检索结果-南通市图书馆

现代企业教育 2007年第6期 180-181页

作者：刘媛熊建团宁夏医学院设备处宁夏医学院设备处银川750004

显微镜管理和维护直接关系到医学院校各学科的实验教学质量,对提高显微镜的使用寿命、提高学生实验素质和技能有着积极而深远的意义。

关键词：医学院校显微镜管理实验教学维护

过表达JNK2增强SCL-1人皮肤鳞状细胞癌细胞的增殖及抗凋亡能力

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细胞与分子免疫学杂志 2018年第11期34卷 1000-1007页

作者：刘慧旭董辉张旭陈源昊琪焦亚宁葛新红宁夏医科大学临床医学院宁夏医科大学总医院科研处科研设备管理中心生物芯片国家工程中心宁夏分中心宁夏医科大学总医院皮肤性病科宁夏银川750004

目的探讨c-Jun氨基末端激酶1(JNK1)或JNK2过表达对SCL-1人皮肤鳞状细胞癌细胞增殖和凋亡的影响及分子机制。方法将JNK1、JNK2分别与p HBAD-EF1-MCS-3FLAG-CMV-GFP载体结合,构建JNK1和JNK2的重组腺病毒表达载体,感染SCL-1细胞,优化感染条... 详细信息

目的探讨c-Jun氨基末端激酶1(JNK1)或JNK2过表达对SCL-1人皮肤鳞状细胞癌细胞增殖和凋亡的影响及分子机制。方法将JNK1、JNK2分别与p HBAD-EF1-MCS-3FLAG-CMV-GFP载体结合,构建JNK1和JNK2的重组腺病毒表达载体,感染SCL-1细胞,优化感染条件,实时荧光定量PCR和Western blot法鉴定过表达效果。CCK-8法测定SCL-1细胞的增殖活性,细胞克隆形成实验观察细胞集落形成能力,划痕实验检测细胞划痕愈合率;流式细胞术检测细胞凋亡水平,实时荧光定量PCR检测JNK1、JNK2、c-Jun mRNA水平; Western blot法检测磷酸化c-Jun的蛋白水平。结果 JNK1、JNK2过表达腺病毒载体最佳感染条件为感染复数(MOI)=100,感染48 h后,SCL-1细胞的JNK1和JNK2的表达水平显著升高。与对照组相比,过表达JNK1对SCL-1细胞的增殖和抗凋亡能力无显著影响,过表达JNK2的SCL-1细胞增殖和抗凋亡能力明显增强,且磷酸化c-Jun蛋白水平上调。结论过表达JNK2可以增强SCL-1人皮肤鳞状细胞癌细胞的增殖能力和抗凋亡能力。

关键词：皮肤鳞状细胞癌 SCL-1细胞 c-Jun氨基末端激酶1(JNK1) JNK2 细胞增殖细胞凋亡

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中国病原生物学杂志 2023年第5期18卷 529-535页

作者：马锐马金花杨壤李雅婷赵志浩马国荣宁夏医科大学基础医学院宁夏银川750004 宁夏医科大学临床医学院

目的分析HspX蛋白的基本性质及其编码基因对大肠埃希菌(E.coli)生长的影响,为将其作为结核病疫苗候选分子和临床检测生物标志物的可行性提供实验依据。方法应用生物信息学方法分析HspX蛋白基本生化性质;构建原核重组表达载体并在E.coli... 详细信息

目的分析HspX蛋白的基本性质及其编码基因对大肠埃希菌(E.coli)生长的影响,为将其作为结核病疫苗候选分子和临床检测生物标志物的可行性提供实验依据。方法应用生物信息学方法分析HspX蛋白基本生化性质;构建原核重组表达载体并在E.coli中表达,用金属螯合层析法纯化HspX蛋白,观察该蛋白及其编码基因对宿主菌E.coli-BL21(DE3)和E.coli-DH5α生长的影响。结果生物信息学分析HspX蛋白由144个氨基酸残基组成,相对分子质量为16.22728×10^(3),等电点为5.00;该蛋白无信号肽,含有14个磷酸化位点,为亲水性细胞壁蛋白。其在大肠埃希菌中以可溶性表达,经镍金属螯合填料一步纯化得到纯度为86.9%的重组蛋白。重组质粒(pET28a-Rv2031c)能显著抑制其表达宿主菌E.coli-BL21(DE3)的生长,但不会抑制其克隆宿主菌E.coli-DH5α的生长。结论HspX蛋白能抑制E.coli-BL21(DE3)宿主菌的生长,其可能是结核分枝杆菌在宿主体内滞留发挥作用的效应物之一。

关键词： HspX Rv2031c 载体构建重组表达生物信息学分析

枸杞多糖通过MGL/TLR信号通路调控巨噬细胞RAW264.7的活化

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中国实验方剂学杂志 2023年第11期29卷 106-112页

作者：刘亚楠杨皓凯闫亚娟杨小娟段相国苏春霞宁夏医科大学基础医学院银川750004 宁夏医科大学临床医学院银川750004

目的:探讨枸杞多糖(LBP)促进巨噬细胞RAW264.7活化的机制。方法:采用不同浓度(50、100、200 mg·L^(-1))的LBP刺激巨噬细胞RAW264.7,以100μg·L^(-1)的脂多糖(LPS)和100 mg·L^(-1)半乳糖(Gal)作为阳性药。LBP刺激24 h后,采用细胞增殖... 详细信息

目的:探讨枸杞多糖(LBP)促进巨噬细胞RAW264.7活化的机制。方法:采用不同浓度(50、100、200 mg·L^(-1))的LBP刺激巨噬细胞RAW264.7,以100μg·L^(-1)的脂多糖(LPS)和100 mg·L^(-1)半乳糖(Gal)作为阳性药。LBP刺激24 h后,采用细胞增殖与活性检测试剂盒(CCK-8)检测不同给药浓度的LBP(0、50、100、200、400、800 mg·L^(-1))对巨噬细胞RAW264.7的毒性影响;采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测细胞培养上清中白细胞介素(IL)-6、IL-12的水平;分别通过实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)和蛋白免疫印迹法(Western blot)检测巨噬细胞RAW264.7 Toll样受体4(TLR4)/Toll样受体2(TLR2)/巨噬细胞半乳糖型凝集素(MGL)通路中p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)、细胞外调节蛋白激酶(ERK)、c-Jun氨基末端激酶(JNK)和核转录因子-κB(NF-κB) mRNA及蛋白表达水平;结果:CCK-8结果显示,与空白组比较,400、800 mg·L^(-1)LBP组干预巨噬细胞RAW264.7时,细胞存活率下降(P<0.05)。ELISA结果显示,与空白组比较,50 mg·L^(-1)LBP能够促进巨噬细胞RAW264.7分泌IL-12水平(P<0.01);与空白组比较,100、200 mg·L^(-1)LBP能够促进巨噬细胞RAW264.7分泌IL-6水平(P<0.05,P<0.01)。Western blot结果显示,与空白组比较,不同质量浓度的LBP组(50、100、200 mg·L^(-1))作用于巨噬细胞RAW264.7能够增强TLR4、TLR2和MGL通路中MAPK关键分子(p-p38 MAPK、p-ERK、p-NF-κB、p-JNK)的蛋白表达水平(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,200 mg·L^(-1)LBP组能够促进巨噬细胞RAW264.7p-NF-κB蛋白表达水平(P<0.01)。Real-time PCR结果显示,与空白组比较,不同质量浓度的LBP组(50、100、200 mg·L^(-1))作用于巨噬细胞RAW264.7能够增强TLR4、TLR2信号通路中MAPK关键分子p38 MAPK、ERK、NF-κB、JNK的mRNA表达水平(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,50、200 mg·L^(-1)LBP组能够促进巨噬细胞RAW264.7 JNK、ERK2 mRNA的表达水平(P<0.05,P<0.01)。结论:LBP能够通过TLR2/TLR4//MGL通路调控巨噬细胞RAW264.7的活化,参与免疫应答。

关键词：枸杞多糖巨噬细胞RAW264.7 Toll样受体2(TLR2) Toll样受体4(TLR4) 丝裂原活化蛋白激酶(MAPK) 巨噬细胞半乳糖型凝集素(MGL)

枸杞多糖通过MGL/TLR通路调控巨噬细胞RAW264.7的活化

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中国实验方剂学杂志 2022年

作者：刘亚楠杨皓凯闫亚娟杨小娟段相国苏春霞宁夏医科大学临床医学院宁夏医科大学基础医学院

目的：探讨枸杞多糖(LBP)促进巨噬细胞RAW264.7活化的机制。方法：采用不同浓度(50、100、200 mg·L)的LBP刺激巨噬细胞RAW264.7，以100 μg·L的脂多糖(LPS)和100 mg·L半乳糖(Gal)作为阳性对照。LBP刺激24 h后，采用细胞增殖与活性检... 详细信息

目的：探讨枸杞多糖(LBP)促进巨噬细胞RAW264.7活化的机制。方法：采用不同浓度(50、100、200 mg·L)的LBP刺激巨噬细胞RAW264.7，以100 μg·L的脂多糖(LPS)和100 mg·L半乳糖(Gal)作为阳性对照。LBP刺激24 h后，采用细胞增殖与活性检测(CCK-8)检测不同给药浓度的LBP(0、50、100、200、400、800mg· L)对巨噬细胞RAW264.7的毒性影响；采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测细胞培养上清中白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-12(IL-12)的水平；分别通过实时荧光定量聚合酶链式反应(TaqMan-PCR)和蛋白免疫印迹法(Western blot)检测巨噬细胞RAW264.7 Toll样受体4(TLR4)/Toll样受体2(TLR2)/巨噬细胞半乳糖型凝集素(MGL)通路中p38丝裂原活化蛋白激酶、细胞外调节蛋白激酶、c-Jun氨基末端激酶(p38/ERK/Jnk MAPK)和核转录因子-κB(NF-κB)mRNA以及蛋白表达水平；结果：CCK-8结果显示，与空白组比较，400和800 mg·LLBP组干预巨噬细胞RAW264.7时，细胞存活率下降(P<0.05)。ELISA结果显示，与空白组比较，50 mg·LLBP能够促进巨噬细胞RAW264.7分泌IL-12水平(P<0.01)；与空白组比较，100 mg·LLBP、200 mg·LLBP能够促进巨噬细胞RAW264.7分泌IL-6水平(P<0.05，P<0.01)。Western blot结果显示，与空白组比较，不同质量浓度的LBP组(50、100、200 mg·L)作用于巨噬细胞RAW264.7能够增强TLR4、TLR2和MGL通路中MAPK关键分子(p-p38、p-ERK、p-NFκB、p-JNK)的蛋白表达水平(P <0.05，P <0.01)；与模型组比较，200 mg·LLBP组能够促进巨噬细胞RAW264.7 p-NF-κB蛋白表达水平(P<0.01)。TaqMan-PCR结果显示，与空白组比较，不同质量浓度的LBP组(50、100、200 mg·L)作用于巨噬细胞RAW264.7能够增强TLR4、TLR2通路中MAPK关键分子(p38、ERK、NFκB、JNK)的mRNA表达水平(P <0.05，P <0.01)；与模型组比较，50、200 mg·LLBP组能够促进巨噬细胞RAW264.7 JNK、ERK2mRNA的表达水平(P <0.05，P <0.01)。结论：LBP能够通过TLR2/TLR4//MGL通路调控巨噬细胞RAW 264.7的活化，参与免疫应答。

关键词：枸杞多糖巨噬细胞RAW264.7 Toll样受体2(TLR2) Toll样受体4(TLR4) 丝裂原活化蛋白激酶(MAPK) 巨噬细胞半乳糖型凝集素(MGL)

结核分枝杆菌Rv1511基因编码蛋白的生物信息学分析与制备

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中国病原生物学杂志 2023年第5期18卷 536-541,546页

作者：罗鹏征马锐王佩马国荣宁夏医科大学基础医学院宁夏银川750004

目的探究结核分枝杆菌Rv1511基因编码蛋白的基本生化性质,为该蛋白在大肠埃希菌中重组表达及评估其成为结核病检测标志物的可行性提供实验数据。方法通过生物信息学方法获取Rv1511基因和氨基酸序列,预测其基本生化性质;构建以大肠埃希... 详细信息

目的探究结核分枝杆菌Rv1511基因编码蛋白的基本生化性质,为该蛋白在大肠埃希菌中重组表达及评估其成为结核病检测标志物的可行性提供实验数据。方法通过生物信息学方法获取Rv1511基因和氨基酸序列,预测其基本生化性质;构建以大肠埃希菌为宿主的重组表达载体pET28a(+)-Rv1511,经镍金属螯合层析获得高纯度重组蛋白,并进行Western blot验证。结果Rv1511基因编码蛋白由340个氨基酸组成,该蛋白是GDP-d-甘露糖脱水酶,与糖代谢途径相关,可能参与细胞壁控制物质渗透作用。该蛋白为亲水性、无跨膜结构域的细胞内蛋白,其理论相对分子质量为38.34241×10^(3),等电点为6.08,有36个磷酸化位点和1个N-糖基化位。BepiPred-2.0预测该蛋白含有4个B细胞表位,SYFPEITHI和Rankpep预测含有8个CTL细胞表位和Th细胞表位;NetMHCIIpa 4.0预测T细胞表位,显示该蛋白有多个MHCI和MHCII结合位点。构建重组质粒,转染E.coli BL21(DE3)后存在本底表达情况,表达产物为不可溶包涵体,经8 mol/L尿素变性后镍金属螯合纯化获得纯度为92.6%的目的蛋白,SDS-PAGE和小鼠抗组氨酸蛋白抗体Western blot验证该重组蛋白在大肠埃希菌中成功表达。结论Rv1511基因及其编码蛋白在卡介苗中缺失,有望成为结核病临床检测潜在标志物。该蛋白存在多个修饰位点和抗原表位,可能与结核杆菌缺氧和营养匮乏状态下抗逆性相关,是潜在的抗结核药物靶点。制备的Rv1511基因重组蛋白具有反应原性,可为进一步评估其作为结核病检测标志物的可行性提供实验支持。

关键词：结核分枝杆菌 Rv1511 结核病生物信息学载体构建

黄芩苷调节let-7i-3p/PI3K/Akt/NF-κB信号轴减轻类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞NLRP3炎性小体活化

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中国药理学通报 2023年第12期39卷 2313-2319页

作者：张炜王莉杨雨欣马锐王丽黄菱万巧凤宁夏医科大学基础医学院病原生物学与医学免疫学系宁夏银川750004 宁夏医科大学总医院风湿科宁夏银川750003 宁夏医科大学临床医学院宁夏银川750004

目的研究黄芩苷减轻类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞(human fibroblast like synoviocytes of rheumatoid arthritis,HFLS-RA)NLRP3炎性小体活化的作用及机制。方法为证实黄芩苷减轻HFLS-RA中NLRP3炎性小体活化,采用免疫荧光观察黄芩苷处... 详细信息

目的研究黄芩苷减轻类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞(human fibroblast like synoviocytes of rheumatoid arthritis,HFLS-RA)NLRP3炎性小体活化的作用及机制。方法为证实黄芩苷减轻HFLS-RA中NLRP3炎性小体活化,采用免疫荧光观察黄芩苷处理前后NLRP3的表达;Western blot检测黄芩苷处理48 h后,p-PI3K、p-Akt、NF-κB p65、NLRP3、ASC及caspase-1蛋白的表达;ELISA检测细胞上清中IL-1及IL-18的含量。为探究黄芩苷减轻NLRP3炎性小体活化的机制,采用双荧光素酶及Western blot验证let-7i-3p与PIK3CA的对应关系;RT-qPCR检测黄芩苷干预前后let-7i-3p及PI3K的表达;采用let-7i-3p干扰,验证黄芩苷是否减轻了增强的NLRP3炎性小体的活化。结果50、100 mg·L^(-1)黄芩苷明显减轻了NLRP3炎性小体的活化,抑制p-PI3K、p-Akt、NF-κB p65、NLRP3、ASC、caspase-1蛋白的表达,抑制IL-1、IL-18的分泌。let-7i-3p与PIK3CA存在靶向对应关系,黄芩苷上调了let-7i-3p的表达、下调了PIK3CA的表达;黄芩苷减轻了因let-7i-3p干扰而增强的NLRP3炎性小体的活化。结论黄芩苷经上调let-7i-3p表达、抑制PI3K/Akt/NF-κB信号转导,从而减轻NLRP3炎性小体的活化。

关键词：黄芩苷类风湿关节炎类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞 NLRP3炎性小体 miRNA 双荧光素酶

磷酸二酯酶PA4781对铜绿假单胞菌运动能力及毒力的影响

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中国感染控制杂志 2022年第6期21卷 532-540页

作者：宋瑾萱张倩楠王秀青宁夏医科大学临床医学院宁夏银川750004

目的探讨磷酸二酯酶PA4781对细菌运动能力及毒力的影响。方法通过测量菌苔的直径检测细菌的运动能力,利用刚果红染色和苯酚-硫酸显色法检测细菌生物膜分泌胞外多糖的能力。通过实时荧光定量PCR检测介导蹭行运动的基因PilZ、与胞外多糖... 详细信息

目的探讨磷酸二酯酶PA4781对细菌运动能力及毒力的影响。方法通过测量菌苔的直径检测细菌的运动能力,利用刚果红染色和苯酚-硫酸显色法检测细菌生物膜分泌胞外多糖的能力。通过实时荧光定量PCR检测介导蹭行运动的基因PilZ、与胞外多糖合成有关的基因PelA以及控制绿脓菌素的基因PhzM的mRNA表达量。利用琼脂糖凝胶电泳检测细菌不同时间段内产生的胞外DNA量,通过测量菌斑在牛奶平板中透明圈的直径检测胞外蛋白酶的总活性。结果相比于PA03野生型菌株,PA4781敲除菌株的运动能力及PilZ的mRNA表达量降低,PA4781过表达菌株的运动能力及PilZ的mRNA表达量增高,差异均有统计学意义(均P<0.05);相比于PA03野生型菌株,PA4781敲除菌株分泌的胞外多糖及PelA的mRNA表达量增多,PA4781过表达菌株分泌的胞外多糖及PelA的mRNA表达量减少,差异均有统计学意义(均P<0.05);PA4781敲除菌株和PA4781过表达菌株的胞外DNA分泌量、绿脓菌素基因PhzM的表达量及胞外蛋白酶的水解能力均低于PA03野生型菌株,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论PA4781可能通过促进基因PilZ的表达,从而促进铜绿假单胞菌的运动能力。PA4781可能通过抑制基因PelA的表达,抑制胞外多糖的分泌。同时,PA4781可能不直接影响胞外DNA分泌量,毒力因子绿脓菌素和胞外蛋白酶的产生。

关键词：铜绿假单胞菌 PA4781 运动能力胞外多糖胞外DNA 绿脓菌素

^(18)F-前列腺特异性膜抗原(PSMA)-1007 PET/CT参数评估前列腺癌骨转移

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中国医学影像技术 2023年第2期39卷 250-254页

作者：董思颖陈建李艳梅杨鹏飞李娟宁夏医科大学总医院核医学科宁夏银川750004 宁夏医科大学临床医学院宁夏银川750004

目的观察^(18)F-前列腺特异性膜抗原(PSMA)-1007 PET/CT参数评估前列腺癌(PCa)骨转移的价值。方法根据有无骨转移将53例经病理确诊的PCa患者分为骨转移组(n=27)及无骨转移组(n=26)。于PET/CT三维图像上勾画PCa原发灶感兴趣容积,测量其... 详细信息

目的观察^(18)F-前列腺特异性膜抗原(PSMA)-1007 PET/CT参数评估前列腺癌(PCa)骨转移的价值。方法根据有无骨转移将53例经病理确诊的PCa患者分为骨转移组(n=27)及无骨转移组(n=26)。于PET/CT三维图像上勾画PCa原发灶感兴趣容积,测量其最大标准摄取值(SUV max)、前列腺肿瘤PSMA表达体积(PSMA-TVp)和前列腺肿瘤病灶PSMA表达总量(TL-PSMAp);比较组间PSMA表达参数差异,采用单因素logistic回归分析预测PCa骨转移的独立因素,绘制受试者工作特征曲线,分析PSMA表达参数评估骨转移的效能。结果骨转移组PCa原发灶SUV max、PSMA-TVp及TL-PSMAp均高于无骨转移组(P均<0.01)。原发灶SUV max、PSMA-TVp及TL-PSMAp均为预测PCa骨转移的独立因素(OR=1.091、1.327、1.042,P均<0.05),其评估PCa骨转移的曲线下面积分别为0.734、0.908及0.929,PCa原发灶TL-PSMAp、PSMA-TVp的评估效能明显高于SUV max(P均<0.05)。结论^(18)F-PSMA-1007 PET/CT所示PCa原发灶PSMA表达参数可用于评估PCa骨转移,尤以体积参数如PSMA-TVp和TL-PSMAp更具价值。

关键词：前列腺肿瘤肿瘤转移前列腺特异性膜抗原体层摄影术,X线计算机正电子发射断层显像

^(18)F-PSMA-1007 PET/CT与^(99)Tc^(m)-MDP SPECT/CT诊断前列腺癌骨转移

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中国医学影像技术 2023年第9期39卷 1379-1383页

作者：陈健董思颖李艳梅杨鹏飞李娟宁夏医科大学总医院核医学科宁夏银川750000 宁夏医科大学临床医学院宁夏银川750000

目的比较^(18)F-PSMA-1007 PET/CT与^(99)Tc^(m)-MDP SPECT/CT诊断前列腺癌(PCa)骨转移的价值。方法回顾性分析于1个月内接受^(18)F-PSMA-1007 PET/CT及^(99)Tc^(m)-SPECT/CT检查的77例PCa患者,包括65例初诊分期者及12例再分期者。以最佳比较(BVC)标准为“金标准”,比较两种方法在个体层面及病灶层面诊断骨转移的效能。结果77例PCa中,42例存在骨转移(408个骨转移灶)。在个体层面,^(18)F-PSMA-1007 PET/CT诊断PCa骨转移的敏感度、特异度、准确率及曲线下面积(AUC)分别为100.00%(42/42)、97.14%(34/35)、98.70%(76/77)及0.986,^(99)Tc^(m)-MDP SPECT/CT分别为66.67%(28/42)、88.57%(31/35)、76.62%(59/77)及0.776,前者AUC高于后者(Z=4.768,P<0.001);在病灶层面,^(18)F-PSMA PET/CT诊断PCa骨转移的敏感度、特异度、准确率及AUC分别为99.02%(404/408)、78.57%(44/56)、96.55%(448/464)及0.888,^(99)Tc^(m)-MDP SPECT/CT分别为76.23%(311/408)、60.71%(34/56)、74.35%(345/464)及0.685,前者AUC亦高于后者(Z=4.844,P<0.001)。结论^(18)F-PSMA-1007 PET/CT诊断PCa骨转移的效能优于^(99)Tc^(m)-MDP SPECT/CT。

关键词：前列腺肿瘤骨和骨组织肿瘤转移前列腺特异性抗原正电子发射断层显像体层摄影术发射型计算机单光子