检索结果-南通市图书馆

西葫芦环斑病病原鉴定及葫芦科作物对西瓜花叶病毒抗性筛选

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植物病理学报 2020年第4期50卷 442-449页

作者：冀树娴吴雨洪郗征王美加李向东田延平山东农业大学植物保护学院植物病理学系泰安271018 山东省农业微生物重点实验室泰安271018

西瓜花叶病毒(watermelon mosaic virus,WMV)是危害我国葫芦科作物生产的重要病原。培育和种植抗病品种是防治病毒病最经济有效的措施。本研究利用RT-PCR和血清学方法在表现环斑症状的西葫芦果实上检测到WMV,未检测到番木瓜环斑病毒(pap... 详细信息

西瓜花叶病毒(watermelon mosaic virus,WMV)是危害我国葫芦科作物生产的重要病原。培育和种植抗病品种是防治病毒病最经济有效的措施。本研究利用RT-PCR和血清学方法在表现环斑症状的西葫芦果实上检测到WMV,未检测到番木瓜环斑病毒(papaya ringspot virus,PRSV)。接种WMV侵染性克隆到西葫芦品种绿源冬宝,果实表面产生环斑症状,表明WMV是引起西葫芦果实表面环斑症状的重要病原。利用间接ELISA方法对山东泰安的西瓜、黄瓜、甜瓜、西葫芦和南瓜等46个样品检测发现33个样品表现WMV血清学阳性(检出率71.74%),薛庄采集的带有环斑症状的西葫芦均检测到WMV。对山东省81份葫芦科作物种质资源抗WMV鉴定发现西葫芦品种万盛丰宝、盛丰金珠表现中抗(MR);西瓜品种绿宝新秀和浪潮一号表现中抗(MR);甜瓜品种黄皮面瓜表现抗病(R);黄瓜品种星君贝贝表现中抗(MR);南瓜品种爱维80南瓜表现高抗(HR),蜜本南瓜、传统蜜本南瓜、七叶早南瓜、玲珑二号和绿贝贝迷你南瓜等5个品种表现抗病(R);瓠瓜品种均表现为感病(S)。研究结果对合理布局葫芦科作物品种防控WMV具有重要意义。

关键词：葫芦科作物西瓜花叶病毒环斑症状抗性评价

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马铃薯Y病毒在种薯中检出率及其株系鉴定

植物病理学报 2020年第6期50卷 685-693页

作者：姬丽云李德江郇晓雪耿超李向东田延平山东农业大学植物保护学院植物病理学系泰安271018 山东省农业微生物重点实验室泰安271018

马铃薯是我国重要粮食和经济作物。马铃薯Y病毒(potato virus Y,PVY)是危害马铃薯生产的重要病害。种植脱毒种薯是防治PVY最有效的途径。马铃薯种薯携带PVY问题严重,但种薯中PVY株系还不清楚。本研究利用PVY特异性抗体检测了7个马铃薯品... 详细信息

马铃薯是我国重要粮食和经济作物。马铃薯Y病毒(potato virus Y,PVY)是危害马铃薯生产的重要病害。种植脱毒种薯是防治PVY最有效的途径。马铃薯种薯携带PVY问题严重,但种薯中PVY株系还不清楚。本研究利用PVY特异性抗体检测了7个马铃薯品种362个种薯,发现不同品种种薯带毒率差异较大,最高达12%。通过RT-PCR方法扩增获得了7个PVY分离物编码区全序列。重组分析发现7个分离物基因组均为重组型,根据重组位点的差异可以分为PVYNTN-NW(SYR-II型)、Rec-1、Rec-2和Rec-3等4种重组类型,后3种为新重组类型。系统进化分析发现,分离物HQH18G3-10与PVYNTN-NW(SYR-II型)处于同一个大的分支,但与中国PVY大田分离物聚集在一起形成一个相对独立的组,命名为PVYNTN-NW(CN型);其余6个分离物与数据库中的中国分离物聚集在PVYN-Wi组。这暗示PVY中国分离物具有相对独立的进化过程,PVY马铃薯大田分离物和种薯分离物进化上相近。所有分离物均能在珊西烟上引起典型叶脉坏死症状,HQH18G3-10引起的坏死症状最为严重。本研究首次报道了我国种薯内PVY发生情况,对分析病毒发生发展规律和防控具有借鉴作用。

关键词：马铃薯Y病毒种薯株系重组分析

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中国小麦花叶病毒弱毒突变体筛选与鉴定

植物病理学报 2021年第2期51卷 217-224页

作者：许小洁迟云化于伟鹏游朋朋何梦君耿超田延平李向东山东农业大学植物保护学院植物病理学系泰安271018 山东省农业微生物重点实验室泰安271018

中国小麦花叶病毒(Chinese wheat mosaic virus, CWMV)是我国小麦土传花叶病毒病的重要病原。将CWMV RNA1、RNA2片段分别连接到pCB301-Rz载体,得到重组质粒pCWMV-RNA1和pCWMV-RNA2,这2个质粒可在本氏烟上引起花叶和畸形症状,在小麦上引... 详细信息

中国小麦花叶病毒(Chinese wheat mosaic virus, CWMV)是我国小麦土传花叶病毒病的重要病原。将CWMV RNA1、RNA2片段分别连接到pCB301-Rz载体,得到重组质粒pCWMV-RNA1和pCWMV-RNA2,这2个质粒可在本氏烟上引起花叶和畸形症状,在小麦上引起黄花叶症状。在pCWMV-RNA2富含半胱氨酸蛋白基因的5′-端融合绿色荧光蛋白基因,可在本氏烟上系统产生绿色荧光。将RNA1 RdRp第1001位Asp(D_(1001))和RNA2 CP第127位Glu(E_(127))的密码子替换为丙氨酸Ala(A)密码子,获得突变体CWMV-RdRp-D1001A、CWMV-CP-E127A、CWMV-RdRp-D1001A/CP-E127A。与野生型CWMV相比,这3个突变体在本氏烟中致病力显著下降,积累量显著降低。

关键词：中国小麦花叶病毒侵染性cDNA克隆致病力衣壳蛋白复制酶

对小麦黄花叶病毒存在抗性差异的2种小麦品种中eIF4E序列分析

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植物病理学报 2017年第4期47卷 568-572页

作者：耿国伟顾珂于成明李向东田延平原雪峰山东农业大学植物保护学院植物病理学系山东省农业微生物重点实验室泰安271018

小麦黄花叶病于1927年在日本首次报道,其病原包括小麦黄花叶病毒（Wheat yellow mosaic virus,WYMV）和中国小麦花叶病毒（Chinese wheat mosaic virus,CWMV）。我国各省麦区在1980年以后陆续报道了其发生与危害,对小麦生长发育构成严... 详细信息

小麦黄花叶病于1927年在日本首次报道,其病原包括小麦黄花叶病毒（Wheat yellow mosaic virus,WYMV）和中国小麦花叶病毒（Chinese wheat mosaic virus,CWMV）。我国各省麦区在1980年以后陆续报道了其发生与危害,对小麦生长发育构成严重影响。

关键词：小麦黄花叶病毒 eIF4E 序列分析小麦生长发育 mosaic 病毒科抗性差异 wheat Wheat 分离物

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拟棘壳孢属的一新种及本属已知种的检索表

菌物学报 2019年第2期38卷 171-177页

作者：王坤英吴悦明陈云姜于兰贵州大学农学院植物病理学系贵州贵阳550025 山东农业大学植物保护学院植物病理学系山东泰安271018 山东农业微生物重点实验室山东泰安271018 修文县农业局贵州贵阳550025

本文报道分离自贵州省土壤的拟棘壳孢属Pyrenochaetopsis真菌一新种,对该种结合形态特征及分子系统学分析明确其分类地位,命名为土栖拟棘壳孢Pyrenochaetopsis terricola;编制了该属13个已知种的分种检索表。研究标本保存于贵州大学植... 详细信息

本文报道分离自贵州省土壤的拟棘壳孢属Pyrenochaetopsis真菌一新种,对该种结合形态特征及分子系统学分析明确其分类地位,命名为土栖拟棘壳孢Pyrenochaetopsis terricola;编制了该属13个已知种的分种检索表。研究标本保存于贵州大学植物病理学实验室(HGUP)和中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)。

关键词：土栖拟棘壳孢形态学分子系统学分类

小麦黄花叶病毒(WYMV)2个山东分离物的全基因组序列及进化分析

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植物病理学报 2017年第3期47卷 348-356页

作者：耿国伟于成明王德亚顾珂师科荣李向东田延平原雪峰山东农业大学植物保护学院植物病理学系山东省农业微生物重点实验室泰安271018 山东农业大学动物科技学院泰安271018

利用5'RACE结合一步法RT-PCR分别从山东泰安与临沂冬小麦上克隆了小麦黄花叶病毒(Wheat yellow mosaic virus,WYMV)的全基因组序列。这2个分离物(TADWK和LYJN)基因组间核苷酸一致性分别为97.21%(RNA1)和95.12%(RNA2)。通过对目前已报道... 详细信息

利用5'RACE结合一步法RT-PCR分别从山东泰安与临沂冬小麦上克隆了小麦黄花叶病毒(Wheat yellow mosaic virus,WYMV)的全基因组序列。这2个分离物(TADWK和LYJN)基因组间核苷酸一致性分别为97.21%(RNA1)和95.12%(RNA2)。通过对目前已报道的共14个分离物的基因组不同部分的分析,表明5'UTR是WYMV基因组变化幅度最大的区域,而编码区(ORF)及3'UTR的序列一致性较高且变动幅度小。另外,发现LYJN RNA2的5'UTR与已报道的所有分离物RNA2的核苷酸一致率仅为90%左右。综合分析RNA1和RNA2的系统发生树,表明WYMV各基因组片段呈单独进化特征,不同分离物间存在RNA重排。RNA重组分析显示在LYJN RNA1和TADWK RNA2发现了RNA重组。此研究说明WYMV在山东地区存在分离物分化现象,WYMV的5'UTR是基因组中的突变热点。

关键词：小麦黄花叶病毒系统发生树 RNA重组

烟草丛顶病毒RNA依赖RNA聚合酶(RdRp)介导的体外复制体系

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植物病理学报 2017年第6期47卷 790-796页

作者：逯晓明于成明王国鲁王德亚耿国伟刘珊珊师科荣原雪峰山东农业大学植物保护学院植物病理学系山东省农业微生物重点实验室泰安271018 山东农业大学动物科技学院泰安271018

通过重叠PCR扩增得到烟草丛顶病毒(Tobacco bushy top virus,TBTV)中国分离物RdRp的编码序列,构建以pMALC2X为基础载体的原核表达载体pMAL-TB-RdRp。0.5 mM IPTG诱导可特异性表达分子量约为120 kDa的MBP-RdRp融合蛋白。温度梯度实验显示... 详细信息

通过重叠PCR扩增得到烟草丛顶病毒(Tobacco bushy top virus,TBTV)中国分离物RdRp的编码序列,构建以pMALC2X为基础载体的原核表达载体pMAL-TB-RdRp。0.5 mM IPTG诱导可特异性表达分子量约为120 kDa的MBP-RdRp融合蛋白。温度梯度实验显示,18℃下诱导表达的MBP-RdRp融合蛋白的可溶性比例较高,约17%;经亲和层析纯化的MBPRdRp可特异性识别TBTV正链和负链的3'末端序列,催化体外复制;对正负链的3'末端的体外复制效率存在差别,识别负链3'末端的体外复制效率明显高于正链3'末端。本研究创建的TBTV RdRp介导的体外复制体系为进一步研究TBTV基因组复制调控奠定了基础。

关键词：烟草丛顶病毒 RNA依赖RNA聚合酶体外复制

水分胁迫下内生真菌球毛壳ND35对冬小麦苗期生长和抗旱性的影响

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生态学报 2015年第18期35卷 6120-6128页

作者：丛国强尹成林何邦令李玲高克祥山东农业大学植物保护学院山东省农业微生物重点实验室泰安271000

为明确不同水分条件下内生真菌对冬小麦苗期生长和抗旱性的影响,以抗旱型小麦品种山农16和水分敏感型小麦品种山农22为材料,利用荧光定量PCR技术检测小麦干旱诱导基因脱水素wzy2的表达量来了解冬小麦在干旱胁迫下相关基因的表达差异,通... 详细信息

为明确不同水分条件下内生真菌对冬小麦苗期生长和抗旱性的影响,以抗旱型小麦品种山农16和水分敏感型小麦品种山农22为材料,利用荧光定量PCR技术检测小麦干旱诱导基因脱水素wzy2的表达量来了解冬小麦在干旱胁迫下相关基因的表达差异,通过测定相关生理指标与酶活性来判断小麦发育及其在干旱胁迫下的生理响应状况。结果表明,与正常水分ND35组相比,接种球毛壳菌(Chaetomium globosum)ND35的干旱处理组小麦的根冠比、总蛋白含量、脯氨酸含量及丙二醛含量等指标显著提高,小麦叶片含水量和可溶性糖含量有所降低。在干旱处理组中,球毛壳菌ND35可以显著提高小麦山农16的根长和山农22的株高,接种球毛壳ND35的山农16脯氨酸含量、可溶性糖含量、过氧化氢酶活性比对照组均显著提高,丙二醛含量比对照组降低9.0%,但差异不显著;山农22脯氨酸含量和过氧化氢酶活性比对照组显著提高,丙二醛含量和可溶性糖含量比对照组有所降低,但可溶性糖含量差异不显著;相对定量检测数据显示,接种球毛壳ND35后,两种小麦脱水素wzy2基因的表达量较对照组均能够显著提高。综合分析说明内生真菌球毛壳ND35可以促进冬小麦苗期根系和植株发育,小麦提前进入三叶期,增强小麦避旱性,同时提高小麦根系活力,增强小麦耐旱性;提高个体细胞内水分、糖分、脯氨酸含量,降低丙二醛的氧化性损伤,增强过氧化氢酶活性,从而提高两种冬小麦对干旱胁迫的耐受能力;球毛壳ND35促进小麦干旱诱导相关基因wzy2的表达量,进而提高抗旱相关蛋白的表达,从而提高两种冬小麦耐脱水性和对干旱胁迫的适应性。

关键词：小麦苗期生长内生真菌球毛壳ND35 水分胁迫脱水素基因表达

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灵芝β-葡萄糖苷酶基因的克隆与功能分析

菌物学报 2022年第12期41卷 1971-1979页

作者：周如月林嘉龙李烨凡秦佳雯李壮孟丽山东农业大学植物保护学院山东省农业微生物重点实验室山东泰安271018

灵芝是我国著名的药用真菌,具有抗癌、抗肿瘤等功效。灵芝酸属于三萜类化合物,是灵芝的主要活性成分,并已成为评价灵芝品质的重要指标之一。β-葡萄糖苷酶(β-glucosidase,BG)是次生代谢产物合成途径中的关键限速酶,能够调节次生代谢产... 详细信息

灵芝是我国著名的药用真菌,具有抗癌、抗肿瘤等功效。灵芝酸属于三萜类化合物,是灵芝的主要活性成分,并已成为评价灵芝品质的重要指标之一。β-葡萄糖苷酶(β-glucosidase,BG)是次生代谢产物合成途径中的关键限速酶,能够调节次生代谢产物的生物合成。本研究通过同源序列比对,注释获得了灵芝β-葡萄糖苷酶基因(GlBG),并通过RNAi技术对灵芝β-葡萄糖苷酶进行功能分析。序列分析结果显示GlBG基因的DNA全长为2759 bp,包含7个外显子和6个内含子,编码793个氨基酸,其编码的蛋白序列中含有β-糖苷水解酶的2个保守结构域。灵芝β-葡萄糖苷酶基因的沉默转化子中灵芝酸含量比野生型菌株的灵芝酸含量平均降低了38%,并且灵芝酸生物合成途径中的关键酶基因(hmgs、hmgr、fps、sqs和osc)的表达量也显著下降,实验结果表明灵芝β-葡萄糖苷酶在灵芝酸生物合成过程中具有重要作用,并为灵芝次生代谢途径及其调控机制提供了参考。

关键词：灵芝灵芝酸 β-葡萄糖苷酶次生代谢