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新型不完全溶血表型金黄色葡萄球菌的微生物学特征

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安徽医科大学学报 2024年 1535-1542页

作者：唐伟冷贵云高菊王亚武姚杰周强徐元宏安徽医科大学第二附属医院检验科安徽医科大学第一附属医院检验科

目的探讨一种新型不完全溶血表型金黄色葡萄球菌(SIHP)的微生物学特征。方法采用三点接种法检测溶血表型,共纳入11株新型SIHP和33株随机匹配的完全溶血表型金黄色葡萄球菌(SCHP)。采用微量肉汤稀释法检测新型SIHP和SCHP的耐药特征,冻... 详细信息

目的探讨一种新型不完全溶血表型金黄色葡萄球菌(SIHP)的微生物学特征。方法采用三点接种法检测溶血表型,共纳入11株新型SIHP和33株随机匹配的完全溶血表型金黄色葡萄球菌(SCHP)。采用微量肉汤稀释法检测新型SIHP和SCHP的耐药特征,冻干兔血浆检测凝固酶活性,玻片法检测触酶活性,实时荧光定量PCR检测溶血素基因mRNA水平,微孔板法检测红细胞毒性,微孔板成膜结晶紫染色法检测生物膜形成能力,微量培养法监测生长曲线。结果与SCHP相比,新型SIHP的hla、hlb、hlc和hld四种溶血素基因表达谱不同;新型SIHP对青霉素、苯唑西林、庆大霉素、喹诺酮类、克林霉素和复方新诺明的耐药率更高;新型SIHP不仅具有更强的溶血毒性、血浆凝固酶活性和生物膜形成能力,而且对数期生长更快。结论新型SIHP的微生物学特征有别于SCHP,耐药性和致病性更强,应引起临床重视。

关键词：金黄色葡萄球菌溶血素溶血表型微生物学特征耐药性致病性

胱抑素C联合凝血酶原时间评估发热伴血小板减少综合征患者病情及预后

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中国感染与化疗杂志 2024年第5期 553-557页

作者：石光顺夏冬梅朱立雨安徽医科大学附属巢湖医院检验科安徽医科大学附属巢湖医院感染疾病科

目的探讨早期胱抑素C(Cys-C)联合凝血酶原时间(PT)在发热伴血小板减少综合征(severe fever with thrombocytopenia syndrome，SFTS)患者病情严重程度及预后中的评估价值。方法回顾性收集2021年4月至2023年8月安徽医科大学附属巢湖医... 详细信息

目的探讨早期胱抑素C(Cys-C)联合凝血酶原时间(PT)在发热伴血小板减少综合征(severe fever with thrombocytopenia syndrome，SFTS)患者病情严重程度及预后中的评估价值。方法回顾性收集2021年4月至2023年8月安徽医科大学附属巢湖医院诊治的101例SFTS患者资料，按患者病情严重程度分为普通组和重症组，按治疗结局分为生存组和死亡组。分析各组临床表现及早期实验室指标差异，采用logistic回归分析影响预后的因素，并采用受试者工作特征(ROC)曲线评估早期Cys-C水平及PT单独及联合检测对预测生存及死亡结局的效能。结果早期患者血清Cys-C、尿素氮、肌酐、尿酸、肌酸激酶、肌酸激酶同工酶水平、PT、活化部分凝血活酶时间在重症组及死亡组高于普通组及生存组，而淋巴细胞计数低于后两组，差异具有统计学意义(P<0.05)。多因素二元logistic回归分析结果提示，患者年龄(OR=1.146，95% CI：1.036～1.267)、PT(OR=2.643，95% CI：1.323～5.281)、Cys-C(OR=5.039，95% CI：1.548～16.395)是SFTS患者预后的独立危险因素。血清Cys-C作为预测生存者与死亡者的指标具有较高评估价值，ROC曲线下面积为0.831；而联合Cys-C、PT和患者年龄，曲线下面积高达0.930。结论 SFTS多发生于农民及老年人群，患者入院早期血清PT和Cys-C水平可有效预估患者预后，两者有望成为预测生存和死亡的生物标志物。

关键词：发热血小板减少综合征胱抑素C 预后

靶向B7-H3抑制人脐静脉血管内皮细胞生长、迁移和血管形成

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中国药理学通报 2024年第7期40卷 1311-1316页

作者：刘宇王南楠牛可凌惠娟朱亚玉胡伟陈礼文安徽医科大学第二附属医院检验科安徽合肥230601 安徽医科大学第二附属医院临床药物实验中心安徽合肥230601 安徽医科大学第二附属医院输血科安徽合肥230601

目的探讨靶向抑制协同信号分子B7-H3对人脐静脉血管内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)生长、迁移及血管生成能力影响。方法使用小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)敲减HUVECs B7-H3分子,采用CCK-8实验检测24 h、48 h和72 h细胞增殖;采用Transwell实验检测24 h细胞迁移;三维细胞培养观察细胞血管生成。结果与空序列转染的阴性对照(siRNA-Control)组比较,siRNA-720、siRNA-1707和siRNA-16903条备选siRNA对B7-H3表达的抑制效果不同,siRNA-1690抑制率明显高于siRNA-720和siRNA-1707,因此,选择使用siRNA-1690序列进行后续实验。CCK-8细胞活力实验结果显示,敲减B7-H3后24 h、48 h和72 h HUVECs增殖能力分别下降24%、22%(P>0.05,与24 h比较)和15%(P<0.05,与48 h比较);Transwell迁移实验表明,与siRNA-Control组对比,敲减B7-H3的HUVECs 24 h迁移能力明显减低(P<0.01);三维细胞培养结果表明,采用si-B7-H3敲减B7-H3基因后,HUVECs血管生成能力明显下降(P<0.01)。结论靶向B7-H3抑制HUVECs生长、迁移及血管生成。

关键词：协同信号分子血管生成靶向药物小干扰RNA 人脐静脉血管内皮细胞细胞迁移

111例侵袭性肺曲霉病(IPA)的临床特征及预后风险因素

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中国感染控制杂志 2024年第4期23卷 482-487页

作者：叶乃芳龚真唐伟李昕储雯雯刘周周强安徽医科大学第二附属医院检验科安徽合肥230601

目的探讨侵袭性肺曲霉病(IPA)的临床特征、实验室检查及预后风险因素。方法回顾性分析2020年9月—2023年6月某院IPA患者的临床资料,分析其临床特征及预后风险因素。结果共纳入111例IPA患者,年龄为(68.8±12.5)岁,以男性为主(63.1%),主... 详细信息

目的探讨侵袭性肺曲霉病(IPA)的临床特征、实验室检查及预后风险因素。方法回顾性分析2020年9月—2023年6月某院IPA患者的临床资料,分析其临床特征及预后风险因素。结果共纳入111例IPA患者,年龄为(68.8±12.5)岁,以男性为主(63.1%),主要分布于呼吸科、重症监护病房(ICU)、血液科及感染科,共占75.6%。IPA常见的曲霉为烟曲霉、黄曲霉及黑曲霉,分别占67.6%、19.8%、4.5%。支气管肺泡灌洗液的(1,3)-β-D-葡聚糖抗原检测(G试验)、半乳甘露聚糖抗原检测(GM试验)阳性率分别为73.7%、68.0%。111例IPA患者中,32例(28.8%)随访发现预后不良,25例(22.5%)合并病毒感染。logistic多因素回归分析显示,合并病毒感染[OR(95%CI):4.535(1.385~14.846),P=0.012]、连续3周使用糖皮质激素史[OR(95%CI):9.128(2.293~36.341),P=0.002]、机械通气[OR(95%CI):4.690(1.100~19.990),P=0.037]及留置导尿管[OR(95%CI):7.144(1.345~37.950),P=0.021]是IPA患者预后不良的独立危险因素。结论多种因素与IPA预后不良有关,应联合多种检测手段早期识别并尽早给予合理治疗,以改善患者预后,同时需采取相应预防措施,避免出现医院感染。

关键词：肺曲霉病 IPA 临床特征预后风险因素

T6SS阳性CRKP临床感染特征及毒力基因分析

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中国感染控制杂志 2024年第4期23卷 488-493页

作者：刘莉娟储雯雯王梦闫涛龚真周强刘周安徽医科大学第二附属医院检验科安徽合肥230601

目的分析T6SS阳性耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(CRKP)临床感染特征,以及其耐药、毒力基因检出率和生物膜形成能力,为临床防控CRKP感染提供参考数据。方法收集2019年1月—2022年12月安徽某三甲医院临床分离的CRKP菌株及患者资料,PCR法检测T... 详细信息

目的分析T6SS阳性耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(CRKP)临床感染特征,以及其耐药、毒力基因检出率和生物膜形成能力,为临床防控CRKP感染提供参考数据。方法收集2019年1月—2022年12月安徽某三甲医院临床分离的CRKP菌株及患者资料,PCR法检测T6SS基因、毒力基因、耐药基因和分子分型,96孔板结晶紫染色法检测生物膜形成能力。结果共纳入160株CRKP。标本来源以痰(46.9%)和血(26.3%)为主。CRKP菌株呈现多重耐药表型,以携带bla KPC(80.6%)为主,其次为bla NDM(17.5%)。根据是否携带T6SS将CRKP分为T6SS阳性组(129株,80.6%)和T6SS阴性组(31株,19.4%)。T6SS阳性组患者患慢性肺部疾病和心脏疾病比例高于T6SS阴性组(P<0.05),且预后较阴性组差(P<0.05)。T6SS阳性组中,iuc A、mrk D、rmp A2、peg 344、wab G、fim H检出率均高于T6SS阴性组(均P<0.05)。CRKP中以ST11型(68.8%)为主,其中K64-ST11型占比70.9%,K47-ST11型占比25.5%。T6SS阳性组ST11型和K64-ST11型CRKP占比均高于T6SS阴性组(均P<0.05)。T6SS阳性组CRKP生物膜形成能力强于T6SS阴性组(P<0.001)。两组除bla OXA-48基因外,在携带其他碳青霉烯类耐药基因和抗菌药物耐药率方面差异无统计学意义。结论该地区CRKP呈现多重耐药,CRKP菌株T6SS检出率高,T6SS阳性CRKP毒力基因检出率更高,且生物膜形成能力更强。

关键词：肺炎克雷伯菌 T6SS 毒力基因耐碳青霉烯类碳青霉烯酶

新型金黄色葡萄球菌滤液对NSCLC细胞的毒性研究

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安徽医科大学学报 2024年 1529-1535页

作者：李欣雨周强陈礼文安徽医科大学第二附属医院检验科安徽医科大学第二附属医院输血科

目的探究一种新型不完全溶血表型金黄色葡萄球菌（SIHP）的滤液对非小细胞肺癌HCC827细胞株的毒性及作用机制。方法新型SIHP和完全溶血表型金黄色葡萄球菌（SCHP）的滤液及其稀释液,分别同1%人红细胞和HCC827细胞共孵育。采用血红蛋... 详细信息

目的探究一种新型不完全溶血表型金黄色葡萄球菌（SIHP）的滤液对非小细胞肺癌HCC827细胞株的毒性及作用机制。方法新型SIHP和完全溶血表型金黄色葡萄球菌（SCHP）的滤液及其稀释液,分别同1%人红细胞和HCC827细胞共孵育。采用血红蛋白释放量法检测红细胞毒性,CCK-8法检测HCC827细胞活性,离子选择电极法、比色法和免疫荧光法分别检测孵育上清液中K+、乳酸脱氢酶（LDH）和白细胞介素-6（IL-6）浓度。结果新型SIHP滤液及其稀释液均能明显降低HCC827细胞活性,引起K+和LDH外漏。新型SIHP滤液及其1:3稀释液,分别导致HCC827细胞的IL-6分泌量减少和增加。与SCHP相比,新型SIHP滤液及其稀释液的红细胞毒性更强,HCC827细胞K+外漏更严重。结论新型SIHP滤液能够通过损伤细胞胞膜,引起内容物释放,杀伤非小细胞肺癌细胞,毒性强于SCHP。

关键词：金黄色葡萄球菌溶血表型滤液非小细胞肺癌细胞毒性抗肿瘤活性

去甲泽拉木醛通过抑制AKT/CREB信号通路抑制非小细胞肺癌细胞的增殖、迁移和侵袭

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南方医科大学学报 2024年第2期44卷 280-288页

作者：韩齐齐叶梦然金齐力蚌埠医科大学检验医学院安徽蚌埠233030 蚌埠医科大学第二附属医院检验科安徽蚌埠233080

目的探讨去甲泽拉木醛抑制非小细胞肺癌细胞A549和H1299增殖、迁移和侵袭并诱导细胞凋亡的作用机制。方法镜下初步观察不同浓度的去甲泽拉木醛(0、1、3、10、30μmol/L)对A549和H1299细胞形态及细胞数量的影响。通过克隆形成、CCK-8、... 详细信息

目的探讨去甲泽拉木醛抑制非小细胞肺癌细胞A549和H1299增殖、迁移和侵袭并诱导细胞凋亡的作用机制。方法镜下初步观察不同浓度的去甲泽拉木醛(0、1、3、10、30μmol/L)对A549和H1299细胞形态及细胞数量的影响。通过克隆形成、CCK-8、细胞划痕、Transwell和流式细胞实验检测去甲泽拉木醛对A549和H1299细胞增殖、细胞活力、细胞迁移和侵袭、细胞凋亡的影响以及SC79处理后对细胞凋亡的影响。通过Western blotting检测不同浓度的去甲泽拉木醛对A549和H1299细胞E-cadherin、N-cadherin、Vimentin、Bax、Bcl-2、cleaved-caspase 3表达和AKT/CREB磷酸化水平变化的影响,SC79处理后对凋亡蛋白表达的影响。结果镜下观察药物作用后,细胞形态由饱满变为细长,细胞间隙增宽。CCK-8实验和克隆形成实验结果显示去甲泽拉木醛能抑制A549和H1299细胞活力并且抑制细胞的增殖(P<0.05)。流式细胞术结果表明,去甲泽拉木醛诱导A549和H1299细胞的凋亡,而SC79处理后逆转了促凋亡作用(P<0.05)。划痕和Transwell实验结果说明,去甲泽拉木醛抑制了A549和H1299细胞的迁移和侵袭(P<0.05)。Western blotting实验结果表明,去甲泽拉木醛处理后A549和H299细胞中Bax、clevaed-caspase3蛋白表达水平升高,Bcl-2蛋白表达水平下调,而SC79的使用逆转了凋亡蛋白的表达趋势,E-cadherin表达上调,N-cadherin、Vimentin表达下调,AKT/CREB磷酸化水平也被显著抑制(P<0.05)。结论去甲泽拉木醛能够抑制非小细胞肺癌细胞的增殖、迁移和侵袭,并诱导其凋亡,其机制可能与其抑制AKT/CREB信号通路有关。

关键词：非小细胞肺癌去甲泽拉木醛 AKT CREB

GNB4和Riplet基因甲基化检测在原发性肝癌诊断中的价值研究

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安徽医科大学学报 2024年第2期59卷 357-362页

作者：杨玉萍徐恩君汪轩轩唐宜桂郑美娟王悦储梦真徐家丹王中新安徽医科大学第一附属医院检验科合肥230022

目的探讨GNB4和Riplet基因甲基化单独和联合检测在原发性肝癌诊断中的诊断效能和临床价值。方法选取313例患者,原发性肝癌患者78例,其他消化系统肿瘤患者41例,非消化系统肿瘤患者17例,肝癌术后20例,肝良性疾病患者157例。采用甲基化... 详细信息

目的探讨GNB4和Riplet基因甲基化单独和联合检测在原发性肝癌诊断中的诊断效能和临床价值。方法选取313例患者,原发性肝癌患者78例,其他消化系统肿瘤患者41例,非消化系统肿瘤患者17例,肝癌术后20例,肝良性疾病患者157例。采用甲基化荧光定量PCR(qMSP)法检测所有患者血浆中GNB4和Riplet基因甲基化水平,直接化学发光法检测血清甲胎蛋白(AFP)水平。结果 AFP检测诊断灵敏度和特异度为51.3%、94.3%;GNB4基因甲基化检测诊断灵敏度和特异度为83.3%、99.4%;Riplet基因甲基化检测诊断灵敏度和特异度为73.1%、99.4%。GNB4和Riplet基因甲基化联合检测诊断的灵敏度和特异度为92.3%、98.7%;AFP、GNB4和Riplet基因甲基化3项指标联合检测诊断的灵敏度和特异度为92.3%、98.7%,纳入年龄和性别后的联合诊断的灵敏度和特异度为93.6%、97.5%。结论对于原发性肝癌的诊断,AFP灵敏度和特异度存在局限性,而GNB4和Riplet基因甲基化水平较高,两者联合检测的灵敏度和特异度均高于AFP的诊断效能。AFP、GNB4和Riplet基因甲基化联合检测诊断的灵敏度和特异度显著高于AFP、GNB4和Riplet基因甲基化单独检测。

关键词：原发性肝癌甲胎蛋白基因甲基化 GNB4基因 Riplet基因

血红素加氧酶-1通过诱导抗病毒蛋白的表达增强IFN-α抗HBV效应

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安徽医科大学学报 2024年第2期59卷 324-330页

作者：笪蔚王琴魏安邦张浩汪任冰刘倩周强安徽医科大学第二附属医院检验科合肥230601 安徽医科大学第二附属医院儿科合肥230601

目的探讨血红素加氧酶-1(HO-1)对HBV复制的作用及HO-1联合α-干扰素(IFN-α)的抗病毒效应。方法以HepG2.2.15细胞和HBV 1.3质粒转染HepG2细胞即HepG2-HBV1.3为HBV复制细胞模型;血红素(Hemin)分别处理HepG2.2.15和HepG2-HBV1.3细胞,诱导HO-1表达;CCK-8评估Hemin对HepG2、HepG2.2.15的毒性作用;化学发光法分析Hemin处理组及si-HO-1等实验组上清液中HBsAg、HBeAg;RT-qPCR分析HO-1、IFN-β、HBV-DNA;Western blot分析IRF-3、JAK/STAT信号通路中相关分子的表达;Hemin联合IFN-α处理HepG2.2.15,监测HO-1是否具有协同IFN-α抗病毒效应。结果Hemin剂量依赖性诱导HO-1,HO-1被诱导后发挥显著的抗HBV效应,同时IFN-β、IRF-3及JAK/STAT信号通路中IRF-9、MxA的表达均增加。沉默HO-1表达能逆转Hemin诱导组的抗病毒效应,同时I型干扰素IFN-β也呈现低表达,JAK/STAT信号通路中的IRF-9、MxA的表达也被抑制。Hemin联合IFN-α发挥更强的抗病毒作用。结论HO-1能够发挥抗HBV效应,这种效应可能是增加IRF-3的磷酸化诱导I型干扰素表达来激活JAK/STAT信号通路发挥抗病毒效应;HO-1可以协同IFN-α发挥抗病毒作用。

关键词：血红素血红素加氧酶-1 JAK/STAT IFN-β