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调整细胞培养条件提高间充质干细胞外泌体治疗骨关节炎的潜能

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中国组织工程研究 2025年第1期29卷 164-174页

作者：钱燕刘启颂深圳国家感染性疾病临床医学研究中心南方科技大学深圳市第三人民医院广东省深圳市518112

背景:间充质干细胞外泌体有望发展成为治疗骨关节炎的无细胞疗法,而通过调整细胞培养条件,可以进一步提高其治疗活性和临床转化潜能。目的:综述分析细胞培养条件对外泌体活性的影响,分析其临床转化潜力。方法:查阅国内外有关骨关节炎/... 详细信息

背景:间充质干细胞外泌体有望发展成为治疗骨关节炎的无细胞疗法,而通过调整细胞培养条件,可以进一步提高其治疗活性和临床转化潜能。目的:综述分析细胞培养条件对外泌体活性的影响,分析其临床转化潜力。方法:查阅国内外有关骨关节炎/软骨损伤修复与间充质干细胞来源外泌体的文献。检索词分别为“外泌体,间充质干细胞,骨关节炎,软骨修复”和“exosomes,extracellular vesicles,mesenchymal stem cells,osteoarthritis,cartilage repair”,检索数据库分别为PubMed和中国知网数据库,检索时限为2010-2023年,最后纳入100篇文献进行总结和分析。结果与结论:(1)在间充质干细胞的培养过程中,提供有利于软骨细胞生长的物理环境,或添加软骨保护小分子、成软骨诱导因子和炎症因子等刺激细胞,可以进一步提高间充质干细胞外泌体在维持软骨细胞表型、促进软骨再生和免疫抑制等方面的调控活性;因此,其他具有相似特征的物理或化学因素,也有可能提升间充质干细胞外泌体治疗骨关节炎的疗效。(2)低氧诱导、脉冲电磁场刺激、生物反应器及软骨保护分子(如人甲状旁腺素1-34)刺激等细胞培养方案具有安全、可规模化生产等优点,可用于制备临床用途的、疗效好的间充质干细胞外泌体。(3)间充质干细胞外泌体有望实现骨关节炎的修正治疗,通过调整细胞培养方案提升治疗活性,可进一步提高其临床转化的可行性。

关键词：间充质干细胞外泌体骨关节炎软骨修复细胞培养低氧诱导预处理三维培养软骨保护因子炎症因子

不同静电纺丝膜上骨髓间充质干细胞的黏附、增殖与成血管平滑肌分化

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中国组织工程研究 2025年第4期29卷 661-669页

作者：孙现娟王秋花张锦艺杨杨杨王文双张晓晴滨州医学院基础医学院人体解剖与组织胚胎学教研室生物材料与组织再生国际合作联合实验室山东省烟台市264003 烟台毓璜顶医院妇科山东省烟台市264000

背景:临床上迫切需要小口径人工血管来治疗冠状动脉和外周动脉疾病,目前,血管组织工程已成为制备小口径人工血管的主要方法,选择合适的生物材料和细胞来源是小口径组织工程血管构建成功的关键因素。目的:观察4种静电纺丝膜材料对骨髓间... 详细信息

背景:临床上迫切需要小口径人工血管来治疗冠状动脉和外周动脉疾病,目前,血管组织工程已成为制备小口径人工血管的主要方法,选择合适的生物材料和细胞来源是小口径组织工程血管构建成功的关键因素。目的:观察4种静电纺丝膜材料对骨髓间充质干细胞增殖、黏附及分化为血管平滑肌细胞的影响。方法:分离提取SD大鼠骨髓间充质干细胞。将骨髓间充质干细胞分别接种于聚己内酯(PCL)、聚己内酯-透明质酸(PCL-HA)、聚己内酯-丝素蛋白(PCL-SF)、聚己内酯-明胶(PCL-GEL)静电纺丝膜材料上,培养1,3,7 d后,扫描电镜下观察材料上的细胞排布,鬼笔环肽染色观察材料上的细胞增殖与黏附,qRT-PCR检测材料上细胞分泌的CD90、Meflin、转化生长因子βmRNA表达;向血管平滑肌细胞诱导分化7 d后,qRT-PCR检测材料上细胞ɑ-平滑肌肌动蛋白mRNA表达。结果与结论:①扫描电镜下可见骨髓间充质干细胞在4种静电纺丝膜上均沿着静电纺丝膜的纤维走向排列;②鬼笔环肽染色显示,骨髓间充质干细胞在4种静电纺丝膜上分布规律,均沿着纤维走向呈现平行分布,并且PCL-HA、PCL-SF、PCL-GEL静电纺丝膜较PCL静电纺丝膜更有利于骨髓间充质干细胞的增殖、黏附,PCL-SF静电纺丝膜相较于PCL-HA、PCL-GEL静电纺丝膜更有利于骨髓间充质干细胞的增殖、黏附;③qRT-PCR检测显示,4种静电纺丝膜材料均可维持骨髓间充质干细胞CD90和Meflin的mRNA表达,组间比较差异无显著性意义(P>0.05);PCL-HA、PCL-SF、PCL-GEL组培养1,7 d的转化生长因子βmRNA表达高于PCL组(P<0.05),PCL-SF组培养3,7 d的转化生长因子βmRNA表达高于其他3组(P<0.05),PCL-HA组培养7 d的转化生长因子βmRNA表达高于PCL-GEL组(P<0.05);④qRT-PCR检测显示,PCL-SF组ɑ-平滑肌肌动蛋白mRNA表达高于其他3组(P<0.05),PCL-HA组ɑ-平滑肌肌动蛋白mRNA表达高于PCL组(P<0.05);⑤结果表明:相较于PCL、PCL-HA、PCL-GEL静电纺丝膜,PCL-SF静电纺丝膜与骨髓间充质干细胞结合更适合制备小口径组织工程血管。

关键词：骨髓间充质干细胞小口径组织工程血管静电纺丝聚己内酯聚己内酯-透明质酸聚己内酯-丝素蛋白聚己内酯-明胶

成人急性感染性腹泻中气单胞菌的分离与临床分析

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中华传染病杂志 2010年第6期28卷 379-380页

作者：蒲增惠于红霞赵茂茂吴金英包益平宋洁毓璜顶医院感染性疾病科烟台264000

气单胞菌主要存在于海水、河水及海产品中，人类感染气单胞菌主要以肠道感染为主，所感染的气单胞菌以嗜水气单胞菌、豚鼠气单胞菌和温和气单胞菌为主。随着旅游业的发展及各种污染源的增多，气单胞菌的感染率也在增高，细菌的产毒能力... 详细信息

气单胞菌主要存在于海水、河水及海产品中，人类感染气单胞菌主要以肠道感染为主，所感染的气单胞菌以嗜水气单胞菌、豚鼠气单胞菌和温和气单胞菌为主。随着旅游业的发展及各种污染源的增多，气单胞菌的感染率也在增高，细菌的产毒能力及致病力也随之增强。近年来，国内外许多研究发现，在夏秋季节的腹泻患者中，气单胞菌的感染率逐年增加，气单胞菌的耐药率也在不断增高。

关键词：嗜水气单胞菌急性感染性腹泻临床分析分离成人温和气单胞菌豚鼠气单胞菌肠道感染

油酸上调围脂滴蛋白2表达增强巨噬细胞对结核分枝杆菌的清除作用

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中国防痨杂志 2025年第1期47卷 72-76页

作者：卢海林汪文斐陶文慧林培翀陈心春邓国防谢水祥赣南医科大学基础医学院赣州341000 深圳国家感染性疾病临床医学研究中心深圳518000 深圳大学医学部深圳518000 深圳市第三人民医院肺病二科深圳518000

目的:研究油酸对巨噬细胞清除结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)的作用,并进一步探讨其作用机制。方法:使用人单核细胞白血病细胞(THP-1)细胞系诱导的巨噬细胞,加入或不加入油酸(oleic acid,OA)后感染MTB标准株H37Ra,用菌... 详细信息

目的:研究油酸对巨噬细胞清除结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)的作用,并进一步探讨其作用机制。方法:使用人单核细胞白血病细胞(THP-1)细胞系诱导的巨噬细胞,加入或不加入油酸(oleic acid,OA)后感染MTB标准株H37Ra,用菌落形成单位(colony-forming unit,CFU)计数及免疫荧光方式检测油酸对巨噬细胞清除MTB的影响。通过RNA-seq筛选出关键靶基因,并采用基因富集分析筛选出相关通路,实时荧光定量PCR验证基因表达。结果:MTB标准株H37Ra感染未经油酸诱导(H37Ra组)巨噬细胞后72 h的菌落计数单位(CFU)中位数(四分位数)为[49×10^(4)(48×10^(4),59×10^(4))],明显高于经油酸诱导(OA+H37Ra组)的巨噬细胞的CFU[34×10^(4)(30×10^(4),42×10^(4))],差异有统计学意义(U=3.500,P=0.017)。RNA-Seq数据显示,围脂滴蛋白2(recombinant perilipin 2,PLIN2)的表达在OA+H37Ra组明显高于H37Ra组。在油酸诱导的巨噬细胞中,敲低PLIN2基因后的CFU结果显示,在H37Ra感染72 h后,敲低PLIN2组的CFU中位数(四分位数)为86×10^(4)(78×10^(4),96×10^(4)),明显高于对照空载体组[56×10^(4)(54×10^(4),62×10^(4))],差异有统计学意义(U=3.000,P=0.015)。OA+H37Ra组中,PLIN2的相对表达量为3.219±0.298,明显高于H37Ra组的0.555±0.028,差异有统计学意义(t=15.410,P<0.01);OA+H37Ra组中PPARγ的相对表达量为0.666±0.075,明显低于H37Ra组的2.217±0.153,差异有统计学意义(t=14.700,P<0.01);OA+H37Ra组中,ACOX1、HADHA基因的相对表达量分别为1.410±0.124和1.107±0.111,均明显低于H37Ra组的2.476±0.207和3.140±0.240,差异均有统计学意义(t=13.520,P<0.01;t=12.760,P<0.01)。结论:油酸通过脂滴表面蛋白PLIN2调控巨噬细胞的脂肪酸氧化促进巨噬细胞对MTB的清除。

关键词：分枝杆菌,结核巨噬细胞油酸围脂滴蛋白基因表达调控,细菌

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3例人粒细胞无形体病的护理

中华护理杂志 2009年第7期44卷 662-663页

作者：包益平于学英山东省烟台毓璜顶医院感染性疾病科烟台市264000

报告了3例人粒细胞无形体病的护理。对3例人粒细胞无形体病患者积极进行病原治疗,密切观察生命体征变化,进行心理护理,同时采取有效的防护隔离。2例患者痊愈出院,1例因消化道大出血死亡,医务人员无感染发生。

关键词：人粒细胞无形体病无形体科感染护理

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小儿单肺通气策略的研究进展

医学综述 2025年第1期31卷 46-52页

作者：宋本钦张彬赵献亮郝明冉王公明山东大学附属儿童医院麻醉科济南250022 山东大学齐鲁医院感染科济南250012 山东省立医院麻醉科济南250021

随着微创技术的发展,胸腔镜手术逐渐在诊治条件成熟的儿童医学中心广泛开展。单肺通气(OLV)是胸腔镜手术中重要且关键的麻醉技术之一,其作为一种非生理性的通气方式,可通过塌陷术侧肺明确病变范围、创造清晰术野、改善操作空间,但小儿... 详细信息

随着微创技术的发展,胸腔镜手术逐渐在诊治条件成熟的儿童医学中心广泛开展。单肺通气(OLV)是胸腔镜手术中重要且关键的麻醉技术之一,其作为一种非生理性的通气方式,可通过塌陷术侧肺明确病变范围、创造清晰术野、改善操作空间,但小儿具有特殊的生理特点和病理机制,OLV时存在发生低氧血症、高碳酸血症、肺不张、呼吸机相关肺损伤等潜在风险。而选择合适的通气策略有助于减少小儿OLV相关并发症发生、改善患儿预后。因此,深入研究小儿OLV的策略及作用机制,可以为疾病的治疗提供新思路。

关键词：单肺通气小儿通气策略肺部并发症

人脐带间充质干细胞来源外泌体治疗SD大鼠骨质疏松性股骨骨折

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中国组织工程研究 2025年第31期29卷 6634-6641页

作者：卜宪敏梁迪张斌徐英杰丁豪吴彬田荣华济宁市第一人民医院病理科山东省济宁市272067 济宁医学院临床医学院山东省济宁市272067 济宁医学院附属医院检验科山东省济宁市272067 济宁医学院附属医院创伤骨科山东省济宁市272067

背景:人脐带间充质干细胞来源外泌体已广泛用于骨修复和重建研究,能显著促进成骨和血管生成。目的:探究人脐带间充质干细胞来源外泌体治疗骨质疏松性骨折的机制。方法:采用组织块培养法提取人脐带间充质干细胞及超速离心法提取人脐带间... 详细信息

背景:人脐带间充质干细胞来源外泌体已广泛用于骨修复和重建研究,能显著促进成骨和血管生成。目的:探究人脐带间充质干细胞来源外泌体治疗骨质疏松性骨折的机制。方法:采用组织块培养法提取人脐带间充质干细胞及超速离心法提取人脐带间充质干细胞来源外泌体并进行鉴定。30只12周龄雌性SD大鼠随机分为假手术组(6只)和去势组(24只)。去势组采用经典的去势法构建骨质疏松模型,术后12周随机选取去势组6只大鼠与假手术组6只大鼠行Micro-CT及苏木精-伊红染色进行模型验证。验证骨质疏松模型构建成功后,将去势组剩余18只大鼠随机分为3组,均构建骨质疏松性股骨骨折模型,骨折端分别注射PBS(PBS组)、1.5×10^(11)particles/mL(低浓度外泌体组)、3×10^(11)particles/mL(高浓度外泌体组)外泌体。骨折术后4周行影像学及组织学观察评估骨折愈合和骨组织血管生成情况。结果与结论:①大体标本观察:与PBS组相比,外泌体组骨折愈合速度明显增快,骨折端骨痂生成量显著增加;②X射线片评分:外泌体组显著高于PBS组,差异有显著性意义(P<0.05);③Micro-CT三维成像:与PBS组相比,外泌体组骨折愈合加快,骨痂生成量显著增加;外泌体组骨体积分数显著高于PBS组,差异有显著性意义(P<0.01);④苏木精-伊红染色和Masson染色:与PBS组相比,外泌体组有更多的骨小梁生成,有更多的新生骨组织生长;⑤免疫组织化学染色:与PBS组相比,外泌体组骨钙素与CD31的表达更加显著;高浓度外泌体组较低浓度外泌体组新生血管密度更大,骨痂生成量更多,骨折愈合增快,呈现浓度依赖性。结果表明,人脐带间充质干细胞来源外泌体可通过促进血管生成和成骨,最终促进骨质疏松性骨折修复,其机制可能与CD31和骨钙素表达增加有关。

关键词：骨质疏松性骨折人脐带间充质干细胞外泌体骨折愈合骨钙素 CD31

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多次误诊的界线类偏瘤型麻风一例

中国麻风皮肤病杂志 2025年第1期41卷 5-6页

作者：李艳冯伟广张兆辉淮安市第四人民医院感染科江苏淮安223002 淮安市疾病预防控制中心江苏淮安223002

临床资料患者,男,66岁。2017年开始出现四肢末端麻木,眉毛逐渐脱落,未予重视,2019年,患者全身相继出现多处皮损,足底出现溃疡。曾多次就诊当地县级医院及市级医院皮肤科、神经科、内分泌科,一直按照银屑病、体癣、糖尿病神经病变及糖尿... 详细信息

临床资料患者,男,66岁。2017年开始出现四肢末端麻木,眉毛逐渐脱落,未予重视,2019年,患者全身相继出现多处皮损,足底出现溃疡。曾多次就诊当地县级医院及市级医院皮肤科、神经科、内分泌科,一直按照银屑病、体癣、糖尿病神经病变及糖尿病足治疗无效,后双上肢出现多发皮下结节,皮肤科按照结节性红斑治疗效果不好。后因某皮肤科医生根据麻木、皮损及脱眉怀疑麻风,转来我院。既往有高血压及糖尿病史数年,一直服用二甲双胍及非洛地平,平素空腹血糖监测在5~7 mmol/L,否认麻风患者接触史,家族中无麻风患者。体格检查:系统检查未见明显异常。皮肤科检查:双侧眉毛全部脱落,双眼结膜充血,面部潮红,全身泛发性分布暗红色浸润性斑丘疹,中央有免疫区,免疫区温痛触觉消失,双上肢可见大小不等结节,质硬(图1a~1c)。

关键词：结节性红斑皮肤科医生糖尿病神经病变面部潮红麻风患者市级医院四肢末端内分泌科

不同感染途径慢性丙型肝炎患者HCV基因型分布的差异

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中华实验和临床病毒学杂志 2004年第3期18卷 247-250页

作者：谢尧赵辉鸥蔚妮闫杰杜邵财徐道振北京地坛医院感染性疾病一科 100011

目的　探讨丙型肝炎病毒 (HCV)基因型在中国部分城市输血与非输血途径感染者之间的分布。方法　对来自中国南北地区 9个城市的慢性HCV肝炎患者的血清 ,用 5′非编码区酶切分型方法进行HCV基因分型 ,分析HCV基因型在不同地区和感染途径... 详细信息

目的　探讨丙型肝炎病毒 (HCV)基因型在中国部分城市输血与非输血途径感染者之间的分布。方法　对来自中国南北地区 9个城市的慢性HCV肝炎患者的血清 ,用 5′非编码区酶切分型方法进行HCV基因分型 ,分析HCV基因型在不同地区和感染途径之间的分布差异。结果　在 2 19例慢性HCV肝炎血清中 ,有 2 14例 (97 7% )检测出HCV基因型 ,其中 197例为单基因型HCV感染 ,主要的HCV流行株为 1b(76 6 4 % )和 2a(18 2 2 % ) ,并有 5 14 %的患者感染基因 3b型 ,且首次在中国检测出 4a型。HCV在中国南北地区城市的分布差异无显著意义 ,但输血感染者和非输血感染者之间的HCV基因型分布差异有显著意义 ,输血感染者中 ,93 88%为单基因型HCV感染 ,1b占 76 87% ,高于非输血途径感染患者中单基因型HCV感染百分率 (86 5 7% )和 1b的感染百分率 (5 8 2 1% ) ,非输血感染者中的混合HCV基因型比例 (13 4 3% )高于输血感染者 (6 12 % )。结论　中国南北部分地区的HCV基因型分布差异无显著意义 ,但经输血感染和非输血感染的慢性丙型肝炎患者之间的HCV基因型分布差异有显著意义。

关键词： HCV基因型输血感染患者 HCV感染慢性丙型肝炎分布差异感染途径部分地区酶切流行株