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肠外致病性大肠杆菌LuxR家族转录调节蛋白YjjQ研究进展

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中国预防兽医学报 2019年第2期41卷 214-217页

作者：傅丹丹肖亚婷祁克宗宋祥军涂健薛媚安徽农业大学动物科技学院/兽医病理生物学与疫病防控安徽省重点实验室安徽合肥230036

致病性大肠杆菌包括肠道内致病性大肠杆菌及肠外致病性大肠杆菌,肠外致病性大肠杆菌包括:尿道致病性大肠杆菌(Uropathogenic Escherichia coli, UPEC)、新生儿脑膜炎大肠杆菌(Neonatal meningitis Escherichia coli, NMEC),禽致病性大... 详细信息

致病性大肠杆菌包括肠道内致病性大肠杆菌及肠外致病性大肠杆菌,肠外致病性大肠杆菌包括:尿道致病性大肠杆菌(Uropathogenic Escherichia coli, UPEC)、新生儿脑膜炎大肠杆菌(Neonatal meningitis Escherichia coli, NMEC),禽致病性大肠杆菌(Avian Pathogenic Escherichia coli, APEC)等“。肠外致病性大肠杆菌常引发腹泻、尿路感染、新生儿脑膜炎和败血症等多种疾病,给人和动物的健康和公共卫生带来严重威胁[1].

关键词：禽致病性大肠杆菌调节蛋白转录尿路感染公共卫生脑膜炎新生儿败血症

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板青颗粒对靶动物猪的安全性试验

中国畜牧兽医 2024年第9期51卷 4164-4173页

作者：丁梦婕王苹苹胡龙飞张秋娜陈静刘佳刘若男郝智慧新疆农业大学动物医学学院乌鲁木齐830052 中国农业大学动物医学院北京100193 保定冀中生物科技有限公司保定071100 保定冀中药业有限公司保定071100

【目的】评估板青颗粒对猪的安全性,为临床合理用药提供参考依据。【方法】选择32头110日龄左右健康猪,随机分为4组,板青颗粒1倍(100 mg/kg BW)、3倍(300 mg/kg BW)、5倍(500 mg/kg BW)剂量组和空白对照组,每组8头。试验组饮水给药14 d... 详细信息

【目的】评估板青颗粒对猪的安全性,为临床合理用药提供参考依据。【方法】选择32头110日龄左右健康猪,随机分为4组,板青颗粒1倍(100 mg/kg BW)、3倍(300 mg/kg BW)、5倍(500 mg/kg BW)剂量组和空白对照组,每组8头。试验组饮水给药14 d,停药后继续观察10 d;空白对照组正常饲养,不给药。每天上午、下午逐头观察并记录试验猪的临床表现,在给药前(试验第0天,D0)、给药结束(试验第15天,D15)、观察结束(试验第25天,D25)称重,并在空腹称重后采血,检测血液常规指标和生化指标。分别在给药结束和观察结束时对5倍剂量组和空白对照组猪进行组织病理学检查。【结果】试验期间各剂量组试验猪精神状态、食欲、二便均表现正常,生长性能指标差异均不显著(P>0.05);血液常规指标检测结果显示,试验猪红细胞数量、血红蛋白含量两个指标均随着给药剂量的增加而升高,但均在正常范围内波动,其余个别指标虽具有显著差异但不具有剂量相关性,且指标数值均在正常范围内。血液生化指标检测结果显示,试验猪血清总蛋白随着给药浓度的增加而升高,血糖含量随着给药浓度的升高而降低,但均在正常范围内波动,其余个别指标虽具有显著差异但不具有剂量相关性,且指标数值均在历史资料的参考范围内。组织病理学观察结果显示,5倍剂量组试验猪的心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏各组织器官结构清晰,层次分明,发育正常,未发现与中药制剂作用有关的细胞变性、坏死及炎性细胞浸润等病理性变化,各组织与空白对照组相比均未见明显的差异。【结论】板青颗粒5倍剂量(500 mg/kg BW)对猪用药安全。

关键词：板青颗粒猪血液常规指标血液生化指标安全性

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禽致病性大肠杆菌生物被膜形成能力及相关特性分析

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南京农业大学学报 2021年第5期44卷 918-926页

作者：邓小玲孙影尤向峰吴育发王梦云胡积东王有为阮祥春安徽农业大学动物科技学院安徽合肥230036 广德市农业农村局安徽广德242200 青阳县畜牧兽医局安徽青阳242800 兽医病理生物学与疫病防控安徽省重点实验室安徽合肥230036

[目的]本研究旨在分析能形成生物被膜的临床分离禽致病性大肠杆菌(APEC)菌株的生物学特征。[方法]用刚果红平板法对70株APEC进行筛选,并用结晶紫染色法鉴定菌株生物被膜的形成能力;通过测定不同时间生物被膜生长情况,推断菌株的膜成熟时... 详细信息

[目的]本研究旨在分析能形成生物被膜的临床分离禽致病性大肠杆菌(APEC)菌株的生物学特征。[方法]用刚果红平板法对70株APEC进行筛选,并用结晶紫染色法鉴定菌株生物被膜的形成能力;通过测定不同时间生物被膜生长情况,推断菌株的膜成熟时间;依据玻璃试管法判断菌株是否有卷曲菌毛以及形成生物被膜基质中是否含有胞外纤维素,同时用苯酚-硫酸法测定膜基质中胞外多糖的浓度。对与生物被膜形成相关群体感应系统、菌毛、鞭毛、蛋白、多糖的基因进行PCR检测,最后通过最小抑菌浓度法检测形成生物被膜的菌株对10种抗菌药的耐药性并分析它们的耐药特性。[结果]在鉴定出能形成生物被膜的31株菌中,强、中等和弱成膜能力的分别有10、7和14株。强成膜菌株膜成熟时间比弱成膜菌株的短且差异显著(P0.05)。强成膜能力的菌株中含有菌毛和产生胞外纤维素的菌株所占的比例最高,且胞外多糖含量极显著高于中等和弱成膜菌株(P生物被膜相关基因的检测结果显示,群体感应系统相关基因检出率最高,达到100.00%,其他从高到低依次为菌毛、蛋白、鞭毛、多糖相关基因。耐药性测定结果表明,生物被膜阳性菌株对10种抗菌药有不同程度的耐药性,且成膜能力越强,对10种抗菌药的耐药程度越严重。[结论]强成膜能力菌株的膜成熟时间短,产生膜基质的量多、组成更复杂,且对10种抗菌药的耐药程度更严重。

关键词：生物被膜禽致病性大肠杆菌生物学特征抗菌药耐药性

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波棱瓜子总木脂素的急性和亚慢性毒性试验

畜牧与兽医 2024年第9期56卷 40-47页

作者：庄向婷王勃森杨乐刘晓强杨凌职业技术学院动物工程学院/陕西省动物疫病防控工程技术研究中心陕西杨凌712100 宝鸡市眉县畜牧兽医技术推广站陕西宝鸡722300 西北农林科技大学动物医学院陕西杨凌712100

旨在用小鼠急性毒性试验和大鼠亚慢性毒性试验评价波棱瓜子总木脂素的安全性。在24只ICR小鼠急性经口毒性试验中,设单次最大给药量(5000 mg/kg),给药后连续观察7 d;在亚慢性毒性试验中,40只SD大鼠分为对照组(0.5%羧甲基纤维素钠)和波棱... 详细信息

旨在用小鼠急性毒性试验和大鼠亚慢性毒性试验评价波棱瓜子总木脂素的安全性。在24只ICR小鼠急性经口毒性试验中,设单次最大给药量(5000 mg/kg),给药后连续观察7 d;在亚慢性毒性试验中,40只SD大鼠分为对照组(0.5%羧甲基纤维素钠)和波棱瓜子总木脂素低(100 mg/kg)、中(200 mg/kg)和高(400 mg/kg)剂量组进行灌胃给药,每天1次,连续给药30 d,灌胃结束后测定大鼠体重、采食量、血液指标、生化指标、脏器系数和病理组织学变化。结果:在小鼠急性毒性试验中,波棱瓜子总木脂素对ICR小鼠的LD50>5000 mg/kg,按照外源化合物急性毒性分级标准波棱瓜子总木脂素属于实际无毒;大鼠亚慢性毒性试验中,与对照组比较,波棱瓜子总木脂素各剂量组体重、采食量、血液学、血液生化学、脏器系数均无显著差异(P>0.05),组织病理学检查结果未见与波棱瓜子总木脂素毒性有关的病理变化。综上,波棱瓜子总木脂素临床合理剂量使用安全性高。

关键词：波棱瓜子总木脂素急性毒性亚慢性毒性

克氏原螯虾副溶血性弧菌的分离鉴定与小鼠致病性试验

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水产学杂志 2024年第4期37卷 42-48,83页

作者：许艺兰陈婷婷卢冰霞梁家幸周英宁黄广杰江新华何肈强许心婷全琛宇赵硕秦毅斌段群棚许佳乐何颖陈忠伟广西壮族自治区兽医研究所广西兽医生物技术重点实验室农业农村部中国(广西)-东盟跨境动物疫病防控重点实验室广西南宁530001 贵港市水产技术推广站广西贵港537100 玉林市水产技术推广站广西玉林537000 广西大学动物科学技术学院广西南宁530005

为探究从广西某养殖基地收集的患病克氏原螯虾(Procambarus clarkii)分离获得的一株细菌GXBL的致病性和生物学特性,利用形态学、分子生物学及生理生化综合鉴定菌株,进行分离菌感染实验动物、组织病理实验及药敏实验。结果显示,分离株GXB... 详细信息

为探究从广西某养殖基地收集的患病克氏原螯虾(Procambarus clarkii)分离获得的一株细菌GXBL的致病性和生物学特性,利用形态学、分子生物学及生理生化综合鉴定菌株,进行分离菌感染实验动物、组织病理实验及药敏实验。结果显示,分离株GXBL在TCBS培养基上菌落呈蓝绿色、圆形,染色镜检为短棒状或弧状的革兰氏阴性菌;生理生化鉴定结果显示,分离菌能发酵阿拉伯糖、葡萄糖、甘露醇、尿素、精氨酸和甲基红,不能发酵纤维二糖、乳糖及蔗糖;16S rRNA序列分析显示该分离菌为副溶血性弧菌;动物试验结果显示,该分离菌对小鼠有一定的致病性,造成小鼠的肝细胞大片坏死,肝板结构被破坏,肺泡壁显著增厚,血管内聚集大量红细胞,脾脏淋巴细胞明显减少;药敏结果显示,分离菌对氨苄西林、头孢哌酮、庆大霉素、四环素、多黏菌素B、复方新诺明等18种抗生素敏感,对青霉素G、甲硝唑和氟康唑3种药物耐药。本研究结果可为副溶血性弧菌引起的克氏原螯虾细菌性疾病防治提供参考依据。

关键词：克氏原螯虾副溶血性弧菌分离鉴定药敏试验致病性

鹅星状病毒衣壳纤突蛋白VP27多克隆抗体的制备和鉴定

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江苏农业学报 2021年第2期37卷 412-417页

作者：吕炫张淼胡增金李佳明张冲朱英奇魏娟文吴琼张瑞辰夏伦志王桂军安徽农业大学动物科技学院安徽合肥230036 兽医病理生物学与疫病防控安徽省重点实验室安徽合肥230036 安徽省农业科学院畜牧兽医研究所安徽合肥230036

采用RT-PCR扩增获得鹅星状病毒(Goose astrovirus)的衣壳纤突蛋白基因vp27,并将其克隆至pCold-SUMO原核表达载体。重组表达载体pCold-vp27经过测序和双酶切验证正确后,转化到感受态细胞Rosetta。挑取阳性克隆子,利用异丙基硫代半乳糖苷... 详细信息

采用RT-PCR扩增获得鹅星状病毒(Goose astrovirus)的衣壳纤突蛋白基因vp27,并将其克隆至pCold-SUMO原核表达载体。重组表达载体pCold-vp27经过测序和双酶切验证正确后,转化到感受态细胞Rosetta。挑取阳性克隆子,利用异丙基硫代半乳糖苷诱导表达鹅星状病毒衣壳纤突重组蛋白,使用镍柱纯化衣壳纤突蛋白VP27,将定量的重组蛋白免疫BALB/c小鼠。利用ELISA、Western blot和IFA鉴定鼠抗衣壳纤突蛋白VP27多克隆抗体。结果显示,鼠抗衣壳纤突蛋白VP27多克隆抗体的效价大于1∶64000,Western blot试验结果证明了鼠抗衣壳纤突蛋白VP27多克隆抗体的特异性,IFA试验结果证明鼠抗衣壳纤突蛋白VP27多克隆抗体能够识别天然的鹅星状病毒衣壳纤突蛋白VP27。

关键词：鹅星状病毒衣壳纤突蛋白VP27 多克隆抗体

树鼩感染HEV致中枢神经损伤与IL-4和IL-5表达相关性研究

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中国兽医科学 2024年第3期54卷 403-409页

作者：朱培英杨国琴宋春莲付忠海孙以鑫武鑫柴俊李文贵云南农业大学动物医学院云南昆明650201 滇西科技师范学院生物技术与工程学院云南临沧677000

戊型肝炎病毒(HEV)感染人可引起神经系统等肝外损伤,其机理尚不清楚。本研究经腹腔注射建立HEV树鼩实验感染模型后,采用RT-PCR法检测粪便、肝和脑等组织中HEV负链RNA,实时荧光定量PCR检测感染树鼩脑、粪便、小肠以及肝中病毒的消长,测... 详细信息

戊型肝炎病毒(HEV)感染人可引起神经系统等肝外损伤,其机理尚不清楚。本研究经腹腔注射建立HEV树鼩实验感染模型后,采用RT-PCR法检测粪便、肝和脑等组织中HEV负链RNA,实时荧光定量PCR检测感染树鼩脑、粪便、小肠以及肝中病毒的消长,测定谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)水平。组织病理学观察各组织的损伤情况以及炎症因子IL-4、IL-5在不同感染时间段的表达水平。结果显示,感染第7天全部组织均能检测到病毒负链RNA的复制;AST、ALT与对照组相比明显升高。组织病理学观察发现肝等组织出现不同程度的损伤,脑膜扩张充血,胶质细胞浸润,小脑出现大量空泡样结构、白质充血,脊髓内各类神经元形状大小不一,神经元广泛变性坏死、胞核崩解固缩,伴有胶质细胞增生。IL-4和IL-5 m RNA转录水平在感染早期和中期均有明显的升高。结果表明,HEV可突破血脑屏障进入脑和脊髓等实质组织,并引起脑和脊髓的病理损伤,感染早期IL-4和IL-5在不同组织有不同程度的升高,与HEV感染引起的脑和脊髓等组织的损伤有关联。

关键词：戊型肝炎树鼩中枢神经损伤 IL-4 IL-5

桦褐孔菌口服佐剂对禽类疫苗的体液免疫增强作用研究

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安徽农业科学 2024年第17期52卷 94-97页

作者：杨硕费智国郭梦帅郭玲陈智张琳丁志勇关红艳赵晓明黄悦妍刘娜刘建钗河北工程大学生命科学与食品工程学院河北邯郸056038 山东省农业科学院畜牧兽医研究所/山东省畜禽疫病防治与繁育重点实验室山东济南250100 农业农村部畜禽生物组学重点实验室山东济南250100 山东农业大学动物科技学院(动物医学院) 山东泰安271018 济南市公园发展服务中心济南动物园工作部山东济南250100 秦皇岛高通生物科技有限公司河北昌黎066600 昌黎县动物防疫监督站城关分站河北昌黎066600

为了明确桦褐孔菌发酵产物(Inonotus obliquus fermentation product,IOFP)作为禽类疫苗佐剂的适用性,选择商品化禽流感灭活疫苗和鸭坦布苏病毒弱毒活疫苗分别免疫SPF鸡和SPF鸭,并饲喂含0.8%IOFP的饲粮,同时设置饲喂商品化饲粮的对照组... 详细信息

为了明确桦褐孔菌发酵产物(Inonotus obliquus fermentation product,IOFP)作为禽类疫苗佐剂的适用性,选择商品化禽流感灭活疫苗和鸭坦布苏病毒弱毒活疫苗分别免疫SPF鸡和SPF鸭,并饲喂含0.8%IOFP的饲粮,同时设置饲喂商品化饲粮的对照组。在免疫后不同时间点采集鸡和鸭的外周血,分离血清后分别测定禽流感病毒(avian influenza virus,AIV)特异性血凝抑制(hemagglutinin inhibition,HI)抗体、鸭坦布苏病毒(duck Tembusu virus,DTMUV)特异性抗体及二者中和抗体效价。使用统计学方法评价IOFP对机体体液免疫反应的影响。鸭免疫后28 d使用DTMUV强毒株攻毒,持续检测泄殖腔排毒量,以确定IOFP对DTMUV排毒量的影响。结果显示,IOFP作为口服佐剂能够显著提升AIV、DTMUV疫苗抗体和中和抗体水平,特别是对免疫早期抗体的改善效果尤为显著。此外,添加IOFP还能够减少DTMUV的排毒量,缩短排毒时间。由此可见,IOFP是一种禽类病毒性疫苗普遍适用的口服佐剂,对于缩短免疫“空窗期”、提升疫苗保护效果具有较好的改善作用。

关键词：桦褐孔菌发酵产物禽流感病毒灭活疫苗鸭坦布苏病毒弱毒活疫苗抗体中和抗体

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小反刍兽疫病毒诱导巨噬细胞产生炎症反应

生物技术 2024年第1期34卷 76-84,119页

作者：李玲霞韩生义李淑萍尚佑军李生庆青海大学农牧学院青海西宁810016 青海大学畜牧兽医科学院青海省动物疫病病原诊断与绿色防控技术研究重点实验室青海西宁810016 中国农业科学院兰州兽医研究所甘肃兰州730046

[目的]探究小反刍兽疫病毒(Peste des petits ruminants virus,PPRV)感染引起的炎症反应并解析其致病机制。[方法]分离山羊肺泡巨噬细胞(PAM),利用qRT-PCR、ELISA及组织病理切片HE染色等方法分别检测PPRV感染后引起的炎性细胞因子表达... 详细信息

[目的]探究小反刍兽疫病毒(Peste des petits ruminants virus,PPRV)感染引起的炎症反应并解析其致病机制。[方法]分离山羊肺泡巨噬细胞(PAM),利用qRT-PCR、ELISA及组织病理切片HE染色等方法分别检测PPRV感染后引起的炎性细胞因子表达、一氧化氮(NO)含量和炎性细胞侵润等现象。进一步利用转录组学测序分析PPRV感染PAM引起的差异基因、信号通路以及差异基因的表达情况。[结果]与正常山羊相比,感染PPRV的山羊其肝脏、肾脏及肺脏的部分细胞坏死并且呈现炎性细胞侵润的现象;与对照组相比,感染后的PAM细胞显著增加了NO含量(P<0.001);与未感染组相比,PPRV感染的PAM其炎性细胞因子IL-1β、TNF-α、IL-10等mRNA表达水平显著升高(P<0.05);此外,PPRV感染诱导的差异基因主要集中在炎症通路及NF-κB信号通路等。[结论]PPRV通过诱导大量炎性细胞侵润、增加炎性细胞因子表达,激活炎症信号通路从而产生炎症反应。

关键词：小反刍兽疫病毒感染巨噬细胞炎症反应信号通路天然免疫发病机制