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SIRT1在运动缓解T2DM小鼠学习记忆能力下降中的作用及机制

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SIRT1在运动缓解T2DM小鼠学习记忆能力下降中的作用及机制

作者：郎咸圣婕山东大学

学位级别：硕士

研究目的:2型糖尿病（Type 2 diabetes mellitus,T2DM）学习记忆能力下降会影响T2DM患者生活质量。提高脑源性神经营养因子（Brain Derived Neurotrophic Factor,BDNF）水平可以有效改善学习记忆能力下降。先前的研究表明运动可以改善T... 详细信息

研究目的:2型糖尿病（Type 2 diabetes mellitus,T2DM）学习记忆能力下降会影响T2DM患者生活质量。提高脑源性神经营养因子（Brain Derived Neurotrophic Factor,BDNF）水平可以有效改善学习记忆能力下降。先前的研究表明运动可以改善T2DM的学习记忆能力受损,但其潜在机制仍不清楚。研究指出沉默调节因子 1（silent mating type information regulation 2 homolog 1,SIRT1）在增加脑内BDNF的表达中发挥作用。本研究通过应用SIRT1抑制剂烟酰胺,观察跑台运动对T2DM小鼠海马内BDNF表达及学习记忆能力的影响,探究运动对T2DM小鼠的积极影响机制是否是SIRT1依赖性。研究方法:选取24只C57BL/6小鼠,应用高脂饮食（High fat diet,HFD）喂养,同时单次腹腔注射链脲佐菌素（streptozotocin,STZ）构造T2DM模型,将小鼠随机分为正常对照组（C组）、T2DM组（T组）、T2DM运动组（E组）、T2DM运动联合注射SIRT1抑制剂组（NAM组）,每组6只。E组和NAM组进行8周中等强度有氧跑台运动,每周5天（周一至周五）,每天1次,每次以60%Smax运动27分钟（运动前和运动后有5分钟40%Smax强度进行的热身和放松运动）。行为学层面通过水迷宫检测小鼠学习和记忆能力,分子层面通过Western blotting方法检测小鼠海马内SIRT1及其下游相关信号通路过氧化物酶体增殖物激活的受体共激活因子-1α（Receptor gamma coactivator 1-alpha,PGC-1α）/纤维连接蛋白Ⅲ型结构域蛋白 5（fibronectin type Ⅲ domain-containing protein 5,FNDC5）和BDNF蛋白水平,RT-PCR方法检测海马内SIRT1及其下游相关信号通路和BDNF的mRNA水平。研究结果:（1）与C组小鼠相比,T组小鼠体重显著降低（p＜0.01）,胰岛素水平极显著降低（p＜0.001）,空腹血糖极显著升高（p＜0.001）;在第4-5天定位航行实验时,表现出更长的逃逸潜伏期（p＜0.05）和更短的平台象限时间百分比（p＜0.05）;最后一天的空间探索实验中,穿越平台次数显著减少（p＜0.05）;BDNF（p＜0.01）、SIRT1、PGC-1α的蛋白和mRNA表达水平均显著降低（p＜0.05）,虽然FNDC5的蛋白和mRNA表达水平降低,却并没有显示出统计学差异（p＞0.05）。（2）与T组相比,E组的体重（p＜0.05）和空腹血胰岛素水平（p＜0.001）显著升高,空腹血糖水平显著降低（p＜0.05）;逃避潜伏期在第4-5天显著减少（p＜0.05）,平台象限时间百分比显著增加（p＜0.05）;在第6天的空间探索实验中,穿越平台次数显著增加（p＜0.05）;BDNF、SIRT1（p＜0.01）、PGC-1α蛋白水平和mRNA水平显著升高（p＜0.05）,FNDC5的蛋白质水平和mRNA水平虽然增加,却无统计学差异（p＞0.05）。（3）与E组相比,NAM组体重,血胰岛素显著降低（p＜0.05）,血糖水平显著增加（p＜0.05）;在第4-5天定位航行实验时,逃逸潜伏期显著增加（p＜0.05）,平台象限时间百分比显著减少（p＜0.05）;在第6天的空间探索实验中,穿越平台次数显著减少（p＜0.05）;BDNF、SIRT1、PGC-1α的蛋白质和mRNA水平显著降低（p＜0.05）,FNDC5的蛋白质水平和mRNA水平虽然降低,却无统计学差异（p＞0.05）。研究结论:8周中等强度跑台运动可能通过激活SIRT1增加T2DM小鼠海马BDNF表达,改善T2DM小鼠学习记忆能力。

关键词：跑台运动 2型糖尿病沉默调节因子1 脑源性神经营养因子纤维连接蛋白Ⅲ型结构域蛋白5

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北京大学医学部集体就餐学生营养调查

中国食物与营养 2011年第10期17卷 78-81页

作者：付国颖杨婷张莹李可基北京大学医学部公共卫生学院营养与食品卫生学系北京100191

分析集体就餐学生群体能量摄入量和各种营养素摄入水平。方便抽样集体就餐学生共40名作为调查对象,通过称重法与24h膳食回顾法分别估算能量和营养素水平。在3d时间内,男生的平均能量摄入量为2 260±588kcal/d;女生为2 022±461kcal/d,... 详细信息

分析集体就餐学生群体能量摄入量和各种营养素摄入水平。方便抽样集体就餐学生共40名作为调查对象,通过称重法与24h膳食回顾法分别估算能量和营养素水平。在3d时间内,男生的平均能量摄入量为2 260±588kcal/d;女生为2 022±461kcal/d,低于我国目前现行的轻体力活动成年男女能量推荐量。男女生各餐供能比分别为早餐14.2%、23.0%;午餐31.5%、24.4%;晚餐39.6%、27.6%;三餐外进食分别为14.7%和25.0%。3大营养素供能比(碳水化合物、脂肪、蛋白质)男生分别为51.4%、35.2%、13.4%;女生分别为50.7%、36.1%、13.2%。膳食中矿物质和维生素摄入量普遍不足。膳食结构中脂肪提供的能量比例增加,早餐供能比过低,蔬菜水果和乳制品摄入量不足,矿物质维生素未达到推荐量是目前该群体普遍现象,应增加在校集体就餐学生食物品种的多样性,对大学生集体就餐群体制定相应干预策略。

关键词：称重法膳食调查营养素摄入

敌敌畏对大鼠乙酰胆碱酯酶抑制作用的基准剂量和未观察到有害作用水平比较

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环境与健康杂志 2013年第6期30卷 486-489页

作者：乙楠楠吴惠何贤松李亭亭赵敏娴姚欣雅王灿楠东南大学公共卫生学院营养与食品卫生系环境医学工程教育部重点实验室江苏南京210009

目的比较敌敌畏对大鼠乙酰胆碱酯酶抑制作用的基准剂量（BMD）和未观察到有害作用水平（NOAEL）。方法将80只健康清洁级成年雌性sD大鼠按体重随机分为8组，分别为对照（蒸馏水）组和0．22、0．44、0．88、1．75、3．50、7．00、14．001... 详细信息

目的比较敌敌畏对大鼠乙酰胆碱酯酶抑制作用的基准剂量（BMD）和未观察到有害作用水平（NOAEL）。方法将80只健康清洁级成年雌性sD大鼠按体重随机分为8组，分别为对照（蒸馏水）组和0．22、0．44、0．88、1．75、3．50、7．00、14．00111g／kg敌敌畏染毒组，采用灌胃方式进行染毒，染毒容量为10ml／kg，每天1次，连续染毒21d。测定大鼠脑组织海马、皮质和血清中的乙酰胆碱酯酶活力，并计算BMD值和NOAEL值。结果与对照组比较，7．00～14．00mg／kg敌敌畏染毒组大鼠脑组织海马和3．50～14．00mg／kg敌敌畏染毒组大鼠脑组织皮质及1．75～14．00mg／kg敌敌畏染毒组大鼠血清中的乙酰胆碱酯酶活力均下降，差异有统计学意义（P〈0．05）；且大鼠血清乙酰胆碱酯酶活力随敌敌畏染毒剂量的升高而下降。敌敌畏经口灌胃对大鼠脑组织皮质、海马和血清的BMD分别为1．80、0．81、0．51mg／kg，95％可信区间下限（BMDL）分别为1．42、0．44、0．30mg／kg；NOAEL分别为3．5、1．75、0．88mg／kg。结论BMD法比NOAEL法得到的安全参考剂量更为保守，能为人群提供更广泛的保护。

关键词：基准剂量乙酰胆碱酯酶敌敌畏风险评估

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盐与健康相关知识和行为的调查研究

中国健康教育 2023年第4期39卷 378-383页

作者：贺永梅阴苏月林茜吕晶李莹航天中心医院健康管理部北京1100049 中南大学湘雅三医院健康管理中心湖南长沙410013 中南大学公共卫生学院营养与食品卫生学系湖南长沙410028

目的了解当前网民对盐与健康相关知信行状况并分析其影响因素,为制定健康教育和营养干预策略提供参考。方法以文献分析为基础,经过专业论证和预填报后形成调查问卷,利用问卷星的形式在网络平台对浏览该网站的18岁及以上网民进行为期7... 详细信息

目的了解当前网民对盐与健康相关知信行状况并分析其影响因素,为制定健康教育和营养干预策略提供参考。方法以文献分析为基础,经过专业论证和预填报后形成调查问卷,利用问卷星的形式在网络平台对浏览该网站的18岁及以上网民进行为期7天的调查。采用χ^(2)检验进行组间比较,采用Logistic回归模型对使用限盐勺和理解营养素参考值百分比(NRV%)进行多因素分析。结果本次调查共收到有效问卷1288份。37.42%的调查对象知道我国成人每日推荐盐摄入量不宜超过6 g。限盐勺使用率及正确使用率为9.78%和5.75%。仅5.36%的调查对象能够理解NRV%的含义。通过多因素分析,调查对象使用限盐勺和理解NRV%的共同影响因素为文化程度以及限盐意愿。此外,年龄较大的人群更愿意使用限盐勺(OR=1.31,95%CI:1.02~1.69);与国家公务人员比较,非医药专业学生不愿意使用限盐勺(OR=0.06,95%CI:0.01~0.57);自估盐摄入量越高的人群越不愿意使用限盐勺(OR=0.76,95%CI:0.62~0.93)。在理解NRV%影响因素的多因素分析中,男性较女性更能理解NRV%的意义(OR=2.43,95%CI:1.44~4.11),且知晓推荐盐摄入量的人群更能理解NRV%(OR=1.94,95%CI:1.14~3.32)。结论调查人群对盐与健康的认知水平较低,减盐行为不容乐观,应加大教育宣传工作,提高网民对于减盐行为的认知及理解。

关键词：限盐勺营养素参考值百分比营养标签认知度

污水生物脱氮中进水碳氮比对N2O释放的影响及其减量化控制

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污水生物脱氮中进水碳氮比对N2O释放的影响及其减量化控制

作者：张婷婷山东大学

学位级别：硕士

目前水体富营养化问题日渐突出,污水生物脱氮技术得到快速发展,但此过程中会产生N2O。N2O是一种重要的温室气体,温室效应能力是CO2的310倍,并以每年0.25%的速度持续增长,对全球环境及其气候变化有重要影响。N20还能消耗臭氧,破坏臭氧层... 详细信息

目前水体富营养化问题日渐突出,污水生物脱氮技术得到快速发展,但此过程中会产生N2O。N2O是一种重要的温室气体,温室效应能力是CO2的310倍,并以每年0.25%的速度持续增长,对全球环境及其气候变化有重要影响。N20还能消耗臭氧,破坏臭氧层,严重影响自然生态系统、威胁人类生存。已有研究表明,污水生物脱氮是N20释放的重要人为源。研究污水生物脱氮系统中污染物去除效果和N20释放具有重要意义。本文基于缺氧-好氧SBR反应器,研究了不同进水碳氮比(1.2、3.5、6.8、9.2、12.9)对污染物去除效果、N20释放的影响,并结合微生物的群落结构研究了微生物群落和N20释放的相关性。试验结果表明：(1)在缺氧-好氧SBR反应器稳定运行后,进水碳氮比对COD去除效果影响不大,但是当进水碳氮比小于6.8时氨氮、总氮和总磷的去除率远远低于进水碳氮比大于6.8时。(2)进水碳氮比对N20释放有重要的影响,当进水碳氮比低于6.8时N20释放量远远小于当进水碳氮比大于6.8时,进水碳氮比为6.8时释放量最大,且随着进水碳氮比的升高而下降。(3)系统内N20的释放主要集中在好氧段,缺氧段几乎无N20的释放。(4)利用PCR-DGGE等分子生物学技术分析N20的释放和微生物群落结构的关系可知：好氧段的N20释放主要来源于以Nitrosomonas属为主体的硝化细菌的反硝化作用。不同进水碳氮比条件对氨氧化细菌群落结构有重要影响,对反硝化细菌群落结构影响不明显。由于我国城市污水进水碳氮比较低,因此,基于进水碳氮比对污染物去除效果和N20释放影响的结果,研究了低进水碳氮比(C/N=3.3)下不同运行工况的污水生物脱氮系统(瞬时进水A/O SBR系统、瞬时进水A/O/A/O SBR系统、分段进水A/O/A/O SBR系统)中污染物的去除效果和N20的释放情况,在低进水碳氮比条件下保证污染物去除效果并减少N20的释放量,实现减量化。最终结果表明,瞬时进水A/O/A/O SBR系统(外加碳源)有最好污染物去除效果,COD、氨氮、总氮、总磷的去除率分别为：87.91%、94.36%、70.38%和94.51%。瞬时进水A/O SBR系统、瞬时进水A/O/A/O SBR系统(外加碳源)、分段进水A/O/A/OSBR系统中N20释放量分别为：15.373mg、6.084mg和17.076mg;N20-N转化率分别为：15.51%、5.77%和17.3%。瞬时进水A/O/A/O SBR系统(外加碳源)的N20释放量和N20-N转化率最小,因此这种运行工况是一种切实可行的减量化策略。

关键词：污水生物脱氮进水碳氮比 N2O 分子生物学运行工况

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AD医疗公司发展战略研究

AD医疗公司发展战略研究

作者：韩伯伟山东大学

学位级别：硕士

自新世纪以来,中国医疗器械行业成为我国医疗卫生行业的重点领域,迎来了发展高峰期,行业的市场规模也在近年来迅速扩大。但目前各医疗器械企业也面临着成本控制难度大、技术创新能力薄弱、市场竞争逐渐加剧、整体发展水平与国外差距较... 详细信息

自新世纪以来,中国医疗器械行业成为我国医疗卫生行业的重点领域,迎来了发展高峰期,行业的市场规模也在近年来迅速扩大。但目前各医疗器械企业也面临着成本控制难度大、技术创新能力薄弱、市场竞争逐渐加剧、整体发展水平与国外差距较大等问题。AD医疗公司是一家创新型医疗器械公司,主导产品包含药物输注类、肠内营养输注类、血液样本采集类、现代伤口护理类、外科引流类等五大系列产品,公司立足医疗器械行业领域,持续进行新产品开发,保持高质量发展。本文的研究目的是,结合AD医疗公司面临的机遇挑战,对企业目前内外部环境和各项资源进行综合分析,通过分析研究总结出适合公司良性发展的发展战略,制定具体的公司战略并提出措施,助力企业高质量发展,也将在一定程度上有助于为其他医疗器械企业提供案例参考和借鉴。本文通过整理阅读相关文献、公司实地调研、问卷调研、公司主要负责人访谈等不同方式,系统分析AD医疗公司的内部资源和外部环境,根据分析结果,一方面提出AD医疗公司外部环境中面临的机会包括:稳定的政治经济环境、技术水平持续进步、行业法律法规不断完善、国家政策倾斜、人民群众对医疗器械需求的提升、行业进入门槛较高等,以及面临的威胁包括:大宗商品原材料价格上涨、行业监管和政府集中采购集中支付使得公司控制成本难度增加、与国外行业领先企业相比整体技术水平和产品质量仍有差距、开拓国际市场较为困难等;另一方面提出公司内部条件中存在的优势包括:资金资本增值能力较强、技术创新水平较高、研发基础雄厚、市场开拓和产品服务能力较强、生产运营良好以及安全质量水平较高、市场品牌企业文化和社会形象较好等,存在的劣势包括:生产成本升高、主营业务优势慢慢减退、研发投入大且研发周期长、售后服务体系不健全、数字化建设水平仍需提高等。本文使用PEST分析、五力模型分析、内外部因素评价矩阵、SWOT分析、波士顿矩阵、麦肯锡三层面增长分析模型以及QSPM战略矩阵等研究模型分析AD医疗企业内外部环境及战略可行性,研究结果显示该医疗公司的未来发展战略为相关多元化增长模式,企业可以借助相关多元化战略提高公司的整体发展水平,合理利用现有生产资源,扩大生产规模,加强原材料、生产制造、营销服务建设,同时结合AD医疗公司生产经营的实际情况,为公司各主要业务板块提供了发展思路和战略目标,针对增长型战略提出了具体战略实施方案,给出了具体的管理建议和优化措施。最后本文总结了研究过程中的缺点和不足,并对医疗器械行业发展进行展望,对AD医疗公司发展有一定的指导意义,更对其行业内其他公司具有借鉴意义。

关键词：医疗器械企业发展战略相关多元化战略

二烯丙基二硫对高脂血症大鼠的降血脂效果和机制研究

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二烯丙基二硫对高脂血症大鼠的降血脂效果和机制研究

作者：王琼山东大学

学位级别：硕士

研究目的高脂血症(Hyperlipidemia)是由于脂肪转运或代谢异常所致血浆或血清中一种或者多种脂质高于正常范围的全身性疾病,具体表现为总胆固醇(Total Cholesterol,TC)和/或甘油三酯(Triglyceride,TG)异常升高。心血管病(CVD,Cardiovascu... 详细信息

研究目的高脂血症(Hyperlipidemia)是由于脂肪转运或代谢异常所致血浆或血清中一种或者多种脂质高于正常范围的全身性疾病,具体表现为总胆固醇(Total Cholesterol,TC)和/或甘油三酯(Triglyceride,TG)异常升高。心血管病(CVD,Cardiovascular Diseases)是由于心脏和血液循环障碍引起的一种多因素疾病,是全球死亡的首要原因,高脂血症是其重要诱因之一。对高脂血症的有效治疗,可以减少CVD的发病率和死亡率。目前临床高脂血症多用他汀类降脂药物治疗,但由于他汀类降脂药物长期服用可对人体产生横纹肌溶解症、肝毒性等毒副作用,因此寻找新的安全有效降脂药物具有重要意义。大蒜是百合科葱属植物蒜的鳞茎,有研究表明大蒜及其提取物具有抗菌、抗病毒、降血压、降血脂,防治动脉粥样硬化等多种生物学功效。大蒜油含有二烯丙基一硫(Diallyl sulfide,DAS)、二烯丙基二硫(Diallyl disulfide,DADS)和二烯丙基三硫(Diallyltrisulfide,DATS)等多种有机硫化合物活性物质,但其中具有降血脂作用的单体成分尚不明确。第一部分实验,根据国家食品药品监督管理局以国食药监保化[2012]107号最新发布的《辅助降低血脂功能检验方法》,通过饲喂Wistar大鼠高脂饲料建立高脂血症模型,研究对比了大蒜的三种单体成分DAS、DADS和DATS,发现DADS具有良好的降血脂作用,但其作用和机制尚不明确并未见报道。第二部分实验,建立相同高血脂模型,探讨DADS的降血脂作用及其机制,分别给予低、中、高三种剂量DADS干预,通过相关血脂和肝脏指标评价其干预效果;并进一步分别从代谢和分子生物学角度对DADS发挥作用的机制进行探讨,为高脂血症的预防和治疗提供科学实验依据,也为大蒜制品DADS的进一步开发和利用提供理论依据。第一章DAS、DADS、DATS和大蒜油对高脂血症大鼠降血脂的效果评价和比较研究方法1.高脂饲料维持饲料中添加20.0%蔗糖、15.0%猪油、1.2%胆固醇、0.2%胆酸钠,另加入1.2%磷酸氢钙、0.8%石粉和5.0%酪蛋白达到维持饲料的国家标准。2.实验动物及处理健康雄性Wistar大鼠200±20g,70只,适应性喂养7天后,观察其一般状态,并按体重随机分为溶剂对照组10只,实验组60只;溶剂对照组给予正常饲料,实验组给予高脂饲料。一周后,实验组根据血清TC水平,随机分为高脂模型组、高脂+DAS干预组(160mg/***)、高脂+DADS干预组(60mg/***)、高脂+DATS干预组(40mg/***)、高脂+大蒜油干预组(100mg/***)和高脂+辛伐他汀对照组(4mg/***)。DAS、DADS和DATS分别用花生油稀释,溶剂对照组及高脂模型组给予等体积花生油,灌胃体积为1ml/***,经口灌胃,1次/天,持续4周。处死动物,迅速低温剥离肝脏,称重后剪取肝脏左叶相同部位作为标本用于制备匀浆和油红O染色,其余肝脏备用,均冻存于-80℃冰箱。3.体重和食物利用率测定实验期间,每周称量一次体重,调整灌胃剂量。以周为单位,记录饲料摄入量并按下列公式计算食物利用率:每周食物利用率=平均每只动物每周食物摄入量(g)/该周体重增长量(g)× 100%。4.肝脏系数测定称量动物末次体重及肝脏质量,按照下列公式计算肝脏系数:肝脏系数=肝脏质量(g)/末次体重(g)×1005.血清生化指标测定断头处死大鼠后取血3500 r/min室温离心15min分离血清,全自动生化仪测定TC、TG、HDL-C和LDL-C含量。6.肝脏TG和TC含量测定减量称重法分别称取肝脏左叶相同部位50mg和100mg肝组织,按照试剂盒要求检测TG和TC浓度,BCA法测定肝脏组织匀浆中的总蛋白浓度校正。7.肝脏油红O染色取肝左叶相同部位肝组织,制备10μm冰冻切片。观察脂滴在肝脏内的分布范围和面积,Image-ProPlus 6.0软件分析油红O染色脂滴所占面积比[面积比=脂滴面积/切片面积× 100%]。研究结果1.实验动物体重及肝脏系数变化与溶剂对照组相比,高脂模型组体重无明显差异;与高脂模型组相比,DAS、DADS、DATS和大蒜油各干预组体重也无明显差异。与溶剂对照组相比,高脂模型组肝脏系数无明显差异;与高脂模型组相比,DAS、DADS、DATS和大蒜油各干预组肝脏系数无明显差异。2.实验动物食物利用率变化与高脂模型组相比,给药期间大蒜油干预组动物总食物利用率下降14.81%(P<0.05),其余各组无明显差异。3.实验动物血清脂质相关指标变化与溶剂对照组相比,高脂模型组血清TC,TG,LDL-C浓度分别上升76.57%、115.16%和43.40%(P<0.01)。与

关键词：二烯丙基二硫高脂血症抗氧化作用降血脂作用 Keap1/Nrf2

基于基因组和转录组分析的Bacillus megaterium BM2的形态学研究

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基于基因组和转录组分析的Bacillus megaterium BM2的形态学研究

作者：杨舟山东大学

学位级别：硕士

巨大芽孢杆菌(Bacillusmegateium),芽孢杆菌属,为革兰氏阳性菌,形体细长,相比其他微生物比较大,菌落形态规则,呈圆形,表面圆润无褶皱,上有凸起。巨大芽孢杆菌因其具有营养要求低等优点,现已广泛的被应用于工业与学术研究领域,包括微生... 详细信息

巨大芽孢杆菌(Bacillusmegateium),芽孢杆菌属,为革兰氏阳性菌,形体细长,相比其他微生物比较大,菌落形态规则,呈圆形,表面圆润无褶皱,上有凸起。巨大芽孢杆菌因其具有营养要求低等优点,现已广泛的被应用于工业与学术研究领域,包括微生物肥料、生物的防治、畜牧业、水体的净化和蛋白表达上的研究与应用。在巨大芽孢杆菌的应用领域,发酵生物量低、生产成本高一直是限制其大规模应用的瓶颈。课题组前期在造纸黑液池中分离到的一株菌体形态小、发酵密度明显提高数倍的巨大芽孢杆菌*** BM2,通过与其它标准巨大菌株进行发酵比较,发现其菌体形态大小与所产芽孢的大小均比标准菌株小,因此猜测其具有较高的发酵密度与菌体的形态有关。该菌株的优势使其在异源表达和微生物菌剂方面具有巨大的应用潜力。本论文针对形态学和芽孢形成相关基因进行研究。首先对其进行全基因组测序,通过基因组和比较基因组分析初步找出了BM2菌株中可能与形态有关的基因,包括特有的壁磷壁酸合成有关基因(1751、1752)和与脂磷壁酸合成相关基因(/tasa、ltasb、ltasB)以及棒状结构蛋白MreB。利用温度敏感型敲除载体pKVM1构建敲除载体,通过对转化方法进行探索,确定了利用*** S17-1接合转移,插入失活的原理进行基因敲除的敲除体系。随后对筛选出的形态相关基因1751、1752、ltasa、ltasb、ltasB和mreB进行基因敲除,构建了一系列与形态有关的单个(*** BM2/Δ1751、*** BM2/Δ1752、*** BM2/Δ/ltasa、*** BM2/Δltasb、*** BM2/AltasB、*** BM2/ΔmreB)或多个敲除突变体(*** BM2/Δ1751Δ1752、*** BM2/ΔltasBΔltasb),并通过生长验证观察其生理变化,利用电镜技术观察其形态变化,以确定这些基因对菌体生长、细胞壁形成及菌体形态的影响。通过对各个敲除菌株进行生理生化和形态分析,我们发现基因1751、1752、ltasa、ltasd、ltasB的单个或者多个缺失会造成菌体生长变慢,而mreB基因的缺失使得菌株在发酵培养基的生物量提高。在细胞形态上,通过扫描电镜可以看出上述基因的缺失在不同程度上影响了细胞大小和形状,如磷壁酸合成相关基因的缺失会使得对数生长期的细胞变大(ltas)或者变小(17511、1752),mreB基因的缺失使得芽孢的生成受到严重抑制,并且细胞形态出现方形或者球状。另外,TEM和Western Blot实验均表明上述基因的丢失会引起细胞壁成分的改变,这也是引起生长和形态发生变化的可能原因之一。这些发现说明了我们初步筛选出的与形态有关的基因对菌体的生长及细胞大小有一定的影响,并且有的基因与芽孢形成相关。最后通过转录组分析*** BM2在生长周期中的基因表达水平变化。一方面在基因表达水平上验证了本论文中筛选出的形态相关基因的表达量差异;另一方面为进一步探索与细胞形态和芽孢形成相关的其它基因提供数据支撑。

关键词：巨大芽孢杆菌基因组学转录组基因敲除形态学磷壁酸

北京社区居民夏秋季节膳食叶黄素、玉米黄素摄入量分析

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中国食物与营养 2010年第3期16卷 77-80页

作者：王子昕林晓明北京大学医学部公共卫生学院营养与食品卫生学系北京100191

目的:测算北京社区居民夏秋季膳食叶黄素、玉米黄素摄入量。方法:采用高效液相色谱法(HPLC)对13种常见蔬菜、水果和蛋类中叶黄素、玉米黄素和β-胡萝卜素含量进行检测。运用定量食物频率表结合HPLC测定结果,计算居民膳食叶黄素、玉米黄... 详细信息

目的:测算北京社区居民夏秋季膳食叶黄素、玉米黄素摄入量。方法:采用高效液相色谱法(HPLC)对13种常见蔬菜、水果和蛋类中叶黄素、玉米黄素和β-胡萝卜素含量进行检测。运用定量食物频率表结合HPLC测定结果,计算居民膳食叶黄素、玉米黄素摄入量。结果:被调查的541名45岁以上社区居民中,叶黄素、玉米黄素平均摄入量分别为10201.4±12852.6μg/d和245.0±260.0μg/d。二者的摄入量在月人均收入1000～1999元者中最低。39.1%和30.2%的膳食叶黄素来源于菠菜和韭菜,40.6%和31.9%的膳食玉米黄素来自韭菜和鸡蛋。结论:利用定量食物频率表结合对常见食物的HPLC测定结果,估计了北京社区居民膳食叶黄素、玉米黄素的膳食摄入量。收入水平是影响居民二者摄入量的因素之一。菠菜、韭菜为被调查者膳食叶黄素的主要来源,韭菜、鸡蛋为其膳食玉米黄素最重要的来源。

关键词：社区居民膳食摄入量叶黄素玉米黄素北京