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灵芝孢子中三萜类成分UPLC-Q-TOF-MS/MS定性分析和HPLC含量测定研究

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中国中药杂志 2024年

作者：乔灵芝卢晨娜刘晓谦陈两绵冯伟红梁曜华李春王智民天津中医药大学中国中医科学院中药研究所中药质量控制技术国家工程实验室

灵芝孢子为多孔菌科真菌赤芝Ganoderma lucidum或紫芝G. sinense的干燥成熟孢子，在提高免疫力、抗肿瘤、抗氧化等多方面有较强的生理活性，三萜是其活性成分之一，但目前没有可靠的含量测定方法。因此，该研究采用UPLC-Q-TOF-MS/MS定... 详细信息

灵芝孢子为多孔菌科真菌赤芝Ganoderma lucidum或紫芝G. sinense的干燥成熟孢子，在提高免疫力、抗肿瘤、抗氧化等多方面有较强的生理活性，三萜是其活性成分之一，但目前没有可靠的含量测定方法。因此，该研究采用UPLC-Q-TOF-MS/MS定性分析灵芝孢子中的三萜类成分，并建立了同步测定灵芝孢子中5种三萜类成分含量的HPLC方法。在负离子模式下，通过与对照品保留时间、紫外光谱、裂解碎片比对，从灵芝孢子中确认了9种三萜类成分，分别是灵芝酸I、灵芝烯酸C、灵芝酸C2、灵芝酸C6、灵芝酸G、灵芝烯酸B、灵芝酸B、灵芝酸A、灵芝酸H；通过与文献比较，从灵芝孢子中推测了3种三萜成分，分别为赤芝酸E、（Z）-6-[（3S，5R，7S，10S，12S，13R，14R，17R）-12-乙酰氧基-3，7-二羟基-4，4，10，13，14-五甲基-11，15-二氧代-2，3，4，5，6，7，10，11，12，13，14，15，16，17-十四氢-1H-环戊烯并[α]菲-17-基]-2-甲基-4-氧代庚-5-烯酸和ganoderin A。以Ultimate HPLC XS-C18色谱柱（4.6 mm×250 mm， 5 μm）为固定相，乙腈-0.072%磷酸水为流动相，梯度洗脱，流速1.2 mL·min-1，检测波长257 nm，柱温40 ℃，该条件下5种三萜类成分可实现同步定量测定，方法学考察结果符合含量测定要求。灵芝烯酸C、灵芝酸C2、灵芝酸C6、灵芝烯酸B和灵芝酸H这5种成分分别在0.93～16.08、3.44～23.88、4.28～59.40、1.40～16.16、3.53～61.20 μg·mL-1呈良好的线性关系(R2＞0.999)，平均回收率在79.53%～93.60%，RSD在4.7%～7.6%。15批不同产地的灵芝孢子原粉和4批不同产地破壁灵芝孢子中5种三萜类成分的含量差别较大，15批不同产地原粉的5种成分总量在0.44～16.25 μg·g-1；4批不同产地的破壁灵芝孢子三萜总量在0.52～3.57 μg·g-1。该文建立的新方法操作简便、结果可靠，可以用于灵芝孢子中三萜类成分的准确测定，为灵芝孢子的质量评价提供了方法依据。

关键词：灵芝孢子三萜定性分析含量测定

祛湿活血方作用非酒精性脂肪肝肝细胞转录组分析及验证

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中国中西医结合杂志 2024年第2期44卷 208-215页

作者：庞华珍李辉刘旭东赵晓芳唐艳芳广西中医药大学附属瑞康医院肝病科南宁530011 广西大学动物科学技术学院南宁530004

目的获取和发掘祛湿活血方作用于非酒精性脂肪肝(NAFLD)肝细胞后的转录组数据库和肝细胞炎症环境相关细胞焦亡差异表达基因。方法研究用棕榈酸诱导的人肝细胞系L-02建立NAFLD的细胞模型,采用去除核糖体RNA的转录组测序法(Ribo-Zero RNA-... 详细信息

目的获取和发掘祛湿活血方作用于非酒精性脂肪肝(NAFLD)肝细胞后的转录组数据库和肝细胞炎症环境相关细胞焦亡差异表达基因。方法研究用棕榈酸诱导的人肝细胞系L-02建立NAFLD的细胞模型,采用去除核糖体RNA的转录组测序法(Ribo-Zero RNA-Seq)对中药祛湿活血方处理的L-02细胞模型进行转录组测序,并进行系统的生物信息学分析,筛选出与炎症环境相关细胞焦亡的差异表达基因。然后通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术和蛋白免疫印迹(Western Blot)验证核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)及其诱导的肝细胞焦亡相关分子的表达。结果本次测序分析共获得3000多个显著性差异表达的基因,其中差异基因的数量在空白处理组/祛湿活血方组最多,1435个上调,658个下调。差异表达基因主要富集在炎症信号、细胞命运和脂肪代谢等相关通路,NLRP3、消皮素D(GSDMD)和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1(Caspase-1)等焦亡相关基因被筛选出。qRT-PCR、Western Blot等验证结果表明,祛湿活血方处理肝细胞可以降低以上分子在基因和蛋白水平的表达。结论祛湿活血方可调控炎症相关焦亡信号分子NLRP3、GSDMD和Caspase-1基因及蛋白的表达,从而降低炎症反应,抑制肝细胞焦亡,这可能是祛湿活血方治疗NAFLD的一个有效靶点。

关键词：祛湿活血方转录组测序肝细胞非酒精性脂肪肝差异表达基因中药复方

LC-MS结合网络药理学探讨炙甘草汤抗快速性心律失常机制研究

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医师在线 2024年第4期14卷 3-9页

作者：朱雪周承志湖北中医药大学第一临床学院武汉430000 湖北省中医院湖北中医药大学附属医院湖北省中医药研究院武汉430000

目的采用液相色谱-质谱联用技术(LC-MS)鉴定炙甘草汤化学成分,并结合网络药理学分析探讨炙甘草汤抗快速性心律失常的作用机制.方法应用LC-MS获取炙甘草汤化学成分,利用中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)、SwissTargetPrediction... 详细信息

目的采用液相色谱-质谱联用技术(LC-MS)鉴定炙甘草汤化学成分,并结合网络药理学分析探讨炙甘草汤抗快速性心律失常的作用机制.方法应用LC-MS获取炙甘草汤化学成分,利用中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)、SwissTargetPrediction、PubChem、PharmMapper等数据库及文献筛选有效成分并预测靶点,使用GeneCards、OMIM、PharmGKB等数据库获取成分靶点,取交集得到潜在治疗靶点,并通过String数据库、Cytoscape 3.7.1软件、Metascape数据库完成蛋白相互作用(PPI)网络绘制、KEGG通路富集分析及GO功能分析,并构建药物-活性成分-潜在靶点-疾病网络图等.结果 LC-MS共检测出601个成分,筛选后获得有效成分305个,得到潜在治疗靶点240个,进一步筛选出左旋千金藤啶碱、光甘草定等5个关键成分和17个关键靶点基因,KEGG富集分析结果显示信号通路主要涉及钙离子、cAMP、MAPK信号通路等.结论炙甘草汤抗快速性心律失常具有多成分、多靶点、多通路的特点,通过干预调节离子通道、抗炎症反应及内皮损伤、抗氧化应激过程等多方面发挥作用.

关键词： LC-MS 炙甘草汤心律失常离子通道网络药理学

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药用植物学课程思政的教学设计与实践研究

才智 2024年第6期 161-164页

作者：张涛齐伟辰李晶峰长春中医药大学药学院

药用植物学是中药学专业的一门专业基础课程，药用植物与中药不仅与人类健康密切相关，而且是人与自然及社会文化连接的纽带。为全面提高中药学人才培养质量，培育医学人文精神和职业道德，落实立德树人教育目标。本文对药用植物学进行... 详细信息

药用植物学是中药学专业的一门专业基础课程，药用植物与中药不仅与人类健康密切相关，而且是人与自然及社会文化连接的纽带。为全面提高中药学人才培养质量，培育医学人文精神和职业道德，落实立德树人教育目标。本文对药用植物学进行课程思政的教学设计和实践研究，从课程分析、教学目标和教学设计和实践几个方面进行探究，在药用植物学教学中融入课程思政，利用本草文化、传统中医药文化挖掘思政元素，通过教材、课堂、实践教学深化内涵，开设系列选修课程拓展外延，探索思政教育与专业课程相融合的路径，为培育优秀的中医药人才奠定理论基础。

关键词：课程思政药用植物学本草文化传统中医药文化

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生物制剂在甲状腺相关眼病中的研究进展

国际眼科杂志 2024年第5期24卷 772-777页

作者：赵静晓王萍蒋敏敏燕树勋河南中医药大学第一临床医学院河南省郑州市450000 河南中医药大学第一附属医院内分泌科河南省郑州市450000

甲状腺相关眼病(TAO)是一种罕见的器官特异性自身免疫性疾病,发病机制尚未明确。目前治疗仍主要依赖糖皮质激素和传统免疫抑制剂,部分患者对这些药物反应不佳,同时存在治疗相关不良反应,因此迫切需要治疗TAO的新型药物。近年来,随着对TA... 详细信息

甲状腺相关眼病(TAO)是一种罕见的器官特异性自身免疫性疾病,发病机制尚未明确。目前治疗仍主要依赖糖皮质激素和传统免疫抑制剂,部分患者对这些药物反应不佳,同时存在治疗相关不良反应,因此迫切需要治疗TAO的新型药物。近年来,随着对TAO发病机制研究的不断深入,针对特定靶点研发的生物制剂层出不穷,其中靶向胰岛素样生长因子-Ⅰ受体(IGF-IR)的替妥木单抗已被美国食品和药物管理局批准用于治疗TAO,还有多种生物制剂处于临床试验阶段。本文通过总结针对IGF-IR、新生儿Fc受体(FcRn)、促甲状腺激素受体(TSHR)、B细胞、细胞因子等的生物制剂在TAO中的临床研究现状,分析其对临床治疗及未来研究趋势的影响,为TAO临床防治和研究提供最新参考。

关键词：甲状腺相关眼病生物制剂单克隆抗体靶向治疗药物治疗

鬼针草的化学成分鉴定及其体外抗胃癌细胞增殖活性分析

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中国实验方剂学杂志 2024年

作者：韩玉刘畅刘娇张涛邹忠梅沈阳药科大学中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所河南中医药大学

目的：研究鬼针草Bidens pilosa的化学成分。方法：采用硅胶柱色谱、制备薄层色谱、中压色谱分离凝胶(MCI)柱色谱、中压制备色谱、半制备高效液相色谱色谱(HPLC)及重结晶等方法进行分离纯化，结合理化性质、紫外光谱(UV)、红外光谱(IR)... 详细信息

目的：研究鬼针草Bidens pilosa的化学成分。方法：采用硅胶柱色谱、制备薄层色谱、中压色谱分离凝胶(MCI)柱色谱、中压制备色谱、半制备高效液相色谱色谱(HPLC)及重结晶等方法进行分离纯化，结合理化性质、紫外光谱(UV)、红外光谱(IR)、质谱(MS)、核磁共振波谱(NMR)和圆二色谱(CD)等鉴定所得化合物的结构。采用噻唑蓝(MTT)法测定部分化合物对胃癌SGC-7901细胞的体外抑制活性，并通过分子对接技术预测化合物17和18发挥其抗胃癌作用的潜在靶点。结果：从鬼针草石油醚部位分离得到25个化合物，分别鉴定为鬼针草木脂素A(1)、5α，8α-过氧麦角甾-6，22-二烯-3β-醇(2)、3β-羟基豆甾-5-烯-7-酮(3)、(20R)-6β-羟基豆甾-4，22-二烯-3-酮(4)、5，22-二烯-7-酮-3β-羟基豆甾烷(5)、豆甾-7，22-二烯-3β，5α，6β-三醇(6)、豆甾-5-烯-3β，7α-二醇(7)、豆甾-5，22-二烯-3β，7α-二醇(8)、7β-羟基谷甾醇(9)、豆甾醇(10)、鹰爪花醇(11)、秋英酸(12)、4(15)-桉烯-1β，6α-二醇(13)、clovandiol(14)、3-吲哚甲醛(15)、6，7-二甲氧基香豆素(16)、3’，4’-二甲氧基槲皮素(17)、8，8’-bis-(dihydroconiferyl)-diferuloylate(18)、hydroxydihydrobovolide(19)、2-去乙酰基-11β，13-二氢苍耳亭(20)、黑麦草内酯(21)、豨莶酮(22)、(+)-去氢催吐萝芙木醇(23)、单棕榈酸甘油(24)和正十六烷酸(25)。化合物17和18对人胃癌SGC-7901细胞具有较好的体外增殖抑制活性，的半数抑制浓度(IC50)分别为3.11 μmol·L-1和7.22 μmol·L-1。分子对接结果显示，二者发挥抗胃癌活性的潜在作用靶点可能为血管内皮细胞生长因子受体2(VEGFR2)和聚二磷酸腺苷-核糖聚合酶7(PARP7)。结论：从鬼针草中分离所得化合物1为新化合物，化合物3～9、11～12、18～20、22～23为首次从鬼针草属植物中分离得到，化合物13和14为首次从该植物中分离得到，其中化合物17、18具有体外抗胃癌细胞增殖活性，靶点可能为VEGFR2和PARP7。

关键词：鬼针草化学成分分离鉴定胃癌分子对接

基于“伏邪”理论探讨阵发性心房颤动的病机与诊疗思路

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北京中医药 2024年第3期43卷 299-304页

作者：贾博超胡元会杜宜航成涛薛文静北京中医药大学研究生院北京100029 中国中医科学院广安门医院心血管科北京100053

阵发性心房颤动(简称“阵发性房颤”)是最常见的心律失常之一,临床实践发现伏邪“时空动态”“隐匿”“自我积聚”“潜证导向”的致病特点与阵发性房颤的发病特点一致,从伏邪角度出发,认为“正气不足,外邪内伏”“脏腑失调,伏邪内生”... 详细信息

阵发性心房颤动(简称“阵发性房颤”)是最常见的心律失常之一,临床实践发现伏邪“时空动态”“隐匿”“自我积聚”“潜证导向”的致病特点与阵发性房颤的发病特点一致,从伏邪角度出发,认为“正气不足,外邪内伏”“脏腑失调,伏邪内生”“伏邪兼夹,交互融合”“内外相引,充实积聚”是阵发性房颤的核心病机;基于伏邪致病观提出“调和营卫”“引透相合”“应用虫药”“分消伏毒”的治疗方法,临床灵活运用,为阵发性房颤的治疗提供新思路。

关键词：伏邪阵发性心房颤动病机诊疗思路

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针刺辨经论治动眼神经麻痹理论探析

甘肃中医药大学学报 2024年第04期 22-26页

作者：曾祥隽孔立红徐子金湖北中医药大学针灸骨伤学院

根据不同病因引起的各类临床症状，结合与目相关的经络循行、穴位特性以及脏腑功能关系进行辨证归经，将动眼神经麻痹分为肝胆经病证、心经病证、脾胃经病证、肾经病证等4种不同的证型，再根据古代相关经络文献与临床针刺取穴规律进行... 详细信息

根据不同病因引起的各类临床症状，结合与目相关的经络循行、穴位特性以及脏腑功能关系进行辨证归经，将动眼神经麻痹分为肝胆经病证、心经病证、脾胃经病证、肾经病证等4种不同的证型，再根据古代相关经络文献与临床针刺取穴规律进行整理研究，辨经取穴，以期为临床针刺选穴治疗动眼神经麻痹提供参考。

关键词：动眼神经麻痹针刺辨经论治选穴

DAM三维专利信息视角下智慧健康养老技术发展态势研究

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中国发明与专利 2024年第7期21卷 31-37,73页

作者：朱秀媛王军永南京中医药大学养老服务与管理学院南京210023 江西中医药大学中医药与大健康发展研究院南昌330004

在积极应对人口老龄化的背景下,智慧健康养老已成为时代发展的潮流,研究智慧健康养老技术发展态势,有助于把握我国智慧健康养老技术生命周期、潜在发展方向和存在不足。本文以incoPat专利数据库为数据来源,运用S曲线数学模型法和技术功... 详细信息

在积极应对人口老龄化的背景下,智慧健康养老已成为时代发展的潮流,研究智慧健康养老技术发展态势,有助于把握我国智慧健康养老技术生命周期、潜在发展方向和存在不足。本文以incoPat专利数据库为数据来源,运用S曲线数学模型法和技术功效矩阵,结合DAM三维分析框架,从技术发展、专利权人构成和市场分布三个维度分析智慧健康养老技术领域专利。分析发现,我国智慧健康养老技术经历了萌芽期和成长期,仍处于成长期;技术潜在发展方向有舒适性提高、稳定性提高、速度提高和成本降低;专利存在重数量轻质量、国际专利布局不足、创新主体不足等问题,针对以上问题,提出要加速国际专利布局、推动专利高质量发展和强化企业创新的主体地位三条建议。

关键词：专利信息智慧健康养老发展态势