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艾灸联合贝那普利对慢性心力衰竭大鼠心肌内质网应激相关蛋白磷酸化表达的影响

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针刺研究 2024年第3期49卷 231-237页

作者：汪恒夏冉高兵李凌基王祝朱梦王茎安徽中医药大学针灸推拿学院合肥230038 安徽中医药大学中医学院合肥230038 新安医学重点实验室合肥230038

目的:观察艾灸“心俞”“肺俞”联合贝那普利对慢性心力衰竭(CHF)大鼠心功能及心肌组织中蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)、真核启动因子2α(eIF2α)蛋白磷酸化的影响,探讨艾灸联合贝那普利防治CHF的潜在机制。方法:采用腹腔注射盐酸多柔... 详细信息

目的:观察艾灸“心俞”“肺俞”联合贝那普利对慢性心力衰竭(CHF)大鼠心功能及心肌组织中蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)、真核启动因子2α(eIF2α)蛋白磷酸化的影响,探讨艾灸联合贝那普利防治CHF的潜在机制。方法:采用腹腔注射盐酸多柔比星复制CHF大鼠模型,将造模成功的SD大鼠随机分为模型组、艾灸组、药物组、艾药组,并设立空白组,每组10只。艾灸组予以艾条温和灸双侧“心俞”“肺俞”,每次20 min;药物组予以贝那普利(0.86 mg/kg)灌胃治疗;艾药组艾灸上述穴位同时予以贝那普利灌胃治疗。各组均每日治疗1次,连续干预3周。超声心动图检测大鼠心脏射血分数(EF)、左室内径缩短率(FS);HE染色法观察心肌组织病理变化;ELISA法检测大鼠血清B型脑钠肽(BNP)和血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)含量;Western blot法检测大鼠心肌组织磷酸化(p)-PERK、p-eIF2α的表达水平。结果:与空白组比较,模型组大鼠EF、FS降低(P<0.01);血清BNP和AngⅡ含量升高(P<0.01);p-PERK、p-eIF2α蛋白表达水平升高(P<0.01);镜下可见心肌细胞排列紊乱,出现不同程度的细胞肿胀、空泡、炎性浸润等改变。与模型组比较,艾灸组、药物组及艾药组大鼠EF、FS升高(P<0.01);血清BNP和AngⅡ含量降低(P<0.01);p-PERK、p-eIF2α蛋白表达水平降低(P<0.01);镜下可见治疗后各组大鼠心肌细胞损伤减轻。艾药联合治疗效果优于艾灸组和药物组。结论:艾灸联合贝那普利能够改善CHF,其机制与降低心肌p-PERK、p-eIF2α的蛋白表达水平,抑制心肌内质网应激反应相关。

关键词：艾灸慢性心力衰竭心功能内质网应激

痰瘀同治调控NOX2/p47phox/LOX通路减轻氧化应激改善糖尿病大鼠心肌纤维化

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中国中西医结合杂志 2024年第10期 1228-1234页

作者：李飞翔储全根喻锦储俊安徽中医药大学中医学院安徽中医药大学新安医学教育部重点实验室

目的观察痰瘀同治对糖尿病大鼠心肌还原性烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶2(NOX2)/p47phox/赖氨酰氧化酶（LOX）通路的干预作用，探究其通过减轻氧化应激反应，改善糖尿病大鼠心肌纤维化病变的相关机制。方法选取健康雄性SD大鼠60只... 详细信息

目的观察痰瘀同治对糖尿病大鼠心肌还原性烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶2(NOX2)/p47phox/赖氨酰氧化酶（LOX）通路的干预作用，探究其通过减轻氧化应激反应，改善糖尿病大鼠心肌纤维化病变的相关机制。方法选取健康雄性SD大鼠60只，随机分为：正常组、化痰组、化瘀组、痰瘀同治组、阿拉氯胺组和模型组，每组10只。单次腹腔注射链脲佐菌素（STZ）溶液55 mg/kg建立糖尿病模型，正常喂养3周后，化痰组、化瘀组、痰瘀同治组每日分别予小陷胸汤[4.05 g/（kg·d）]、血府逐瘀汤[7.02 g/（kg·d）]、抵当陷胸汤[8.10 g/（kg·d）]灌胃，阿拉氯胺组每日予阿拉氯胺[3 mg/（kg·d）]灌胃，连续给药8周后麻醉取材。HE及Masson染色观察大鼠心肌组织病理形态变化；免疫组化法检测大鼠心肌组织锰超氧化物歧化酶（MnSOD）表达水平；实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测大鼠心肌组织NOX2、p47phox及LOX的mRNA表达水平；Western Blot法检测大鼠心肌组织NOX2、p47phox及LOX蛋白表达水平。结果与正常组比较，模型组大鼠心肌纤维排列紊乱，部分断裂，胶原纤维增生，分布不均匀；MnSOD表达显著降低（P<0.01）,NOX2、p47phox及LOX蛋白和mRNA表达水平显著升高（P<0.01）。与模型组比较，各用药组大鼠心肌组织病理损害明显改善，心肌纤维排列较为整齐，胶原纤维增生程度减轻；MnSOD表达明显增强（P<0.05,P<0.01）,NOX2、p47phox及LOX蛋白和m RNA表达水平均不同程度下降（P<0.05,P<0.01）。组间比较发现，痰瘀同治组较化瘀组和化痰组心肌组织病理损害改善效果更佳，MnSOD表达水平增强更明显（P<0.01）,NOX2、p47phox及LOX蛋白和mRNA表达水平较化瘀组和化痰组下降更明显（P<0.05,P<0.01）。结论痰瘀同治法能够减轻糖尿病大鼠心肌组织氧化应激反应，改善心肌纤维化，且效果优于单独使用化痰或化瘀之法，其机制可能与调控NOX2/p47phox/LOX信号通路有关。

关键词：糖尿病心肌病变痰瘀同治氧化应激反应心肌纤维化中药复方

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苓桂术甘汤对心肌梗死后小鼠心肌纤维化及Lats1/Yap信号通路的影响

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中国中药杂志 2024年第17期49卷 4702-4710页

作者：徐少华王舒舒任涵赵婉竹周鹏王靓黄金玲安徽中医药大学中医学院安徽合肥230012 安徽中医药大学中西医结合学院安徽合肥230012 中药复方安徽省重点实验室安徽合肥230012

观察苓桂术甘汤对心肌梗死(MI)后小鼠心肌纤维化(MF)及心肌组织大肿瘤抑制激酶1(Lats1)/Yes相关蛋白(Yap)信号通路的影响,探讨其抑制MF的作用和机制。采用冠状动脉左前降支结扎法构建MI后小鼠缺血模型,造模24 h后,连续干预6周。采用小... 详细信息

观察苓桂术甘汤对心肌梗死(MI)后小鼠心肌纤维化(MF)及心肌组织大肿瘤抑制激酶1(Lats1)/Yes相关蛋白(Yap)信号通路的影响,探讨其抑制MF的作用和机制。采用冠状动脉左前降支结扎法构建MI后小鼠缺血模型,造模24 h后,连续干预6周。采用小动物超声成像系统检测小鼠左室射血分数(LVEF)、左室短轴缩短率(LVFS)、左室收缩末期内径(LVIDs)、左室舒张末期内径(LVIDd);采用HE及Masson染色观察小鼠心肌组织病理学变化;采用ELISA法检测小鼠血清肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)、乳酸脱氢酶(LDH)水平;采用RT-qPCR法检测小鼠心肌组织Lats1、Yap、结缔组织生长因子(CTGF)mRNA水平;采用Western blot法检测小鼠心肌组织α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、胶原蛋白Ⅰ(ColⅠ)、胶原蛋白Ⅲ(ColⅢ)、基质金属蛋白酶抑制剂1(TIMP1)、基质金属蛋白酶2(MMP2)、Lats1、Yap、磷酸化Yap(phosphorylation-Yap,p-Yap)、细胞核Yap(n-Yap)蛋白表达。与假手术组比较,模型组小鼠LVEF、LVFS水平显著降低,LVIDd、LVIDs水平显著升高(P<0.01);心肌细胞排列紊乱,心肌纤维部分断裂及胶原纤维大量沉积;小鼠血清CK-MB、LDH水平显著升高(P<0.01);心肌组织Lats1 mRNA水平显著降低(P<0.01),Yap、CTGF mRNA水平显著升高(P<0.01);心肌组织α-SMA、ColⅠ、ColⅢ、MMP2、Yap、n-Yap蛋白表达显著升高(P<0.01),Lats1、TIMP1、p-Yap蛋白表达及p-Yap/Yap比值显著降低(P<0.01)。与模型组比较,经高剂量苓桂术甘汤干预后,小鼠LVEF、LVFS水平显著升高,LVIDd、LVIDs水平显著降低(P<0.01);心肌细胞排列较整齐,心肌纤维断裂及胶原纤维沉积明显减少;小鼠血清CK-MB、LDH水平显著降低(P<0.01);心肌组织Lats1 mRNA水平显著升高(P<0.01),Yap、CTGF mRNA水平显著降低(P<0.01);心肌组织α-SMA、ColⅠ、ColⅢ、MMP2、Yap、n-Yap蛋白表达显著降低(P<0.01),Lats1、TIMP1、p-Yap蛋白表达及p-Yap/Yap比值显著升高(P<0.01)。苓桂术甘汤能够抑制MI后模型小鼠MF,改善小鼠心功能,此作用与其激活Lats1/Yap信号通路密切相关。

关键词：苓桂术甘汤心肌梗死心肌纤维化 Lats1/Yap信号通路

抵当汤含药血清对高糖诱导大鼠肾小球内皮细胞损伤的影响

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中成药 2024年第9期46卷 2930-2935页

作者：罗宝璐储全根储俊李飞翔陈静王悦琦安徽中医药大学中医学院安徽合肥230012 安徽中医药大学新安医学教育部重点实验室安徽合肥230012

目的观察抵当汤含药血清对高糖诱导损伤大鼠肾小球内皮细胞(RGECs)的保护作用。方法大鼠灌胃给予蒸馏水或抵当汤制备空白血清或抵当汤含药血清,CCK8法筛选葡萄糖造模浓度及含药血清给药浓度。将RGECs分为空白组、模型组、抵当汤组(10%... 详细信息

目的观察抵当汤含药血清对高糖诱导损伤大鼠肾小球内皮细胞(RGECs)的保护作用。方法大鼠灌胃给予蒸馏水或抵当汤制备空白血清或抵当汤含药血清,CCK8法筛选葡萄糖造模浓度及含药血清给药浓度。将RGECs分为空白组、模型组、抵当汤组(10%抵当汤含药血清)、达格列净组(空白血清+2μmol/L达格列净)、抵当汤+达格列净组(10%抵当汤含药血清+2μmol/L达格列净),药物处理24 h后,RT-qPCR法和Western blot法检测细胞Nrf2、HO-1、NQO-1 mRNA和蛋白表达,免疫荧光法检测细胞Nrf2荧光表达,比色法检测细胞SOD活性及MDA水平。结果与空白组比较,模型组RGECs中Nrf2、HO-1、NQO-1 mRNA和蛋白表达以及SOD活性降低(P<0.01),MDA水平升高(P<0.01);与模型组比较,各给药组Nrf2、HO-1、NQO-1 mRNA和蛋白表达以及SOD活性升高(P<0.05,P<0.01),MDA水平降低(P<0.01)。结论抵当汤含药血清可以通过激活Nrf2信号通路从而抑制氧化应激,对高糖损伤的RGECs起到保护作用。

关键词：抵当汤大鼠肾小球内皮细胞(RGECs) 糖尿病肾病 Nrf2信号通路氧化应激

抵当陷胸汤调控PI3K/Akt信号通路对糖尿病大鼠足细胞凋亡的影响

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中国实验方剂学杂志 2024年第12期30卷 62-69页

作者：张可敬王悦琦储全根储俊安徽中医药大学中医学院新安医学教育部重点实验室合肥230038 安徽中医药大学新安医学与中医药现代化研究所合肥230012

目的:观察抵当陷胸汤对糖尿病大鼠肾脏的保护作用及其对磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)信号通路的调控作用与对足细胞凋亡的影响,探讨抵当陷胸汤改善糖尿病肾病的机制。方法:采用单次腹腔注射链脲佐菌素(STZ)溶液55 mg·kg^(-1... 详细信息

目的:观察抵当陷胸汤对糖尿病大鼠肾脏的保护作用及其对磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)信号通路的调控作用与对足细胞凋亡的影响,探讨抵当陷胸汤改善糖尿病肾病的机制。方法:采用单次腹腔注射链脲佐菌素(STZ)溶液55 mg·kg^(-1)的方法建立糖尿病模型,将模型复制成功的30只随机分为模型组、抵当陷胸汤组(8.10 g·kg^(-1))、小陷胸汤组(4.05 g·kg^(-1))、抵当汤组(4.05 g·kg^(-1))、阿拉氯胺(ALT-711)组(3 mg·kg^(-1)),每组6只,另设6只空白组大鼠。连续给药8周后,采用苏木素-伊红(HE)染色观察大鼠肾脏组织病理形态变化;马松(Masson)染色观察胶原沉积程度;高碘酸-席夫(PAS)染色观察基底膜病变;免疫组化法检测大鼠肾组织磷酸化(p)-PI3K、p-Akt蛋白表达;原位末端标记法(TUNEL)检测大鼠足细胞凋亡;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测大鼠肾组织PI3K、Akt mRNA表达情况;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测肾组织中PI3K、p-PI3K、Akt、p-Akt、B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、磷酸化糖原合成酶激酶-3β(p-GSK-3β)、胱天蛋白酶-3(Caspase-3)的蛋白表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠肾小球代偿性膨胀,系膜细胞增殖,系膜间质大量胶原沉积,基底膜增厚,PI3K、Akt mRNA表达减少,PI3K、Akt蛋白磷酸化显著受到抑制(P<0.01),足细胞凋亡率显著升高(P<0.01),抗凋亡蛋白Bcl-2表达显著降低(P<0.01),Bax、p-GSK-3β、Caspase-3表达显著升高(P<0.01);与模型组比较,抵当陷胸汤组肾脏组织病理明显改善,PI3K、Akt mRNA表达显著升高(P<0.01),PI3K、Akt蛋白磷酸化水平显著升高(P<0.01),Bcl-2表达显著升高(P<0.01),Bax、p-GSK-3β、Caspase-3表达显著降低(P<0.01),足细胞凋亡率显著降低(P<0.01)。结论:抵当陷胸汤可能通过促进PI3K/Akt信号通路活化,抑制足细胞凋亡,减缓糖尿病肾病的发展进程。

关键词：糖尿病肾脏病变抵当陷胸汤痰瘀同治磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)通路足细胞凋亡

艾灸对慢性心力衰竭大鼠PTEN/mTOR信号通路和心肌纤维化的影响

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北京中医药大学学报 2024年第4期47卷 562-569页

作者：宫甜甜高兵朱玲李澜纵艳平胡婧王茎安徽中医药大学针灸推拿学院合肥230031 安徽中医药大学中医学院安徽中医药大学新安医学教育部重点实验室新安医学与中医药现代化研究所

目的观察艾灸对慢性心力衰竭(CHF)大鼠心肌病理形态、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源蛋白(PTEN)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路的影响,探讨艾灸减轻CHF大鼠心肌纤维化的可能机制。方法60... 详细信息

目的观察艾灸对慢性心力衰竭(CHF)大鼠心肌病理形态、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源蛋白(PTEN)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路的影响,探讨艾灸减轻CHF大鼠心肌纤维化的可能机制。方法60只雄性SD大鼠按随机数字表法分为正常组(10只)和手术组(50只),手术组结扎大鼠左冠状动脉复制CHF模型。40只造模成功的大鼠按随机数字表法分为模型组、艾灸组、bpV(phen)组、艾灸+bpV(phen)组,每组10只。正常组、模型组不给予任何干预;艾灸组用定制艾条悬灸大鼠背部双侧“肺俞”“心俞”,每穴30 min,每日1次;bpV(phen)组腹腔注射bpV(phen)溶液(0.15 mg/kg),每周2次;艾灸+bpV(phen)组在bpV(phen)组的基础上,按艾灸组操作。干预4周。观察大鼠摄食、活动等一般情况;HE染色观察心肌细胞形态学变化;Masson染色观察心肌纤维化情况;超声心动检测射血分数(EF)、缩短分数(FS);实时荧光PCR法检测心肌组织PTEN、mTOR mRNA表达;蛋白质印迹法检测心肌组织PTEN、mTOR、α-SMA蛋白表达。结果与正常组比较,模型组大鼠心肌细胞形态改变,心肌纤维结构严重损伤,EF、FS,以及mTOR mRNA和蛋白表达明显降低,PTEN、α-SMA蛋白表达及PTEN mRNA表达明显升高(P<0.05)。与模型组比较,艾灸组、bpV(phen)组、艾灸+bpV(phen)组心肌超微结构损伤减轻,EF、FS,以及mTOR mRNA和蛋白表达明显升高,α-SMA蛋白表达明显降低,PTEN mRNA和蛋白表达明显降低(P<0.05)。与艾灸+bpV(phen)组比较,艾灸组、bpV(phen)组心肌超微结构损伤较重,EF、FS,以及mTOR mRNA和蛋白表达明显降低,α-SMA蛋白表达明显升高,PTEN mRNA和蛋白表达明显升高(P<0.05)。结论艾灸可以改善CHF大鼠心肌细胞病理形态和功能,减轻心肌纤维化,其机制可能与下调PTEN表达、进而上调mTOR表达有关。

关键词：艾灸慢性心力衰竭第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源蛋白/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白信号通路心肌纤维化大鼠

论“尊重教育”视域下康复护理学课程思政的教学改革

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中国基层医药 2024年第7期31卷 1090-1092页

作者：朱宇吴月红李白坤安徽中医药大学护理学院合肥230012 安徽中医药大学中医学院合肥230012

在专业课教学中开展"课程思政"是当前高校立德育人教学的新理念、新模式, 在培养学生专业知识和技能时, 将思政德育融入课程教学的各个环节是实施护理专业课程思政的精髓。"尊重教育"常被作为德育教育内容进行课堂教学, 然而鲜有在护理... 详细信息

在专业课教学中开展"课程思政"是当前高校立德育人教学的新理念、新模式, 在培养学生专业知识和技能时, 将思政德育融入课程教学的各个环节是实施护理专业课程思政的精髓。"尊重教育"常被作为德育教育内容进行课堂教学, 然而鲜有在护理学专业课程教学中的报道。本研究从"课程思政"与"尊重教育"的内涵、主要内容、关联以及如何基于"尊重教育"开展康复护理学课程思政的教学改革进行阐述, 以期以课程为依托培育和践行社会主义核心价值观, 培养高质量的护理人才。

关键词：教育,护理康复护理课程护理人员教学职业

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闵道扬生平及其医著考

中华医史杂志 2024年第4期54卷 248-253页

作者：王帅虎陆翔安徽中医药大学中医学院合肥安徽中医药大学新安医学教育部重点实验室合肥

闵道扬是新安医家, 字汝孝, 号守泉, 又号守泉山人, 徽州府歙县人, 主要活动于明嘉靖至万历年间。闵道扬编撰的医著有《医指如宜方脉》《全婴要览》《医学集要》《伤寒纂录》《医学汇纂》《女科便览》《药方歌括》《医学仁术便览》等8... 详细信息

闵道扬是新安医家, 字汝孝, 号守泉, 又号守泉山人, 徽州府歙县人, 主要活动于明嘉靖至万历年间。闵道扬编撰的医著有《医指如宜方脉》《全婴要览》《医学集要》《伤寒纂录》《医学汇纂》《女科便览》《药方歌括》《医学仁术便览》等8种。今仅有《医指如宜方脉》《全婴要览》《医学集要》3种存世, 其余5种未见。《医指如宜方脉》现有明隆庆庚午四年(1570)刻本, 吴江图书馆藏有该本残本;《全婴要览》现有明隆庆壬申六年(1572)金陵刊本, 中国台湾省"中央图书馆"藏有该本全本;《医学集要》现有日本江户时期抄本, 日本国立公文书馆内阁文库藏有该本的全本。

关键词：闵道扬新安医家《医指如宜方脉》《全婴要览》《医学集要》

白头翁汤正丁醇提取物通过激活BMP信号通路治疗溃疡性结肠炎的作用机制研究

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中国中药杂志 2024年第7期49卷 1762-1773页

作者：蒋晓娟王亚东孙娟马克龙吴大强邵菁汪天明汪长中安徽中医药大学中西医结合学院安徽合肥230012 安徽省中医药科学院中西医结合研究所安徽合肥230012 安徽中医药大学中医学院安徽合肥230012

该研究旨在探讨白头翁汤正丁醇提取物(n-butanol extract of Pulsatilla Decoction,BEPD)通过激活骨形态发生蛋白(BMP)信号通路发挥对溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)的治疗作用。C57BL/6小鼠分为6组:对照组、模型组、美沙拉嗪组及... 详细信息

该研究旨在探讨白头翁汤正丁醇提取物(n-butanol extract of Pulsatilla Decoction,BEPD)通过激活骨形态发生蛋白(BMP)信号通路发挥对溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)的治疗作用。C57BL/6小鼠分为6组:对照组、模型组、美沙拉嗪组及BEPD低、中、高剂量组。除对照组外,其余各组小鼠连续7 d自由饮用3%葡聚糖硫酸钠(dextran sulfate sodium,DSS)建立UC模型,然后进行不同浓度的BEPD和美沙拉嗪灌胃治疗。记录各组小鼠体质量和疾病活动指数(disease activity index,DAI)。处死小鼠后,取结肠组织进行组织学分析,采用阿利新蓝/过碘酸雪夫(AB/PAS)染色法检测杯状细胞的数量及黏液分泌状况,免疫组化法检测结肠组织中增殖标志物ki67、活化半胱天冬酶3(cleaved caspase-3)、粘蛋白2(mucin 2,Muc2)和基质金属蛋白酶9(MMP9)的表达,免疫荧光法检测结肠组织中紧密连接蛋白的表达,酶联免疫吸附法(ELISA)检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(interleukin,IL)-1β和IL-6的水平,Western blot检测小鼠结肠组织中与BMP通路相关蛋白的表达,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测小鼠结肠杯状细胞分化相关基因表达。在体外细胞学实验中,进一步验证BEPD含药血清对脂多糖(LPS)诱导下的LS174T杯状细胞屏障功能的保护作用及其机制。结果表明,BEPD显著缓解UC小鼠的一般症状,恢复杯状细胞分化功能,促进Muc2分泌和紧密连接蛋白的表达,并抑制炎症因子的分泌,同时激活BMP信号通路。因此,该研究提示BEPD可能通过激活BMP信号通路发挥治疗UC的作用,为药物干预UC提供了新的思路。

关键词：溃疡性结肠炎白头翁汤正丁醇提取物肠黏膜屏障骨形态发生蛋白(BMP)信号通路杯状细胞