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紫外交联免疫沉淀技术原理及其应用

生物化学与生物物理进展 2024年第1期51卷 136-144页

作者：杜亚琼王琬瑶高帆徐旸时文涛天津医科大学基础医学院遗传学系天津300070 南开大学医学院天津300071

紫外交联免疫沉淀(UV cross-linking immunoprecipitation,CLIP)技术最初建立于2003年。通过紫外交联、免疫沉淀、逆转录及后续的高通量测序等步骤,可在全转录组范围鉴定特定RNA结合蛋白(RNA-binding proteins,RBP)的靶标RNA序列和结合... 详细信息

紫外交联免疫沉淀(UV cross-linking immunoprecipitation,CLIP)技术最初建立于2003年。通过紫外交联、免疫沉淀、逆转录及后续的高通量测序等步骤,可在全转录组范围鉴定特定RNA结合蛋白(RNA-binding proteins,RBP)的靶标RNA序列和结合位点。在近20年的应用过程中,该技术被不断改进和完善,可操作性、实验结果的准确性都有所提升,技术的应用范围也有所拓展。本文对CLIP技术的基本原理、实验方法、实际应用进行介绍,着重比较几种主流CLIP技术的异同,并对如何选择具体的技术路线提出建议。

关键词：紫外交联免疫沉淀高通量测序 RNA结合蛋白

伊马替尼通过Nrf2/HO-1信号通路调节脂多糖诱导的小鼠急性肺损伤的机制

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中华急诊医学杂志 2024年第8期33卷 1104-1109页

作者：李端阳刘雅茹周芷晴杨红宗晓龙李真玉天津医科大学第二医院急诊医学科天津300211 天津医科大学基础医学院药理学系天津300070 天津医科大学第二医院检验科天津300211

目的评价伊马替尼对内毒素血症急性肺损伤小鼠的影响。方法采用随机数字表法将60只8~12周龄的SPF级雄性C57BL/6小鼠分为4组(n=15):对照组(C组)、伊马替尼组(I组)、内毒素血症组(LPS组)和伊马替尼+内毒素血症组(I+LPS组)。复制内毒素血... 详细信息

目的评价伊马替尼对内毒素血症急性肺损伤小鼠的影响。方法采用随机数字表法将60只8~12周龄的SPF级雄性C57BL/6小鼠分为4组(n=15):对照组(C组)、伊马替尼组(I组)、内毒素血症组(LPS组)和伊马替尼+内毒素血症组(I+LPS组)。复制内毒素血症急性肺损伤小鼠模型,24 h后处死小鼠,观察小鼠肺组织病理学检测结果并进行肺损伤评分,测量肺组织湿/干比;ELISA法检测血清肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和白细胞介素-6(IL-6)的表达;试剂盒检测肺组织丙二醛(malondialdehyde,MDA)、谷胱甘肽(glutathione,GSH)、过氧化氢酶(catalase,CAT)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和还原型谷胱甘肽/氧化型谷胱甘肽(GSH/GSSG)水平;Western blot法分析肺组织核转录因子κB(NF-κB)的磷酸化水平、核转录因子红系2相关因子2(nuclear factor-erythroid 2-related factor 2,Nrf2)及血红素氧合酶1(heme oxygenase-1,HO-1)的表达水平。结果与C组相比较,LPS组的肺湿/干比比值[(3.47±0.41)vs.(5.58±0.47)]及肺损伤评分[(1.25±0.89)vs.(10.25±1.75)]升高(P<0.05),血清中TNF-α和IL-6水平上调(P<0.05),SOD、CAT、GSH、GSH/GSSG水平降低(P<0.05),MDA水平增加,p-NF-κB、Nrf2和HO-1蛋白表达上调(均P<0.05);与LPS组比较,I+LPS组肺W/D比值[(5.58±0.47)vs.(4.62±0.38)]及肺损伤评分[(10.25±1.75)vs.(7.00±1.31)]下降(P<0.05),血清TNF-α和IL-6水平下降(P<0.05),SOD、CAT、GSH、GSH/GSSG水平升高(P<0.05),MDA水平下调(P<0.05),p-NF-κB蛋白表达下降,Nrf2和HO-1蛋白表达升高(P<0.05)。结论伊马替尼可改善脓毒症急性肺损伤,其机制可能与抑制氧化应激有关。

关键词：内毒素血症急性肺损伤伊马替尼血红素加氧酶-1 氧化应激脂多糖核转录因子红系2相关因子2 核因子κB

我国中老年人抑郁症状与心肺疾病关联的前瞻性队列研究

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中国慢性病预防与控制 2024年第2期32卷 81-85,89页

作者：蔺婧孙俐张馨予杨洪喜王耀刚天津医科大学公共卫生学院天津300070 天津医科大学护理学院天津医科大学基础医学院

目的探讨中国中老年人群抑郁症状与心肺疾病患病风险之间的关联,为心肺疾病的防治提供科学依据。方法数据来源于中国健康与养老追踪调查(CHARLS)。于2011年开展基线调查,采用10条目的流调中心抑郁量表(CESD-10)评估研究对象的抑郁症状,... 详细信息

目的探讨中国中老年人群抑郁症状与心肺疾病患病风险之间的关联,为心肺疾病的防治提供科学依据。方法数据来源于中国健康与养老追踪调查(CHARLS)。于2011年开展基线调查,采用10条目的流调中心抑郁量表(CESD-10)评估研究对象的抑郁症状,并收集人口社会学资料、体格检查、健康状况、生活方式等相关数据。心肺疾病结局数据来源于2018年随访数据,最终纳入研究对象8356名。使用R V.1.4统计软件,采用Cox比例风险模型分别分析中老年人抑郁症状对心血管疾病、慢性肺部疾病、仅患1种疾病以及心肺共病的影响。结果8356名研究对象中,基线时3608人(43.2%)有抑郁症状,2018年随访时心血管疾病患病846人(10.1%),慢性肺部疾病患病374人(4.5%),仅患1种疾病1046人(12.5%),心肺共病87人(1.0%)。调整混杂因素后,多因素Cox回归分析结果显示,与无抑郁症状的中老年人群相比,有抑郁症状与心血管疾病(HR=1.16,95%CI:1.01~1.33)、慢性肺部疾病(HR=1.41,95%CI:1.14~1.74)以及仅患1种疾病(HR=1.29,95%CI:1.14~1.47)高风险相关,均有统计学意义(P0.05)。分层分析结果显示,与无抑郁症状的中老年人群相比,45~64岁(HR=1.24)、女性(HR=1.25)、初中及以上文化程度(HR=1.29)人群抑郁症状与心血管疾病高风险相关;45~64岁(HR=1.44)、男性(HR=1.48)、小学(HR=1.42)和初中及以上(HR=1.52)文化程度、城市(HR=1.44)人群抑郁症状与慢性肺部疾病高风险相关;45~64岁(HR=1.37)、男性(HR=1.22)、女性(HR=1.35)、小学(HR=1.31)和初中及以上(HR=1.44)文化程度、城市(HR=1.28)、农村(HR=1.42)人群抑郁症状与仅患1种疾病高风险相关,均有统计学意义(P0.05)。结论抑郁症状是中老年人群心血管疾病、慢性肺部疾病的独立危险因素,而与心肺共病的关联无统计学意义。

关键词：心血管疾病慢性肺部疾病心肺共病抑郁症状中老年人群

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细菌介导的肿瘤治疗研究进展

中国生物工程杂志 2024年第2期44卷 112-123页

作者：史恩宇王宁赵溪悦陈博曹鸣芯李长义天津医科大学口腔医院天津300070 天津医科大学眼视光学院天津300070

癌症是导致人类死亡的主要原因之一。尽管现代医学在癌症治疗方面取得了重大进展,但由于癌症的异质性、耐药性和治疗副作用等问题,传统治疗手段仍存在局限性。随着科学技术的不断发展,细菌治疗在肿瘤治疗领域展现出巨大潜力。细菌因其... 详细信息

癌症是导致人类死亡的主要原因之一。尽管现代医学在癌症治疗方面取得了重大进展,但由于癌症的异质性、耐药性和治疗副作用等问题,传统治疗手段仍存在局限性。随着科学技术的不断发展,细菌治疗在肿瘤治疗领域展现出巨大潜力。细菌因其生存特性具有天然的肿瘤靶向能力,并含有大量免疫激活物质,可调节肿瘤微环境并激活免疫系统以达到杀伤肿瘤的目的。部分细菌还能通过多种途径直接杀伤肿瘤细胞并抑制肿瘤血管生成。此外,科学家们在深入探索过程中发现,细菌联合放疗、化疗和免疫治疗等方法逐渐成为细菌治疗的主流策略。并可根据临床需求,将外源性基因导入细菌以发挥特定功能。细菌疗法通过与多种治疗方式联用来克服各自的治疗缺陷,提高肿瘤的治疗效果并降低其毒性副作用。从细菌治疗的基本原理、常用于肿瘤治疗的细菌种类、细菌治疗的优化策略及临床试验和案例等方面进行综述。希望通过充分发挥细菌的治疗潜力,为癌症患者提供更加有效的治疗手段。

关键词：肿瘤细菌疗法肿瘤联合治疗细菌细菌工程化

去氢毛钩藤碱抗突变型p53(R273H)结直肠癌的体外作用机制研究

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中草药 2024年第10期55卷 3354-3362页

作者：任泽昊张彦刘东辉孔德新邱玉玲天津医科大学药学院天津300070

目的从抑制结直肠癌细胞HT29增殖角度研究去氢毛钩藤碱(hirsuteine,HST)对突变型p53(R273H)结直肠癌的体外抗癌作用机制。方法采用MTT和平板克隆形成实验评价HST对HT29细胞增殖的影响;流式细胞术和丹酰尸胺(dansylcadaverine,MDC)染色... 详细信息

目的从抑制结直肠癌细胞HT29增殖角度研究去氢毛钩藤碱(hirsuteine,HST)对突变型p53(R273H)结直肠癌的体外抗癌作用机制。方法采用MTT和平板克隆形成实验评价HST对HT29细胞增殖的影响;流式细胞术和丹酰尸胺(dansylcadaverine,MDC)染色法检测细胞周期分布和自噬情况;Western blotting、qRT-PCR分析细胞中p53蛋白、mRNA表达水平和p53下游效应子的表达情况;放线菌酮(actidione,CHX)-chase实验检测p53蛋白半衰期;染色质免疫共沉淀(chromatin immunoprecipitation,ChIP)实验检测p53与其下游靶基因p21启动子区的结合情况。结果HST显著抑制突变型p53(R273H)结直肠癌HT29细胞增殖,引起细胞周期阻滞,诱导杀伤性细胞自噬,缩短突变型p53(R273H)蛋白半衰期,诱导其发生MDM2介导的泛素-蛋白酶体降解,增强其与p21启动子的结合,并上调p21的mRNA表达。结论HST能够促进HT29细胞中突变型p53(R273H)降解并恢复p53野生型转录激活功能,其体外抗结直肠癌活性可能与p53通路密切相关。

关键词：结直肠癌去氢毛钩藤碱突变型p53(R273H) 蛋白酶体降解 p53野生型转录特性恢复

家族性与散发性分化型甲状腺癌患者^(131)I治疗反应与临床转归的比较

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中华放射医学与防护杂志 2024年第6期44卷 531-536页

作者：季艳会王萱李雪孙丹阳肖茜何雅静孟召伟贾强谭建郑薇天津医科大学总医院核医学科天津300052

目的分析不同家族性分化型甲状腺癌(FDTC)与散发性分化型甲状腺癌(SDTC)患者首次^(131)I治疗(RIT)反应的临床转归及影响因素。方法对2016年1月至2022年1月间于天津医科大学总医院接受RIT的120例FDTC与480例SDTC患者进行回顾性分析。分... 详细信息

目的分析不同家族性分化型甲状腺癌(FDTC)与散发性分化型甲状腺癌(SDTC)患者首次^(131)I治疗(RIT)反应的临床转归及影响因素。方法对2016年1月至2022年1月间于天津医科大学总医院接受RIT的120例FDTC与480例SDTC患者进行回顾性分析。分析两组患者首次RIT不同疗效反应,分析无病(NED)亚组的无病生存期(DFS)、生化疾病持续(BPD)及结构或功能性疾病持续(S/FPD)亚组的无进展生存期(PFS),并筛选未达到NED状态的危险因素。结果首次RIT后FDTC及SDTC组达到NED、BPD及S/FPD状态的患者分别为56(46.7%)、50(41.7%)、14(11.6%)及284(59.1%)、160(33.3%)、36(7.5%)例(χ^(2)=10.10,P=0.013)。末次随访时,FDTC及SDTC组达到NED、BPD及S/FPD状态的患者分别为71(59.1%)、36(30.1%)、13(10.8%)及337(70.2%)、114(23.7%)、29(6.1%)例(χ^(2)=8.99,P=0.026)。家族性(F)-NED及散发性(S)-NED亚组患者5年DFS率分别为92.4%及97.4%;F⁃BPD及S⁃BPD亚组5年PFS率分别为88.3%及90.8%;F⁃S/FPD及S⁃S/FPD亚组5年PFS率分别为78.2%及79.6%。采用二元logistic单因素分析显示肿瘤最大径、T分期、M分期、复发危险度分层、术后刺激状态甲状腺球蛋白(p⁃sTg)与患者否达到NED状态相关(χ^(2)=6.37~13.10,P<0.05);采用二元logistic多因素回归分析显示T分期、p⁃sTg是能否达到NED状态的独立危险因素(χ^(2)=0.11~11.33,P<0.05)。结论初始RIT治疗反应有助于指导后续治疗和随访策略,SDTC患者临床转归优于FDTC患者,应提高FDTC患者前站RIT警惕性,对于p⁃sTg及T分期较高患者,应酌情增加首次RIT剂量、缩短随访间隔。

关键词：家族性甲状腺癌治疗反应 ^(131)I治疗疾病状态

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运动改善创伤性脑外伤的研究进展

生理科学进展 2024年第2期55卷 99-106页

作者：隆远水徐子博刘素娟天津医科大学基础医学院天津300070 天津医科大学第二临床医学院天津300211 天津医科大学基础医学院人体解剖与组织胚胎学系天津300070

创伤性脑外伤(traumatic brain injury,TBI)是由外力作用引起的脑功能改变或其他脑部病理学变化,是世界范围内的重大公共卫生问题。目前大量研究证明运动作为非药物治疗方式可有效改善TBI。损伤前后的运动均可通过相关机制有益于TBI患... 详细信息

创伤性脑外伤(traumatic brain injury,TBI)是由外力作用引起的脑功能改变或其他脑部病理学变化,是世界范围内的重大公共卫生问题。目前大量研究证明运动作为非药物治疗方式可有效改善TBI。损伤前后的运动均可通过相关机制有益于TBI患者的康复。本文综述了创伤前/后运动对TBI的影响及其潜在调控机制,以期为深入理解运动改善TBI的研究机制及运动疗法在TBI临床中的应用提供理论依据。

关键词：创伤性脑外伤运动氧化应激炎症反应脑源性神经营养因子

Graves病诊治与骨转换标志物的相关性研究

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中华内分泌代谢杂志 2024年第4期40卷 312-319页

作者：柴锦燕苏孟雪张瑞国郑薇贾强谭建门剑龙刘伟任静孟召伟天津医科大学总医院核医学科 300052 天津医科大学总医院精准医学科 300052

目的探讨Graves病(GD)患者相关指标与骨转换标志物(BTMs)的关系及其治疗前后变化的预测价值。方法回顾性研究458例GD患者和109名健康体检者(对照组)。比较2组的甲状腺激素[游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)、游离甲状腺素(FT4)、促甲状腺素(TS... 详细信息

目的探讨Graves病(GD)患者相关指标与骨转换标志物(BTMs)的关系及其治疗前后变化的预测价值。方法回顾性研究458例GD患者和109名健康体检者(对照组)。比较2组的甲状腺激素[游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)、游离甲状腺素(FT4)、促甲状腺素(TSH)]和BTMs[骨钙素、Ⅰ型前胶原N-末端肽(PⅠNP)、Ⅰ型胶原C-末端肽(CTX)]水平。采用单、多因素分析探讨GD患者14项相关指标与BTMs的相关性。所有GD患者均接受抗甲状腺药物(ATD治疗组)或放射性碘治疗(RAI治疗组)。绘制受试者工作特征(ROC)曲线,分析治疗后FT3、FT4水平/治疗前FT3、FT4水平(FT3-P/FT3-A,FT4-P/FT4-A)的变化对BTMs是否恢复正常的预测价值。结果GD组FT3、FT4、骨钙素、PⅠNP、CTX水平均显著高于对照组(P0.05)。结论GD患者的BTMs异常升高。ATD治疗6个月后FT3下降超过46.5%,FT4下降超过40.5%;RAI治疗组治疗6个月后FT3下降超过64.5%,FT4下降超过40.5%是GD骨形成指标骨钙素恢复的独立预测因子。

关键词：甲状腺功能亢进症骨转换标志物骨钙素 Ⅰ型前胶原N-末端肽 Ⅰ型胶原C-末端肽

芒柄花素调节Hippo/YAP信号通路对炎症性肠病大鼠肠上皮细胞凋亡的影响

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中国药房 2024年第13期35卷 1564-1569页

作者：谢栋刘媛媛李正翔袁恒杰曹晓沧天津医科大学总医院药剂科天津300052 天津医科大学基础医学院遗传学系天津300070 天津医科大学总医院消化科天津300052

目的探究芒柄花素(FMN)对炎症性肠病(IBD)大鼠肠上皮细胞凋亡的影响及可能机制。方法采用三硝基苯磺酸诱导的方法构建大鼠IBD模型。将造模成功的48只大鼠按照随机数字表法分为模型组(生理盐水),低、高剂量FMN组(20、40 mg/kg FMN)和... 详细信息

目的探究芒柄花素(FMN)对炎症性肠病(IBD)大鼠肠上皮细胞凋亡的影响及可能机制。方法采用三硝基苯磺酸诱导的方法构建大鼠IBD模型。将造模成功的48只大鼠按照随机数字表法分为模型组(生理盐水),低、高剂量FMN组(20、40 mg/kg FMN)和高剂量FMN+YAP抑制剂Verteporfin(VTPF)组(40 mg/kg FMN+10 mg/kg VTPF),每组12只;另取12只大鼠设为正常组(生理盐水);每天给药/生理盐水1次,连续7 d。末次给药后,对大鼠疾病活动指数(DAI)进行评分;测量大鼠结肠长度;观察大鼠结肠组织的病理学变化;检测大鼠血清中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)、IL-10水平;检测大鼠肠上皮细胞的凋亡情况;检测大鼠结肠组织中Yes相关蛋白(YAP)、切割型胱天蛋白酶3(cleaved-caspase-3)、B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)表达。结果与正常组比较,模型组大鼠DAI评分,TNF-α、IL-6水平,肠上皮细胞凋亡率,cleaved-caspase-3、Bax蛋白表达水平均显著升高(P<0.05);结肠长度显著变短(P<0.05);IL-10水平和YAP、Bcl-2蛋白表达水平均显著降低(P<0.05);结肠组织出现细胞形态异常、排列紊乱,炎症细胞浸润等病理学变化。与IBD组比较,低剂量FMN组、高剂量FMN组大鼠上述指标水平均显著改善(P<0.05),且具有剂量依赖性(P<0.05);而加入VTPF后,显著逆转了FMN对IBD大鼠上述指标的改善作用(P<0.05)。结论 FMN可能是通过抑制Hippo/YAP信号通路,促进YAP的表达,进而抑制IBD大鼠肠上皮细胞凋亡。

关键词：芒柄花素 Hippo/YAP信号通路炎症性肠病肠上皮细胞细胞凋亡

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