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利用三级质谱与二级质谱匹配策略鉴定丹参中酚酸类成分

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分析化学 2024年第2期52卷 267-285页

作者：李菡张珂李婷陈蔚李军屠鹏飞赵云芳宋月林北京中医药大学北京中医药研究院北京中医药大学中药学院

多级质谱信息(MS/MS information)可提供鉴定化合物结构的关键线索，多级质谱(MS/MS)图谱到结构的转换(MS/MS spectrum to structure)是精准鉴定化合物结构的重要过程。本研究提出了化合物的三级质谱(MS3)图谱与其结构单元的二级质谱(M... 详细信息

多级质谱信息(MS/MS information)可提供鉴定化合物结构的关键线索，多级质谱(MS/MS)图谱到结构的转换(MS/MS spectrum to structure)是精准鉴定化合物结构的重要过程。本研究提出了化合物的三级质谱(MS3)图谱与其结构单元的二级质谱(MS2)图谱匹配策略，实现了化合物结构的精准鉴定。首先，利用三重四极杆复合线性离子阱质谱仪(Qtrap-MS)的双碰撞池，采集酯类化合物酯基质谱裂解产生的特征碎片离子(c~–和y~–)在线性离子阱(LIT)内经第二次碰撞诱导解离(Collision-induced dissociation, CID)后的MS3图谱，并同步采集其结构单元化合物([M–H]~–)在LIT中经碰撞诱导解离后的MS2图谱，结果表明，酯类化合物特征碎片离子的MS3图谱与结构单元化合物的MS2图谱匹配。最后，采用HR-MS/MS对丹参总酚酸(Total salvianolic acid derivatives, TSA)进行定性分析，结合文献报道及数据库信息，初步鉴定了36种化合物。进一步利用MS3与MS2图谱匹配策略实现了对迷迭香酸和丹酚酸B的精准鉴定，证明了本方法的可行性。本方法为化合物的精准定性分析提供了新的思路和参考。

关键词：多级质谱信息三级质谱与二级质谱图谱匹配酯类化合物丹参总酚酸结构鉴定

来源：博看期刊

人参醇溶蛋白提取工艺优化、结构表征及体外抗氧化活性分析

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食品工业科技 2024年第8期45卷 1-10页

作者：郭浩白雪媛陈宇宋文博刘那王思明长春中医药大学东北亚中医药研究院吉林长春130117

为探讨人参中醇溶蛋白提取工艺,结构表征及体外抗氧化活性,本文以人参为研究对象,采用单因素实验和响应面试验探索人参醇溶蛋白的最佳提取工艺,以紫外吸收光谱法、红外分光光度分析法、氨基酸组成、微观结构观察等方法对人参醇溶蛋白进... 详细信息

为探讨人参中醇溶蛋白提取工艺,结构表征及体外抗氧化活性,本文以人参为研究对象,采用单因素实验和响应面试验探索人参醇溶蛋白的最佳提取工艺,以紫外吸收光谱法、红外分光光度分析法、氨基酸组成、微观结构观察等方法对人参醇溶蛋白进行结构表征,并对其在不同pH条件下的体外抗氧化活性开展一系列研究。通过测定DPPH自由基清除能力、羟基自由基清除能力、铁离子还原能力,评价人参醇溶蛋白的体外抗氧化活性。结果表明,人参中醇溶蛋白最佳提取工艺为:提取时间2 h、提取料液比1:10 g/mL、提取pH为7,此时人参醇溶蛋白得率为0.319%,蛋白含量为75%。通过紫外吸收光谱法、红外分光光度分析法、氨基酸组成成分分析试验结果表明,人参醇溶蛋白氨基酸总量为82.3 g/100 g,其中人体必需氨基酸含量为26.46 g/100 g,药用氨基酸含量为30.51 g/100 g,验证了该人参醇提物主要成分确为蛋白质,分子量约为3.3 kDa,SEM扫描电镜结果显示,该人参醇溶蛋白结构完整,表面稀疏且有不规则的脊形凸起以及少量孔隙,蛋白质颗粒呈现蜂窝聚集状态,具有稳定有序的网状结构。体外抗氧化试验结果表明,该蛋白在强酸性条件下具有较强的体外抗氧化活性,当pH=1时,人参醇溶蛋白对DPPH自由基的清除率为96%,对羟基自由基的清除率为79%,对铁离子的还原能力为0.86。

关键词：人参醇溶蛋白响应面结构表征抗氧化活性

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基于UPLC-Q-TOF-MS分析大麻二酚对肺纤维化的影响

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中国实验方剂学杂志 2024年第12期30卷 185-193页

作者：孙梦迪张飞宇杨慧聪王宇陈平平卢芳刘树民黑龙江中医药大学中医药研究院哈尔滨150040

目的:应用超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱法(UPLC-Q-TOF-MS)进行肺组织代谢组学分析,探讨大麻二酚抗肺纤维化的作用机制。方法:将48只SD大鼠随机分为空白组、模型组、泼尼松组(3.15 mg·kg^(-1))、大麻二酚低、中、高剂量组(12、36... 详细信息

目的:应用超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱法(UPLC-Q-TOF-MS)进行肺组织代谢组学分析,探讨大麻二酚抗肺纤维化的作用机制。方法:将48只SD大鼠随机分为空白组、模型组、泼尼松组(3.15 mg·kg^(-1))、大麻二酚低、中、高剂量组(12、36、108 mg·kg^(-1)),每组8只。除空白组外,各组均通过气管内注射5 mg·kg^(-1)博来霉素构建肺纤维化大鼠模型,造模成功后各组按剂量每天灌胃给药1次,空白组灌胃等量生理盐水,连续给药28 d。观察大鼠肺组织病理变化,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血清中基质金属蛋白酶-7(MMP-7)、Ⅱ型肺泡细胞表面抗原(KL-6)、肺表面活性物质相关蛋白A(SP-A)、肺表面活性物质相关蛋白D(SP-D)的表达水平,免疫组化检测肺组织Ⅰ型胶原蛋白(Col-Ⅰ)、纤维连接蛋白(FN)的表达水平,免疫荧光检测黏蛋白5AC(MUC5AC)的表达。基于UPLC-Q-TOF-MS筛选大麻二酚治疗肺纤维化的潜在生物标志物并进行通路富集分析。结果:与空白组比较,模型组大鼠肺组织出现大量炎性细胞浸润及连续纤维化病灶;与模型组比较,泼尼松组和大麻二酚组大鼠肺组织中炎性浸润减少,蓝色胶原沉积减少。与空白组比较,模型组血清中MMP-7、KL-6、SP-A、SP-D的表达量显著升高(P<0.01);与模型组比较,泼尼松组和大麻二酚高剂量组MMP-7、KL-6、SP-A、SP-D的表达量明显降低(P<0.05,P<0.01)。与空白组比较,模型组肺组织中Col-Ⅰ和FN的表达水平显著升高,MUC5AC的荧光强度显著增加(P<0.01);与模型组比较,泼尼松组和大麻二酚高剂量组肺组织中Col-Ⅰ和FN的表达水平明显降低(P<0.05,P<0.01),MUC5AC的表达显著下降(P<0.01)。模型组较空白组共筛选出18个差异化合物,可作为潜在生物标志物,大麻二酚可回调其中16个化合物,主要涉及亚油酸代谢,苯丙氨酸、酪氨酸和色氨酸生物合成,花生四烯酸代谢,烟酸和烟酰胺代谢4种代谢途径。与空白组比较,模型组潜在生物标志物花生四烯酸、亚油酸相对含量明显增加(P<0.05,P<0.01),5,6-EET、L-酪氨酸、烟酰胺相对含量显著降低(P<0.01);与模型组比较,大麻二酚能使花生四烯酸、亚油酸相对含量显著降低,5,6-EET、L-酪氨酸、烟酰胺相对含量均显著增加(P<0.01)。结论:大麻二酚对肺纤维化具有缓解作用,其作用机制可能与调节亚油酸代谢,苯丙氨酸、酪氨酸和色氨酸生物合成,花生四烯酸代谢,烟酸和烟酰胺代谢有关。

关键词：大麻二酚肺纤维化代谢组学炎症免疫超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱法(UPLC-Q-TOF-MS)

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白芷中香豆素类成分研究

中草药 2024年第19期55卷 6465-6473页

作者：温建牛石璠钰杨万青卢姿含王阳樊江平熊娜凌鸽雨朱枝祥史社坡北京中医药大学北京中医药研究院中药现代研究中心

目的研究杭白芷Angelica dahurica var. formosana的化学成分。方法利用各种色谱分离技术对临床常用中药白芷中的香豆素类成分进行研究，结合核磁共振波谱对分离得到的单体化合物进行结构鉴定，并对所有的化合物进行了抗炎活性筛选。... 详细信息

目的研究杭白芷Angelica dahurica var. formosana的化学成分。方法利用各种色谱分离技术对临床常用中药白芷中的香豆素类成分进行研究，结合核磁共振波谱对分离得到的单体化合物进行结构鉴定，并对所有的化合物进行了抗炎活性筛选。结果从白芷乙醇提取物中共得到22个香豆素类化合物，分别鉴定为（4S）-4,8-dihydroxy-5-prenyl-3,4-dihydrofurocoumarin（1）、花椒毒酚（2）、花椒毒素（3）、佛手柑内酯（4）、异茴芹灵（5）、异去甲基呋喃羽叶芸香素（6）、异欧前胡素（7）、欧前胡素（8）、珊瑚菜素（9）、比克白芷素（10）、水合氧化前胡素（11）、别欧前胡素（12）、异氧化前胡内酯（13）、新白当归脑（14）、dahurin B（15）、仲-O-β-D-吡喃葡萄糖基白当归素（16）、叔-O-β-D-吡喃葡萄糖基-（R）-白当归素（17）、7-去甲软木花椒素（18）、紫花前胡苷元（19）、紫花前胡苷（20）、印度榅桲苷（21）、marmesin 4′-O-β-D-apiofuranosyl-（1-6）-O-β-D-glucopyranoside（22）。结论化合物1为新化合物，命名为（4S）-3,4-二氢白芷素B；化合物2、11对脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）诱导的小鼠巨噬细胞RAW 264.7的一氧化氮（NO）产生有一定抑制活性，半数抑制浓度(median inhibition concentration,IC50)分别为（32.8±0.8）μmol/L和（94.5±1.9）μmol/L。

关键词：白芷杭白芷 3,4-二氢呋喃香豆素 (4S)-3,4-二氢白芷素B 香豆素花椒毒酚水合氧化前胡素抗炎

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浅论“燥湿同源”内涵及其临床应用

北京中医药大学学报 2024年

作者：宋振李崇超南京中医药大学中医药文献研究院

中医学理论体系中，“同源”学说内容丰富，历代医家多有论及，诸如“肝肾同源”“血水同源”“营卫同源”等。其中，燥与湿两者在中医学理论中关系尤为密切，诸多现代疾病的发病均与两者相关，因此，全面理解燥与湿的关系在临床实践中... 详细信息

中医学理论体系中，“同源”学说内容丰富，历代医家多有论及，诸如“肝肾同源”“血水同源”“营卫同源”等。其中，燥与湿两者在中医学理论中关系尤为密切，诸多现代疾病的发病均与两者相关，因此，全面理解燥与湿的关系在临床实践中具有重要意义。本文深入梳理相关文献，从《黄帝内经》等诸多经典著作中挖掘“燥湿同源”的理论依据，认为该理论的核心内涵包括“燥可生湿”与“湿可化燥”2个方面。在临床实践中，医者需灵活运用此理论，既要见燥防湿，又要遇湿防燥。针对以湿邪或燥邪为主要特征的疾病，医者从湿与燥的同源性、共存性及相互转化的角度进行辨证和治疗。这一理论不仅深化了对中医病因病机的认识，也为现代临床实践提供了有力的理论指导。随着对“燥湿同源”理论研究的深入，其在现代临床中的应用价值将愈发突显。

关键词： “同源”学说燥湿同源理论依据内涵临床应用

指纹图谱结合化学模式识别及网络药理学的石菖蒲质量标志物预测分析

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中国新药杂志 2024年第11期33卷 1174-1184页

作者：李鹏辉孙瑜冯小龙陶新如龚年春蔡媛彭艳梅湖南省中医药研究院长沙410006

目的:指纹图谱结合化学模式识别技术及网络药理学,分析预测不同产地野生石菖蒲(Acorus tatarinowii Schott)中潜在的差异质量标志物(quality marker,Q-marker)。方法:采用HPLC法建立石菖蒲药材指纹图谱,确认共有峰并进行指认,通过主成... 详细信息

目的:指纹图谱结合化学模式识别技术及网络药理学,分析预测不同产地野生石菖蒲(Acorus tatarinowii Schott)中潜在的差异质量标志物(quality marker,Q-marker)。方法:采用HPLC法建立石菖蒲药材指纹图谱,确认共有峰并进行指认,通过主成分分析(principal component analysis,PCA)及正交偏最小二乘-判别分析(orthogonal partial least square-discriminant analysis,OPLS-DA),筛选引起产地差异的主要特征化学成分;再运用网络药理学构建“活性成分-靶点-通路网络”图,预测Q-marker。结果:建立了4个产地18批石菖蒲药材指纹图谱,共有峰的选择显示不同产地石菖蒲药材的内在质量存在明显差异,PCA和OPLS-DA显示同一产地石菖蒲药材各自聚为一类,指认的3号峰(β-细辛醚)是引起产地差异的主要特征化学成分。网络药理学筛选出6个潜在Q-marker,结合Q-marker五要素原则,进一步明确β-细辛醚可作为石菖蒲的潜在Q-marker。结论:预测了β-细辛醚可作为不同产地石菖蒲药材的差异Q-marker,为石菖蒲质控指标的选择提供思路和参考依据。

关键词：石菖蒲指纹图谱化学模式识别网络药理学差异质量标志物 β-细辛醚

山药总蛋白对高糖诱导的人脐静脉内皮细胞氧化应激的保护作用及机制研究

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食品工业科技 2024年第11期45卷 307-315页

作者：姜蕾蕾冯佳宝刘颖金辰蓉刘美辰王思明赵大庆于士婷长春中医药大学吉林省人参科学研究院吉林长春130117 长春中医药大学东北亚中医药研究院吉林长春130117

探究山药总蛋白对高浓度D-葡萄糖(High concentrations of D-glucose,HG)诱导的人脐静脉内皮细胞(Human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)氧化应激损伤的保护作用及其机制。利用50 mmol/L HG建立HUVECs损伤模型。将HUVECs随机分为对照组、模型组、山药总蛋白低剂量组(0.5 mg/mL)以及山药总蛋白高剂量组(1 mg/mL),评估山药总蛋白对HG处理的HUVECs的细胞活力、细胞形态及血管生成能力的影响;检测细胞中活性氧(Reactive oxygen species,ROS)的水平和超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)、过氧化氢酶(Catalase,CAT)的活力;以及培养基上清液中一氧化氮(Nitric oxide,NO)、8-羟基脱氧鸟苷(8-Hydroxy deoxyguanosine,8-OHdG)、丙二醛(Malondialdehyde,MDA)、白介素-1β(Interleukin-1β,IL-1β)、白介素-6(Interleukin-6,IL-6)的水平;测定B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、硫氧还蛋白相互作用蛋白(Txnip)、NOD样受体蛋白3(NLRP3)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶剪切体-1(Cleaved caspase-1)和IL-1β蛋白的表达水平。结果显示,山药总蛋白能显著提高HG处理后的HUVECs的细胞活力(P研究结果表明,山药总蛋白可能通过抑制Txnip/NLRP3信号通路从而保护HUVECs拮抗HG诱导的氧化应激,恢复HUVECs内的氧化平衡,进一步减轻细胞的炎症反应。

关键词：山药总蛋白人脐静脉内皮细胞氧化应激炎症反应 Txnip/NLRP3 信号通路

蛹虫草的化学成分、药理作用及产业化研究进展

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中草药 2024年第7期55卷 2413-2422页

作者：赵璇田雨航庞道然高兴郭英杰李肖山东中医药大学药物研究院山东济南250355 山东中医药大学药学院山东济南250355 山东中医药大学中医药创新研究院山东济南250355

蛹虫草Cordyceps militaris是食药两用真菌,在传统医学中应用广泛,并于2009年被我国卫生部批准为新资源食品。已有研究表明,蛹虫草提取物及其活性成分(虫草多糖、虫草素等)具有多种药理作用。从化学成分、体内/体外药理作用和产业化现状... 详细信息

蛹虫草Cordyceps militaris是食药两用真菌,在传统医学中应用广泛,并于2009年被我国卫生部批准为新资源食品。已有研究表明,蛹虫草提取物及其活性成分(虫草多糖、虫草素等)具有多种药理作用。从化学成分、体内/体外药理作用和产业化现状3个方面对蛹虫草相关文献进行梳理,对其调节免疫、抗肿瘤、调血脂、神经保护等药理作用及其相关大健康产品进行综述,并指出蛹虫草在药效物质基础发现、大健康产品研发方面存在的问题及解决思路,以期充分发掘其菌种资源,创造更大的医药价值、经济价值和社会价值。

关键词：蛹虫草新资源食品虫草多糖虫草素大健康产品抗肿瘤调血脂

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白芍对血管的保护作用及谱效关系研究

中国现代应用药学 2024年第14期41卷 1883-1891页

作者：王芳许平翠林炳锋王娜妮浙江中医药大学杭州311400 浙江省中医药研究院杭州310005

目的建立白芍(Paeoniae Radix Alba)HPLC指纹图谱,研究白芍指纹图谱与保护血管内皮细胞活性之间的谱效关系。方法以HPLC建立白芍指纹图谱;采用脂多糖诱导人脐静脉内皮细胞(HUVEC)和Tg(fli1:egfp)系斑马鱼模型,测定17批白芍提取物对血管... 详细信息

目的建立白芍(Paeoniae Radix Alba)HPLC指纹图谱,研究白芍指纹图谱与保护血管内皮细胞活性之间的谱效关系。方法以HPLC建立白芍指纹图谱;采用脂多糖诱导人脐静脉内皮细胞(HUVEC)和Tg(fli1:egfp)系斑马鱼模型,测定17批白芍提取物对血管内皮细胞的体内外的保护作用,运用灰色关联度和偏最小二乘法分析白芍指纹图谱与药效作用的谱效关系。结果构建白芍的HPLC图谱,标出11个共有峰,有较高的关联度,表明白芍中的多个成分可能对保护血管内皮细胞活性具有协同作用;与体内活性的关联序分别为P6>P7>P10>P11>P9>P5>P3>P2>P8>P1>P4,与体外活性的关联序分别为P6>P4>P2>P3>P5>P1>P10>P9>P7>P11>P8,其中指认6号峰为芍药苷,经偏最小二乘标准方程回归系数为正值,与保护血管内皮细胞活性和Tg(fli1:egfp)系斑马鱼血管呈正相关,且VIP>1.0;进一步检测活性成分药效作用发现芍药苷可提高脂多糖诱导内皮细胞模型增殖、迁移和成管能力,促进Tg(fli1:egfp)系斑马鱼血管生成,且存在浓度相关性,可认为是白芍保护血管内皮细胞的药效物质。结论白芍抗血管炎症损伤的主要药效物质为芍药苷,可为药材质量控制提供参考。

关键词：白芍指纹图谱血管内皮细胞斑马鱼谱效关系芍药苷