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阿魏酸对糖尿病小鼠视网膜和高糖诱导的人RPE细胞损伤的抑制作用及其机制

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中华实验眼科杂志 2024年第8期42卷 705-715页

作者：朱德军邹文青曹相枚王潇飞陆钊罡宁夏回族自治区人民医院　宁夏眼科医院银川　750002 宁夏医科大学基础医学院病理学系银川　750002 华北理工大学附属医院病理科唐山　063000 宁夏回族自治区人民医院药学部银川　750002

目的:探讨阿魏酸对糖尿病小鼠视网膜和高糖诱导的人视网膜色素上皮(RPE)细胞损伤的抑制作用及其机制。方法:选取SPF级雄性8周龄2型糖尿病db/db小鼠30只，采用随机数字表法将小鼠分为模型组和阿魏酸组，每组15只，另选取15只同周龄db/m... 详细信息

目的:探讨阿魏酸对糖尿病小鼠视网膜和高糖诱导的人视网膜色素上皮(RPE)细胞损伤的抑制作用及其机制。方法:选取SPF级雄性8周龄2型糖尿病db/db小鼠30只，采用随机数字表法将小鼠分为模型组和阿魏酸组，每组15只，另选取15只同周龄db/m小鼠作为对照组。模型组和对照组每日采用生理盐水灌胃(5 ml/kg)，阿魏酸组采用阿魏酸溶液灌胃(0.05 g/kg)，治疗后2个月处死各组小鼠并摘除眼球。采用苏木精－伊红染色观察小鼠视网膜组织形态学变化;采用免疫荧光染色法和Western blot法检测各组小鼠视网膜组织线粒体钙离子单向转运蛋白(MCU)、p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)、磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶(p-p38 MAPK)蛋白荧光强度和表达水平。取人RPE细胞，将其分为对照组、二甲基亚砜(DMSO)组、高糖组和高糖＋阿魏酸组，其中对照组不做任何处理，其余各组用相应试剂培养24 h。采用活性氧簇(ROS)检测试剂盒检测各组RPE细胞ROS水平;采用线粒体膜电位检测试剂盒(JC-1)检测各组RPE细胞线粒体膜电位水平;采用微丝绿色荧光探针检测各组RPE细胞MCU和微丝荧光强度;通过慢病毒转染技术沉默和过表达MCU蛋白水平探讨MCU与p38 MAPK、p-p38MAPK间的调控关系;采用免疫荧光染色法和Western blot法检测各组RPE细胞MCU、p38 MAPK、p-p38MAPK蛋白荧光强度和表达水平。结果:与对照组比较，模型组小鼠视网膜组织外核层、内核层和神经节细胞层细胞间隙增大、排列紊乱，阿魏酸组小鼠视网膜组织明显改善。与对照组比较，模型组、阿魏酸组小鼠视网膜组织MCU、p-p38 MAPK和MCU＋p-p38 MAPK蛋白荧光强度显著升高，差异均有统计学意义(均 P<0.05);与模型组比较，阿魏酸组小鼠视网膜组织MCU、p-p38 MAPK和MCU＋p-p38 MAPK蛋白荧光强度显著降低，差异均有统计学意义(均 P<0.05)。与对照组比较，模型组小鼠视网膜组织MCU、p38 MAPK和p-p38 MAPK蛋白相对表达量显著升高，差异均有统计学意义(均 P<0.05);与模型组比较，阿魏酸组小鼠视网膜组织MCU、p38 MAPK和p-p38 MAPK蛋白相对表达量显著降低，差异均有统计学意义(均 P<0.05)。对照组、DMSO组、高糖组和高糖＋阿魏酸组细胞ROS荧光强度分别为0.22±0.02、0.22±0.03、0.30±0.02和0.24±0.02，总体比较差异均有统计学意义( F＝7.845， P<0.01)，其中高糖组细胞ROS荧光强度明显高于对照组和DMSO组，高糖＋阿魏酸组细胞ROS荧光强度明显低于高糖组，差异均有统计学意义(均 P<0.05)。高糖组、高糖＋阿魏酸组细胞线粒体膜电位水平明显低于对照组和DMSO组，高糖＋阿魏酸组细胞线粒体膜电位水平明显高于高糖组，差异均有统计学意义(均 P<0.05)。与对照组、DMSO组比较，高糖组MCU荧光强度较高，并伴随着细胞微丝减少和变细;高糖＋阿魏酸组MCU蛋白荧光强度明显下降，细胞微丝数量明显增加。与对照组、DMSO组比较，高糖组细胞MCU、p38 MAPK和p-p38 MAPK蛋白荧光强度和相对表达量显著升高，差异均有统计学意义(均 P<0.05);与高糖组比较，高糖＋阿魏酸组细胞MCU、p38 MAPK和p-p38 MAPK蛋白荧光强度和相对表达量显著降低，差异均有统计学意义(均 P<0.05)。与对照组和空载体组比较，MCU过表达组细胞MCU、p38 MAPK和p-p38 MAPK蛋白相对表达量显著升高，MCU shRNA组、MCU过表达＋阿魏酸组细胞MCU、p38 MAPK和p-p38 MAPK蛋白相对表达量显著降低，差异均有统计学意义(均 P<0.05);与MCU过表达组比较，MCU shRNA组、MCU过表达＋阿魏酸组细胞MCU、p38 MAPK和p-p38 MAPK蛋白相对表达量显著降低，差异均有统计学意义(均 P<0.05)。结论:阿魏酸能够调控氧化应激和线粒体功能障碍，进而改善糖尿病小鼠视网膜和高糖诱导的RPE细胞损伤，其可能通过MCU及p38MAPK信号通路发挥保护作用。

关键词：阿魏酸糖尿病视网膜视网膜色素上皮细胞线粒体钙离子单向转运蛋白氧化应激线粒体功能障碍

龙胆泻肝汤加减治疗肝经湿热型PCOS的疗效及对血清性激素、炎症因子的影响

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中药材 2024年第1期47卷 226-230页

作者：肖淑兰杜彦懿王嘉玥宁夏回族自治区银川市第二人民医院宁夏银川750011

目的:观察龙胆泻肝汤加减治疗肝经湿热型多囊卵巢综合征(PCOS)的疗效及对血清性激素、炎症因子的影响。方法:选取2020年1月-2022年12月宁夏回族自治区银川市第二人民医院收治的肝经湿热型PCOS患者102例,随机分为对照组和观察组各51例,... 详细信息

目的:观察龙胆泻肝汤加减治疗肝经湿热型多囊卵巢综合征(PCOS)的疗效及对血清性激素、炎症因子的影响。方法:选取2020年1月-2022年12月宁夏回族自治区银川市第二人民医院收治的肝经湿热型PCOS患者102例,随机分为对照组和观察组各51例,对照组给予西药治疗,观察组给予西药联合龙胆泻肝汤加减治疗。两组均在治疗3个月经周期后评价中医证候评分与多囊卵巢综合征患者生存质量问卷修订版(MPCOSQ)评分,比较两组分级临床疗效,并检测糖代谢相关指标(FPG、FINS、HOMA-IR)、血清性激素(E_(2)、FSH、LH、T、PRL、AMH)、炎症因子(IL-6、IL-8、TNF-α、TGF-β_(1))水平。结果:与治疗前比较,治疗后两组患者中医证候及MPCOSQ评分、FPG、FINS、HOMA-IR、LH、LH/FSH、T、PRL、AMH、IL-6、IL-8、TNF-α、TGF-β_(1)水平显著降低,E_(2)水平显著升高(P0.05)外,观察组各指标改善均显著优于对照组(P<0.05)。观察组愈显率(60.8%)与总有效率(100.0%)显著高于对照组(分别为39.2%、86.3%)(P<0.05)。结论:龙胆泻肝汤加减治疗肝经湿热型PCOS可改善临床症状及性激素紊乱,抑制炎症因子水平,提高临床疗效及患者生活质量。

关键词：多囊卵巢综合征性激素炎症因子肝经湿热型龙胆泻肝汤

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巴豆霜干预脑缺血再灌注损伤大鼠皮质区JNK/p38 MAPK及神经元凋亡的机制

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中国组织工程研究 2024年第8期28卷 1186-1192页

作者：岳云王佩佩袁兆鹤何生存贾戌生刘倩李占涛付慧玲宋斐贾孟辉宁夏医科大学中医学院宁夏回族自治区银川市750000 银川市第一人民医院中医科宁夏回族自治区银川市750000 宁夏少数民族医药现代化教育部重点实验室宁夏回族自治区银川市750000 宁夏医科大学临床医学院宁夏回族自治区银川市750000

背景:巴豆霜能够激活ERK通路、对神经元细胞具有抗凋亡作用,是否具有抑制JNK、p38通路的激活而发挥抗凋亡的协同效应尚不清楚。目的:探讨巴豆霜对脑缺血再灌注损伤大鼠缺血侧皮质区神经元损伤和凋亡的影响及机制。方法:①将90只SD大鼠... 详细信息

背景:巴豆霜能够激活ERK通路、对神经元细胞具有抗凋亡作用,是否具有抑制JNK、p38通路的激活而发挥抗凋亡的协同效应尚不清楚。目的:探讨巴豆霜对脑缺血再灌注损伤大鼠缺血侧皮质区神经元损伤和凋亡的影响及机制。方法:①将90只SD大鼠随机分为假手术组,模型组,巴豆霜低、中、高剂量组,尼莫地平组,每组15只,除假手术组外,剩余各组均采取线栓法制备大脑中动脉栓塞大鼠模型,巴豆霜各组大鼠分别按剂量20,40,60 mg/kg灌胃;假手术组和模型组大鼠给予等量生理盐水,1次/d,连续给药7 d。运用神经功能缺损评分、TTC染色、脑组织含水量、苏木精-伊红染色及尼氏染色筛选出最佳浓度即巴豆霜高剂量。②将120只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、巴豆霜组、JNK抑制剂组、巴豆霜+JNK抑制剂组、p38 MAPK抑制剂组、巴豆霜+p38 MAPK抑制剂组和尼莫地平组,每组15只,除假手术组外,剩余各组大鼠均制备大脑中动脉栓塞大鼠模型,在造模之前30 min,将10μL JNK抑制剂SP600125或10μL p38 MAPK抑制剂SB203580分别注射到大鼠侧脑室,巴豆霜各组大鼠灌胃60 mg/kg巴豆霜,7 d后,采用Western Blot、TUNEL染色及流式细胞术检测各组大鼠脑组织JNK/p38 MAPK信号通路及凋亡相关蛋白水平及细胞凋亡情况。结果与结论:①与假手术组相比,模型组神经功能缺损评分、脑含水量、脑梗死体积、细胞凋亡率显著升高(P<0.05),神经细胞呈散乱分布;与模型组相比,巴豆霜中、高剂量组和尼莫地平组大鼠神经功能缺损评分、脑组织含水量、脑梗死体积显著降低(P<0.05),神经细胞病理形态明显改善;②与JNK抑制剂组相比,巴豆霜+抑制剂组大鼠脑组织p-JNK/JNK、p-p38/p38、Bax表达显著降低(P<0.05),细胞凋亡率显著降低(P<0.05),而Bcl-2表达显著升高(P<0.05);③结果提示,巴豆霜可能通过抑制JNK/p38 MAPK信号通路的激活、减少神经元凋亡等途径,达到对脑缺血再灌注损伤大鼠的神经保护作用。

关键词：巴豆霜脑缺血再灌注损伤神经元凋亡信号通路大鼠

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卢化平辨治甲亢多汗证验案举隅

山西中医 2024年第8期40卷 36-36,42页

作者：魏彦宁李静张恒耀颜青董慧杰张敏宁夏回族自治区银川市中医医院银川750001 宁夏回族自治区银川市第三人民医院

卢化平教授系第二届全国名中医,全国第三、四批老中医药专家师承指导老师,中国中医科学院博士后合作导师,从事临床工作近60年,学宗四家,推崇仲景之辨证,东垣之补脾土,景岳之调阴阳,天士之辨气血,集诸家之所长,因时因地因人制宜,积累了... 详细信息

卢化平教授系第二届全国名中医,全国第三、四批老中医药专家师承指导老师,中国中医科学院博士后合作导师,从事临床工作近60年,学宗四家,推崇仲景之辨证,东垣之补脾土,景岳之调阴阳,天士之辨气血,集诸家之所长,因时因地因人制宜,积累了丰富的临床经验,尤其擅长治疗内科疑难杂症。

关键词：卢化平甲亢多汗证当归六黄汤验案

国内外护理“双师型”教师培养的研究热点与趋势分析

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中华护理教育 2024年第5期21卷 552-556页

作者：李娟娟肖雯怡李丽张淼王丽娟葛玉荣宁夏医科大学银川市750004 宁夏回族自治区人民医院

目的了解国内外对护理“双师型”教师培养的研究现状、热点及发展趋势。方法通过检索中国知网、万方、维普、中国生物医学文献数据库、Pub Med,获取国内外有关护理“双师型”教师培养的文献,检索时限为2004年—2023年,利用Cite Space 6.... 详细信息

目的了解国内外对护理“双师型”教师培养的研究现状、热点及发展趋势。方法通过检索中国知网、万方、维普、中国生物医学文献数据库、Pub Med,获取国内外有关护理“双师型”教师培养的文献,检索时限为2004年—2023年,利用Cite Space 6.2.R6软件进行刊文数量、关键词频次、关键词突现分析。结果共纳入389篇文献,其中128篇文献由国内学者发表,261篇文献由国外学者发表。2004年—2023年国内外护理“双师型”教师培养研究年发文量整体呈上升趋势。国内外护理“双师型”教师培养研究热点主要集中在“双师型”教师的核心能力、培训体系与考核评价、培养模式(校企合作和产教融合)和政策支持等方面。结论国内外护理“双师型”教师培养领域的研究处于快速发展阶段,研究热点呈现多元化的特征。未来我国院校管理者可通过根据护理“双师型”教师来源、类型、层级等建立差异化的、定量定性相结合的考核评价标准;对专职与兼职教师建立不同的认定标准,并打造护理“双师型”教师聘任制度、退出机制及公正多元的激励机制;将培训体系的覆盖范围扩展至入职前阶段等举措,助力提升护理“双师型”教师培养质量与效果。

关键词： “双师型”教师培养护理文献计量学

枸杞多糖联合奥沙利铂可逆转结肠癌干细胞的耐药

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中国组织工程研究 2024年第1期28卷 74-79页

作者：艾芳芳肖红燕汪芳朱永朝马丽君宁夏医科大学临床医学院宁夏回族自治区银川市750004 宁夏医科大学宁夏少数民族医药现代化教育部重点实验室宁夏回族自治区银川市750004 宁夏回族自治区人民医院宁夏回族自治区银川市750004 宁夏医科大学总医院外科学研究室宁夏回族自治区银川市750004 宁夏医科大学基础医学院人体解剖与组织胚胎学系宁夏回族自治区银川市750004

背景:结肠癌临床主要采用以氟尿嘧啶、伊立替康及奥沙利铂为基础的治疗方法,研究发现这些药物的转运与ABC转运蛋白G家族成员2(ATP-binding cassette transport protein of G2,ABCG2)等膜转运蛋白相关,然而当患者对这些化疗药物产生耐药... 详细信息

背景:结肠癌临床主要采用以氟尿嘧啶、伊立替康及奥沙利铂为基础的治疗方法,研究发现这些药物的转运与ABC转运蛋白G家族成员2(ATP-binding cassette transport protein of G2,ABCG2)等膜转运蛋白相关,然而当患者对这些化疗药物产生耐药后,ABCG2的高表达致使治疗效果明显下降,引起了结肠癌的耐药问题。临床急切需要新的药物及治疗方法来提高疗效,枸杞多糖具有广泛的生物学活性,将多糖作为抗肿瘤药物,可以克服化疗和放疗过程中杀死肿瘤细胞的同时对机体正常细胞的损伤。目的:通过体外实验探索枸杞多糖联合奥沙利铂对结肠癌干细胞耐药的逆转作用,进而探讨枸杞多糖逆转结肠癌耐药的可能分子机制。方法:选用结肠癌细胞株HCT116以及奥沙利铂耐药细胞株HCT116-OXR进行体外实验,采用CCK8检测细胞增殖情况确定枸杞多糖和奥沙利铂的最适干预浓度和干预时间,进一步分为HCT116对照组,HCT116-OXR空白处理组,枸杞多糖组(2.5 mg/mL枸杞多糖),奥沙利铂组(10μmol/L奥沙利铂),枸杞多糖+奥沙利铂组(2.5 mg/mL枸杞多糖+10μmol/L奥沙利铂),流式细胞仪检测细胞凋亡情况,免疫荧光和Western blot检测磷酸甘露糖异构酶(phosphomannose isomerase,PMI)和ABCG2的表达,Western blot检测PI3K,AKT,Bcl-2和Bax的蛋白表达水平。结果与结论:①HCT116-OXR相较HCT116对枸杞多糖更敏感(P<0.05);②与HCT116-OXR空白处理组比较,奥沙利铂联合枸杞多糖促进了HCT116-OXR细胞凋亡(P<0.05),Bcl-2蛋白表达明显下调(P<0.05),Bax蛋白表达明显上调(P<0.05),ABCG2、PMI、PI3K、AKT的蛋白表达明显下调(P<0.05);③结果表明枸杞多糖通过抑制PMI/PI3K/AKT通路逆转结肠癌耐药,为研究枸杞多糖增敏化疗作用的分子机制奠定了基础。

关键词： PMI ABCG2 PI3K AKT 枸杞多糖结肠癌干细胞耐药凋亡

结核分枝杆菌Rv3048c基因及编码蛋白生物信息学分析与制备

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中国病原生物学杂志 2024年第4期19卷 382-388,394页

作者：徐锐强马瑛龙邱蕾王佩马国荣宁夏医科大学基础医学院宁夏银川750004 宁夏回族自治区第四人民医院

目的探究结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis)Rv3048c基因编码蛋白成为结核病临床检测标志物及蛋白疫苗的可能性,为结核病防控提供新的实验数据。方法通过生物信息学方法分析、预测该基因及其编码蛋白的基本生物学性质;在NCBI数... 详细信息

目的探究结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis)Rv3048c基因编码蛋白成为结核病临床检测标志物及蛋白疫苗的可能性,为结核病防控提供新的实验数据。方法通过生物信息学方法分析、预测该基因及其编码蛋白的基本生物学性质;在NCBI数据库检索Rv3048c基因及编码蛋白序列,设计并合成Rv3048c基因的引物,以热灭活Mtb基因组DNA为模板,经聚合酶链式反应获得该基因并将其构建到pET28a表达载体,构建pET28a-Rv3048c重组质粒;应用热激法将其转化至*** BL21(DE3)感受态细胞,构建pET28a-Rv3048c-BL21(DE3)表达菌株;以IPTG为诱导剂获得Rv3048c基因编码的重组蛋白;最后,用镍金属螯合层析纯化获得高纯度重组蛋白,并用SDS-PAGE和Western blot验证该重组蛋白。结果Rv3048c基因编码蛋白NrdF2由324个氨基酸组成,含两个α亚基和两个β亚基。该蛋白是亲水性、无跨膜结构域、无信号肽的细胞内蛋白;该蛋白理论分子质量为36.99153 ku,等电点为4.57,有36个磷酸化位点。基于ABCpred预测出5个B细胞表位。SYFPEITHI预测出CTL细胞表位和Th细胞表位共有9个。重组质粒Pet28a-Rv3048c在表达宿主*** BL21(DE3)中为可溶性表达;SDS-PAGE和小鼠抗His-Tag抗体免疫印迹(Western blot,WB)证实重组质粒pET28a-Rv3048c在*** BL21(DE3)中成功表达。结论Rv3048c基因编码蛋白nrdF2中存在多个位点和抗原表位,是潜在的结核病检测血清标志物。本研究获得该重组蛋白,为进一步评估其免疫原性与结核病血清学检测提供实验支持。

关键词：结核分枝杆菌 Rv3048c 结核病血清标志生物信息学

肝硬化门静脉高压症患者脾切除术后腹腔内脏血管直径变化分析

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中华消化外科杂志 2024年第7期23卷 961-968页

作者：刘明奇田明国宁夏回族自治区人民医院肝胆外科银川750002 海军军医大学附属东方肝胆外科医院上海200438

目的探讨肝硬化门静脉高压症患者脾切除术后腹腔内脏血管直径变化。方法采用回顾性队列研究方法。收集2012年1月至2022年6月宁夏回族自治区人民医院收治的149例肝硬化门静脉高压症行脾切除术患者的临床资料;男115例,女34例;年龄为46(17~... 详细信息

目的探讨肝硬化门静脉高压症患者脾切除术后腹腔内脏血管直径变化。方法采用回顾性队列研究方法。收集2012年1月至2022年6月宁夏回族自治区人民医院收治的149例肝硬化门静脉高压症行脾切除术患者的临床资料;男115例,女34例;年龄为46(17~68)岁。患者术前,术后1周、2周、1个月、3个月、6个月、1年、3年、5年行腹部CT检查,图像三维重建后测量门静脉系统和腹腔内脏动脉系统血管直径。偏态分布的计量资料以M(范围)表示。重复测量数据采用广义线性混合模型分析,估算目标的边际均值以均数±标准误表示。分析术后不同时间点血管直径与术前直径差异采用简单效应,边际均值的多重比较采用连续Bonferroni校正。结果(1)脾切除术前后肝总动脉、肝固有动脉和胃十二指肠动脉直径变化。患者脾切除术前后肝总动脉、肝固有动脉、胃十二指肠动脉直径变化趋势比较,差异均有统计学意义(F=28.66,29.46,8.12,P0.05)。(3)脾切除术前后肠系膜上动脉、右肾动脉和左肾动脉直径变化。患者脾切除术前后肠系膜上动脉、右肾动脉、左肾动脉直径变化趋势比较,差异均有统计学意义(F=8.22,13.21,10.27,P0.05)。结论肝硬化门静脉高压症患者脾切除术后门静脉、脾动脉及腹腔干直径变细,肝总动脉、肝固有动脉、胃十二指肠动脉、肠系膜上动脉及肾动脉直径增粗,该血管直径变化持续达5年。

关键词：肝硬化门静脉高压症腹腔内脏血管直径脾切除术变化

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基于潜在剖面分析分娩镇痛对产后抑郁的影响

中国健康教育 2024年第5期040卷 467-471页

作者：张阳孙雪玲钱鸿春拓明花尚玉秀宁夏医科大学公共卫生学院宁夏回族自治区中卫市人民医院宁夏回族自治区中卫市中医医院

目的采用潜在剖面分析（Latent Profile Analysis,LPA）产后抑郁的调查结果,探讨分娩镇痛对产后抑郁及各类别的影响。方法选取2021年5月—2022年3月宁夏回族自治区中卫市3所医院产科住院待产的孕妇329例为研究对象,分为分娩镇痛组和... 详细信息

目的采用潜在剖面分析（Latent Profile Analysis,LPA）产后抑郁的调查结果,探讨分娩镇痛对产后抑郁及各类别的影响。方法选取2021年5月—2022年3月宁夏回族自治区中卫市3所医院产科住院待产的孕妇329例为研究对象,分为分娩镇痛组和对照组,采用爱丁堡产后抑郁量表（Edinburgh Postnatal Depression Scale,EPDS）对产后3 d和42 d抑郁情况进行调查,使用Mplus 8.3软件对两组间EPDS得分、抑郁检出率和抑郁程度等指标进行潜在剖面模型分析。结果分娩镇痛组与对照组在产后42 d EPDS得分、抑郁检出率和抑郁程度方面的差异均有统计学意义（t=5.079,χ2=8.376,χ2=8.382,P均<0.05）。LPA分析将产后抑郁分为3个类别,分别为低危型（3.08±2.35）分,占36.5%;中危型（9.89±2.91）分,占45.8%;高危型（19.54±3.18）分,占17.7%。中危型分娩镇痛组与对照组产后EPDS得分比较,差异有统计学意义（t=7.225,P<0.05）。结论分娩镇痛可降低产后42 d及中危型产妇的抑郁风险。

关键词：潜在剖面分析分娩镇痛产后抑郁