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海藻酸盐基复合水凝胶培养乳腺癌类器官中钙离子的关键作用

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中国组织工程研究 2025年第22期29卷 4702-4709页

作者：林志光饶琪梁珊珊王若雨于炜婷大连大学附属中山医院肿瘤中心辽宁省大连市116001 大连大学中山临床学院辽宁省大连市116001 大连市海洋多糖生物材料转化医学重点实验室辽宁省大连市116001

背景:基质胶是当前培养肿瘤类器官的主要材料,但单纯基质胶不足以在体外模拟肿瘤生长的力学环境;在基质胶基础上引入海藻酸盐材料可提升水凝胶刚度,但水凝胶力学性能在长期培养中难以维持稳定。目的:在乳腺癌类器官培养体系中引入少量... 详细信息

背景:基质胶是当前培养肿瘤类器官的主要材料,但单纯基质胶不足以在体外模拟肿瘤生长的力学环境;在基质胶基础上引入海藻酸盐材料可提升水凝胶刚度,但水凝胶力学性能在长期培养中难以维持稳定。目的:在乳腺癌类器官培养体系中引入少量钙离子,观察其对基质胶-海藻酸钠水凝胶长期力学性能的维持作用。方法:(1)在恒定质量浓度(5 mg/m L)的基质胶中引入不同质量浓度(0,2.5,5 mg/m L)的海藻酸钠,分别制备低、中、高刚度水凝胶,使用流变仪定期测量水凝胶的力学性能。(2)将人三阴性乳腺癌细胞MDA-MB-231重悬于不同刚度的水凝胶预凝胶中,成胶后加入含(或不含)钙离子的乳腺癌类器官因子培养基,进行乳腺癌类器官培养,在设定的时间点,使用流变仪定期测量引入钙离子对水凝胶力学性能的影响,光学显微镜下观察乳腺癌类器官形态变化,统计第13天乳腺癌类器官成球率。乳腺癌类器官培养7 d后,加入不同浓度(0.1,1,10,100 nmol/L)的化疗药物多西他赛干预6 d,检测细胞活力,计算多西他赛的半抑制浓度IC_(50)。结果与结论:(1)海藻酸钠的加入有效提高了水凝胶的力学强度。(2)随着乳腺癌类器官培养时间的延长,水凝胶的力学强度均降低,培养第13天,中、高刚度水凝胶在含钙离子培养环境中的力学性能均显著高于在不含钙离子培养环境中的力学性能(P0.05)。在长期培养中(13 d),中、高刚度水凝胶组乳腺癌类器官随水凝胶力学性能的下降由圆形转化为梭形,而引入钙离子后两组乳腺癌类器官形态不随培养时间延长而改变。在培养环境中引入钙离子对低刚度水凝胶组乳腺癌类器官成球率无影响,但可提升中、高刚度水凝胶组乳腺癌类器官成球率。(3)在不含钙离子的培养环境中,随着多西他赛浓度的升高,乳腺癌类器官的细胞活力均降低,3组水凝胶组间的IC_(50)无明显差异(P>0.05);在含钙离子的培养环境中,随着多西他赛浓度的升高,乳腺癌类器官的细胞活力均降低,中、高刚度水凝胶组乳腺癌类器官的细胞活力强于低刚度水凝胶组,IC_(50)高于低刚度水凝胶组(P<0.05)。(4)结果表明,在乳腺癌类器官培养体系中引入钙离子可维持基质胶-海藻酸钠水凝胶的力学性能。

关键词：肿瘤类器官乳腺癌类器官海藻酸钠基质胶复合水凝胶基质刚度药物反应

胃癌类器官模型应用于个性化药物筛查的可行性

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中国组织工程研究 2025年第25期29卷 5345-5350页

作者：范洪凯管瑛瑛王路敏曾凡伟尹毅锐复旦大学附属中山医院厦门医院普通外科福建省厦门市361015 复旦大学附属中山医院厦门医院病理科福建省厦门市361015 复旦大学附属中山医院厦门医院药剂科福建省厦门市361015 厦门博创盛世生物技术有限公司福建省厦门市361100

背景:术后辅助化疗是治疗胃癌的常用方法,但患者对化疗的反应存在很大的差异,需要一种新的临床治疗前模型,来指导胃癌患者的个性化药物治疗。目的:构建基于胃癌组织的类器官模型,探讨其在个性化药物筛查中的应用价值。方法:收集20例胃... 详细信息

背景:术后辅助化疗是治疗胃癌的常用方法,但患者对化疗的反应存在很大的差异,需要一种新的临床治疗前模型,来指导胃癌患者的个性化药物治疗。目的:构建基于胃癌组织的类器官模型,探讨其在个性化药物筛查中的应用价值。方法:收集20例胃癌患者术中切除的组织标本,消化分解后与基质胶混合种板,添加含有表皮生长因子和成纤维细胞生长因子10的类器官培养基进行培养。采用苏木精-伊红染色和免疫组化染色对胃癌类器官及原始肿瘤组织进行病理形态学及免疫分子标记同质性验证。通过对卡铂、伊立替康、氟尿嘧啶、奥沙利铂、紫杉醇、表阿霉素等6种药物进行药物敏感性筛查,评估胃癌类器官模型用于药物筛查的可行性。结果与结论:成功培养14例胃癌类器官,类器官的形态及生长特性存在个体性差异,所有类器官均可稳定传代、冻存、复苏。胃癌类器官保留了与原发肿瘤相同的形态学特征及免疫分子表达。6例类器官对6种化疗药物表现出了不同的药物敏感性,初步证实了胃癌类器官作为体外药物筛查模型具有可行性。

关键词：类器官 3D培养模型化疗个体化治疗胃癌药敏

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毛囊类器官研究:现状、问题与前景

中国组织工程研究 2025年第31期29卷 6733-6742页

作者：王钊龚琳朴永君大连医科大学附属第一医院皮肤科辽宁省大连市116000

背景:毛囊体外重建依赖于毛乳头细胞及角质形成细胞3D共培养时的自组装行为,该过程与毛囊胚胎发育极为相似,因此,毛囊类器官可作为毛囊再生相关基础研究良好的体外模型,目前,通过仿生系统培养的全人源毛囊类器官已能成功移植到动物体内... 详细信息

背景:毛囊体外重建依赖于毛乳头细胞及角质形成细胞3D共培养时的自组装行为,该过程与毛囊胚胎发育极为相似,因此,毛囊类器官可作为毛囊再生相关基础研究良好的体外模型,目前,通过仿生系统培养的全人源毛囊类器官已能成功移植到动物体内。毛囊类器官研究使毛囊再生成为可能,但构建方法亦无统一定论,仍面临诸多挑战。目的:综述目前毛囊类器官的研究进展,总结毛囊类器官培养方法及表征,阐述应用前景,为后续研究提供可靠依据,以期促进其在组织工程及脱发治疗的临床转化。方法:应用计算机在中国知网(CNKI)及PubMed数据库中,以“毛囊再生,毛发再生,类器官”为中文检索词,“hair growth,hair loss,hair regeneration,hair follicle,dermal papilla cell,organoid”为英文检索词进行检索,查阅国内外关于毛囊类器官的相关文献,共纳入文献67篇进行后续分析。结果与结论:①不同来源的毛乳头细胞与角质形成细胞可在体外构建毛囊类器官,以获得鼠源、人-鼠嵌合及人源毛囊类器官,并成功用于啮齿动物移植模型;②多种重编程方法如电刺激、添加重组蛋白、解离细胞基因过表达等可用于促进毛囊类器官毛胚形成及毛钉伸长,同时,多种3D打印技术的应用已实现大小可控毛囊类器官的批量生产,极大提高了生产效率;③在解离细胞共培养体系中加入黑素细胞时,或可破译新生毛囊的色素缺失难题,而加入人脐静脉血管内皮细胞时,细胞聚集体内的新生血管可改善营养供给,减少中心部位坏死;④随着工程化类毛囊技术逐渐趋于成熟,患者自体细胞构建的毛囊类器官或可用于严重脱发的个体化医疗。

关键词：脱发毛囊再生毛乳头细胞毛囊类器官上皮-间充质交互作用 3D培养类器官组织工程工程化类器官

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应力对纯钛表面成骨细胞核结合因子α1形成和表达的影响

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华西口腔医学杂志 2008年第6期26卷 588-590,598页

作者：王学金郝晓宁刘巍彭巍许颖华大连大学附属中山医院口腔科辽宁大连116001

目的观察应力对纯钛表面成骨细胞核结合因子α1(Cbfα1)形成及表达的影响,揭示应力对支抗种植体周骨反应的调控机制。方法用大小为2.205N的间断离心力刺激接种于纯钛表面的成骨细胞,刺激频率为每培养4h加力15min,分别于4、8、12h后收集... 详细信息

目的观察应力对纯钛表面成骨细胞核结合因子α1(Cbfα1)形成及表达的影响,揭示应力对支抗种植体周骨反应的调控机制。方法用大小为2.205N的间断离心力刺激接种于纯钛表面的成骨细胞,刺激频率为每培养4h加力15min,分别于4、8、12h后收集细胞,采用免疫荧光法检测Cbfα1的形成,提取总RNA并应用逆转录聚合酶链反应检测Cbfα1mRNA的表达。结果纯钛表面加力组和不加力组MG-63成骨细胞的细胞核内均有Cbfα1荧光染色,且加力组Cbfα1蛋白荧光强度较不加力组多,差异有统计学意义(P<0.05);纯钛表面加力组和不加力组MG-63成骨细胞Cbfα1mRNA表达均为阳性,且加力组Cbfα1mRNA表达较不加力组多,差异有统计学意义(P<0.05)。结论成骨细胞受力后Cbfα1基因形成和表达增强,提示间歇性的牵引应力可以促进纯钛表面成骨细胞的活性。

关键词：应力钛成骨细胞核结合因子α1

基于CT影像儿童枢椎正常发育与变异的解剖特征

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中国组织工程研究 2025年第21期29卷 4545-4551页

作者：吕绍茂蓝佐珍吴文雪池金澄段少银福建医科大学临床医学部福建省福州市350004 厦门大学附属中山医院影像科福建省厦门市361004 厦门市儿童医院(复旦大学附属儿童医院厦门医院)放射科福建省厦门市361006

背景:枢椎发育演变过程复杂,研究报道较少。CT成像可以显示枢椎的正常发育过程、解剖结构、发育变异与畸形,明确枢椎骨化中心出现与骺板闭合时间及其演变过程和规律具有重要的临床价值。目的:基于CT影像展示儿童枢椎正常发育与变异的解... 详细信息

背景:枢椎发育演变过程复杂,研究报道较少。CT成像可以显示枢椎的正常发育过程、解剖结构、发育变异与畸形,明确枢椎骨化中心出现与骺板闭合时间及其演变过程和规律具有重要的临床价值。目的:基于CT影像展示儿童枢椎正常发育与变异的解剖结构。方法:回顾性分析2016年6月至2019年11月行颈部扫描的732例0-15岁儿童CT图像。观察指标包括枢椎齿状突、双侧椎弓、椎体骨化中心,齿突尖部二次骨化中心,椎弓、齿突基底部及后正中骺板,以及枢椎发育变异或畸形。分析与比较各项指标在不同年龄下的变化情况,并利用SPSS 17.0统计学软件包进行数据分类处理及统计学分析。结果与结论:(1)732例研究对象包括枢椎正常发育718例(98.1%),畸形或发育异常14例(1.9%);(2)枢椎5个骨化中心,其中双侧椎弓及齿突、椎体骨化中心在出生时已出现;齿突尖部二次骨化中心出现的中位年龄是5.7岁,年龄四分位差(IQR)是4.1-7岁,最早出现的为8个月22 d,最迟未出现的为12岁10个月;(3)齿突尖骺板融合的中位年龄是6岁,IQR是5-8岁,未融合最大年龄是8岁9个月,融合的最小年龄是4岁3个月;(4)双侧椎弓骺板闭合的中位年龄约3.8岁,IQR约2.9-4.6岁,闭合的最小年龄是2岁3个月,未闭合的最大年龄是6岁;(5)齿突基底部骺板闭合的中位数5.2岁,IQR为3.5-6.8岁,闭合最小年龄是2岁6个月,最晚未闭合年龄是9岁6个月;(6)后正中骺板闭合年龄中位数为1.5岁,IQR为1.0-2.1岁,最晚未闭合2例分别为2岁5个月、14岁,最早闭合为6个月20 d;(7)枢椎畸形或发育异常,包括出现副骨化中心及副骺板7例、枢椎游离骨化小骨3例、后正中骺板不闭合2例、无齿突尖部二次骨化中心2例及枢椎齿突骨化中心未出现1例;(8)提示多层螺旋CT扫描、结合多平面重组技术可以完整显示枢椎的解剖结构,评估其正常发育变异及畸形。

关键词：枢椎骨化中心骺板发育与变异 CT影像

C57BL/6新生乳鼠肠神经胶质细胞的提取与培养

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中国组织工程研究 2025年第31期29卷 6656-6660页

作者：赵楠丁勇修航刘鹏飞梁国刚大连医科大学附属第一医院中西医结合临床国家重点学科实验室辽宁省大连市116000 大连医科大学附属第一医院普外三科辽宁省大连市116000

背景:炎症性肠病的发病机制涉及炎症、免疫激活、内脏高敏感、肠道菌群失调等,其中炎症促使免疫细胞释放炎症递质,损伤肠神经系统。肠神经胶质细胞是肠神经系统的重要组成部分,是研究肠道神经炎症的良好细胞。原代肠神经胶质细胞对于探... 详细信息

背景:炎症性肠病的发病机制涉及炎症、免疫激活、内脏高敏感、肠道菌群失调等,其中炎症促使免疫细胞释放炎症递质,损伤肠神经系统。肠神经胶质细胞是肠神经系统的重要组成部分,是研究肠道神经炎症的良好细胞。原代肠神经胶质细胞对于探索肠神经系统疾病的细胞疗法具有至关重要的作用,而目前获得该细胞的方法大多较繁琐,因此找到一种便捷、快速提取该细胞的方法十分关键。目的:建立优化分离培养及鉴定小鼠肠神经胶质细胞的方法。方法:通过过量吸入异氟烷处死0-7 d龄C57BL/6乳鼠,将其浸泡于体积分数75%乙醇消毒后腹正中线开腹取出十二指肠(幽门下1 cm至屈氏韧带上1 cm),用1 mL注射器充满DPBS反复冲洗肠内容物至肠道半透明,剥离肠系膜及血管。将十二指肠剪至1 mm大小,放入含0.25%EDTA胰酶中消化20 min后加入等量DMEM/F12完全培养基终止消化,用100μm细胞滤器过滤后离心,加入1 mL DMEM/F12完全培养基重悬后培养细胞,细胞贴壁生长密度至80%时消化传代。细胞培养至第3代时用标记肠神经胶质细胞的胶质纤维酸性蛋白进行免疫荧光鉴定。结果与结论:分离培养的细胞胶体饱满,突起向外延展,可以传代,胶质纤维酸性蛋白染色阳性。该方法可成功分离培养肠神经胶质细胞,且操作简便,为肠神经系统的病理生理学研究提供稳定的模型。

关键词：肠神经胶质细胞乳鼠细胞培养炎症性肠病肠神经系统胶质纤维酸性蛋白工程化细胞

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下颌第二磨牙远中邻面龋单面洞的修复

复旦学报（医学版） 2002年第3期29卷 216-217页

作者：虞国君任颖毕玮复旦大学附属中山医院口腔科上海200032

目的　单面洞修复下颌第二磨牙远中颈部龋减少牙体制备量 ,从而减少患牙折裂。方法　用玻璃离子粘固粉与牙体的黏结性对 2 0 0例下颌第二磨牙远中颈部龋行单面洞修复 ,其中 50例患牙伴有牙髓炎或者根尖周炎在颌面附加Ⅰ类洞型行根管治... 详细信息

目的　单面洞修复下颌第二磨牙远中颈部龋减少牙体制备量 ,从而减少患牙折裂。方法　用玻璃离子粘固粉与牙体的黏结性对 2 0 0例下颌第二磨牙远中颈部龋行单面洞修复 ,其中 50例患牙伴有牙髓炎或者根尖周炎在颌面附加Ⅰ类洞型行根管治疗。结果　 2 0 0例患牙治疗后经一年随访 5例出现修复物脱落 ,5例患牙远中边缘折断。结论　以玻璃离子粘固粉修复下颌第二磨牙远中邻面龋能减少牙体制备量 ,避免银—汞合金对牙槽黏膜的刺激。

关键词：下颌第二磨牙远中邻面龋单面洞牙体修复玻璃离子粘固粉

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临时义齿的天然牙修复

复旦学报（医学版） 2004年第3期31卷 305-306,F003页

作者：孙健毕玮任颖复旦大学附属中山医院口腔科上海200032

目的　用患者本身的天然牙作为临时义齿的基础材料提供临时修复 ,并与传统的临时义齿作比较。方法　对 2 0名前牙拔除的患者 ,用其天然牙作临时修复 ,与其他传统方法临时修复的 2 0名患者作比较。结果　在美观和病人心理接受程度、拔牙... 详细信息

目的　用患者本身的天然牙作为临时义齿的基础材料提供临时修复 ,并与传统的临时义齿作比较。方法　对 2 0名前牙拔除的患者 ,用其天然牙作临时修复 ,与其他传统方法临时修复的 2 0名患者作比较。结果　在美观和病人心理接受程度、拔牙创愈合情况、黏膜过敏情况、价格等方面 ,前者有较大的优势。结论　利用患者本身的完整离体牙为病人作临时修复 ,既美观。

关键词：临时义齿天然牙修复义齿

多孔Ta的制备及其作为骨植入材料的应用进展

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金属学报 2017年第10期53卷 1303-1310页

作者：赵德伟李军雷大连大学附属中山医院骨科医学研究中心大连116001

多孔Ta金属是近二十年发展起来的一种具有良好生物相容性、优异的综合力学特性的骨植入材料,具备弹性模量与骨组织相匹配、高摩擦系数提高植入体植入初期稳定性、诱导新生骨组织长入提高植入体长期稳定性等方面优势,在临床上获得广泛应... 详细信息

多孔Ta金属是近二十年发展起来的一种具有良好生物相容性、优异的综合力学特性的骨植入材料,具备弹性模量与骨组织相匹配、高摩擦系数提高植入体植入初期稳定性、诱导新生骨组织长入提高植入体长期稳定性等方面优势,在临床上获得广泛应用。本文从多孔Ta金属作为骨植入材料的应用背景、优势、制备方法、生物学性能以及临床应用情况等方面,阐述了多孔Ta金属作为骨植入材料的研究现状及最新动态,并对其发展前景进行了展望。

关键词：多孔Ta 骨植入材料骨小梁金属