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婴幼儿食品源阪崎克罗诺杆菌的3种分型方法

中国食品学报 2022年第5期22卷 358-366页

作者：杨秋萍阎彦霏张艳曹晨阳盛焕精崔生辉杨保伟西北农林科技大学食品科学与工程学院陕西杨凌712100 富平县检验检测中心(陕西省羊乳产品质量监督检验中心) 陕西富平711700 中国食品药品检定研究院北京100050

阪崎克罗诺杆菌污染婴幼儿食品可能导致新生儿和婴幼儿脑膜炎、败血症和坏死性小肠结肠炎,对其健康造成严重威胁。采用脉冲场凝胶电泳(PFGE)、多位点序列分型(MLST)和肠杆菌间保守重复序列PCR(ERIC-PCR)对分离于婴幼儿配方乳粉、米粉和... 详细信息

阪崎克罗诺杆菌污染婴幼儿食品可能导致新生儿和婴幼儿脑膜炎、败血症和坏死性小肠结肠炎,对其健康造成严重威胁。采用脉冲场凝胶电泳(PFGE)、多位点序列分型(MLST)和肠杆菌间保守重复序列PCR(ERIC-PCR)对分离于婴幼儿配方乳粉、米粉和辅食中的阪崎克罗诺杆菌进行分子分型,计算3种分型方法的辛普森多样性指数(DI)值,评价3种方法的分型效率,以便精确和快速开展阪崎克罗诺杆菌流行病学研究。PFGE、MLST和ERIC-PCR可分别将37株阪崎克罗诺杆菌分为35个PFGE基因型、28个ERIC-PCR型和23个序列(ST)型,分型结果的DI值分别为99.55%,96.40%和98.05%。3种方法对阪崎克罗诺杆菌均具有较高的分型能力,其中PFEG分型能力最高,分型效率最佳。

关键词：阪崎克罗诺杆菌脉冲场凝胶电泳多位点序列分型肠杆菌间保守重复序列PCR

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酶解法制备绵羊乳酪蛋白ACE抑制肽的工艺优化及其抑制机制

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中国食品学报 2022年第6期22卷 220-231页

作者：汤海霞张艳葛武鹏宋宇轩王海燕王爽爽西北农林科技大学食品科学与工程学院陕西杨凌712100 富平县检验检测中心陕西省羊乳产品质量监督检验中心陕西富平711700 西北农林科技大学动物科技学院陕西杨凌712100

为优化酶解法制备绵羊乳酪蛋白ACE抑制肽的工艺条件以及筛选和鉴定一种新的ACE抑制肽,选用5种蛋白酶水解酪蛋白,以水解度、分子质量分布和ACE抑制率为指标筛选最适蛋白酶,采用单因素和响应面试验优化工艺,采用三合一质谱仪(Orbitrap Fus... 详细信息

为优化酶解法制备绵羊乳酪蛋白ACE抑制肽的工艺条件以及筛选和鉴定一种新的ACE抑制肽,选用5种蛋白酶水解酪蛋白,以水解度、分子质量分布和ACE抑制率为指标筛选最适蛋白酶,采用单因素和响应面试验优化工艺,采用三合一质谱仪(Orbitrap Fusion Lumos Tribrid MS)方法鉴定分子质量小于3 ku组分的氨基酸序列,筛选潜在ACE抑制肽,进行人工合成,测定其IC50值。采用Linewaver-Burk作图确定酶抑制动力学,结合分子对接解析肽段的抑制机制。结果表明:碱性蛋白酶水解酪蛋白的最佳条件为pH 6、底物含量8%、酶添加量4%、温度55℃、水解时间90 min,此时酪蛋白水解液ACE抑制率为99.1%。验证具有ACE抑制活性的肽段10条,筛选出一条新颖的降血压肽——LFRQFY(源自αs1-酪蛋白),其ACE抑制活性的IC50为(7.9±1.7)μmol/L,酶抑制动力学为混合抑制模式。分子对接结果表明:LFRQFY能与ACE的氨基酸残基Ala354(活性口袋S1)、His353(活性口袋S2)形成氢键,具有显著的体外降血压活性。

关键词： ACE抑制肽绵羊乳分子质量分布分子对接响应面

微波消解-火焰原子吸收光谱法间接测定小麦粉中的滑石粉

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粮食与油脂 2024年第4期37卷 150-152,157页

作者：罗叶丽董梅武鑫强鑫渭南市检验检测研究院陕西渭南714000 富平县检验检测中心(陕西省羊乳产品质量监督检验中心) 陕西富平711700

建立微波消解-火焰原子吸收光谱法测定小麦粉中滑石粉含量的方法。通过对消解系统酸用量和释放剂氯化锶加入量的优化,最终确定选用硝酸-氢氟酸体积比5∶1作为消解用酸,以每100 mL试样溶液中加入2.0 mL 15 g/L氯化锶溶液来达到消除干扰... 详细信息

建立微波消解-火焰原子吸收光谱法测定小麦粉中滑石粉含量的方法。通过对消解系统酸用量和释放剂氯化锶加入量的优化,最终确定选用硝酸-氢氟酸体积比5∶1作为消解用酸,以每100 mL试样溶液中加入2.0 mL 15 g/L氯化锶溶液来达到消除干扰的目的,经过方法学验证,结果表明:在0.2~1.0 mg/L范围内线性良好,相关系数r为0.999354;在加入镁元素的含量分别为1153.8、2884.6、7692.3μg/g时,平均回收率分别为101.0%、102.0%和102.3%,方法的相对标准偏差为0.44%,检出限为0.0040 g/kg,定量限为0.0134 g/kg,实际样品测定结果满意。

关键词：微波消解滑石粉小麦粉火焰原子吸收光谱法

QuEChERS/气相色谱-串联质谱-内标前置法测定茶叶中37种农药残留

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分析测试学报 2022年第8期41卷 1221-1228页

作者：黄微马玉凤孟怡璠李崇勇李春梅李婷王俣心丁伟陕西省茶叶产品质量监督检验中心汉中市食品药品监督检验检测中心陕西汉中723000 城固县食品药品检验检测中心陕西汉中723200

采用QuEChERS前处理技术,结合内标前置法建立了气相色谱-串联质谱同时检测茶叶中37种农药残留的方法,待测农药包括14种有机磷类、10种有机氯类、8种拟除虫菊酯类和5种有机杂环类。比较了提取溶剂、加水量、内标放置方式对37种农药提取... 详细信息

采用QuEChERS前处理技术,结合内标前置法建立了气相色谱-串联质谱同时检测茶叶中37种农药残留的方法,待测农药包括14种有机磷类、10种有机氯类、8种拟除虫菊酯类和5种有机杂环类。比较了提取溶剂、加水量、内标放置方式对37种农药提取效果的影响,考察了不同类型茶叶的基质效应,确定最优的实验条件为:茶叶样品加入内标后,加水浸泡,经乙腈超声提取,QuEChERS法净化,采用气相色谱-串联质谱仪多反应离子监测模式(MRM)进行检测,基质匹配标准曲线内标法定量。结果表明:内标前置法比内标后置法的回收率高,绿茶、红茶、白茶、黑茶基质均以基质增强效应为主。在优化实验条件下,37种农药在相应的质量浓度范围内呈良好的线性关系,相关系数(r^(2))均大于0.99。方法检出限(LOD)为0.2~15.7μg/kg,定量下限(LOQ)为0.7~52.2μg/kg。37种农药在LOQ、2LOQ和10LOQ 3个加标水平下的回收率为70.2%~120%,相对标准偏差(RSD)为1.1%~11%。该方法操作简单、准确高效、成本较低,适用于茶叶中农药多残留的日常检测。

关键词：气相色谱-串联质谱 QuEChERS 内标前置茶叶农药残留

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不同巴氏杀菌处理对绵羊乳总蛋白及乳清蛋白二级结构的影响

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食品安全质量检测学报 2021年第23期12卷 9220-9226页

作者：康鹏雷晓民葛武鹏吴仪凡王海燕李博为吕欣西北农林科技大学食品科学与工程学院杨凌712100 富平县检验检测中心(陕西省羊乳产品质量监督检验中心) 富平711700

目的分析不同巴氏杀菌处理下绵羊乳蛋白的结构变化,并以牛乳为对照,比较二者差异性。方法分别以低温长时巴氏杀菌(65℃ 30 min)、高温短时巴氏杀菌(85℃ 15 s)和超巴氏杀菌(121℃ 5 s)对绵羊乳、牛乳进行杀菌处理,探究3种巴氏杀菌处理... 详细信息

目的分析不同巴氏杀菌处理下绵羊乳蛋白的结构变化,并以牛乳为对照,比较二者差异性。方法分别以低温长时巴氏杀菌(65℃ 30 min)、高温短时巴氏杀菌(85℃ 15 s)和超巴氏杀菌(121℃ 5 s)对绵羊乳、牛乳进行杀菌处理,探究3种巴氏杀菌处理对绵羊乳和牛乳总蛋白及乳清蛋白二级结构的影响。结果3种巴氏杀菌处理均会影响绵羊乳总蛋白和乳清蛋白二级结构,改变乳蛋白原空间结构;相比总蛋白,乳清蛋白二级结构稳定性受热处理影响更大(P羊乳总蛋白与乳清蛋白二级结构影响最大,乳清蛋白变性程度最大。绵羊乳与牛乳在3种巴氏杀菌处理方式下蛋白二级结构的变化规律略有差异。结论3种巴氏杀菌处理下低温长时巴氏杀菌绵羊乳蛋白结构及组成变化最小,且绵羊乳总蛋白与乳清蛋白二级结构的变化规律与牛乳略有不同,在绵羊乳液态奶加工时应引起足够重视。

关键词：绵羊乳巴氏杀菌乳蛋白二级结构

高效液相色谱法测定食品中苯甲酸、山梨酸和糖精钠的方法验证

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中国食品 2021年第11期 66-69页

作者：郝果王琳帆安晓娟陕西省羊乳产品质量监督检验中心富平县检验检测中心

苯甲酸、山梨酸、糖精钠是常用的食品添加剂,也是衡量食品卫生质量的重要指标。苯甲酸、山梨酸具有防腐保鲜的作用,糖精钠是合成甜味剂,甜度比蔗糖甜300-500倍。GB2760-2016《食品安全国家标准食品添加剂使用标准》对这三者的添加范围... 详细信息

苯甲酸、山梨酸、糖精钠是常用的食品添加剂,也是衡量食品卫生质量的重要指标。苯甲酸、山梨酸具有防腐保鲜的作用,糖精钠是合成甜味剂,甜度比蔗糖甜300-500倍。GB2760-2016《食品安全国家标准食品添加剂使用标准》对这三者的添加范围和限量都有明确的规定,超范围或者超限量使用都是违法的。GB5009.28-2016《食品安全国家标准食品中苯甲酸、山梨酸和糖精钠的测定》对其检测方法做了规定,有高效液相色谱法和高效气相色谱法,其中高效液相色谱法为第一法仲裁法被广泛应用。国标方法在使用前要进行方法验证,核查实验室能否满足检测方法的要求。本研究针对高效液相色谱法测定食品中苯甲酸、山梨酸和糖精钠的适用性、线性、检出限、定量限、加标回收率等进行了一一验证,均能够满足检测方法的要求。

关键词：糖精钠食品卫生质量食品添加剂高效液相色谱法山梨酸防腐保鲜合成甜味剂高效气相色谱法

驼乳乳铁蛋白DPP-IV抑制肽的筛选验证及其防治糖尿病潜在作用机制探究

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食品工业科技 2023年第6期44卷 384-395页

作者：谢玉霞葛武鹏李国薇白航张静李香云高秦艺王爽爽西北农林科技大学食品科学与工程学院陕西杨凌712100 富平县检验检测中心(陕西省羊乳产品质量监督检验中心) 陕西渭南711700 西安依巴特生物科技有限公司陕西西安710000 陕西秦龙乳业集团有限公司陕西西安710000

目的:结合生物信息学,从驼乳乳铁蛋白(Lactoferrin,LF)中筛选DPP-IV(Dipeptidyl peptidase IV,DPP-IV)抑制肽,并利用网络药理学探讨筛选肽段对糖尿病的潜在作用机制。方法:利用BIOPEP网站模拟酶切LF序列产生多条肽段,结合多肽数据库及... 详细信息

目的:结合生物信息学,从驼乳乳铁蛋白(Lactoferrin,LF)中筛选DPP-IV(Dipeptidyl peptidase IV,DPP-IV)抑制肽,并利用网络药理学探讨筛选肽段对糖尿病的潜在作用机制。方法:利用BIOPEP网站模拟酶切LF序列产生多条肽段,结合多肽数据库及分子对接筛选潜在的DPP-IV抑制肽,选择其中四条进行人工合成,验证其DPP-IV抑制活性,通过分子对接分析肽段与DPP-IV分子间相互作用方式,Lineweaver-Burk方法分析肽段抑制模式。选择抑制作用较强的GPQY进行网络药理学分析,预测其对糖尿病的潜在作用机制。采用Swiss Target Prediction和GeneCards数据库挖掘GPQY及糖尿病的作用靶点,String数据库获取蛋白与蛋白互作关系,Cytoscape 3.9.0软件构建PPI网络,DAVID数据库对靶点进行GO与KEGG通路富集分析。结果:筛选验证获得2条DPP-IV抑制GPQY和EACAF,其半抑制浓度(IC50)值分别为348.27±16.11和1024.89±19.67μmol/L,抑制模式分析表明GPQY为竞争性抑制,EACAF为混合型抑制。分子对接结果显示两条肽段通过氢键、疏水作用和静电作用与DPP-IV结合。由PPI网络筛选到GPQY有STAT3、MMP9、SRC、MAPK1等25个核心作用靶点,KEGG通路富集显示GPQY防治糖尿病通路涉及IL-17信号通路、肿瘤坏死因子(TNF)信号通路、肾素-血管紧张素系统、细胞凋亡等。结论:驼乳LF是DPP-IV抑制肽的良好来源,由其获得的四肽GPQY可通过多靶点、多通路参与炎症反应,影响细胞增殖分化等多方面防治糖尿病及其并发症。

关键词：驼乳乳铁蛋白模拟酶切 DPP-IV抑制肽分子对接网络药理学

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市场监管系统基层检验检测机构质量基础设施建设和科技创新工作存在的问题及建议

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实验室检测

实验室检测 2024年第4期2卷 116-120页

作者：郝果李璐杨小娜富平县检验检测中心陕西省羊乳产品质量监督检验检测中心渭南711799

本文立足基层检验检测机构,结合实际工作,从质量基础设施建设、科技创新、科技工作体制等方面讨论了目前市场监管系统基层检验检测机构发展定位、鼓励激励机制、人才队伍建设、科技创新工作、科技成果转化等一些普遍共性问题进行分析,... 详细信息

本文立足基层检验检测机构,结合实际工作,从质量基础设施建设、科技创新、科技工作体制等方面讨论了目前市场监管系统基层检验检测机构发展定位、鼓励激励机制、人才队伍建设、科技创新工作、科技成果转化等一些普遍共性问题进行分析,并提出了多条建议。

关键词：市场监管系统基层检验检测机构质量基础设施科研管理科技创新存在问题建议

不同温度下复溶配方乳粉中阪崎克罗诺杆菌生长状况研究

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中国乳品工业 2021年第2期49卷 4-9页

作者：牛沁雅孟令缘张艳李珊珊施春雷史贤明杨保伟西北农林科技大学食品科学与工程学院陕西杨凌712100 富平县检验检测中心(陕西省羊乳产品质量监督检验中心) 陕西富平711700 上海交通大学农业与生物学院上海200240

研究了阪崎克罗诺杆菌分别于4、15、25、37℃时在复溶婴幼儿配方乳粉中的生长增殖状况,建立数学模型,预测RPIF中***生长不会对消费者产生危害的储存条件。采用平板菌落计数法测定***的浓度;Gompertz和Logistic方程建立一级模型;Ratkowsk... 详细信息

研究了阪崎克罗诺杆菌分别于4、15、25、37℃时在复溶婴幼儿配方乳粉中的生长增殖状况,建立数学模型,预测RPIF中***生长不会对消费者产生危害的储存条件。采用平板菌落计数法测定***的浓度;Gompertz和Logistic方程建立一级模型;Ratkowsky和Rosso模型作为二级模型,预测不同温度下RPIF中Cronobacter sakazakii的生长速率。结果显示除4℃外,Cronobacter Sakazakii在15、25、37℃生长良好,生长趋势符合S型曲线。基于Gompertz方程可知,不同温度下Cronobacter sakazakii的生长速率为0.23~0.81 h~(-1),且随培养温度升高而增加。结果认为将RPIF贮存于4℃时,阪崎克罗诺杆菌基本不会增殖。于15、25、37℃储存都可能因Cronobacter sakazakii增殖过快而对消费者造成危害.

关键词：阪崎克罗诺杆菌生长模型复溶婴幼儿配方乳粉预测微生物学