诱导型HSP70过表达对低钾诱导的小脑颗粒神经元凋亡的保护作用
Inducible HSP70 overexpression protects cultured cerebellar granule neurons against apoptosis induced by low potassium作者机构:中山大学基础医学院药理教研室 中山大学附属第一医院肾内科广东广州510089
出 版 物:《中国药理学通报》 (Chinese Pharmacological Bulletin)
年 卷 期:2007年第23卷第1期
页 面:37-42页
核心收录:
学科分类:0710[理学-生物学] 1006[医学-中西医结合] 1005[医学-中医学] 07[理学] 071006[理学-神经生物学] 10[医学]
基 金:国家自然科学基金资助课题(No30472010) 广东省自然基金团队项目资助课题(No039191)
摘 要:目的观察腺病毒介导的人诱导型HSP70过表达对低钾诱导的原代培养的大鼠小脑颗粒神经元(cerebellargranuleneurons,CGN)凋亡的影响。方法原代培养5d的CGN共感染含人诱导型HSP70和绿色荧光蛋白(GFP)的腺病毒(AdTR5/HSP70-GFP)和四环素调控的启动子(AdCMV/tTA),或共感染含GFP的腺病毒(AdTR5/GFP)和AdCMV/tTA(对照组)。48h后,采用细胞荧光免疫组织化学法、Westernblot法检测HSP70的表达,或者换成无血清含5mmol·L-1KCl的培养基以诱导神经元凋亡。24h后,采用相差显微镜观察细胞形态学变化,MTT法检测神经元存活率,Hoechst33258核染色和DNA琼脂糖凝胶电泳分析神经元凋亡,以观察HSP70过表达对低钾诱导的CGN凋亡的影响。结果共感染了AdCMV/tTA和AdTR5/HSP70-GFP的CGN过表达了HSP70,抑制了低钾诱导的CGN的凋亡:使神经元存活率由45·5%±5·2%提高至82·3%±5·2%(P0·01),核固缩减少,DNA的片段化减轻。结论腺病毒介导的人诱导型HSP70的过表达抑制了低钾诱导的CGN凋亡。