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山奈酚通过线粒体依赖的途径减轻高糖诱导的足细胞损伤

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中国老年学杂志 2024年第10期44卷 2516-2520页

作者：黄威饶艳玲武汉市第三医院中医科武汉市第五医院中医科

目的探讨山奈酚(Kae)对高糖诱导的损伤足细胞生物学行为的影响及其可能的机制。方法 25 mmol/L的D-葡萄糖构建足细胞损伤模型，CCK8检测Kae对足细胞的毒性，不同浓度的Kae干预高糖诱导的足细胞24、48 h和72 h, CCK8检测细胞存活率，确... 详细信息

目的探讨山奈酚(Kae)对高糖诱导的损伤足细胞生物学行为的影响及其可能的机制。方法 25 mmol/L的D-葡萄糖构建足细胞损伤模型，CCK8检测Kae对足细胞的毒性，不同浓度的Kae干预高糖诱导的足细胞24、48 h和72 h, CCK8检测细胞存活率，确定Kae的低、中、高剂量和作用时间。将细胞分成对照组、模型组、Kae低、中、高剂量组。CCK8检测细胞存活率，流式检测细胞凋亡率，JC-1荧光探针法检测线粒体膜电位变化，2,7-二氯荧光素二乙酸酯(DCFH-DA)探针法检测活性氧(ROS)含量，Western印迹检测细胞中肾病蛋白(Nephrin)、足突蛋白(Podocin)、线粒体融合素(MFN)1、MFN2蛋白的表达水平。结果与对照组相比，模型组细胞存活率、线粒体膜电位、Nephrin、Podocin、MFN1、MFN2蛋白表达水平均显著降低，细胞凋亡率和ROS含量均显著升高(P0.05)。结论 Kae能够提高高糖诱导的损伤足细胞的存活率，抑制细胞凋亡，减轻足细胞损伤，其机制可能与Kae改善线粒体功能有关。

关键词：山奈酚糖尿病肾病足细胞线粒体功能

补阳还五汤通过miR-26a-5p激活PTEN/PI3K/Akt信号通路减轻大鼠脑缺血再灌注损伤

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中国中药杂志 2024年第15期49卷 4197-4206页

作者：张修红傅开龙林侃李楠姚明龙郑关毅福建医科大学附属协和医院中医科福建福州350001

为探讨补阳还五汤抗大鼠脑缺血再灌注损伤的机制,180只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、补阳还五汤组、补阳还五汤+miR-26a-5p激动剂(激动剂)组、补阳还五汤+激动剂阴性对照(激动剂阴性对照)组,每组36只;每组又按再灌注时间分为第3、7... 详细信息

为探讨补阳还五汤抗大鼠脑缺血再灌注损伤的机制,180只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、补阳还五汤组、补阳还五汤+miR-26a-5p激动剂(激动剂)组、补阳还五汤+激动剂阴性对照(激动剂阴性对照)组,每组36只;每组又按再灌注时间分为第3、7、14天3个亚组。除假手术组外,其余各组采用线栓法诱导大脑中动脉阻塞(MCAO)模型,缺血90 min后再灌注。补阳还五汤组、激动剂组、激动剂阴性对照组建模24 h后开始给予补阳还五汤灌胃,每日2次;假手术组、模型组灌胃等量生理盐水,直至处死的前1 d。激动剂组和激动剂阴性对照组建模24 h后分别于侧脑室注射miR-26a-5p激动剂和miR-26a-5p激动剂阴性对照剂,其他各组注射等量生理盐水。各组建模24 h后腹腔注射5-溴脱氧尿苷(BrdU),每日1次,直至处死的前1 d。采用改良版神经损伤严重程度评分(mNSS)评价神经功能缺损,2,3,5-三苯四氮唑(TTC)染色检测脑梗死体积,TUNEL染色检测脑组织细胞凋亡,免疫荧光双标记法检测BrdU/NeuN双阳性(BrdU^(+)/NeuN^(+))细胞数评估新生神经元,双荧光素酶实验验证PTEN是miR-26a-5p的靶基因,实时荧光定量聚合酶链式反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)检测PTEN及miR-26a-5p的表达,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测PTEN、PI3K、p-PI3K、Akt、p-Akt的表达。结果显示,与模型组比较,补阳还五汤可促进脑缺血大鼠神经功能恢复,缩小脑梗死体积,增加BrdU+/NeuN+细胞数,上调miR-26a-5p的表达,调控PTEN/PI3K/Akt信号通路,促进神经元新生;侧脑室注射miR-26a-5p激动剂后加强上述效应。综上所述,补阳还五汤可促进脑缺血大鼠神经功能恢复,减小脑梗死体积,促进脑缺血大鼠神经元新生,其机制可能是通过miR-26a-5p激活PTEN/PI3K/Akt信号通路。

关键词：补阳还五汤脑缺血再灌注神经保护 miR-26a-5p 大脑中动脉闭塞局灶性脑缺血 PTEN/PI3K/Akt

华蟾素通过调控HIF1α的SUMO修饰促进胃癌细胞铁死亡

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中国药理学通报 2024年第7期40卷 1342-1349页

作者：郑梓莹张燕陈文林玉婷叶磊福建医科大学附属第二医院中医科福建泉州362000

目的本研究旨在探讨华蟾素(cinobufotalin,CB)调控缺氧诱导因子1α(hypoxia inducible factor 1 alpha,HIF1α)的小泛素样修饰相关蛋白(small ubiquitin-like modifier,SUMO)修饰对胃癌细胞铁死亡的影响。方法使用不同浓度CB处理人正常胃黏膜上皮细胞(GES-1)和人胃癌细胞(MGC803)。MTT检测细胞活力并计算CB在胃癌细胞中的IC_(50)值,Transwell检测侵袭。铁死亡激动剂(erastin)或抑制剂(ferrostatin-1)处理癌细胞并评估胃癌细胞脂质活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平、MDA水平和细胞凋亡、细胞内总铁水平和Fe^(2+)的水平。Western blot检测SUMO1和HIF1α的表达,免疫沉淀(immunoprecipitation,IP)检测SUMO1和HIF1α的相互作用。建立异种移植瘤模型,使用CB或erastin治疗,评估CB在体内对肿瘤生长和胃癌细胞铁死亡的影响。结果2μmol·L^(-1)以下CB未对GES-1细胞活力产生影响。与Con组相比,CB处理剂量依赖性地抑制MGC803细胞活力和侵袭。与Con组比较,CB处理提高胃癌细胞脂质ROS、MDA、总铁和Fe^(2+)水平,并促进细胞凋亡(均P<0.05)。CB联合erastin增强铁死亡,而ferrostatin-1处理则抑制CB诱导的胃癌细胞铁死亡。机制上,CB抑制SUMO1表达,减少HIF1α的SUMO化修饰,进而抑制其表达。CB诱导的胃癌细胞铁死亡能够被SUMO1过表达载体逆转。体内实验证实,CB能够抑制肿瘤生长并诱导胃癌细胞铁死亡。结论CB通过抑制HIF1α的SUMO化修饰进而诱导胃癌细胞铁死亡。

关键词：华蟾素胃癌缺氧诱导因子1α 小泛素样修饰蛋白铁死亡细胞凋亡

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疏肝健脾活血方在乙肝肝硬化患者中的应用

辽宁中医杂志 2024年

作者：占宝鋆黄石市第二医院中医科

目的探讨疏肝健脾活血方在乙肝肝硬化患者中的应用。方法将92例2020年1月～2022年12月黄石市第二医院收治的乙肝肝硬化患者随机纳入A组（46例）和B组（46例）。所有患者均采用常规治疗，在此基础上A组患者应用恩替卡韦治疗，B组在A组... 详细信息

目的探讨疏肝健脾活血方在乙肝肝硬化患者中的应用。方法将92例2020年1月～2022年12月黄石市第二医院收治的乙肝肝硬化患者随机纳入A组（46例）和B组（46例）。所有患者均采用常规治疗，在此基础上A组患者应用恩替卡韦治疗，B组在A组基础上给予疏肝健脾活血方治疗，两组均连续治疗6个月。比较两组治疗6个月后的临床疗效，治疗前、治疗6个月后的肝功能、肝纤维化指标、凝血功能，研究期间安全性。结果治疗6个月后，B组总有效率为97.83%，高于A组的82.61%；与治疗前比较，治疗6个月后，B组血清丙氨酸转氨酶（ALT）、天冬氨酸转氨酶（AST）、总胆红素（TBIL）、透明质酸（HA）、层粘连蛋白（LN）、Ⅲ型前胶原（PC-Ⅲ）及Ⅳ型胶原（Ⅳ-C）水平均降低，B组低于A组；血清前白蛋白（PAB）、血浆纤维蛋白原（FIB）水平则均升高，且B组高于A组；血浆活化部分凝血活酶时间（APTT）、凝血酶原时间（PT）、凝血酶时间（TT）值均缩短，且B组短于A组（P<0.05）。两组研究期间均没有发生严重不良反应，且均经过对应治疗后有所改善。结论疏肝健脾活血方可有效改善乙肝肝硬化患者的肝功能、凝血功能，减轻肝纤维化程度，具有较高临床治疗效果的同时安全性良好。

关键词：乙肝肝硬化疏肝健脾活血方肝功能

川芎定痛饮加减联合盐酸氟桂利嗪胶囊治疗偏头痛的疗效及对脑血流动力学和血清神经递质的影响

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辽宁中医杂志 2024年

作者：啜阿丹王丽彦林禹舜北京市第六医院中医科

目的：探讨川芎定痛饮加减联合盐酸氟桂利嗪胶囊治疗偏头痛的疗效和安全性。方法：偏头痛患者86例随机分为对照组43例与试验组43例。对照组予以盐酸氟桂利嗪胶囊治疗，试验组予以川芎定痛饮加减联合盐酸氟桂利嗪胶囊治疗，两组均连续治... 详细信息

目的：探讨川芎定痛饮加减联合盐酸氟桂利嗪胶囊治疗偏头痛的疗效和安全性。方法：偏头痛患者86例随机分为对照组43例与试验组43例。对照组予以盐酸氟桂利嗪胶囊治疗，试验组予以川芎定痛饮加减联合盐酸氟桂利嗪胶囊治疗，两组均连续治疗4周。观察两组疗效和不良反应，于治疗前和治疗后进行对患者进行偏头痛中医证候积分、视觉模拟量表（VAS）评分和特异性偏头痛生活质量量表（MSQ）评分，进行脑血流速度[大脑前动脉（ACA）、大脑后动脉（PCA）、大脑中动脉（MCA）]和血清神经递质[5-羟色胺（5-HT）、降钙素基因相关肽（CGRP）、β-内啡肽（β-EP）]的测定。结果：试验组显愈率显著高于对照组（P0.05）。治疗后，试验组中医证候积分和VAS评分显著低于对照组（P0.05）。结论：川芎定痛饮加减联合盐酸氟桂利嗪胶囊治疗偏头痛患者能够更有效缓解患者偏头痛症状，提高疗效，其作用机制可能与调节脑血流速度和血清神经递质表达有关。

关键词：偏头痛川芎定痛饮盐酸氟桂利嗪胶囊脑血流动力学神经递质

基于网络药理学研究心舒宝片抗炎、血管舒张和心肌保护作用机制

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中国中药杂志 2024年第2期49卷 487-497页

作者：蔡晴晴李煜黄颖王丽芳张方博杨洪军天津中医药大学天津301617 中国中医科学院中药研究所北京100700 中国中医科学院医学实验中心北京100700 中国中医科学院北京100700

通过实验研究心舒宝片全方及其单味药肠吸收液对抗炎、血管舒张和心肌保护的影响,并结合网络药理学阐明其潜在作用机制,Western blot进一步验证潜在核心靶点的表达情况。脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)刺激RAW264.7细胞产生炎症因子观... 详细信息

通过实验研究心舒宝片全方及其单味药肠吸收液对抗炎、血管舒张和心肌保护的影响,并结合网络药理学阐明其潜在作用机制,Western blot进一步验证潜在核心靶点的表达情况。脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)刺激RAW264.7细胞产生炎症因子观察抗炎作用,离体微血管活性实验观察血管舒张作用,氧糖剥夺(oxygen-glucose deprivation,OGD)损伤H9c2细胞实验观察心肌保护作用。使用Herb数据库结合心舒宝片肠吸收液成分信息,获得心舒宝片化学成分,SwissTargetPrediction数据库查找成分作用靶点;GeneCards数据库查询抗炎、血管舒张和心肌保护相关的靶点。药物靶点分别与各疾病靶点以及疾病总靶点取交集后,进行蛋白-蛋白互作(protein-protein interaction,PPI)分析,得到核心靶点,最后将四者交集核心靶点导入Cytoscape 3.9.1进行基因本体论(Gene Ontology,GO)和京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)分析。抗炎实验表明心舒宝片全方和各单味药均有抗炎作用,以郁金抑制肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)的作用最强,以丹参抑制白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)的作用最强。离体微血管舒张实验表明心舒宝片、郁金和山楂均有血管舒张作用,单味药以山楂最强。心肌保护实验表明心舒宝片全方、丹参、刺五加和白芍均具有心肌保护作用,单味药以丹参最强。网络药理学研究结果表明除全方外,抗炎作用以丹参活性成分最多,血管舒张和心肌保护作用以郁金活性成分最多,丹参次之。心舒宝片发挥抗炎、血管舒张和心肌保护作用的核心靶点为内皮型一氧化氮合酶3(nitric oxide synthase 3,NOS3),并用Western blot实验验证表明心舒宝片可显著增加OGD损伤H9c2细胞NOS3表达水平。GO生物学过程分析主要与细胞脂质输出、血压调节和炎症因子等有关;KEGG通路富集分析主要涉及AGE-RAGE信号通路和HIF-1信号通路等。

关键词：心舒宝片抗炎血管舒张心肌保护含药肠吸收液网络药理学 NOS3

栀子豉汤结合宁神补肾法针刺治疗失眠（心肾不交型）临床效果研究

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中华中医药学刊 2024年

作者：潘英英康静王海铭山西省人民医院中医科

目的观察栀子豉汤结合宁神补肾法针刺治疗失眠（心肾不交型）临床效果。方法将山西省人民医院中医科2021年2月～2023年3月收治的110例失眠（心肾不交型）患者以随机数字表法分为对照组、观察组，各组55例，给予对照组患者右佐匹克隆片... 详细信息

目的观察栀子豉汤结合宁神补肾法针刺治疗失眠（心肾不交型）临床效果。方法将山西省人民医院中医科2021年2月～2023年3月收治的110例失眠（心肾不交型）患者以随机数字表法分为对照组、观察组，各组55例，给予对照组患者右佐匹克隆片治疗，观察组患者口服右佐匹克隆片同时结合栀子豉汤及宁神补肾法针刺治疗，治疗及研究过程中；对照组脱落2例患者，观察组脱落3例患者，比较各组数据：疗效、患者中医症候积分（入睡困难、心烦失眠、心悸多梦、潮热盗汗、五心烦热、头晕耳鸣等）变化、多导睡眠监测（Polysomnography，PSG）指标变化、焦虑自评（Self-RatingAnxietyScale，SAS）及抑郁自评量表（Self-ratingdepressionscale，SDS）评分变化、匹兹堡睡眠指数（Pittsburghsleepqualityindex，PSQI）评分变化及简易智力状态检查量表（Mini-mentalStateExamination，MMSE）评分变化、生活质量量表（shortform36questionnaire，SF-36）评分变化、不良反应情况。结果观察组与对照组患者治疗总有效率分别为96.15%、83.02%，观察组治疗总有效率显著更高（p＜0.05）。治疗前两组患者中医症候积分（入睡困难、心烦失眠、心悸多梦、潮热盗汗、五心烦热、头晕耳鸣等）、PSG相关指标（睡眠总时长、觉醒时长、睡眠潜伏期与睡眠效率）、SAS评分以及SDS评分、PSQI评分、MMSE评分以及SF-36评分比较（p＞0.05），经治疗后各组患者中医症候积分（入睡困难、心烦失眠、心悸多梦、潮热盗汗、五心烦热、头晕耳鸣等）、PSG相关指标（睡眠总时长、觉醒时长、睡眠潜伏期与睡眠效率）、SAS评分以及SDS评分、PSQI评分、MMSE评分以及SF-36评分均显著改善，观察组患者治疗后中医症候积分（入睡困难、心烦失眠、心悸多梦、潮热盗汗、五心烦热、头晕耳鸣等）、PSG相关指标（睡眠总时长、觉醒时长、睡眠潜伏期与睡眠效率）、SAS评分以及SDS评分、PSQI评分、MMSE评分以及SF-36评分显著优于对照组患者（p＜0.05）；观察组与对照组患者治疗不良反应率分别为1.92%、13.21%，观察组患者总不良反应率更低（p＜0.05）。结论栀子豉汤结合宁神补肾法针刺治疗失眠（心肾不交型）临床疗效好，患者临床症状、心理状态与睡眠质量均改善，认知功能与生活质量均提升，且不良反应少，较为安全。

关键词：失眠心肾不交型栀子豉汤宁神补肾法针刺疗效睡眠质量不良反应

黄芪建中汤通过PPARγ信号对脾胃虚寒大鼠结肠屏障的影响及机制

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中国老年学杂志 2024年第8期44卷 1911-1917页

作者：王明丽赵卫国宋鹏程赵学荣杨娜宋长军王响杨凤爱李炳茂衡水市人民医院中医科

目的探讨黄芪建中汤对脾胃虚寒大鼠结肠屏障的保护作用及其对过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR)γ信号的调节机制。方法采用RNA干扰PPARγ的表达，采用4℃低温醋酸联合精炼动物脂肪油灌胃来构建脾胃虚寒大鼠模型。正常组在造模过程中... 详细信息

目的探讨黄芪建中汤对脾胃虚寒大鼠结肠屏障的保护作用及其对过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR)γ信号的调节机制。方法采用RNA干扰PPARγ的表达，采用4℃低温醋酸联合精炼动物脂肪油灌胃来构建脾胃虚寒大鼠模型。正常组在造模过程中均以等剂量的生理盐水进行灌胃。模型组、中药组和抑制剂组在造模结束后进行如下处理，中药组每日腹腔注射5×10～9 pfu/ml的siRNA-PPARγ-NC,并且以15 g/kg的黄芪建中汤灌胃，抑制剂组每日腹腔注射5×10～9 pfu/ml的siRNA-PPARγ,并且以15 g/kg的黄芪建中汤灌胃，模型组和正常组每日腹腔注射5×10～9 pfu/ml的siRNA-PPARγ-NC,并且以15 g/kg的等剂量的生理盐水灌胃，每日给药一次。酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组血清肿瘤坏死因子(TNF)-α和白细胞介素(IL)-6含量；过碘酸雪夫(PAS)染色检测结肠组织的杯状细胞数量；流式细胞术检测细胞的凋亡率；免疫组化检测结肠组织中闭锁小带蛋白(ZO)-1和紧密连接蛋白(Claudin)-1表达；Western印迹检测结肠组织中PPARγ表达。结果与正常组相比，模型组、中药组、抑制剂组血清中TNF-α和IL-6含量、细胞凋亡率均明显升高，杯状细胞数量、ZO-1和Claudin-1阳性细胞比例及PPARγ表达明显降低(均P<0.05);与模型组相比，中药组、抑制剂组血清中TNF-α和IL-6含量、细胞凋亡率均明显降低，杯状细胞数量、ZO-1和Claudin-1阳性细胞比例及PPARγ表达明显升高(均P<0.05);与中药组相比，抑制剂组血清中TNF-α和IL-6含量、细胞凋亡率均明显升高，杯状细胞数量、ZO-1和Claudin-1阳性细胞比例及PPARγ表达明显降低(均P<0.05)。结论黄芪建中汤能抑制脾胃虚寒大鼠的炎性应激，抑制其细胞凋亡，保护结肠黏膜屏障。

关键词：黄芪建中汤脾胃虚寒结肠屏障过氧化物酶体增殖物激活受体γ信号

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冠心病的中医认识与经方治疗策略

中国中药杂志 2024年第13期49卷 3684-3692页

作者：蓝宇罗富锟于悦王小雅王朋倩熊兴江中国中医科学院广安门医院北京100053 中国中医科学院中药研究所北京100700

冠心病为心血管领域的常见疾病,我国约有1140万例冠心病患者,其患病率与病死率逐年上升,已成为威胁人类健康和公共卫生的重要因素。在现代医学的一级、二级预防,介入,冠状动脉旁路移植术等干预下,其病死率虽有下降,但仍存在阿司匹林等... 详细信息

冠心病为心血管领域的常见疾病,我国约有1140万例冠心病患者,其患病率与病死率逐年上升,已成为威胁人类健康和公共卫生的重要因素。在现代医学的一级、二级预防,介入,冠状动脉旁路移植术等干预下,其病死率虽有下降,但仍存在阿司匹林等药物抵抗、继发性硝酸甘油失效、介入术后乏力胸闷焦虑、冠心病合并高出血风险等问题,已成为现代医学亟待解决的临床关键科学问题。冠心病属于中医学“胸痹、心痛”范畴。在病因上,包括外感寒邪、情志内伤、禀赋不足、体虚劳伤等,这与现代医学中的交感神经活性、双心疾病状态、家族病史、心血管多代谢紊乱等因素密切相关。在病机上,包括气郁、痰浊、瘀血、火热、寒凝、正虚等证型。结合现代病理,气郁与焦虑抑郁状态等情志因素相关,痰浊与脂质代谢异常相关,瘀血与血液循环与凝血功能异常相关,火热与炎症反应相关,寒凝与免疫反应亢进相关,正虚与后期心力衰竭、合并慢性消耗性疾病或年老体虚相关。在经方治疗策略上,气郁推荐柴胡加龙骨牡蛎汤,痰浊推荐温胆汤、瓜蒌薤白半夏汤,瘀血推荐血府逐瘀汤、桂枝茯苓丸,火热推荐小陷胸汤、三黄泻心汤,寒凝推荐枳实薤白桂枝汤,正虚推荐人参汤等。研究发现,在病机认识上,由于古今疾病谱变化以及体质差异,导致冠心病的核心病机从阳微阴弦的胸阳不振、“寒凝”为主,转变为“气郁”“痰浊”“痰瘀”“火热”等,呈现出由寒到热,由虚到实的转变;在经方合方上,有规律可循,即某疾病的核心方证常固定性地与其他方证合方出现,这可能与疾病内在的病理生理机制的发展变化相关;在现代药理成果的临床运用上,根据团队“病机结合病理,药性结合药理”临证原则,大量经典名方的现代药理学研究有助于现代临床的“靶向”治疗;经方还有助于改善阿司匹林抵抗、氯吡格雷抵抗,介入术后焦虑,易合并高出血风险,冠脉临界病变的缺乏有效阻断、延缓心肌梗死后心力衰竭进展等临床难题。冠心病的病因病机创新认识,有助于进一步提升中医药临床疗效,进而推进经方治疗冠心病临证体系的完善。

关键词：冠心病经方方证对应中医药