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新型冠状病毒RT-LAMP检测方法的建立

现代预防医学 2021年第1期48卷 128-134页

作者：周杨万强蔡芷荷卢勉飞杨绪伟吴清平李健顺广东环凯微生物科技有限公司广东环凯生物科技有限公司广东省微生物研究所

目的建立基于逆转录环介导恒温扩增技术(reverse transcription loop-mediated isothermal amplification,RT-LAMP)的新型冠状病毒(Severe Acute Respiratory Syndrome Coronavirus 2,SARS-CoV-2)快速检测方法。方法针对SARS-CoV-2的ORF1ab和N基因序列保守区,设计引物,优化RT-LAMP检测体系,评价其检测特异性和灵敏度。结果成功建立了检测SARS-CoV-2的可视化RT-LAMP(Visual RT-LAMP,V-RT-LAMP)和实时荧光RT-LAMP(Real-time fluorescence RT-LAMP,RF-RT-LAMP)方法,经检测人工合成靶位基因RNA样品和各种实际核酸样品,其结果均与实际结果相符;V-RT-LAMP和RF-RT-LAMP方法的最低检出限均可达到10拷贝数,与实时荧光逆转录聚合酶链反应(quantatitive Reverse Transcription Polymerase Chain Reaction,qRT-PCR)方法相一致。结论 V-RT-LAMP和RF-RT-LAMP方法其检测特异性好、灵敏度高,适用于SARS-CoV-2的快速检测。

关键词：新型冠状病毒逆转录环介导恒温扩增技术可视化实时荧光

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柑橘溃疡病菌噬菌体的分离鉴定

园艺学报 2021年第12期48卷 2349-2359页

作者：肖逍丁良丛郁徐旭凌乔欢何四龙许文建徐天舜菲吉乐科(南京)生物科技有限公司南京211100

从中国9个地区采集柑橘溃疡病样本,并通过单菌落形态,PCR特异性引物和16S rDNA测序对地毯草黄单胞菌柑橘致病变种进行分离鉴定,获得17株目标菌。以地毯草黄单胞菌柑橘致病变种标准菌株ACCC 03526为宿主菌,采用双层平板法从南京市污水样... 详细信息

从中国9个地区采集柑橘溃疡病样本,并通过单菌落形态,PCR特异性引物和16S rDNA测序对地毯草黄单胞菌柑橘致病变种进行分离鉴定,获得17株目标菌。以地毯草黄单胞菌柑橘致病变种标准菌株ACCC 03526为宿主菌,采用双层平板法从南京市污水样本中分离其噬菌体,获得1株地毯草黄单胞菌柑橘致病变种烈性噬菌体,命名为Xac-P9。通过透射电镜对噬菌体Xac-P9形态大小进行观察,结果显示Xac-P9头部直径约58 nm,属于有尾噬菌体目(Caudovirales),短尾噬菌体科(Podoviridae)。对Xac-P9的裂解谱、最佳感染复数、一步生长曲线、热稳定性、pH稳定性、紫外线敏感性及杀菌速率等生物学特性进行测定,结果表明,Xac-P9对17株来源不同的Xac菌株的裂解率为100%,裂解谱宽;最佳感染复数为0.001,此时所获噬菌体效价为6.6×109 PFU·mL^(-1);一步生长曲线表明:Xac-P9潜伏期为20 min,爆发时间为60 min,裂解量为132;Xac-P9在40~60℃条件下具有一定耐受性,在pH 3~13环境中具有活性,对紫外辐射不敏感;30 min对宿主菌ACCC 03526的杀菌率可达90%,150 min后可将宿主菌全部杀灭。

关键词：柑橘溃疡病地毯草黄单胞菌柑橘致病变种噬菌体分离鉴定生物学特性

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异丙双酚的晶体结构和晶型稳定性研究

中国新药杂志 2020年第4期29卷 376-381页

作者：肖飒郭树攀王汝涛西安力邦肇新生物科技有限公司西安710077

目的:本实验系统研究了异丙双酚存在的多晶型现象,制备获得晶型样品,并采用现代技术方法进行表征,研究数据为该药品的晶型质量控制提供科学依据。方法:采用化学的常温挥发、悬浮结晶、溶析结晶、二元溶剂结晶、熔融结晶、研磨等晶型筛... 详细信息

目的:本实验系统研究了异丙双酚存在的多晶型现象,制备获得晶型样品,并采用现代技术方法进行表征,研究数据为该药品的晶型质量控制提供科学依据。方法:采用化学的常温挥发、悬浮结晶、溶析结晶、二元溶剂结晶、熔融结晶、研磨等晶型筛查技术,筛查发现异丙双酚存在多晶型现象并制备出3种晶型样品。利用粉末X射线衍射法(powder X-ray diffraction,PXRD)、差示扫描量热法(differential scanning calorimetry,DSC)分别对3种晶型物质状态进行了表征分析;初步通过影响因素实验探讨晶型Ⅰ和Ⅱ的稳定性和晶型转变规律。结果:本研究制备获得了3种晶型物质,均为首次发现。3种晶型的PXRD图谱具有指纹性,可实现对异丙双酚的3种晶型物质的有效鉴别。结论:DSC可区分异丙双酚晶型Ⅰ,Ⅱ和Ⅲ。晶型Ⅰ为无水物,晶型Ⅱ为一水化合物,晶型Ⅲ为1,4-二氧六环溶剂化物。晶型I在高温、高湿、强光和水中稳定性最好,为优势晶型。

关键词：异丙双酚多晶型表征分析有效鉴别优势晶型

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响应面法优化酸酶结合法水解牡蛎肽工艺

食品工业科技 2019年第17期40卷 167-172页

作者：杨留明吕春霞张登科雷梦捷杨华冯群力张建芳浙江万里学院生物与环境学院浙江宁波315100 宁波博丰生物科技有限公司浙江宁波315600

以牡蛎为原料,选用酸酶结合法对其进行深度酶解,以水解度指标,通过单因素实验考察了不同种类酸溶液、酸解pH、酸解温度、酸解时间、酶添加量、酶解pH、酶解温度和酶解时间对牡蛎深度酶解的影响,采用Box-Benhnken试验对牡蛎深度酶解工艺... 详细信息

以牡蛎为原料,选用酸酶结合法对其进行深度酶解,以水解度指标,通过单因素实验考察了不同种类酸溶液、酸解pH、酸解温度、酸解时间、酶添加量、酶解pH、酶解温度和酶解时间对牡蛎深度酶解的影响,采用Box-Benhnken试验对牡蛎深度酶解工艺进行优化。结果表明:酸酶结合法水解牡蛎肽的最优工艺参数为:醋酸酸解、酸解pH4.5、酸解温度50℃、酸解5 h后,选择胰蛋白酶与风味蛋白酶(质量比为2∶1)酶解、添加量0.75 g/kg、酶解pH10、酶解时间3 h、酶解温度60℃,在此条件下可得到水解度为36.25%±0.63%的牡蛎肽。

关键词：牡蛎酸解酶解水解度工艺优化

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从肝素副产物废蛋白中提取类肝素工艺研究

现代化工 2015年第11期35卷 125-128页

作者：汤彬彩童永刚潘卫春杨志秋马青青江玲超杭州惠顺生物科技有限公司浙江杭州311500

提出了一种从肝素提取过程中产生的废蛋白中提取类肝素的工艺。以类肝素总单位数为评价指标,通过单因素实验和正交设计实验确定了吸附工艺最佳条件:温度为55℃,盐浓度为0.8 mol/L,p H为8.72。氧化工艺最佳条件为:加入双氧水的量与待氧... 详细信息

提出了一种从肝素提取过程中产生的废蛋白中提取类肝素的工艺。以类肝素总单位数为评价指标,通过单因素实验和正交设计实验确定了吸附工艺最佳条件:温度为55℃,盐浓度为0.8 mol/L,p H为8.72。氧化工艺最佳条件为:加入双氧水的量与待氧化的类肝素粗品溶液体积比为2∶100,氧化时间为6 h。与传统的处理废蛋白的方式相比,有效地增加了其经济价值。

关键词：类肝素吸附氧化单因素正交设计

基于代替数据法的心率变异信号混沌特性的识别

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生物医学工程学杂志 2009年第5期26卷 989-991,1004页

作者：刘东民山东凯赛生物科技材料有限公司济宁272073

采用代替数据法对心率变异(Heart rate variability,HRV)信号的混沌特性进行识别。首先介绍了利用一步预测误差平均绝对值(MAE)为统计量的基于代替数据法的混沌识别原理,用一个已知的混沌系统响应和一个有色噪声信号证实该算法的有效性... 详细信息

采用代替数据法对心率变异(Heart rate variability,HRV)信号的混沌特性进行识别。首先介绍了利用一步预测误差平均绝对值(MAE)为统计量的基于代替数据法的混沌识别原理,用一个已知的混沌系统响应和一个有色噪声信号证实该算法的有效性,然后对几组典型生理和病理状态的HRV进行分析,计算并比较了几个特征参数的数值变化情况。

关键词： HRV 混沌代替数据法

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病例报告表设计的要点

药学学报 2015年第11期50卷 1452-1455页

作者：付海军骆晓霞上海凯锐斯生物科技有限公司上海201199

病例报告表(CRF)是临床试验收集数据的主要文件,设计良好的CRF有助于数据库的构建,提高收集数据的准确性,减少数据质疑,方便研究者填写且易于统计分析。CRF设计流程应当规范,数据采集须符合试验方案要求。设计的CRF页面应布局清晰,字段... 详细信息

病例报告表(CRF)是临床试验收集数据的主要文件,设计良好的CRF有助于数据库的构建,提高收集数据的准确性,减少数据质疑,方便研究者填写且易于统计分析。CRF设计流程应当规范,数据采集须符合试验方案要求。设计的CRF页面应布局清晰,字段设计及编码应规范。

关键词：病例报告表临床试验试验方案

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棕榈酰寡肽组合物延缓皮肤衰老的功效研究

日用化学工业 2020年第4期50卷 263-268页

作者：周春霞周利丹卢伊娜上海珈凯生物科技有限公司上海200241

以水解胶原蛋白、棕榈酰寡肽组成的肽类组合物-时光肽(Rejutime PTC)为研究对象,通过多种方法对其抵抗皮肤衰老的功效进行研究。结果显示,针对成纤维细胞(HDF-a)衰老模型,质量分数为0.125%~0.5%的PTC显著促进细胞增殖,并上调Ⅰ型胶原蛋... 详细信息

以水解胶原蛋白、棕榈酰寡肽组成的肽类组合物-时光肽(Rejutime PTC)为研究对象,通过多种方法对其抵抗皮肤衰老的功效进行研究。结果显示,针对成纤维细胞(HDF-a)衰老模型,质量分数为0.125%~0.5%的PTC显著促进细胞增殖,并上调Ⅰ型胶原蛋白(COLⅠ)、Ⅲ型胶原蛋白(COL Ⅲ)和纤连蛋白的合成及分泌;针对角质形成细胞(NHEK)衰老模型,0.063%和0.25%的PTC处理细胞24~72 h可显著促进细胞增殖;对于真-表皮连接区(DEJ)的4种组成蛋白即层粘连蛋白-5、整合素β1、Ⅶ型胶原蛋白(COL Ⅶ)和Ⅳ型胶原蛋白(COL Ⅳ),PTC质量分数为0.063%~1%能促进其合成及分泌。PTC作为一种新型化妆品添加剂,针对皮肤表皮层、DEJ、真皮层发挥延缓皮肤衰老的作用。

关键词：化妆品添加剂棕榈酰寡肽组合物皮肤衰老

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桃树脂提取物的抗衰老功效研究

日用化学工业 2022年第2期52卷 159-165页

作者：黄少勇周利丹寻伟施雪梅卢伊娜上海珈凯生物科技有限公司上海200241

皮肤老化由多种因素引起,主要包括年龄导致的自然老化和暴露于环境导致的光老化。大气中的紫外线、雾霾中的多环芳烃均能造成皮肤炎症、细胞活性和功能下降,最终导致皮肤松弛、老化,形成皱纹、斑点。本研究以桃树脂提取物(PG)为研究对象... 详细信息

皮肤老化由多种因素引起,主要包括年龄导致的自然老化和暴露于环境导致的光老化。大气中的紫外线、雾霾中的多环芳烃均能造成皮肤炎症、细胞活性和功能下降,最终导致皮肤松弛、老化,形成皱纹、斑点。本研究以桃树脂提取物(PG)为研究对象,通过多种方法对其紧致、抗皱的功效进行研究。结果显示,在成纤维细胞衰老模型上,PG在质量分数为0.3%~10%的范围下能剂量依赖性地促进成纤维细胞增殖、Ⅰ型胶原蛋白合成,降低β-半乳糖苷酶的活性。在紫外线(UVA)和雾霾类似物苯并芘(BaP)造成的角质形成细胞衰老模型上,质量分数为0.1%~10%的PG可以抑制细胞因子前列腺素E2和基质金属蛋白酶1表达,恢复细胞活性,并降低β-半乳糖苷酶的活性。在人体临床评价上,质量分数为2%~10%的PG具有显著的即时提升皮肤含水量、降低经皮失水率、提升紧肤感、减少皱纹效果。PG作为一种天然来源的活性原料,可应用于皮肤保湿、紧致、抗皱系列产品中。

关键词：桃树脂提取物保湿即时紧肤即时抗皱