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2型糖尿病大鼠急性心肌缺血对心肌新生血管的影响

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中华糖尿病杂志 2012年第6期4卷 361-364页

作者：段薇张学梅于萌王晓梅金成吉李湘张弢曲建梅刘臻瑶大连大学附属中山医院内分泌科 116001 大连大学基础药理教研室 116001

目的探讨糖尿病急性心肌缺血对心肌新生血管生成的影响及其机制。方法清洁级健康雄性8周龄sD大鼠52只，任意选取其中20只以高脂喂养联合小剂量链脲佐菌素建立糖尿病大鼠模型；以糖尿病建模成功的大鼠与16只正常大鼠以结扎冠状动脉前降... 详细信息

目的探讨糖尿病急性心肌缺血对心肌新生血管生成的影响及其机制。方法清洁级健康雄性8周龄sD大鼠52只，任意选取其中20只以高脂喂养联合小剂量链脲佐菌素建立糖尿病大鼠模型；以糖尿病建模成功的大鼠与16只正常大鼠以结扎冠状动脉前降支制作急性心肌梗死模型；另外16只大鼠只开胸不造模、不给药作为假手术组。心肌梗死造模术后2周，处死各组动物，取左心室梗死区及相邻区域心肌，采用免疫组化方法检测各组大鼠缺血周边区微血管密度（MVD），Western blotting法检测血管内皮生长因子（VEGF）及其信号转导蛋白[磷酸化蛋白激酶B（p-Akt）、内皮型一氧化氮合酶（eNOS）、磷酸化eNOS（p-eNOS）]、内皮抑素蛋白的表达。组间数据比较采用单因素方差分析，样本均数间两两比较采用q检验，两组计量资料比较采用t检验。结果3组成活大鼠分别为：糖尿病心肌梗死组12只，非糖尿病心肌梗死组（对照组）13只，假手术组14只。与对照组相比，糖尿病组缺血心肌新生血管明显减少（19．7±3．8比14．2±3．6，q=2．98，P〈0．05）。糖尿病组、假手术组VEGF表达显著低于对照组（分别为0．89±0．12、0．65±0．23和1．53±0．20，F=6．52，P〈0．01）。糖尿病组和对照组p-Akt和eNOS蛋白表达差异无统计学意义（t值分别为3．02、2．78，P〉0．05），但糖尿病组p-eNOS蛋白表达显著减少（0．49±0．09比1．16±0．12，t=5．68，P〈0．05）。糖尿病组内皮抑素表达显著高于对照组（4．6±0．6比2．3±0．4，t=8．63，P〈0．05）。结论糖尿病大鼠急性缺血心肌的新生血管生成低下，VEGF转导通路在多个水平上参与其中，并与内皮抑素共同作用。

关键词：糖尿病,2型心肌缺血新生血管化,生理性大鼠

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高糖对人脐静脉内皮细胞内皮抑素表达的影响

中国糖尿病杂志 2010年第8期18卷 588-590页

作者：段薇张学梅于萌王晓梅大连大学附属中山医院内分泌科大连116001 大连大学基础医学院药理教研室

目的研究高糖对人内皮细胞内皮抑素(ES)mRNA及蛋白表达水平的影响及其意义。方法培养人脐静脉内皮细胞(HUVECs),分为正常糖(5.6mmol/L)对照组,高糖(11.2、***/L)组。培养24、48、72、96h后,收集各组不同作用时间点细胞,用RT-PCR法检测ES... 详细信息

目的研究高糖对人内皮细胞内皮抑素(ES)mRNA及蛋白表达水平的影响及其意义。方法培养人脐静脉内皮细胞(HUVECs),分为正常糖(5.6mmol/L)对照组,高糖(11.2、***/L)组。培养24、48、72、96h后,收集各组不同作用时间点细胞,用RT-PCR法检测ES mRNA表达水平,Western blot法检测ES蛋白的表达。结果高糖对HUVECs中ES mRNA和蛋白表达水平的影响是双相的:短时间内起促进作用,具有时间依赖性;随作用时间延长转为抑制作用,22.4mmol/L糖培养HUVECs 96h时组ES mRNA和蛋白表达水平较对照组明显降低(P<0.05)。结论在糖尿病(DM)慢性病程中,ES表达的降低可能与DM血管病变的发生有关。

关键词：葡萄糖内皮细胞内皮抑素

双萘酰亚胺类化合物诱导SMMC-7721细胞凋亡的研究

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中华肝脏病杂志 2008年第8期16卷 608-611页

作者：刘健孙强陈英杰孙抒大连大学医学院病理学教研室 116622 大连大学附属中山医院延边大学医学部基础医学院病理学教研室

目的观察双萘酰亚胺类化合物（C8）对人肝癌细胞株SMMC-7721细胞的作用。方法四甲基偶氮唑盐法检测C8对SMMC-7721细胞的抑制情况；流式细胞术检测细胞周期和凋亡率；Western blot检测Bcl-2蛋白表达量；流式细胞术分析细胞内Bcl-2蛋白量... 详细信息

目的观察双萘酰亚胺类化合物（C8）对人肝癌细胞株SMMC-7721细胞的作用。方法四甲基偶氮唑盐法检测C8对SMMC-7721细胞的抑制情况；流式细胞术检测细胞周期和凋亡率；Western blot检测Bcl-2蛋白表达量；流式细胞术分析细胞内Bcl-2蛋白量；酶联免疫法检测Caspase 9和Caspase 3表达量。结果C8抑制SMMC-7721细胞增殖，半数抑制浓度为15μmol／L。C8作用浓度在10、15、20μmol／L时，SMMC-7721细胞的凋亡比例分别为16.8％、29．4％和35．8％，对照组为2．1％，SMMC-7721细胞的凋亡率明显高于对照组，P〈0．01。细胞内Bcl-2蛋白表达水平下降。酶联免疫检测结果表明Caspase 9和Caspase 3被活化。结论C8可诱导人肝癌SMMC-7721细胞的凋亡，为抗肿瘤药物的研究提供新的化合物。

关键词：癌,肝细胞细胞凋亡萘酰亚胺 SMMC-7721细胞

骨髓间质干细胞的成骨诱导作用及其机制的研究进展

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中华骨科杂志 2021年第4期41卷 262-270页

作者：刘天柱尉晓蔚刘阁赵德伟大连大学附属中山医院骨科 116001 大连大学附属中山医院骨科植入材料开发国家地方联合工程实验室 116001 大连大学中山临床学院 116001

大段骨缺损的治疗是临床难题,骨组织工程学的出现为其带来了一种具有前景的治疗策略,是当下的研究热点。骨髓间质干细胞(Bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)作为骨组织工程学重要的种子细胞来源之一,是一种容易取材、来源广泛... 详细信息

大段骨缺损的治疗是临床难题,骨组织工程学的出现为其带来了一种具有前景的治疗策略,是当下的研究热点。骨髓间质干细胞(Bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)作为骨组织工程学重要的种子细胞来源之一,是一种容易取材、来源广泛、增殖率高的多能干细胞。BMSCs可被多种方法诱导分化为成骨细胞,从而达到修复骨缺损的目的。目前常见的诱导BMSCs成骨分化的方法包括活性因子、激素、生物材料、中药、物理刺激以及非编码RNA等。BMSCs的成骨分化是一个非常复杂的过程,受到多种信号通路的调控,以维持平衡的骨代谢水平,主要有BMPs/Smad信号通路、转化生长因子-β信号通路、Wnt信号通路等。开发和研究不同的可诱导BMSCs成骨分化的活性因子和支架材料是骨组织工程学发展的基础;同时进一步探究其中的信号通路,可揭示具体的分子调控机制,有利于寻找新的治疗靶点,研发靶向治疗药物。但BMSCs的定向成骨诱导分化、信号通路相互交错干扰、临床转化及个体化应用等问题仍需进一步解决。

关键词： Wnt信号通路临床难题骨髓间质干细胞活性因子成骨分化物理刺激支架材料多能干细胞

别嘌醇联合非布司他对高尿酸慢性肾病患者尿酸水平及肾功能的影响

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中国临床药理学杂志 2019年第18期35卷 2040-2042,2050页

作者：王鑫高弼虎张亚男殷遇通贾盼攀李素华大连大学附属中山医院肾内科辽宁大连116001 大连大学附属中山医院循环科辽宁大连116001 大连大学附属中山医院药剂科辽宁大连116001

目的观察别嘌醇联合非布司他对高尿酸(HUA)慢性肾病患者尿酸(UA)水平及肾功能的影响。方法将126例高尿酸慢性肾病患者随机分为对照组和试验组,每组63例。对照组给予别嘌醇0. 25 g,每天1次,口服;试验组在对照组的基础上给予非布司他40 mg... 详细信息

目的观察别嘌醇联合非布司他对高尿酸(HUA)慢性肾病患者尿酸(UA)水平及肾功能的影响。方法将126例高尿酸慢性肾病患者随机分为对照组和试验组,每组63例。对照组给予别嘌醇0. 25 g,每天1次,口服;试验组在对照组的基础上给予非布司他40 mg,每天1次,口服。2组均治疗6个月。观察2组患者的肾功能、电解质和生化指标变化。结果治疗后,对照组与试验组UA分别为(466. 62±95. 74),(417. 96±75. 48)μmol·L-1,血钾水平分别为(1. 64±1. 02),(1. 27±0. 87) mmol·L-1,血钠分别为(120. 42±3. 01),(118. 78±2. 69) mmol·L-1,血清中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)分别为(621. 84±167. 52),(688. 02±183. 01) ng·mL-1,差异均有统计学意义(均P <0. 05)。结论非布司他联合别嘌醇治疗高尿酸慢性肾病能有效改善患者的肾功及生化指标,纠正电解质失衡,延缓肾损害进展。

关键词：高尿酸糖化血红蛋白A1c 中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白别嘌醇非布司他

葡萄糖对内皮细胞内皮抑素表达的影响(英文)

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中国现代医学杂志 2008年第10期18卷 1313-1317页

作者：段薇张学梅牛菊敏大连大学附属中山医院内分泌科辽宁大连116001 大连大学基础医学院药理教研室辽宁大连116622 沈阳妇婴医院辽宁沈阳110023

目的研究不同浓度葡萄糖作用下人内皮细胞内皮抑素( endostatin, ES) 的代谢特点, 探索内皮抑素与糖尿病血管病变的关系。方法培养人脐静脉内皮细胞( HUVECs) , 随机加入不同浓度的葡萄糖液中培养,分为正糖对照组( 5.6 mmol/L Glu) , ... 详细信息

目的研究不同浓度葡萄糖作用下人内皮细胞内皮抑素( endostatin, ES) 的代谢特点, 探索内皮抑素与糖尿病血管病变的关系。方法培养人脐静脉内皮细胞( HUVECs) , 随机加入不同浓度的葡萄糖液中培养,分为正糖对照组( 5.6 mmol/L Glu) , 高糖组( 11.2 mmol/L Glu、22.4 mmol/L Glu 组) 。培养 24、48、72 和 96h后, 收集各组不同作用时间点的 HUVECs, 采用 RT- PCR 法检测 ES mRNA 的表达, Western- blot 法检测 ES蛋白水平的表达。结果 11.2 mmol/L Glu 组, ES mRNA 和蛋白的表达随着时间的延长而增强, 第 72、96 小时表达水平显著高于对照组( P 72h<0.05, P 96h<0.01) ; 22.4 mmol/L Glu 组, ES mRNA 和 ES 蛋白的表达在 24、48、72h随着时间的延长而增强, 72 h 表达水平显著高于对照组( P <0.05) , 而 96 h 表达水平明显低于对照组( P <0.05) ; 对照组中 ES mRNA 的表达水平不随时间的延长而改变, ES 蛋白的表达水平随着时间的延长逐渐降低,96h 的表达水平明显低于 24 h 的( P <0.05) 。结论高糖对 HUVECs中 ES mRNA 和蛋白表达水平的影响是双向的: 短时间内起促进作用, 具有时间依赖性; 随着作用时间的延长, 高糖对 ES mRNA 和蛋白的表达转为抑制; 在 DM 慢性长期病程中, ES 表达的降低可能与 DM 血管病变的发生有关。

关键词：葡萄糖血管内皮细胞内皮抑素

中药复方对抗雷公藤多苷毒性的研究Ⅲ.对雷公藤多苷抗炎作用的影响

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中草药 1999年第12期30卷 916-919页

作者：梁文波张学梅黄彩云杨静娴刘俊平胡薇大连大学医学系药理教研室 116622 大连医科大学基础医学部药理教研室吉林医学院附属医院

以瓜蒌、石斛、白芍、川芎、生地、元参、牛膝、五味子、菟丝子、枸杞子、车前子、覆盆子、益母草、泽兰、麦冬、当归组成的中药复方，其水提剂１１．２７，５．６４，２．８２ｇ／ｋｇ与等量雷公藤多苷组成复方制剂给动物ｉｇ．小剂... 详细信息

以瓜蒌、石斛、白芍、川芎、生地、元参、牛膝、五味子、菟丝子、枸杞子、车前子、覆盆子、益母草、泽兰、麦冬、当归组成的中药复方，其水提剂１１．２７，５．６４，２．８２ｇ／ｋｇ与等量雷公藤多苷组成复方制剂给动物ｉｇ．小剂量复方中药＋雷公藤多苷组对小鼠急性、慢性炎症及大鼠急性和免疫炎症均有明显的抑制作用，且该作用优于等剂量的雷公藤多苷。中药复方剂量过大可拮抗雷公藤多苷的抗炎作用。

关键词：中药复方雷公藤多苷抗炎作用毒性

诱导型HSP70过表达对低钾诱导的小脑颗粒神经元凋亡的保护作用

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中国药理学通报 2007年第1期23卷 37-42页

作者：曹林毛海萍苏兴文银巍伍宇平刘爱伶邱鹏新颜光美中山大学基础医学院药理教研室中山大学附属第一医院肾内科广东广州510089

目的观察腺病毒介导的人诱导型HSP70过表达对低钾诱导的原代培养的大鼠小脑颗粒神经元(cerebellargranuleneurons,CGN)凋亡的影响。方法原代培养5d的CGN共感染含人诱导型HSP70和绿色荧光蛋白(GFP)的腺病毒(AdTR5/HSP70-GFP)和四环素调... 详细信息

目的观察腺病毒介导的人诱导型HSP70过表达对低钾诱导的原代培养的大鼠小脑颗粒神经元(cerebellargranuleneurons,CGN)凋亡的影响。方法原代培养5d的CGN共感染含人诱导型HSP70和绿色荧光蛋白(GFP)的腺病毒(AdTR5/HSP70-GFP)和四环素调控的启动子(AdCMV/tTA),或共感染含GFP的腺病毒(AdTR5/GFP)和AdCMV/tTA(对照组)。48h后,采用细胞荧光免疫组织化学法、Westernblot法检测HSP70的表达,或者换成无血清含5mmol·L-1KCl的培养基以诱导神经元凋亡。24h后,采用相差显微镜观察细胞形态学变化,MTT法检测神经元存活率,Hoechst33258核染色和DNA琼脂糖凝胶电泳分析神经元凋亡,以观察HSP70过表达对低钾诱导的CGN凋亡的影响。结果共感染了AdCMV/tTA和AdTR5/HSP70-GFP的CGN过表达了HSP70,抑制了低钾诱导的CGN的凋亡:使神经元存活率由45·5%±5·2%提高至82·3%±5·2%(P<0·01),核固缩减少,DNA的片段化减轻。结论腺病毒介导的人诱导型HSP70的过表达抑制了低钾诱导的CGN凋亡。

关键词：小脑颗粒神经元凋亡腺病毒热休克蛋白70

一氧化氮／环鸟苷酸信号传导通路对高葡萄糖环境中人脐静脉内皮细胞内皮抑素表达的影响

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中华糖尿病杂志 2011年第3期3卷 256-258页

作者：段薇张学梅于萌王晓梅金成吉李湘张弢曲建梅大连大学附属中山医院内分泌科 116001 大连大学附属中山医院基础药理教研室 116001

目的研究一氧化氮/环鸟苷酸信号传导通路对高葡萄糖时人脐静脉内皮细胞表达内皮抑素的调控.方法采用5.6、11.2、22.4 mmol/L葡萄糖培养人脐静脉内皮细胞72 h,硝酸还原酶法测定培养上清液中一氧化氮含量,Western blot法检测内皮抑素蛋... 详细信息

目的研究一氧化氮/环鸟苷酸信号传导通路对高葡萄糖时人脐静脉内皮细胞表达内皮抑素的调控.方法采用5.6、11.2、22.4 mmol/L葡萄糖培养人脐静脉内皮细胞72 h,硝酸还原酶法测定培养上清液中一氧化氮含量,Western blot法检测内皮抑素蛋白表达水平.在11.2 mmol/L葡萄糖作用72 h（对照组）后,分别以左旋硝基精氨酸甲基酯、硝普钠、1H-[1,2,4] 二唑[4,3-a]喹喔啉-1-酮（ODQ）干预人脐静脉内皮细胞,Western blot法检测各组内皮抑素蛋白的变化.组间数据采用单因素方差分析,样本均数间多重比较采用q检验.结果不同浓度葡萄糖作用72 h后,一氧化氮含量和内皮抑素蛋白表达随葡萄糖浓度的增加而增加.与对照组相比,左旋硝基精氨酸甲基酯和ODQ抑制内皮抑素蛋白的表达（内皮抑素蛋白的相对表达量分别为33.5%和43.7%,q值分别为-6.38、-5.93,均P〈0.01）,硝普钠提高内皮抑素蛋白的表达（内皮抑素蛋白的相对表达量为129.0%,q=-3.89,P〈0.05）.结论人脐静脉内皮细胞在高葡萄糖作用72 h后,内皮抑素蛋白表达水平和一氧化氮生成量呈葡萄糖浓度依赖性;高葡萄糖环境下,人脐静脉内皮细胞中内皮抑素蛋白表达的调控可部分通过一氧化氮/环鸟苷酸信号传导通路实现.

关键词：葡萄糖内皮细胞内皮抑素类一氧化氮