主动脉取血并采集病理标本。应用流式细胞术检测各组大鼠血小板表面受体CD62P的表达情况;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测IL-6、TNF-α水平;检测心肌损伤标志物:CKMB、LDH水平;并检测转氨酶、肌酐、白细胞水平;对心肌组织进行HE染色观察病理形态;通过TUNEL法观察心肌细胞凋亡情况。结果①流式结果可见与sham组相比,CLP组的CD62P表达水平明显增加(P<0.01),两组给药组与CLP组相比CD62P的表达水平均明显降低,HD组更为显著(P<0.01)。②ELISA结果显示与sham组相比CLP组的IL-6、TNF-α水平显著升高(P<0.01),HD组较CLP组显著降低(P<0.05),LD组IL-6水平下降不明显。CLP组的TNF-α水平与sham组相比明显升高(P<0.01)。③CLP组和两组替格瑞洛干预组与sham组相比,CKMB和LDH的表达水平均有显著增加(P<0.01),给药组与CLP组相比CKMB、LDH均有明显下降(P<0.05),HD组下降更明显(P<0.01)。;④与sham组相比,CLP组大鼠血WBC,ALT,CR值升高明显,而使用替格瑞洛进行干预后,大鼠的WBC、ALT、CR值下降明显(P<0.05),且差异与剂量明显相关。⑤病理结果显示:sham组心肌细胞形态正常,CLP组心肌细胞损伤最重,LD组及HD组心肌细胞损伤较CLP组明显减轻。⑥Tunel染色显示与Sham组可见的少量阳性细胞比较,CLP组可见大量被染色的阳性细胞,LD组和HD组心肌细胞凋亡与CLP组相比明显减少。结论脓毒症激活血小板,刺激CD62P的过度表达,进而诱导炎症反应的过度激活,引起心肌细胞的凋亡和损伤,导致脓毒性心肌损伤;替格瑞洛的心脏保护作用可能与抑制血小板活化后CD62P表达的减少有关,且CD62P的表达与替格瑞洛之间存在剂量依赖关系。

关键词：脓毒症 CD62P P选择素替格瑞洛心肌损伤血小板血小板受体脓毒性心肌病

负载Scriptaid甲基丙烯酰化丝素蛋白水凝胶调控小胶质细胞的极化行为

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中国组织工程研究 2024年第29期28卷 4628-4633页

作者：郭青霞王玥吴桐青岛大学医学部神经再生与康复研究院山东省青岛市266071 青岛大学附属医院神经外科山东省青岛市266071

背景:小胶质细胞是维持中枢神经系统平衡的主要参与者,在神经系统发育和功能重建中起重要作用。Scriptaid作为一种组蛋白去乙酰化酶抑制剂具有抑制神经炎症和增强神经保护的作用。目的:探索负载Scriptaid的甲基丙烯酰化丝素蛋白水凝胶... 详细信息

背景:小胶质细胞是维持中枢神经系统平衡的主要参与者,在神经系统发育和功能重建中起重要作用。Scriptaid作为一种组蛋白去乙酰化酶抑制剂具有抑制神经炎症和增强神经保护的作用。目的:探索负载Scriptaid的甲基丙烯酰化丝素蛋白水凝胶对小胶质细胞行为的影响。方法:采用含不同浓度(0,0.1,0.5,1,2,5,10μmol/L)Scriptaid的培养液培养小胶质细胞(BV2细胞),利用CCK-8法与活/死细胞染色筛选Scriptaid的适宜干预浓度。采用光固化制备负载与未负载Scriptaid(1μmol/L)的甲基丙烯酰化丝素蛋白水凝胶,表征水凝胶的微观形貌、溶胀性能、力学性能、缓释性能及亲水性。将小胶质细胞(BV2细胞)接种于24孔Transwell小室下室,分5组培养:对照组将细胞培养液加入下室,脂多糖组、Scriptaid组、单纯水凝胶组、载药水凝胶组将含有脂多糖的细胞培养液加入下室,脂多糖干预24 h后,Scriptaid组、单纯水凝胶组、载药水凝胶组上室分别加入Scriptaid、甲基丙烯酰化丝素蛋白水凝胶、负载Scriptaid的甲基丙烯酰化丝素蛋白水凝胶,将培养液更换为普通培养液继续培养24 h,通过CCK-8法检测细胞活性,通过诱导型一氧化氮合酶和精氨酸酶1免疫荧光染色检测细胞表型。结果与结论:①与未加入Scriptaid组相比,加入Scriptaid干预后BV2细胞的活性与数量均降低,当加入2μmol/L及以上Scriptaid时细胞活性低于标准化细胞活性(70%),并且细胞数量显著减少,所以选择1μmol/L Scriptaid负载于水凝胶中;②表征实验显示,Scriptaid的加入未影响甲基丙烯酰化丝素蛋白水凝胶的微观形貌、吸水溶胀率、压缩模量与亲水性,甲基丙烯酰化丝素蛋白水凝胶具有缓释性能;③CCK-8法检测显示,与对照组相比,甲基丙烯酰化丝素蛋白水凝胶显著提高了BV2细胞活性(P<0.001);④免疫荧光染色显示,与对照组相比,脂多糖组细胞诱导型一氧化氮合酶表达量增加(P<0.01),载药水凝胶组细胞诱导型一氧化氮合酶表达量减少(P<0.01)、精氨酸酶1表达量增加(P<0.001),Scriptaid组细胞精氨酸酶1表达量增加(P<0.01);⑤结果表明,负载Scriptaid的甲基丙烯酰化丝素蛋白水凝胶可促进脂多糖诱导后的小胶质细胞向M2型极化。

关键词： Scriptaid 甲基丙烯酰化丝素蛋白水凝胶小胶质细胞细胞极化

胸部和腹部肿瘤患者不同放疗摆位技术精准度对比分析

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中华肿瘤防治杂志 2024年第3期31卷 167-172页

作者：王云刚闫先瑞杨保成孔祥宾楚志翔杨光杰朱健青岛大学医学部基础医学院山东青岛266071 山东省肿瘤防治研究院(山东省肿瘤医院)放射物理技术科山东第一医科大学(山东省医学科学院)山东济南250117 青岛大学附属医院核医学科山东青岛266100

目的对比分析真空负压袋联合弓形尺和真空负压袋两侧直接标记对胸部肿瘤和腹部肿瘤患者摆位误差的影响。方法选取山东省肿瘤防治研究院2020-10-13-2021-09-02收治的20例胸部肿瘤和20例腹部肿瘤患者进行研究,采用分层分组方法,先按胸部... 详细信息

目的对比分析真空负压袋联合弓形尺和真空负压袋两侧直接标记对胸部肿瘤和腹部肿瘤患者摆位误差的影响。方法选取山东省肿瘤防治研究院2020-10-13-2021-09-02收治的20例胸部肿瘤和20例腹部肿瘤患者进行研究,采用分层分组方法,先按胸部肿瘤和腹部肿瘤分为两层,分别在每层内分组,将胸部肿瘤患者分为A、B组,腹部肿瘤患者C、D两组,其中A、C两组为弓形尺定位组,B、D两组为直接标记定位组。每次治疗前行CBCT扫描和图像配准,记录在前后(AP)、上下(SI)、左右(RL)三个方向摆位误差。分析治疗过程中出现的随机误差值及绝对值≤0.5 cm的误差值占比。结果A组和B组AP方向摆位误差分别为(0.37±0.45)和(0.43±0.35)cm,Z=-1.684,P=0.092;RL方向摆位误差分别为(-0.01±0.46)和(-0.02±0.41)cm,Z=-4.851,P<0.001。C组和D组SI方向摆位误差为别为(-0.08±0.42)和(-0.25±0.40)cm,Z=-4.768,P<0.001;RL方向摆位误差分别为(0.10±0.28)和(-0.01±0.30)cm,Z=-3.761,P<0.001。A组AP、SI和RL方向摆位误差绝对值≤0.5 cm占比分别为63.0%、74.0%和89.0%;B组分别为62.0%、84.5%和78.0%;C组分别为76.0%、79.0%和89.0%;D组分别为83.0%、70.5%和89.5%。结论弓形尺辅助真空负压袋摆位方式和真空负压袋直接标记摆位方式均能满足临床放疗精度要求。实际治疗过程中,可根据患者健康情况和设备运行状态来灵活选择两种方式。

关键词：胸部肿瘤腹部肿瘤影像引导摆位技术锥形束CT

海藻酸钠/纳米蒙脱土纤维制备及其增强增韧机制

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纺织学报 2024年第6期45卷 16-22页

作者：胥家辉郭肖青王伟王怀芳张传杰宫兆庆青岛大学纺织服装学院山东青岛266071 青岛大学威海创新研究院山东威海264200 威海市织物功能助剂工程技术中心山东威海264500

海藻纤维的断裂强度低、伸长率差一直是限制其广泛应用的主要原因。针对该问题,对海藻纤维进行改性,将纳米蒙脱土(MMT)与海藻酸钠共混制备纺丝原液,以CaCl_(2)为凝固浴,通过湿法纺丝法制备海藻酸纳/纳米蒙脱土纤维,借助透射电子显微镜... 详细信息

海藻纤维的断裂强度低、伸长率差一直是限制其广泛应用的主要原因。针对该问题,对海藻纤维进行改性,将纳米蒙脱土(MMT)与海藻酸钠共混制备纺丝原液,以CaCl_(2)为凝固浴,通过湿法纺丝法制备海藻酸纳/纳米蒙脱土纤维,借助透射电子显微镜、扫描电子显微镜、红外光谱仪、X射线衍射仪和热重分析仪等对其微观形貌及结构进行表征与分析,通过单纤维强力仪测试其断裂强度、断裂伸长率等物理力学性能及热稳定性,研究蒙脱土溶胀时间及添加量对其性能的影响。结果表明:当MMT溶胀120 h、质量分数为0.1%时,MMT在纺丝液中分布较为均匀;与纯海藻纤维的力学性能相比,改性后纤维的断裂强度由1.32 cN/dtex提高到3.01 cN/dtex,提高率高达228%;断裂伸长率由4.67%增加到10.07%,同时MMT的加入没有明显改变海藻纤维的化学结构与结晶结构,对纤维的热稳定性能有一定的提高。

关键词：蒙脱土海藻纤维增强增韧插层海藻酸钠湿法纺丝