结核分枝杆菌休眠相关蛋白HspX的生物信息学分析、制备及对大肠埃希菌生长抑制探究
Bioinformatics analysis and preparation of Mycobacterium tuberculosis dormancy associated protein HspX and preliminary study on growth inhibition of E.coli作者机构：宁夏医科大学基础医学院宁夏银川750004 宁夏医科大学临床医学院
出 版 物：《中国病原生物学杂志》 (Journal of Pathogen Biology)
年 卷 期：2023年第18卷第5期
页 面：529-535页
核心收录：
学科分类：1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100103[医学-病原生物学] 10[医学]
基 金：国家自然科学基金项目(No.82160027) 宁夏自然科学基金项目(No.2022AAC03133) 宁夏医科大学校级重点项目(No.XZ2021012)。
主 题：HspX Rv2031c 载体构建 重组表达 生物信息学分析
摘 要：目的分析HspX蛋白的基本性质及其编码基因对大肠埃希菌(E.coli)生长的影响,为将其作为结核病疫苗候选分子和临床检测生物标志物的可行性提供实验依据。方法应用生物信息学方法分析HspX蛋白基本生化性质;构建原核重组表达载体并在E.coli中表达,用金属螯合层析法纯化HspX蛋白,观察该蛋白及其编码基因对宿主菌E.coli-BL21(DE3)和E.coli-DH5α生长的影响。结果生物信息学分析HspX蛋白由144个氨基酸残基组成,相对分子质量为16.22728×10^(3),等电点为5.00;该蛋白无信号肽,含有14个磷酸化位点,为亲水性细胞壁蛋白。其在大肠埃希菌中以可溶性表达,经镍金属螯合填料一步纯化得到纯度为86.9%的重组蛋白。重组质粒(pET28a-Rv2031c)能显著抑制其表达宿主菌E.coli-BL21(DE3)的生长,但不会抑制其克隆宿主菌E.coli-DH5α的生长。结论HspX蛋白能抑制E.coli-BL21(DE3)宿主菌的生长,其可能是结核分枝杆菌在宿主体内滞留发挥作用的效应物之一。
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