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Sigma因子基因表达与结核分枝杆菌异烟肼耐药关系探讨

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中国热带医学 2024年第3期24卷 299-303页

作者：江丽娜高丽王志锐王秀月王春花天津市病原微生物重点实验室天津市结核病控制中心天津300011

目的研究调控基因Sigma因子(sigA-sigM)在katG突变导致的异烟肼耐药结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)中的表达调控是否与异烟肼耐药相关,为研究异烟肼耐药的分子机制提供参考依据。方法选择2020—2022年天津市结核病控制... 详细信息

目的研究调控基因Sigma因子(sigA-sigM)在katG突变导致的异烟肼耐药结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)中的表达调控是否与异烟肼耐药相关,为研究异烟肼耐药的分子机制提供参考依据。方法选择2020—2022年天津市结核病控制中心耐药检测期间收集的初治患者菌株共95株,其中katG基因未突变的全敏菌株30例,katG突变导致的异烟肼耐药菌株共65例,包括11例单耐异烟肼菌株,24株异烟肼多耐药菌株(同时耐异烟肼和链霉素),30例异烟肼耐多药菌株(同时耐异烟肼、链霉素和利福平)。在异烟肼含药培养基上收集菌株后,提取菌株RNA,应用反转录聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)方法检测Sigma因子的相对表达量,采用Mann-Whitney U检验分析各个Sigma因子在不同异烟肼耐药表型菌株中的表达差异。结果sigA、sigC、sigF、sigG、sigH、sigI、sigJ、sigK、sigL的基因表达量在单耐异烟肼组中的表达量高于全敏组,差异有统计学意义(Z=4.368、5.701、6.865、4.021、5.126、2.670、5.983、4.701、5.490,P均<0.001)。多耐药组中sigA、sigC、sigE、sigF、sigG、sigH、si⁃gI、sigJ、sigK、sigL的基因表达量显著高于全敏组,差异有统计学意义(Z=-5.017、-4.670、-4.667、-5.456、-4.083、-5.393、-4.712、-6.971、-8.206、-5.211,P均<0.001)。耐多药组中sigC、sigD、sigE、sigF、sigG、sigH、sigI、sigJ、sigK、sigL的基因表达量显著高于全敏组,差异有统计学意义(Z=-5.537、-4.003、-5.216、-7.328、-7.730、-5.658、-4.440、-6.036、-4.862、-4.312,P均<0.001)。sigB、sigF、sigG在异烟肼单耐药、异烟肼耐多药和异烟肼多耐药3组之间的基因表达量差异显著,有统计学意义(Z=10.139、7.735、14.532,P均<0.001)。sigF、sigG、sigI、sigJ、sigL在异烟肼耐药组中的高表达率显著高于敏感组,差异有统计学意义(χ^(2)=17.410、45.673、57.661、42.896、26.363,P均<0.001)。结论sigF、sigG、sigI、sigJ、sigL与katG突变导致的异烟肼耐药相关。

关键词： Sigma因子耐药结核表达

天津市2019-2022年新报告HIV感染者抗病毒治疗前病毒载量基线特征分析

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中华流行病学杂志 2024年第3期45卷 353-357页

作者：赵璇候金余朱静瑾郑敏娜李龙宁铁林于茂河天津市疾病预防控制中心/天津市传染病病原微生物重点实验室性病艾滋病预防控制所天津300011

目的了解天津市新报告HIV感染者抗病毒治疗前病毒载量(VL)基线特征及相关因素。方法资料来源于中国疾病预防控制信息系统,研究对象为天津市2019-2022年新报告且首次抗病毒治疗前HIV感染者,收集其社会人口学特征、CD4^(+)T淋巴细胞(CD4)... 详细信息

目的了解天津市新报告HIV感染者抗病毒治疗前病毒载量(VL)基线特征及相关因素。方法资料来源于中国疾病预防控制信息系统,研究对象为天津市2019-2022年新报告且首次抗病毒治疗前HIV感染者,收集其社会人口学特征、CD4^(+)T淋巴细胞(CD4)计数及VL值等基线信息,基线高VL值定义标准为≥100000拷贝数/ml,分析影响VL水平的相关因素。采用SPSS 24.0软件进行统计学分析。结果研究对象新报告HIV感染者共1296例,其中,基线高VL值的HIV感染者占15.89%(206/1296)。多因素logistic回归分析结果显示,有STD史者(aOR=1.45,95%CI:1.00~2.08),基线高VL值的可能性较大;相比于基线CD4计数500个/µl者(aOR=0.30,95%CI:0.18~0.49)的基线高VL值的可能性较小。结论2019-2022年天津市HIV感染者抗病毒治疗前基线VL值高的比例较低,HIV感染者基线VL值高的相关因素为有STD史和基线CD4计数重点关注。

关键词：艾滋病病毒病毒载量抗病毒治疗基线

γ-干扰素释放试验在结核病筛查中的辅助诊断价值

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中国热带医学 2024年第2期24卷 171-175页

作者：江丽娜陈盛玉孟苏凯孙蕊吴振萍王秀月张玉华王春花天津市结核病控制中心天津市传染病病原微生物重点实验室天津300011

目的分析比较γ-干扰素释放试验(interferon-gamma releaseassay,IGRA)对结核病诊断的辅助价值和意义。方法采用回顾性分析的方法收集2020年1月—2021年12月在天津市结核病控制中心门诊部进行IGRA检测的462例疑似结核病患者的检测结果,... 详细信息

目的分析比较γ-干扰素释放试验(interferon-gamma releaseassay,IGRA)对结核病诊断的辅助价值和意义。方法采用回顾性分析的方法收集2020年1月—2021年12月在天津市结核病控制中心门诊部进行IGRA检测的462例疑似结核病患者的检测结果,根据诊断结果分为结核病组229例(肺结核组203例和肺外结核组26例),非结核病组233例。分析IGRA对结核病的辅助诊断价值,并将其与结核分枝杆菌培养、结核分枝杆菌/利福平耐药实时荧光定量核酸扩增检测技术(geneXpert Mycobacterium tuberculosis/rifampin,Xpert MTB/RIF)2种方法进行比较。结果IGRA、结核分枝杆菌培养和Xpert MTB/RIF在结核病患者中的阳性率分别为76.42%、29.26%、40.62%,与非结核病组比较(38.20%、0.00%、0.00%),差异有统计学意义(P0.05)。在菌阳患者组、非结核患者组中IGRA检测结核的阳性率分别为79.34%、38.20%,差异有统计学意义(χ^(2)=54.526,P<0.001);在菌阴患者组、非结核患者组中IGRA检测结核的阳性率分别为73.15%、38.20%,差异有统计学意义(χ^(2)=36.456,P<0.001)。结论IGRA在结核病患者的诊断中具有较高的灵敏度,在肺外结核和菌阴结核的筛查也有一定的优势,为临床上诊断结核病提供重要的参考依据。

关键词： γ-干扰素释放试验结核分枝杆菌培养实时荧光定量核酸扩增检测结核病

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骨化二醇及骨化三醇生物合成研究进展

生物工程学报 2024年第6期40卷 1601-1619页

作者：艾佳莹高吉凯殷子扬毛淑红工业发酵微生物教育部重点实验室天津300457 天津市工业微生物学重点实验室天津300457 天津科技大学生物工程学院天津300457

维生素D_(3)是对人体健康十分重要的维生素,可以促进肠道对钙的吸收、防止佝偻病等。骨化二醇[25(OH)VD_(3)]和骨化三醇[1α,25(OH)_(2)VD_(3)]是维生素D_(3)的两种活性衍生物,在防治骨质疏松及调节人的生理功能方面发挥着重要作用。目... 详细信息

维生素D_(3)是对人体健康十分重要的维生素,可以促进肠道对钙的吸收、防止佝偻病等。骨化二醇[25(OH)VD_(3)]和骨化三醇[1α,25(OH)_(2)VD_(3)]是维生素D_(3)的两种活性衍生物,在防治骨质疏松及调节人的生理功能方面发挥着重要作用。目前,骨化二醇及骨化三醇的生产以化学合成居多,但化学合成具有产物产量低、副产物多以及对环境不友好等缺点。因此开发一种绿色、安全、对环境友好的生物催化合成途径显得尤为重要。本文综述了骨化二醇及骨化三醇的生物催化合成途径,并介绍了该途径中的关键酶P450酶,包括P450单加氧酶(cytochrome P450 monooxygenases,CYPs)和P450过加氧酶(unspecific peroxygenases,UPOs)。其中研究较为广泛的是P450单加氧酶,通过解析其催化作用机制,分析不同氧化还原伴侣适配以及关键氨基酸残基对酶催化活性的重要影响。此外,对利用H2O2驱动的UPOs的催化机理、高效异源表达策略以及H2O2的原位再生等方面也进行了总结,UPOs优势在于既不需要昂贵的辅因子也不需要氧化还原伴侣的参与,是十分有前景的生物催化剂。本文为进一步开发或改造相关P450酶来高效生产VD_(3)活性衍生物提供了重要的参考。

关键词：骨化二醇骨化三醇 P450s 生物催化合成

多换流器直流系统的虚拟惯性评估与控制参数协调设计

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电力系统自动化 2024年第10期48卷 87-95页

作者：张可心朱琳赵学深李霞林郭力王成山智能电网教育部重点实验室(天津大学) 天津市300072 天津市智慧能源与信息技术重点实验室天津市300072

针对基于类虚拟同步发电机(AVSG)的多换流器直流系统遇到的非预期虚拟惯性问题,提出了一种多换流器直流系统虚拟惯性通用分析方法,有效修正了系统级等效AVSG外特性。首先,将多个AVSG控制回路等效为一个等值AVSG控制回路,建立了直流系统... 详细信息

针对基于类虚拟同步发电机(AVSG)的多换流器直流系统遇到的非预期虚拟惯性问题,提出了一种多换流器直流系统虚拟惯性通用分析方法,有效修正了系统级等效AVSG外特性。首先,将多个AVSG控制回路等效为一个等值AVSG控制回路,建立了直流系统的等值单台AVSG模型。其次,提出了一种系统级虚拟惯性评估方法,从等值单台AVSG模型的输出阻抗频域响应特性角度对系统级虚拟惯性进行评估。然后,讨论了电压比例-积分(PI)控制参数对虚拟惯性特性的影响,并开展了电压PI控制参数和虚拟惯性系数间的协调设计。最后,在PLECS仿真软件及RT-BOX硬件在环实验平台上搭建了多换流器直流系统的开关模型,通过多种实验工况验证了等值单台AVSG模型和控制参数协调设计的有效性和可行性。

关键词：类虚拟同步发电机输出阻抗直流系统等效降阶模型虚拟惯性协调设计

热带印-太海温与海河流域夏季降水的联合模态及降水预测应用

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地球物理学报 2024年第6期67卷 2069-2084页

作者：郝钰茜郝立生何丽烨程善俊天津市海洋气象重点实验室天津300074 天津市气候中心天津300074

利用1961—2020年中国站点观测降水资料和英国Hadley中心海表面温度资料,针对海河流域夏季降水预测困难的问题,通过多变量经验正交分解(MVEOF)方法的正、反向应用,分析了热带印度洋-太平洋前期海温变化与海河流域夏季降水异常年际变化... 详细信息

利用1961—2020年中国站点观测降水资料和英国Hadley中心海表面温度资料,针对海河流域夏季降水预测困难的问题,通过多变量经验正交分解(MVEOF)方法的正、反向应用,分析了热带印度洋-太平洋前期海温变化与海河流域夏季降水异常年际变化的联合模态特征,据此建立了海河流域夏季降水的客观统计预测模型并检验预测效果.结果表明:(1)前期ENSO事件和热带印度洋(TIO)海温季节演变与海河流域夏季降水异常分布型关系密切.若前冬El Niño事件达到鼎盛,春季开始衰减,并引起TIO海盆尺度滞后增暖,则当年夏季海河流域降水一致性偏多,偏多中心在流域北部;若前秋El Niño向La Niña事件转变,随后TIO暖海温转冷,则夏季海河流域降水易出现西部偏多、东部偏少型分布;此外,如果前期出现太平洋经向模态(冷舌模态)的海温异常分布时,夏季流域降水异常为西北多、东南少(南多北少).(2)根据联合模态统计关系建立的预测模型,对2013—2020年海河流域夏季降水有较好的预测能力.与实况相比,模型对全域降水异常预测的时间相关系数为0.86、趋势预测准确率为87.50%,对站点的趋势预测准确率为51.35%~70.27%,对旱涝程度预测的平均偏差仅为45.92%,但对降水异常空间分布的预测技巧整体较低.本文阐明了前期热带印-太海温与海河流域夏季降水异常的统计关系,并建立了海河流域夏季降水的客观统计预测模型,为我国华北地区短期气候预测提供了一种新的有效参考.

关键词：海河流域夏季降水客观预测方法热带印-太海温异常

基于转化相关重组克隆曲酸合成基因簇及其在黑曲霉中的异源整合表达

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微生物学通报 2024年

作者：赵宇欣谭宇洋高莹朱柏松张明怡曹威天津科技大学生物工程学院工业发酵微生物教育部重点实验室天津市工业微生物重点实验室

【背景】黑曲霉是一种重要的丝状真菌底盘细胞，然而对其进行大片段DNA的遗传操作存在工具缺乏、效率低下的问题。海量基因组数据中存在大量未被鉴定的次级代谢产物合成基因簇，因相应DNA分子量大而难以克隆，大部分基因与产物分子之间... 详细信息

【背景】黑曲霉是一种重要的丝状真菌底盘细胞，然而对其进行大片段DNA的遗传操作存在工具缺乏、效率低下的问题。海量基因组数据中存在大量未被鉴定的次级代谢产物合成基因簇，因相应DNA分子量大而难以克隆，大部分基因与产物分子之间的映射关系尚未被解析。【目的】开发一种适配黑曲霉的大片段DNA分子直接克隆的方法。以直接克隆米曲霉来源的曲酸合成基因簇(约30 kb)在黑曲霉底盘细胞中表达，实现曲酸的异源发酵。【方法】基于转化相关重组(transformation-associated recombination， TAR)克隆，构建适配黑曲霉转化的TAR捕获骨架载体pSEA-TAR；将曲酸合成基因簇上下游各1 kb同源DNA序列先后引入pSEA-TAR，中间以唯一的XhoⅠ相隔，得到曲酸合成基因簇捕获载体pSEA-KLR；随后，将NotⅠ/SbfⅠ消化后含有完整曲酸合成基因簇及上下游同源序列的米曲霉基因组与经XhoⅠ线性化的pSEA-KLR共同转化酿酒酵母VL6-48，通过营养缺陷筛选，获得成功捕获曲酸合成基因簇的重组子，提取质粒，电转化大肠杆菌扩增重组质粒；借助农杆菌介导黑曲霉转化，对获得的含有曲酸合成基因簇的黑曲霉转化子进行曲酸发酵，检测曲酸合成水平。【结果】获得了含有ARSH4/CEN6、TRP1、hph和LB/RB-T-DNA repeat的基于TAR克隆、适配黑曲霉表达的大片段DNA捕获载体pSEA-TAR。借助酿酒酵母高效的同源重组系统，通过同源重组获得含有曲酸合成基因簇的重组质粒pSEA-TAR-KA，捕获成功率为5.9%。对获得的含有曲酸合成基因簇的10株黑曲霉重组菌株KA1-KA10进行发酵分析发现均成功合成了曲酸，其中黑曲霉KA-2发酵7 d后曲酸水平最高，达到5.86 g/L。【结论】构建了适配黑曲霉的TAR克隆体系，用于大片段DNA高效捕获、重构和表达大型生物合成基因簇。以来源于米曲霉的曲酸合成基因簇捕获及在黑曲霉中成功实现曲酸合成验证了其有效性，进一步丰富了黑曲霉作为底盘细胞在重要化合物绿色生物制造中的作用。

关键词：转化相关重组(TAR)克隆大片段DNA 黑曲霉曲酸合成基因簇

天津市高校学生艾滋病知信行现状及高危性行为影响因素

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中国学校卫生 2024年第2期45卷 203-206,212页

作者：刘轶柳忠泉武子明龚卉柏建芸于茂河天津市疾病预防控制中心性病艾滋病预防控制所 300011 天津市传染病病原微生物重点实验室

目的了解天津市高等院校学生艾滋病知信行现状和高危性行为的影响因素,为艾滋病精准防治提供科学依据。方法2022年11—12月,采用分层整群随机抽样方法调查天津市56所高等院校64697名学生艾滋病知信行现状,采用问卷星开展网络问卷调查。... 详细信息

目的了解天津市高等院校学生艾滋病知信行现状和高危性行为的影响因素,为艾滋病精准防治提供科学依据。方法2022年11—12月,采用分层整群随机抽样方法调查天津市56所高等院校64697名学生艾滋病知信行现状,采用问卷星开展网络问卷调查。描述性分析高校学生艾滋病知信行现状,应用χ^(2)检验和多因素Logistic回归模型分析高校学生高危性行为的影响因素。结果天津市高校学生艾滋病防治知识知晓人数达到87.33%,性态度开放人数为70.73%。在最近一年发生过性行为的3463名学生中,42.13%发生过高危性行为。多因素Logistic回归分析结果显示,女性、有恋爱对象、接受过性教育以及艾滋病防治知识与高危性行为均呈负相关(OR值分别为0.66,0.59,0.81,0.59,P值均天津市高校学生艾滋病知晓率较高,但高危性行为仍处于较高水平。需进一步有针对性开展宣传教育和行为干预,控制艾滋病传播流行。

关键词：获得性免疫缺陷综合征健康知识态度实践回归分析学生

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铁蛋白纳米颗粒体内成像及肿瘤靶向性研究

中国生物工程杂志 2024年第4期44卷 1-13页

作者：张磊孙晓敬马茜郭娇李碧璇张永峰田甜汪洋西安医学院基础医学部西安市病原微生物与肿瘤免疫重点实验室西安710021

目的:构建近红外荧光探针修饰的铁蛋白纳米颗粒,研究其作为体内成像系统的安全性以及在小鼠体内的生物分布情况和对肿瘤组织的靶向性。方法:通过在铁蛋白(ferritin)表面人工设计半胱氨酸点突变,通过半胱氨酸巯基和含有马来酰亚胺(maleim... 详细信息

目的:构建近红外荧光探针修饰的铁蛋白纳米颗粒,研究其作为体内成像系统的安全性以及在小鼠体内的生物分布情况和对肿瘤组织的靶向性。方法:通过在铁蛋白(ferritin)表面人工设计半胱氨酸点突变,通过半胱氨酸巯基和含有马来酰亚胺(maleimide)的Dy731近红外荧光探针分子进行巯基偶联,对铁蛋白纳米颗粒表面进行功能化修饰,使荧光探针以共价的形式结合在蛋白纳米颗粒的表面;将近红外荧光探针修饰过的铁蛋白纳米颗粒(Dy731-Ft)与5%w/v琼脂糖溶液混合冷却后制成凝胶,置于小鼠皮下和腹腔肌肉壁下,检测蛋白纳米颗粒穿透皮肤和肌肉组织的能力;将Dy731-Ft蛋白纳米颗粒通过尾静脉对小鼠进行活体注射,观察小鼠是否产生急性不良反应,检测近红外荧光强度以观察Dy731-Ft作为体内成像系统在小鼠体内的分布情况;构建U87-MG肿瘤异种移植动物模型,进行尾静脉注射验证Dy731-Ft在荷瘤小鼠组织器官内的分布和对于肿瘤组织的靶向性。结果:通过动物实验表明,小鼠体内注射铁蛋白纳米颗粒和显像期间及之后均未见急性不良反应,说明铁蛋白纳米颗粒具有良好的生物相容性,进入体内主要在肝脏积累。结论:近红外Dy731-Ft蛋白纳米颗粒能够靶向U87-MG肿瘤组织,推测其在肿瘤组织内的积累可能与转铁蛋白受体1(transferrin receptor 1,TfR-1)介导的细胞内吞作用和肿瘤组织增强渗透性以及滞留效应(enhanced permeability and retention effect,EPR)的协同作用相关。

关键词：铁蛋白纳米颗粒肿瘤靶向成像转铁蛋白受体1